血管紧张素抑制剂对宫颈癌HeLa细胞的AT1R,MMP2和MMP9表达的影响

目的:探讨血管紧张素转化酶抑制剂(ACEI)卡托普利及血管紧张素Ⅱ1型受体抑制剂(ARB)缬沙坦对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的宫颈癌HeLa细胞株的血管紧张素Ⅱ1型受体(AT1R)抗原、基质金属蛋白酶2(MMP2)、MMP9蛋白和基因表达的影响.方法:宫颈癌HeLa细胞株单独使用AngⅡ、联合卡托普利或缬沙坦,细胞生...     

血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体与妇科肿瘤

血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）是肾素-血管紧张素-醛固酮系统（RAS）的主要活性成分,在人体血压与水-电解质平衡调节过程中起着关键作用。近年研究发现,除循环中存在RAS外,在一些恶性肿瘤组织中也同样存在着RAS的局部活化,在局部组织中AngⅡ通过与其Ⅰ型受体（AT1R）结合参与肿瘤的发生、发展、血管生成等,而阻断AngⅡ或AT1R有望成为肿瘤治疗的新靶点。就AngⅡ及AT1R与妇科肿瘤关系研究进展综述。     

血管紧张素Ⅱ及其Ⅰ型受体与妇科肿瘤

血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）是肾素－血管紧张素－醛固酮系统（RAS）的主要活性成分,在人体血压与水-电解质平衡调节过程中起着关键作用。近年研究发现,除循环中存在RAS外,在一些恶性肿瘤组织中也同样存在着RAS的局部活化,在局部组织中AngⅡ通过与其Ⅰ型受体（AT1R）结合参与肿瘤的发生、发展、血管生成等,而阻断AngⅡ或AT1R有望成为肿瘤治疗的新靶点。就AngⅡ及AT1R与妇科肿瘤关系研究进展综述。     

血管紧张素Ⅱ受体在宫颈癌中的表达

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，研究表明，在组织癌变发生和发展的过程中，血管生成起到了重要作用。血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）除传统的调节血压、水和电解质平衡的作用外，与它的两种跨膜受体血管紧张素Ⅱ受体I型（AT1R）和受体Ⅱ型（AT2R）结合可调节细胞的代谢、生长及血管生成。     

妊高征患者胎盘组织血管紧张素Ⅱ 1型受体和血管紧张素原的表达

目的　探讨血管紧张素Ⅱ 1型受体 (angiotensinⅡtype 1receptor ,AT1R)和血管紧张素原 (angiotensinogen ,AGT)在妊娠高血压综合征 (妊高征 )患者胎盘组织中表达的变化及其在妊高征发病中的意义。　方法　采用免疫组织化学染色法 (免疫组化 )和逆转录聚合酶链反应法 (RT PCR) ,检测 2 0例中、重度妊高征患者 (妊高征组 )和 15例正常妊娠妇女 (正常组 )的胎盘组织AT1R水平及AT1RmRNA和AGTmRNA的表达。　结果　 ( 1)AT1R主要定位于胎盘绒毛滋养细胞、血管内皮细胞及血管平滑肌细胞。 ( 2 )免疫组化定量灰度分析 ,妊高征组胎盘组织AT1R阳性表达( 112 .4 3± 11.75 )显著强于正常组 ( 170 .4 7± 10 .5 9) (P <0 .0 1)。 ( 3)妊高征组胎盘组织AT1RmRNA的表达水平 ( 0 .96± 0 .2 0 )高于正常组 ( 0 .5 6± 0 .14 ) (P <0 .0 1)。妊高征组胎盘组织AGTmRNA的表达水平 ( 1.0 8± 0 .2 2 )亦显著高于正常组 ( 0 .6 0± 0 .12 ) (P <0 .0 1)。　结论　在妊高征患者胎盘组织中 ,AT1R和AGT表达均有明显增加 ,说明胎盘组织局部肾素 血管紧张素系统与妊高征发病有相关性     

血浆RGS2蛋白与血管紧张素Ⅱ及其1型受体在子痫前期中的作用

目的:探讨妊娠期血浆中G蛋白信号调节因子2(RGS2)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)及其1型受体(AT1R)在子痫前期(PE)发病中的作用及对疾病严重程度的影响。方法:选择2016年1~9月在南方医科大学附属深圳妇幼保健院住院分娩的PE孕妇50例为PE组(合并FGR组17例,非FGR组33例)。选择同期分娩的健康孕妇40例为对照组。采用ELISA法检测各组孕妇血浆中RGS2蛋白、AngⅡ及AT1R水平,并比较PE组(合并FGR组、非FGR组)与对照组间3种指标的差异,运用Logistic回归分析3种指标与PE的发生及严重程度的相关性。结果:(1)PE组血浆中RGS2蛋白、AngⅡ、AT1R水平及收缩压、舒张压均高于对照组,而取样孕周、分娩孕周及新生儿出生体质量均低于对照组,差异有统计学意义(P0.05);合并FGR组、非FGR组间的RGS2蛋白水平、收缩压、舒张压差异无统计学意义(P0.05),但均分别高于对照组(P0.05);AngⅡ、AT1R水平及新生儿出生体质量在对照组、非FGR组及合并FGR组中两两比较,差异均有统计学意义(P0.05)。(2)Logistic回归分析示RGS2、AngⅡ及AT1R是PE发生的独立危险因素[(粗OR1,P0.05;调整抽样孕周后的OR11,P0.05;调整另外两种指标后的OR2值1,P0.05(除外AngⅡ)]。(3)RGS2蛋白、AngⅡ、AT1R水平与PE、收缩压、舒张压均呈正相关(P0.05),AngⅡ、AT1R水平与新生儿出生体质量呈负相关(P0.05),RGS2与新生儿出生体质量无相关性(P0.05)。结论:血浆中RGS2蛋白、AngⅡ及AT1R可能与PE的发病机制相关,AngⅡ及AT1R可能与疾病的严重程度相关。     

血管紧张素Ⅱ及其1型受体拮抗剂在卵巢癌中的作用机制

卵巢癌是女性生殖系统常见的恶性肿瘤之一,由于其发病隐匿,大多数患者出现症状就诊时已属晚期,且易发生转移和复发,死亡率居妇科恶性肿瘤的首位。因此进一步探究卵巢癌发生发展机制、寻找肿瘤潜在治疗靶点至关重要。血管紧张素Ⅱ（angiotensinⅡ,AngⅡ）是肾素-血管紧张素系统（renin-angiotensin system,RAS）中最具生物活性的因子,主要参与机体血压和水盐代谢的调节,目前研究发现其与血管紧张素1型受体（angiotensin type 1 receptor,AT1R）结合激活相关通路与卵巢癌的发生、发展及转移过程密切相关,而AT1R拮抗剂（angiotensin receptor blocker,ARB）可以与AT1R选择性结合阻断AngⅡ-AT1R通路,从而阻断或抑制AngⅡ在卵巢癌中的作用。深入研究血管紧张素Ⅱ及其1型受体拮抗剂在卵巢癌中的作用机制或许能为寻找卵巢癌新的治疗靶点提供依据。     

血管紧张素Ⅱ受体与妊娠

血管紧张素Ⅱ受体（ATR）是肾素－血管紧张素系统（RAS）的效应器，介导血管紧张素Ⅱ的生理学效应，是RAS作用的关键环节。子宫胎盘组织血管紧张素Ⅱ受体ATR的表达改变对妊娠的正常发生发展起着重要的调节作用，ATR的表达异常将导致妊娠高血压综合征（简称妊高征）的发生，AT1R拮抗剂可能成为妊高征治疗的新手段。本文就ATR在妊娠及妊高征中的作用的研究进展作一综述。     

血管紧张素转化酶基因和血管紧张素Ⅱ受体1基因多态性与子痫前期患者蛋白尿的相关性研究

子痫前期是妊娠期特有的疾病,其典型临床表现为高血压、蛋白尿和水肿.近年来,在对原发性高血压和糖尿病等疾病的研究中发现,肾素-血管紧张素系统参与了这些疾病中高血压和肾脏损害的发生,肾素-血管紧张素系统中的血管紧张素转化酶（ACE）基因和血管紧张素Ⅱ受体1（AT1R1166）基因的多态性,增加了机体对原发性高血压和糖尿病的易感性.本研究旨在探讨ACE基因和AT1R1166基因多态性与子痫前期患者发生蛋白尿的关系.     

胎盘中AT1受体的表达及其意义

血管紧张素Ⅱ受体1(AT1R)属G蛋白偶联受体超家族,是肾素-血管紧张素系统(RAS)的主要活性介质.发生妊娠高血压综合征(PIH)时胎盘RAS中AT1R的表达异常可能与PIH的发病有关.现将PIH与AT1R关系的研究进展加以综述如下.     

AngⅡ及AT1R在子宫内膜腺癌的表达及临床意义

目的:探讨AngⅡ及AT1R在子宫内膜腺癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学SP法检测50例子宫内膜腺癌,15例子宫内膜非典型增生及10例正常子宫内膜组织中AngⅡ及AT1R蛋白的表达。结果:AngⅡ及AT1R主要定位在细胞浆及胞膜中,大都呈弥漫性表达,在正常子宫内膜,非典型增生内膜及子宫内膜腺癌的阳性表达率分别是10%/20%,47%/33%,86%/72%。AngⅡ及AT1R在子宫内膜腺癌的表达显著高于非典型增生及正常子宫内膜组(P<0.05),AngⅡ及AT1R在非典型增生内膜组及正常子宫内膜组的表达无显著差异(P>0.05);AngⅡ在各期子宫内膜腺癌组织的表达无显著差异(P>0.05),AT1R在Ⅰ、Ⅱ期子宫内膜腺癌组织的表达显著高于Ⅲ期子宫内膜腺癌组织(P<0.05);AngⅡ及AT1R在子宫内膜腺癌侵及肌层深层组及浅层组,有淋巴结转移组和无淋巴结转移组的表达均无显著差异(P>0.05)。结论:AngⅡ及AT1R可能参与了子宫内膜腺癌的发生和发展,选择性拮抗AT1受体可能为子宫内膜腺癌的预防及治疗提供新的靶点。     

丙基戊酸钠对宫颈癌细胞HeLa增殖的影响机制

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitor,HDACI)丙基戊酸钠(sodium valproate,VPA)影响宫颈癌细胞HeLa增殖的机制。方法:用MTT法检测不同浓度VPA对HeLa细胞增殖的影响;倒置相差显微镜观察药物作用后细胞形态的变化;流式细胞仪(FCM)分析不同浓度VPA对HeLa细胞凋亡及细胞周期的影响;Western blot观察不同浓度VPA处理后caspase-3、bcl-2蛋白的表达变化。结果:VPA能明显抑制HeLa细胞的增殖,并呈时间和剂量依赖关系;经4mmol/L VPA处理48h后,HeLa细胞缩小变形成长梭状、胞膜皱缩、贴壁不良;VPA诱导HeLa凋亡、阻滞细胞于G2/M期,同时抑制细胞增殖;随浓度增加,VPA能明显增加caspase-3蛋白表达,并可见到蛋白裂解产物,表明VPA可以促进caspase-3活化,但下调bcl-2蛋白的表达。结论:VPA有抗宫颈癌作用,其重要作用机制之一是诱导HeLa细胞凋亡、直接抑制细胞增殖,有望成为新的抗宫颈癌药物。     

自噬基因Beclin1抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长的研究

目的:研究自噬基因Beclin1对裸鼠宫颈癌细胞株HeLa移植瘤的抑制作用。方法:将自噬基因Beclin1真核表达质粒pcDNA3.1(+)-Beclin1经脂质体包裹后转染人宫颈癌HeLa细胞,通过荧光定量PCR(RT-PCR)和Westernblot检测其mRNA及蛋白水平的表达,MTT法检测细胞生长抑制率;将HeLa细胞接种于裸鼠右前肢腋下建立裸鼠人宫颈癌移植瘤模型,待瘤结节直径≥5mm后,分别以重组质粒pcDNA3.1(+)-Bec-lin1、pcDNA3.1(+)和生理盐水200μl每两天1次直接瘤内注射,连用3周后,测量3组肿瘤大小并观察肿瘤组织形态学改变。结果:pcDNA3.1(+)-Beclin1能使HeLa中Bec-lin1mRNA及蛋白表达增加(P<0.05),并显著抑制HeLa细胞的生长,呈现时间依赖性,与其余两组相比,有显著统计学差异(P<0.05);经重组质粒治疗21天后,裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,相对于对照组瘤体明显缩小、瘤重明显减轻(P<0.05),病理检查可见,pcD-NA3.1(+)-Beclin1处理组瘤块内细胞坏死减少,结缔组织增生,而对照组中癌细胞分布呈弥漫性。结论:自噬基因Beclin1可以抑制HeLa移植瘤的生长。     

Renal angiotensin-II receptors expression changes in a model of preeclampsia.

The blunted response to angiotensin II (Ang II) during pregnancy is lost in patients by preeclampsia. This impaired response has been attributed to a change in one or both of the Ang II receptors, type 1 (AT(1)R) and type 2 (AT(2)R). The ratio of the Ang II receptor types in the kidney has not been studied. We postulated that an imbalance exists between AT(1)R/AT(2)R receptors in the renal cortex from rats subjected to an experimental model of preeclampsia, and that this altered ratio can modify the characteristic blunted pressor response to Ang II during pregnancy. The feto-placental units of Wistar rats were made ischemic by subrenal aortic coarctation, thus creating an experimental model of preeclampsia. We measured the AT(1)R and AT(2)R protein expression and the presence of the heterodimer AT(1)R/AT(2)R in the renal cortex and evaluated the pressor response to Ang II in an isolated kidney preparation from non-pregnant, healthy pregnant, and preeclampsia model rats. Pregnancy increased AT(2)R and AT(1)R/AT(2)R heterodimer expression and decreased the pressor response to Ang II. In contrast, AT(1)R increased, while AT(2)R and AT(1)R/AT(2)R heterodimer decreased in the preeclampsia model group. Thus, Ang II hypersensitivity observed in preeclampsia might be related to an increased expression of AT(1)R over AT(2)R and to a decreased presence of the AT(1)R/AT(2)R heterodimer in renal cortex.     

野生型p53抑制宫颈癌HeLa细胞的研究

目的:研究外源性野生型p53(wtp53)基因对宫颈癌HeLa细胞中的致癌基因环氧合酶-2(COX-2)的影响,以及抑制HeLa细胞生长的作用。方法:用脂质体介导的转染技术将野生型p53基因转染到HeLa细胞。实验分为2组,p53转染组(p53-HeLa组)和空白对照组(HeLa组),wtp53表达用逆转录-多聚酶链反应鉴定,并检测p53mR-NA和COX-2mRNA瞬时转染及稳定转染前后表达的变化。CCK-8染色法绘制细胞生长曲线。结果:野生型p53基因转染后HeLa细胞中的p53mRNA表达增加,COX-2mRNA表达减少。通过对细胞生长曲线的分析,转染后与转染前相比,生长明显减慢(P<0.01),wtp53对HeLa细胞有抑制作用。结论:外源性wtp53基因表达可抑制宫颈癌He-La细胞中COX-2mRNA的表达;wtp53可能通过抑制COX-2对宫颈癌HeLa细胞产生抑制作用,进而阻碍肿瘤的生长。     

Anti-invasive effect of MMI-166, a new selective matrix metalloproteinase inhibitor, in cervical carcinoma cell lines

OBJECTIVES: The aim of our study was to evaluate the anti-invasive effect of MMI-166, a new matrix metalloproteinase (MMP) inhibitor in cervical carcinoma cell lines. METHODS: We analyzed the invasive activities of cervical carcinoma cell lines (CAC-1, CaSki, and SiHa) and the gene expression of various matrix proteinases (matrix metalloproteinase-1 [MMP-1], MMP-2, MMP-9, membrane-type MMP type 1 [MT1-MMP], MT2-MMP, and MT3-MMP) and their inhibitors (tissue inhibitor of metalloproteinase type 1 [TIMP-1] and TIMP-2). The effect of MMI-166 was analyzed by in vitro invasion assay. The cytotoxicity of MMI-166 was determined by MTT assay. The gelatinase activity was analyzed by gelatin zymography. RESULTS: Cervical carcinoma cell lines, which produced both MMP-2 and MT1-MMP, showed invasive capacity in the in vitro invasion assay. The invasion of cervical carcinoma cells was suppressed by MMI-166. No remarkable suppression of the proliferation by MMI-166 was observed in the MTT assay. Gelatin zymography revealed complete suppression of MMP-2 activity by MMI-166. CONCLUSIONS: MMI-166 inhibited the MMP-2 activity in cervical carcinoma cells and it is useful for the regulation of cervical carcinoma cell invasion.