X线辐射对大鼠卵巢形态与功能的影响

目的：探讨X线电离辐射对大鼠卵巢形态与功能的影响。方法：实验分0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0 Gy剂量组,每组各10只大鼠。采用HE染色观察各级卵泡数目,免疫组化法观察P53、Bcl-2蛋白表达,TUNEL法测定颗粒细胞中凋亡小体的表达。结果：随大鼠机体接受X线照射剂量增加,始基卵泡、初级卵泡、次级卵泡数目随之减少（P＜0.05或P＜0.01）,以始基卵泡减少为著;不同剂量X线照射后窦状卵泡数目与假照射组差异无统计学意义（P＞0.05）。当吸收剂量为0.2 Gy,卵巢颗粒细胞中P53蛋白及凋亡小体表达较假照射组减少,Bcl-2蛋白有所增多（P＜0.05或P＜0.01）,而吸收剂量在0.4～1.0 Gy时,P53蛋白及凋亡小体的表达水平随吸收剂量的增加而上升（P＜0.05或P＜0.01）,Bcl-2蛋白表达水平减少（P＜0.01）。结论：X线可使大鼠卵巢组织中始基卵泡的数目有所减少,促进细胞发生凋亡,进一步影响颗粒细胞的内分泌功能。     

凋亡抑制基因survivin在卵巢上皮性癌组织中的表达及其与bcl-2、bax蛋白表达的关系

目的　探讨凋亡抑制基因survivin在卵巢上皮性癌中的表达 ,及其与bcl 2、bax蛋白表达的相关性。方法　应用逆转录聚合酶链反应 (RT PCR)技术 ,检测 35例卵巢上皮性癌组织中survivin基因的表达 ;应用免疫组织化学链霉亲和素 生物素 过氧化物酶复合物 (SABC)方法 ,检测bcl 2及bax蛋白的表达 ,并与卵巢上皮性交界性肿瘤、良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织各 10例进行对照。结果　卵巢上皮性癌、交界性肿瘤组织中 ,survivin基因的表达率分别为 83%及 80 % ,显著高于良性卵巢肿瘤及正常卵巢组织的表达率 2 0 %及 0 % (P均 <0 .0 5 )。survivin基因表达与卵巢上皮性癌的临床分期、病理学类型、组织学分级及淋巴结转移无相关性 (P均 >0 .0 5 )。survivin基因表达与bcl 2蛋白表达呈正相关 (P <0 0 1) ,而与bax蛋白表达呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论　survivin基因可通过抑制癌细胞凋亡 ,对卵巢上皮性癌的发生和发展起作用 ;survivin基因可能与凋亡相关基因bcl 2、bax ,在卵巢上皮性癌的发展中分别起协同和拮抗作用。     

产前不同疗程激素治疗对仔鼠脑神经元细胞凋亡及Bcl-2蛋白表达的影响

目的通过产前应用不同疗程地塞米松治疗,了解不同给药疗程产前激素治疗是否会影响后代脑发育及可能的机制。方法SPF级SD孕大鼠34只,随机分为4组,产前1剂组8只,于孕17d肌注地塞米松0.8mg/(kg.d);产前3剂组8只,于孕17、18、19d各肌注地塞米松0.8mg/(kg.d);产前4剂组10只,于孕17、18、19、20d各肌注地塞米松0.8mg/(kg.d);对照组8只肌注等量生理盐水。对各组孕鼠所生仔鼠,分别于生后第1、7、14天每组每个时间点随机取仔鼠16只测量全脑重量、称重后再将脑组织进行凋亡细胞的原位标记检测(每个时间点各8只)脑神经元细胞凋亡及改良的酶联免疫杂交分光光度法检测(每个时间点各8只)脑bcl-2蛋白表达,并与对照组比较。结果产前糖皮质激素治疗(antenatalcorticosteroidstreatment,ACT)1日龄仔鼠1剂组、3剂组、4剂组脑重分别为(0.301±0.030)g、(0.302±0.026)g、(0.296±0.025)g,均低于对照组(0.363±0.041g),P均<0.01;7日龄仔鼠3剂组、4剂组脑重分别为(0.798±0.092)g、(0.785±0.050)g,均低于对照组(0.862±0.049)g,P<0.05或P<0.01;14日龄仔鼠,仅产前4剂组脑重(1.190±0.080)g低于对照组(1.295±0.019)g,P<0.01。1日龄仔鼠产前3剂,4剂组神经元细胞凋亡率分别为(9.82±1.51)%、(10.28±1.50)%,较对照组(6.78±1.35)%增加(P均<0.01);7日龄仔鼠产前4剂组神经元细胞凋亡率(22.85±3.18)%较对照组(18.61±3.34)%显著增加(P<0.01)。1日龄仔鼠产前3剂,4剂组bcl-2蛋白含量分别为(9.50±0.46)U/ml、(9.06±0.46)U/ml,均低于对照组(12.60±1.04)U/ml,P均<0.01;7日龄仔鼠产前4剂组bcl-2蛋白含量(6.87±0.27)U/ml低于对照组(8.40±0.52)U/ml,P<0.01。产前1剂组与对照组相比无明显差异(P>0.05)。结论ACT会影响仔鼠脑发育,可引起脑重量的下降,重复ACT下调脑bcl-2蛋白的表达,通过调节bcl-2基因表达引起脑神经元凋亡增加,使仔鼠脑发育障碍。     

胎儿生长受限对其肾脏发育的影响

目的：探究胎儿生长受限（fetal growth restriction,FGR）的宫内环境对胎儿肾脏发育的影响。方法：收集2009年11月—2011年12月于天津市中心妇产科医院产科因胎儿原因要求引产的11例FGR和同期12例非FGR死胎或死产胎儿的肾脏组织标本（所有标本的采集均征得患方的知情同意和院伦理委员会的认可）,测量其质量和体积,应用TUNEL法分析肾脏组织细胞凋亡率,并对Bax和Bcl-2蛋白在凋亡细胞中的阳性表达率进行检测。结果：与非FGR组相比,FGR组胎儿的平均肾脏体积、质量和肾单位数目均明显下降（P＜0.01）,而其细胞凋亡率明显增加（P＜0.01）。进一步检测发现,FGR组细胞内促凋亡蛋白Bax的阳性表达率明显增加（P＜0.01）,伴随有凋亡抑制基因Bcl-2的阳性表达率显著降低（P＜0.01）。结论：生长受限的宫内环境可能通过促进细胞凋亡而影响胎儿肾脏发育,为将来进一步探讨FGR的分子机制和成人期疾病的发病机制提供了新的线索。     

毛蕊异黄酮苷对卵巢上皮性肿瘤细胞的增殖和凋亡的影响及作用机制#br#

Objective?To investigate the effect and mechanism of Calycosin-7-O-β-D-glucoside(CG) on the proliferation inhibition and apoptosis induction of ovarian epithelial cancer cells (SKOV3). Methods?The objects were divided into negative control group and experimental group, the latter group was divided into low concentration group (50 μmol/L), medium concentration group (100 μmol/L) and high concentration group (200 μmol/L). The effect of CG on the proliferation activity of SKOV3 cells were detected by the CCK8 method. Apoptosis was detected by flow cytometry and Hoechst33258 staining. The mRNA and protein expression levels of apoptosis-related genes of ovarian epithelial cancer cells was detected by RT-qPCR and Western blot. Results?CG inhibited cell proliferation in a concentration of (0~200 μmol/L) in a time-and dose-dependent manner. The cell cycle was arrested in G0/G1 phase, and the total apoptosis rate increased with the increase of the concentration of CG (P<0.05) after 48 h. Protein expression levels of apoptosis-related genes such as Caspase-3, Caspase-9, p53, and Bax increased with increasing drug concentration and Caspase-3 enzyme activity also significantly increased, meanwhile the mRNA and protein expression levels of the anti-apoptotic gene bcl-2 decreased with increasing drug concentration, and the differences were statistically significant (P<0.05). Conclusion?CG can play an anti-tumor effect by inhibiting the proliferation and inducing apoptosis of SKOV3. The mechanism may be related to the activation of p53 pathway and the enhanced activity of caspase-3.     

化疗对卵巢癌细胞凋亡和P53、Bcl-2蛋白表达的影响

探讨卵巢癌细胞凋亡过程相关基因及其蛋白表达的变化 ,为解决卵巢癌化疗耐药提供理论依据。方法 :应用不同浓度顺铂处理HO - 8910细胞 ,HE染色观察细胞形态改变 ,琼脂糖凝胶电泳观察DNA降解 ,SP免疫组化染色观察细胞凋亡过程中P53、Bcl - 2蛋白表达的变化。结果 :由于使用顺铂 ,HO - 8910细胞呈凋亡改变 ,DNA琼脂糖凝胶电泳呈典型的凋亡特征。在细胞凋亡的同时 ,P53蛋白表达逐渐升高 ,Bcl- 2蛋白表达逐渐降低 ,二者的变化分别和凋亡细胞数呈正、负相关性。结论 :顺铂通过细胞内P53、Bcl - 2蛋白表达的变化 ,诱导人卵巢癌细胞凋亡是其抗肿瘤的机制之一。卵巢癌细胞对顺铂耐药的产生可能和P53、Bcl- 2蛋白表达有关。     

胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1和凋亡相关基因的表达与子痫前期发病的关系

目的 探讨胎盘组织中血凝素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)和凋亡相关基因easpase-3、Bax及bcl-2的表达及其与子痫前期发病的关系.方法 选择2005年6月-2006年12月在中国医科大学附属盛京医院产科住院的子痫前期患者30例(子痫前期组),以同期正常孕妇40例为对照组.采用免疫组化、RT.PCR技术和蛋白印迹(western-blot)法检测两组孕妇不同孕周胎盘组织中LOX-1和caspase-3、Bax及bel-2的表达.结果 (1)子痫前期组20周+1～24周、24周+1～28周、28周+1-32周、32周+1～36周、36周+1～40周孕妇胎盘组织中LOX-1蛋白表达水平分别为20.1±1.8、25.6±1.3、32.8±1.6、34.3±1.5、39.9±1.2,对照组分别为11.2±0.6、18.5±1.6、26.1±1.8、28.3±1.6、32.3±1.6,两组分别比较,差异均有统计学意义(P<0.05);子痫前期组孕妇胎盘组织中easpase-3蛋白表达水平分别为12.3±0.9、16.3 4-0.9、24.4±0.8、28.3±0.5、36.3±1.1,对照组分别为8.5±1.0、12.3±1.1、17.4±1.2、20.4±0.5、24.2±1.3,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05).(2)子痫前期组不同孕周孕妇胎盘组织中LOX-1、easpase-3及Bax mRNA和蛋白的表达水平明显高于对照组,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);bel-2 mRNA和蛋白的表达趋势与Bax表达结果相反.结论 LOX-1和caspase-3、Bax在子痫前期患者胎盘组织中表达上调,bcl-2表达下调,-与子痫前期发病有关.     

特发性胎儿生长受限与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系

目的 探讨特发性胎儿生长受限(FGR)与胎盘细胞凋亡及bcl-2基因表达的关系.方法 应用透射电镜、脱氧核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿苷三磷酸标记法(TUNEL)、流式细胞技术(FCM)检测特发性FGR孕妇(FGR组)及正常妊娠妇女(对照组)各15例的胎盘细胞凋亡情况,并采用RT-PCR技术观察两组胎盘细胞中bcl-2基因相对表达量.结果 电镜下观察到FGR组胎盘合体滋养细胞核膜皱缩,核仁消失,染色质致密、凝聚;TUNEL 检测 FGR 组胎盘细胞凋亡率为13.68%,高于对照组的4.05%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05);FCM检测胎盘S期细胞比率FGR组为3.4%,对照组为2.2%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05),FCM检测的胎盘细胞凋亡率变化趋势与TUNEL检测结果一致;FGR组胎盘细胞bcl-2基因相对表达量为0.19±0.13,对照组为0.55±0.17,两组比较,差异也有统计学意义(P<0.05).结论 特发性FGR的发生与胎盘细胞凋亡增加有关,胎盘细胞凋亡增加与胎盘细胞中bcl-2基因表达下调有一定关系.     

CT与X线对妊娠滋养细胞肿瘤肺转移的诊断价值

我们将我院近 10年来妊娠滋养细胞肿瘤 (ｇｅｓｔａｔｉｏｎａｌｔｒｏｐｈｏｂｌａｓｔｉｃｔｕｍｏｒ ,ＧＴＴ)肺转移患者的胸部Ｘ片 (胸片 )与肺ＣＴ的结果 ,以及本院近 32年来因ＧＴＴ肺转移行肺叶切除的 6 2例进行分析 ,现总结如下。1　临床资料1 1　胸片或肺ＣＴ提示为ＧＴＴ肺转移者 2 79例。均于1987年 1月至 1997年 12月在我院确诊住院治疗。1 1 1　病种　侵蚀性葡萄胎 (ｉｎｖａｓｉｖｅｍｏｌｅ ,ＩＭ ) 142例 ,其中Ⅲａ期 12 7例 ,Ⅲｂ期 11例 ,Ⅳ期 4例 (脑转移 2例、盆腔转移 1例、胸膜转移 1例 ) ;绒癌 (ｃｈｏｒｉｏｃａｒ…     

Bcl-2与P53在复发性卵巢癌组织中表达的临床意义

探讨卵巢上皮癌组织中Bcl- 2与突变型P53蛋白表达的临床意义及与耐药的关系。方法 :采用免疫组化方法测定 31例初治、19例复发卵巢癌组织中Bcl- 2与P53的表达率。结果 :卵巢癌组织中Bcl - 2阳性表达率为 54% ,P53阳性表达率为 60 %。Bcl - 2表达与临床分期、组织学分级无关。P53在Ⅲ -Ⅳ晚期卵巢癌表达增加。Bcl- 2在初治及复发性卵巢癌者表达无差异 ,复发性卵巢癌组织中P53表达增加。Bcl- 2阳性表达者 2年存活率无明显降低 ,P53高表达者预后不良。结论 :Bcl - 2与P53可能通过调控肿瘤细胞凋亡参与卵巢癌的发生发展 ,Bcl - 2可能在肿瘤发生的早期阶段起作用 ,P53则为后发现象。Bcl - 2与P53之间可能有功能性关联。     

肿瘤抑制基因p53在卵巢移行细胞癌中的过度表达

采用单克隆本免疫组化技术，对３２例卵巢称行细胞癌组织进行肿瘤抑制基因Ｐ５３表达的检测，分析Ｐ５３过度表达与卵巢移行细胞癌预后诸因素间的相关性。结果：卵巢移行细胞癌Ｐ５３表达率为４１％。     

桦褐孔菌醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖和凋亡的影响

目的:观察桦褐孔菌醇对人卵巢癌SKOV3细胞株的抗增殖和诱导凋亡作用。方法:选用人卵巢癌SKOV3细胞株进行体外培养,分为不同浓度桦褐孔菌醇组(25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml)和对照组(未加桦褐孔菌醇)。分别采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法测定两组对人卵巢癌SKOV3细胞株的作用;应用倒置显微镜、HE染色光学显微镜观察两组细胞形态学变化;通过免疫组化法比较两组核增殖抗原Ki-67的表达。结果:①作用48小时后,桦褐孔菌醇浓度为25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的抑制率分别为(17.16±4.71)%、(35.16±4.26)%和(57.83±3.48)%,与对照组(0)比较差异有统计学意义(P<0.05)。②HE染色光镜下,桦褐孔菌醇组卵巢癌SKOV3肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质浓缩或染色质块形成,有的细胞膜起泡形成凋亡小体;倒置显微镜下,桦褐孔菌醇组SKOV3肿瘤细胞体积变小、变圆,核染色质凝集,细胞间连接疏松,贴壁能力明显减弱。③作用48小时后,桦褐孔菌醇浓度为25μg/ml、50μg/ml、100μg/ml的Ki-67阳性表达率分别为(64.67±3.98)%、(43.83±3.06)%和(34.00±2.61)%,与对照组(92.83±3.06)%比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:桦褐孔菌醇对人卵巢癌SK-OV3细胞株有抗增殖作用和诱导凋亡作用,并表现出浓度依耐性。     

中草药促排卵汤对小鼠卵巢及子宫内膜作用的组织化学研究

昆明系雌性小鼠在生育期服用相当于人剂量的中草药促排卵汤５ｄ后，取出其卵巢和子宫，制成冰冻切片，均用油红０法显示脂类（Ｌ），用Ｌｏｊｄａ法显示３－β－羟基甾体脱氨酶（３－β－ＨＳＤＨ），用亮氨酰－β萘酰胺法显示氨基肽酶（ＬＮＡｓｅ），用偶氮偶联法显示碱性磷酸酶（ＡＫＰ），对子宫还用ＰＡＳ法显示糖原（ＧＬｙ）。结果表明，与对照组相比，无论是动情前期或动情后期，服用中草药的小鼠卵巢其卵泡内膜层及颗粒层细胞和黄体细胞的胞浆内３－β－ＨＳＤＨ活性和脂类明显增高；子宫内膜上皮细胞及间质内的糖蛋白和脂类明显增高。对结果的讨论说明中草药促排卵汤确有促进卵巢卵泡和黄体的甾体激素分泌，并可增强子宫内膜营养的作用，这些都会有利于胚泡的着床及发育。     

Prognostic Significance of p53 and p21 Immunoreactivity in Epithelial Cancers of the Ovary

Objectives. Theprognostic value of p53 expression in epithelial ovarian cancer remains unresolved. We hypothesized that prognosis may relate more to expression of p21^waf1/cip1, the major downstream effector of p53, which can also be induced through p53-independent mechanisms. We therefore studied the relationship of p53 and p21^waf1/cip1 expression in epithelial ovarian cancers to clinicopathological variables and prognosis.Methods. Fixed, embedded tumors from 85 patients with untreated, primary epithelial ovarian cancer were immunostained with antibodies to p53 and p21^waf1/cip1. Expression was correlated with clinicopathological features and prognosis. Survival curves were calculated by the Kaplan–Meier method and compared using the log-rank test for p53, p21^waf1/cip1, and all combinations of expression of the two markers.Results. Sixty-two percent of tumors expressed p53, and 42% expressed p21^waf1/cip1. There was no correlation between p53 and p21^waf1/cip1 expression. Advanced stage, grade, age ≥50, and p53 expression were associated with worse disease-free survival. Patients whose tumors were p53⁺/waf1⁻, however, had a particularly strong association with poorer disease-free survival when compared with other combinations of p53 and p21^waf1/cip1 expression (P = 0.003). Neither p53, nor p21^waf1/cip1, nor combinations of expression were independently related to survival when histology, age, stage, and differentiation were considered.Conclusions. p53 expression in the absence of p21^waf1/cip1 expression is a better marker of poor prognosis than either p53 or p21^waf1/cip1 expression status alone in univariate analysis. Absence of independent prognostic significance may be related to the paucity of early stage cases in the current study.     

P~(16)蛋白在宫颈癌中的表达及其临床意义

目的：研究抑癌基因P16与宫颈癌发生、发展及患者预后的关系。方法：用免疫组化ABC法检测了10份正常宫颈组织、16份慢性宫颈炎及123份宫颈鳞癌组织中P16的表达情况。结果：P16在宫颈癌中检出率为43．90％，明显低于正常宫颈（80．00％）及宫颈炎组织（68．75％），P＜0．01。其中伴淋巴结转移的宫颈癌中P16蛋白表达率（22．22％）是显著低于无淋巴结转移者（61．11％），P＜0．05。P16蛋白表达阳性者5a存活率为52．63％，而阴性者仅为29．79％，P＜0．05。结论：P16蛋白的突变与缺失可能与宫颈癌的发生、发展密切相关。     

The significance of p53 mutation and over-expression in ovarian cancer prognosis

Mutation of the p53 tumor suppressor gene is the most commonly observed genetic abnormality in human tumors and associations between p53 aberration and patient survival have been shown for several tumor types. Previous studies have found that approximately 50% of epithelial ovarian carcinomas exhibit abnormalities in the p53 gene. The aim of this study, therefore, was to examine the potential prognostic significance of aberrant p53 in patients with primary epithelial ovarian carcinoma. Using immunohistochemistry (IHC) and the anti-p53 antibodies CM1, PAb240 and PAb1801, p53 over-expression was observed in 20/39 (51%) tumors. When these results were combined with previously reported IHC and sequencing analyses, 37/61 (61%) tumors exhibited a p53 aberration. Although there was no significant difference between sequencing and IHC results, several cases gave discordant results, indicating that a combination of both methods may be required to estimate accurately the proportion of tumors with p53 aberrations. Univariate statistical analysis showed that p53 aberrations were significantly associated with tumor grade 3/4, FIGO stage III/IV, serous tumors and the presence of bulk (>2 cm) residual disease following surgery. In univariate survival analysis, tumor grade and stage, ascites and post-surgical residual tumor> 2 cm were associated with both overall survival (OS) and disease-free survival (DFS). p53 status, however, was not a predictor of either OS or DFS. Using the Cox proportional hazards model, only FIGO stage and post-surgical residual disease> 2 cm had an independent effect on OS and only stage was found to be an independent predictor of DFS. In conclusion, p53 mutation and overexpression does not appear to be a significant indicator of patient survival in this series of ovarian carcinomas.