地塞米松对宫颈癌移植瘤生长及凋亡的影响

目的 探讨不同时间使用地塞米松对宫颈癌HeLa细胞移植瘤生长及凋亡的影响.方法 BALB/c裸鼠皮下接种HeLa细胞,于成瘤后测量肿瘤直径,不同时间(第6天和第16天)开始经腹腔内注射相同剂量地塞米松(15 mg·kg-1·d-1),连用10 d,对肿瘤进行透射电镜观察及原位细胞凋亡检测(Terminal deoxynucleotidyl Transferase Biotin-dUTP Nick End Labeling,TUNEL)凋亡小体数目.结果 不同时间使用地塞米松体内注射均抑制宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤生长,诱导肿瘤细胞凋亡;不同时间药物注射肿瘤的体积大小有差异(P＜0.01);早期注射抑瘤率高(94.36%),电镜下凋亡小体明显,TUNEL检测凋亡小体数目较多;晚期注射抑瘤率低(53.57%),只有早期凋亡表现,TUNEL检测凋亡小体数目较少,组间比较有显著性差异(P＜0.01).结论 不同时间地塞米松体内注射均能抑制肿瘤生长,诱导凋亡发生,并存在时间依从性.     

姜黄素抑制人宫颈癌CaSki细胞裸鼠移植瘤生长的实验研究

目的:探讨姜黄素对人宫颈癌CaSki细胞裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用。 方法：建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,35只荷瘤裸鼠随机分为5组,姜黄素高剂量(200mg/kg)、中剂量(100mg/kg)、低剂量(50mg/kg)组、溶剂对照组和顺铂组（3mg/kg）,每组7只,姜黄素连续灌胃给药15d,顺铂组每3天腹腔注射给药,共5次。停药24 h后处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;结果:处理组的移植瘤体积均明显小于空白对照组(P相似文献   

青蒿琥酯增敏对宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤凋亡的影响

目的探讨青蒿琥酯增敏对宫颈癌HeLa细胞裸鼠移植瘤凋亡的影响。方法建立裸鼠移植瘤模型,待移植瘤体积平均增至大约（5 mm×5 mm×5 mm）,将裸鼠随机分为对照组、单药组、单照组和联合组,单药组和联合组每只裸鼠给予青蒿琥酯100 mg.kg^-1.d^-1,对照组和单照组每只裸鼠给予等体积生理盐水,处理7 d,第7 d给药后单照组和联合组立即给予一次性^60Coγ射线10Gy照射,照后观察14 d,14 d后剥瘤,TUNEL法检测移植瘤组织中细胞的凋亡。结果联合组裸鼠移植瘤瘤质量较单照组明显减小[（0.64±0.11）g vs（1.31±0.58）g]（P〈0.05）,抑瘤率达71.17%。联合组移植瘤组织中细胞凋亡数较单照组显著增大[（77.5±8.07）vs（48.80±6.71）]（P〈0.05）。结论青蒿琥酯能明显增加HeLa细胞裸鼠移植瘤对射线的放射敏感性,作用机制与其增强射线诱导移植瘤组织中细胞凋亡有关。     

重组凋亡素对人卵巢癌裸鼠移植瘤生长抑制作用的影响

目的 观察凋亡素(VP3)基因真核表达质粒对人卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人卵巢癌(COC1)细胞裸鼠异种移植瘤模型.实验裸鼠分为四组:高剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,100μg/只);低剂量实验组(pcDNA-VP3质粒DNA,瘤内注射,50μg/只);空载体对照组[pcDNA3.1(+)质粒DNA,瘤内注射,100μg/只];脂质体对照组(脂质体,瘤内注射,0.2mL/只).每3d测量皮下移植瘤长、宽径,按标准公式V=L×W2X0.52计算移植瘤体积.12天后处死裸鼠,称取瘤重.使用TUNEL法观察凋亡素对皮下移植瘤细胞凋亡程度的影响.结果 pcDNA9·vP3高剂量组和低剂量组卵巢癌裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑制.高剂量组和低剂量组肿瘤生长抑制率分别为76%和52%;瘤重抑制率分别为71.9%和49.5%(P<0.05).TUNEL实验结果表明凋亡素在体内以凋亡方式诱导肿瘤细胞死亡.结论 重组凋亡素基因真核表达质粒具有抑制人卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长作用.凋亡素在瘤组织中以诱导凋亡方式抑制卵巢癌裸鼠异种移植瘤生长.     

白藜芦醇对裸鼠胃癌移植瘤中PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对裸鼠胃癌移植瘤细胞凋亡相关基因PDCD5蛋白表达及细胞凋亡的影响。方法将BGC-823细胞复苏后,通过右前肢腋部皮下移植构建裸鼠胃癌移植瘤模型。建模成功后的荷瘤裸鼠随机分为空白对照组、Res组、顺铂组和联合用药组(白藜芦醇+顺铂),各组分别在成瘤部位皮下注射0.2ml相应的药物,每日1次,治疗1周。停药后将裸鼠处死,剥离肿瘤组织。采用免疫组织化学方法检测移植瘤组织中PDCD5蛋白表达,采用原位末端标记法(TUNEL)检测移植瘤组织中细胞凋亡情况。结果 Res组中PDCD5蛋白表达水平明显高于空白对照组,但低于顺铂组和联合用药组,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。TUNEL法检测到胃癌移植瘤中凋亡细胞核呈棕褐色,染色深浅不一,染色质分布不均,空白对照组中仅见到少数凋亡细胞,Res组、顺铂组和联合用药组凋亡细胞数依次增加,上述各组两两相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇可上调裸鼠胃癌移植瘤细胞中PDCD5的蛋白表达,表明其可能通过上调PDCD5的表达进而诱导细胞凋亡。     

MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的影响

目的:观察蛋白酶体抑制剂MG132联合顺铂对人宫颈癌Hela细胞裸鼠移植瘤的影响。方法:建立人宫颈癌裸鼠移植瘤模型,将荷瘤鼠分成4组,每组5只,分别给予腹腔注射。对照组:生理盐水0.2 ml,1次.d-1,共7 d。MG132组:5 mg.kg-1MG132,0.2 ml,1次.d-1,共7 d。顺铂组:3 mg.kg-1顺铂,0.2 ml,第3、5、7天,1次.d-1。MG132联合顺铂组:5 mg.kg-1MG132,0.2 ml,1次.d-1,共7 d;3 mg.kg-1顺铂,0.2 ml,第3、5、7天,1次.d-1。计算瘤体积,绘制瘤体生长曲线;称瘤重,计算抑瘤率及瘤体抑制率,比较各组荷瘤鼠瘤体积和瘤重的差异。结果:各组荷瘤鼠瘤体积两两比较差异均有统计学意义(P<0.001),MG132组、顺铂组以及MG132联合顺铂组的瘤体生长较对照组明显缓慢。荷瘤鼠瘤重各组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.001),各干预组的荷瘤鼠瘤重比对照组明显减轻。MG132组、顺铂组、MG132联合顺铂组荷瘤鼠抑瘤率分别为15%、48%和81%;MG132组、顺铂组、MG132联合顺铂组荷瘤鼠瘤重抑制率分别为9%、43%和69%。结论:MG132能抑制裸鼠体内Hela细胞移植瘤的生长,并增强顺铂对裸鼠Hela细胞移植瘤生长的抑制作用。     

二氧化硒和顺铂联合作用对于人卵巢癌裸鼠皮下移植瘤的影响

目的探讨二氧化硒和顺铂联合作用对人卵巢癌细胞株裸鼠皮下移植瘤生长的影响。方法将4×106个卵巢癌细胞(来源于临床标本)接种于裸鼠皮下,然后待瘤株长至一定的体积后,腹腔注射顺铂,使得肿瘤对顺铂的反应逐渐下降,反复注射6次后取瘤株接种至下一代,反复传至三代后,取瘤株细胞注射至20只雌性裸鼠左侧腋下,待瘤长成约为5 mm×5 mm×5 mm时,随机分成对照组和实验组。实验组包括顺铂组、二氧化硒组,二氧化硒+顺铂组,每组5只裸鼠,对照组给予生理盐水0.4 mL/只,顺铂组腹腔内注射DDP 3 mg/kg 0.2 mL+生理盐水0.2 mL;二氧化硒组腹腔内注射二氧化硒30μg/mL 0.2 mL+生理盐水0.2 mL;顺铂联合二氧化硒组,腹腔内注射顺铂3 mg/kg 0.2 mL+二氧化硒30μg/mL 0.2 mL。3 d给药1次,共4次。给予后计算移植瘤的体积、瘤重、抑瘤率;瘤组织标本分别进行HE染色病理检查,和检测P-gp的表达。结果顺铂组,二氧化硒联合顺铂组对移植瘤的生长有明显抑制作用;病理检测瘤组织标本均提示经顺铂治疗后的肿瘤细胞发生了凋亡。结论二氧化硒可以增强顺铂对人卵巢癌移植瘤的生长抑制作用,并可以减轻...     

As2O3对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用

目的 探讨不同剂量三氧化二砷(As2O3)对人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤的抗肿瘤作用及机制.方法 将4×106个Hela细胞接种于裸鼠皮下,建立人宫颈癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为As2O3低剂量(1.0 mg/kg)、中剂量(2.5 mg/kg)、高剂量(5.0 mg/kg)组及生理盐水空白对照组、顺铂阳性对照组,腹腔连续给药10 d,停药后24 h处死裸鼠留取标本计算抑瘤率,流式细胞仪检测细胞凋亡率, RT-PCR方法检测移植瘤组织caspase-3基因的相对表达量,免疫组化SP法检测磷酸化细胞外信号调节激酶(pERK)的表达.结果 各剂量As2O3组及顺铂组瘤质量与生理盐水组相比均有统计学意义(F=39.14,P<0.05);As2O3高、中、低剂量组流式细胞仪检测时均出现典型凋亡峰,凋亡率分别为17.89%、17.19%、18.52%;As2O3作用后caspase-3基因的表达较生理盐水组明显升高,差异均有统计学意义(F=8.76,q=3.06～5.81,P＜0.05);As2O3各剂量组pERK的表达较生理盐水组降低.结论 As2O3 对人宫颈癌移植瘤的生长具有明显的抑制作用,其机制与上调caspase-3基因的表达诱导细胞凋亡,下调pERK的表达与抑制MAPK信号传导通路有关.     

YH-16对宫颈癌细胞及其裸鼠移植瘤抑制作用研究

目的探讨YH-16（重组内皮抑素）对宫颈癌Hela细胞及其荷瘤鼠生长抑制作用。方法用MTT法检测细胞生长;用透射电镜观察细胞凋亡、流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期;将Hela细胞移植至裸鼠皮下,观察不同浓度YH-16（0、0.4、0.75和1.5mg/kg）对荷瘤鼠皮下移植瘤生长的影响;TUNEL法观察肿瘤细胞的凋亡;免疫组化方法检测裸鼠移植瘤组织中肿瘤微血管密度（MVD）。结果YH-16抑制Hela细胞增殖（P〈0.01）;能诱导Hela细胞凋亡。YH-16能抑制裸鼠皮下移植瘤的生长（P〈0.05）;YH-1615mg/kg组的肿瘤MVD计数较对照组和其他治疗组明显降低（P〈0.05）。结论YH-16具有抑制宫颈癌Hela细胞及其皮下移植瘤生长的作用。     

X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1抑制肝癌裸鼠移植瘤生长的研究

目的 研究X连锁凋亡抑制蛋白相关因子-1(XAF1)基因对人肝癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用.方法 建立人肝癌细胞株SMMC7721裸鼠荷瘤模型,每组5只裸鼠分别在瘤内分3点注射相同感染滴度的重组腺病毒Ad5/F35-XAF1、Ad5/F35-Null对照空病毒及等体积的磷酸缓冲液(PBS),隔天注射1次,疗程2周.每3天测量各组裸鼠移植瘤的体积,观察Ad5/F35-XAF1组移植瘤的生长与其他两组的差异.原位末端标记TUNEL法检测移植瘤细胞的凋亡,免疫组织化学法检测移植瘤中XAF1蛋白表达和微血管密度(MVD).结果 与PBS组和Ad5/F35-Null组比较,瘤内注射Ad5/F35-XAF1组裸鼠移植瘤体积、质量和MVD显著减小(P<0.05或P<0.01),而移植瘤细胞的凋亡指数和XAF1蛋白的表达率均明显增高(P<0.01).结论 腺病毒介导XAF1基因可抑制人肝癌裸鼠移植瘤的生长,可能与该基因诱导肝癌细胞凋亡和抑制肿瘤血管形成有关.     

全血标本保存条件对人总RNA提取效率的影响

目的探讨全血标本保存条件对RNA提取效率和RNA完整性的影响。方法从179例保存在不同温度、不同时间的全血标本中提取总RNA,测定其浓度和纯度、分析其完整性。另选20例标本研究冻融次数对RNA提取效率的影响。179例中的73例总RNA在-80℃下保存1周前、后分别测定浓度和纯度,观察两者差异。结果新鲜血来源的总RNA浓度最高,平均306.51ng/μl;冻融2次全血仍可获得足量的RNA,浓度181.98ng/μl,RNA完整性有所下降;-80℃保存1周的RNA,浓度和纯度都略有下降。结论利用Trizol法可从小体积全血标本中获取足量有效的总RNA;不同保存条件全血中所获取的总RNA浓度存在差异;总RNA-80℃短期保存也会略有降解。     

二甲氨基偶氮苯诱发大白鼠肝癌的研究——癌变过程核糖体和多核糖体RNA含量及其PolyA~+ RNA相对含量的改变

本实验以二甲氨基偶氮苯(DAB)诱发大白鼠肝癌不同时期的肝组织为材料,观察了核糖体和多核糖体RNA含量及其polyA~+RNA相对含量的改变。结果表明:DAB诱癌6周、16周及肝癌的癌区组织核糖体和多核糖体RNA含量均低于正常对照组。而癌周组织的含量未见有显著性变化。核糖体和多核糖体RNA中polyA~+RNA的相对含量在诱癌6周、16周时低于对照组,但在肝癌形成时则高于对照组。本文就这种变化的意义作了初步讨论。     

大鼠肝细胞核体外转录活性随增龄变化的研究

本文用同位素参入法研究不同月龄大鼠的肝细胞核体外转录活性。结果观察到老年大鼠的肝细胞核体外转录活性较断乳鼠及青年鼠分别下降了47％及42％,而肝组织中总RNA的含量随增龄变化不十分明显;负责rRNA及tRNA的RNA聚合酶Ⅰ+Ⅲ所致的转录活性随增龄明显下降,而负责n.RNA合成的RNA聚合酶Ⅱ所致的转录活性则改变不太明显;RNA合成后从细胞核转运到核外的变化趋势是1～10月龄时上升,11—28月龄时下降。     

抑制RhoC基因对卵巢癌细胞紫杉醇敏感性的影响

目的 探讨RNA干扰技术沉默Ras homolgyC(RhoC)基因对卵巢癌细胞SKOV3细胞对紫杉醇敏感性的影响.方法 体外设计合成针对RhoC基因的微小干扰RNA(miRNA),转染卵巢癌细胞SKOV3,应用RT-PCR和Western印迹方法检测转染前后基因mRNA和蛋白的变化,应用MTT方法检测干扰后SKOV3细胞对紫杉醇敏感性的变化,同时应用RT-PCR法检测转染前后SKOV3细胞中的凋亡基因Caspase-3、Survivin mRNA的表达水平.结果 转染针对RhoC基因的miRNA后24、48、72 h,SKOV3细胞mRNA和蛋白水平显著下降;关闭RhoC基因后,SKOV3细胞对紫杉醇的敏感性显著提高.与单独使用紫杉醇相比,在RhoC-miRNA联合紫杉醇组中促进凋亡的基因Caspase-3明显增高,而抗凋亡蛋白Suvlvin mRNA水平显著降低.结论 RNA干扰RhoC基因能增加卵巢癌SKOV3细胞对紫杉醇的敏感性,其协同机制可能与Caspase-3基因的上调,Suvivin基因的下调有关.     

逆转录聚合酶链反应检测HCV RNA血标本保存条件分析

目的 确定用于丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ逆转录聚合酶链反应测定的血清（浆）标本的最佳收集和保存条件。方法 按的不同条件处理,用逆转录聚合酶链反应测定ＨＣＶ ＲＮＡ。和高压消毒的离心管与未用高压消毒的离心管收集、保存ＨＣＶ ＲＮＡ血清,其阳性检出率有差异（Ｐ〈０．０５）。血凝固后４ｈ离心分离血清对ＨＣＶ ＲＮＡ阳性检出率不造成明显改变（阳性率为８５％）;１２ｈ后检测则变化明显（阳性率降至７５％）。     

节律基因Clock干扰对小鼠精子受精能力的影响

目的 通过干扰小鼠睾丸圆形精子期节律基因Clock的表达,研究Clock对雄性小鼠精子受精能力的影响.方法 小鼠睾丸注射Clock干扰质粒,Western Blotting检测注射后睾丸组织Clock表达的变化,体内实验观察注射干扰质粒前后引起雌鼠胎仔数变化,体外实验观察精子数量、精子活力、体外受精率以及对顶体发育的影响.结果 Clock干扰质粒使小鼠睾丸CLOCK蛋白的表达明显下调.体内实验结果显示注射Clock干扰质粒影响了雄性鼠致雌鼠的胎仔数,体外实验结果显示,虽然注射Clock干扰质粒后精子计数、精子活力无明显变化,但体外受精能力明显下降.顶体酶活性明显下降.结论 节律基因Clock与雄性小鼠的生殖功能有密切的关系.节律基因Clock可能通过调节顶体酶活性来影响雄性小鼠精子的受精能力.     

RNAi研究进展

从 1998年ＡｎｄｒｅｗＦｉｒｅ和ＣｒａｉｇＭｅｌｌｏ揭开了ＲＮＡｉ对基因的阻抑效应后 ,在随后的短短几年中 ,ＲＮＡｉ现象被广泛地发现于真菌、拟南芥、水螅、涡虫、锥虫、斑马鱼等大多数真核生物中。这种存在揭示了ＲＮＡｉ很可能是出现于生命进化的早期阶段。尤其是最近在哺乳动物中的研究不断深入 ,ＲＮＡｉ的机制正在被逐步阐明 ,而同时作为功能基因组研究领域中的有力工具以及治疗疾病的一种新技术 ,ＲＮＡｉ被广泛地运用到越来越多的领域。1　ＲＮＡｉ的发现及发展首次发现ＲＮＡｉ是 1995年Ｇｕｏ和Ｋｅｍｐｈｕｅｓ利用反义Ｒ…     

IL-1β加酵母RNA对照射小鼠外周血肝脾GSH与SOD活性的影响

目的　研究IL-1β（人重组白介素-1）复合酵母RNA对小鼠受γ射线外照射后外周血、肝、脾谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）活性的影响，探讨药物治疗辐射损伤机制. 方法　雌性小鼠25只，随机分为5组，1150 cGy腹部照射后1 h, 24 h分别给予后肢im IL-1β, 酵母RNA, IL-1β复合酵母RNA，于照后6 d，取外周血、肝脏和脾脏测SOD, GSH活性. 结果　照射后外周血、肝、脾SOD, GSH活性下降. 使用IL-1β, 酵母RNA, IL-1β复合酵母RNA后照射组外周血、肝、脾SOD, GSH活性升高，且肝、脾的SOD, GSH活性与照射对照组之间有显著差异(P<0.05)，复合组肝脾SOD, GSH活性明显高于照射对照组具有显著差异(P<0.01)，高于照射单独给药组. 外周血各照射组之间无显著差异. 结论　IL-1β复合酵母RNA升高γ射线外照射对肝、脾谷胱甘肽（GSH），超氧化物歧化酶（SOD）活性，复合用药可以对抗射线引起机体产生的损伤作用. 结果表明：照后复合应用IL-1β, 酵母RNA可通过提高清除自由基，起到更好的抗辐射作用.     

La蛋白与HBV RNA相互作用关系的研究进展

新近研究发现,人类La蛋白(human La protein,hLa)是一种与HBV RNA转录调节相关的因子.La蛋白可能结合在HBV RNAs的茎环结构上,具有保护乙肝病毒(hepatitis B virus,HBV)RNA,促进其翻译启动的作用,可能是HBV RNA的稳定因子.当La蛋白发生突变后将无法与HBV RNA结合,丧失保护HBV RNA的功能,使其受到酶的降解,无法转录翻译,病毒的复制受阻,从而抑制HBV感染.本文综述了La蛋白、HBV RNA及核酶(nuclear RNases)三者间相互作用关系的最新研究成果,从分子水平上探讨了导致HBV RNA降解的可能机制,推测了野生型和突变型La蛋白对乙型肝炎病毒RNA的翻译启动和病毒复制的影响.     

真核细胞中总RNA的制备

RNA的制备是基因表达在转录水平上的调节和cDNA的合成等研究过程中必不可少的方法之一.通常一个典型的哺乳动物细胞约含有10 pg RNA, 其中80%～85%为rRNA (主要是28 S、18 S和5 S 3种类型);10%～15%为tRNA 和核内小分子RNA;1%～5%为mRNA[1].mRNA 虽然大小和核苷酸序列各不相同,从数百至数千碱基不等,但大多数真核细胞mRNA在其3′端均有一寡聚腺苷酸(poly A)组成的尾,其长度一般足以吸附于寡聚脱氧胸苷酸-纤维素[oligo(dT)],使得mRNA可以有亲和层析法分离.这个群体编码了所有由该细胞合成的多肽.