槲皮素脂质体纳米粒对肝癌HepG2细胞生长的抑制作用

目的 比较槲皮素脂质体纳米粒化后对肝癌HepG2细胞的抑制作用是否优于纯槲皮素.方法 将不同浓度的槲皮素悬液与采用薄膜蒸发-高压均质法制备的槲皮素脂质体纳米粒,空白脂质体纳米粒槲皮素,加入到肝癌HepG2细胞悬液中进行培养,24h,48h后,加入MTT,观察细胞生长状况,分析抑制情况.结果 48h光密度值:同浓度的槲皮素脂质体纳米粒明显较槲皮素,空白脂质体纳米粒小,与5-Fu比较,明显较大,差异有显著性(P＜0.05).结论 在所使用的浓度范围内,槲皮素脂质体纳米粒对体外肝癌HepG2细胞生长的抑制作用更优于纯槲皮素.     

槲皮素脂质体纳米药物对大鼠肝脏损伤保护作用的研究

目的比较槲皮素脂质体纳米药物对肝损伤大鼠的肝脏保护作用是否优于槲皮素。方法采用薄膜高压均质-负压蒸发法备槲皮素脂质体纳米药物,测量其粒径、药物含量及包封率。将肝损伤模型大鼠按体重随机分组后按不同剂量给药,比较各组大鼠血清ALT、AST、TBiLi和TBA,比较各组大鼠肝脏LN、HA、PCIII和IV-C,同时通过各组大鼠肝脏Bcl-2蛋白表达的比较,探讨槲皮素脂质体纳米药物保护肝脏的机制。结果采用本实验方法制得的槲皮素脂质体纳米粒粒径为(133±21)nm,载药量为(0.61±0.08)mg/mg,,包封率为(91.18±0.78)%。槲皮素脂质体纳米药物在血清AST、ALT、TBiLi、TBA及肝脏LN、HA、PCIII、IV-C等指标总体较槲皮素及空白脂质体纳米药物有所提高,槲皮素脂质体纳米药物可使大鼠肝脏Bcl-2蛋白的表达升高。结论槲皮素脂质体纳米药物对模型大鼠的肝脏保护优于未纳米化的槲皮素及空白脂质体纳米药物,且呈正相量效关系。槲皮素脂质体纳米药物保护肝脏的机制是增强了肝脏Bcl-2蛋白的表达。     

槲皮素肠溶PLGA纳米粒各肠段的吸收特性研究

目的 研究槲皮素肠溶PLGA纳米粒各肠段的吸收特性.方法 采用高压均质法结合复乳-溶剂挥发法等方法制备槲皮素PLGA纳米粒,进行纳米粒形态学分析与粒径考察及包封率的测定,并优化制备工艺;考察药物在人工胃液、人工肠液不同介质中的槲皮素PLGA纳米粒的释放度;分别以Eudragit L100、Eudragit L100-55、Eudragit S10、HP55、HP50等肠溶包衣材料与PLGA以一定比例量制备槲皮素纳米粒,比较粒径、包封率,筛选肠溶材料及制备方法;分别于人工胃液及人工肠液中测定不同槲皮素肠溶PLGA纳米粒释放度,与槲皮素PLGA纳米粒比较;从吸收部位、药物质量浓度、灌流速度三个方面对槲皮素肠溶PLGA纳米粒的各肠段吸收特性进行考察.结果 5种不同肠溶包衣材料与PLGA以一定比例量制备槲皮素纳米粒的包封率、粒径等指标比较差异均无统计学意义(P>0.05),且在PLGA浓度为100 mg/mL和50 mg/mL时析出大颗粒沉淀;在人工肠液中的槲皮素PLGA纳米粒释放度明显高于人工胃液中,差异有统计学意义(P<0.05);在人工肠液中的槲皮素PLGA纳米粒释放度为(84.6±9.8)%,明显高于人工胃液中的(64.7±4.6)%,差异有统计学意义(t=5.81,P<0.05);质量浓度为1μg/mL时,药物吸收速率常数为(6.6±1.6)Ka/h,质量浓度为10μg/ml时,药物吸收速率常数为(3.5±1.5)Ka/h,质量浓度为20.0μg/mL时,药物吸收速率常数为(2.0±0.4)Ka/h,十二指肠、空肠中的药物吸收速率常数为(7.5±2.5)Ka/h,回肠、结肠中的药物吸收速率常数为(2.7±1.4)Ka/h;灌流速度为0.2 mL/min时,药物吸收速率常数为(15.5±3.5)Ka/h;灌流速度为0.8 mL/min时,药物吸收速率常数为(26.5±1.7)Ka/h;药物吸收速率在质量浓度10~20μg/mL范围内出现了自身浓度抑制;在十二指肠、空肠的药物吸收速率常数明显高于回肠、结肠段,且药物吸收速度常数随着灌流速度的增高而逐渐增高,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 制备槲皮素-聚乳酸-羟基乙酸(QC-PLGA)纳米粒可显著提高抗肿瘤的缓释作用,在质量肿瘤切除术后残留癌灶方面前景广阔.     

大鼠口服黄体酮脂质纳米粒的血药浓度测定

目的采用高效液相色谱法测定大鼠血浆中黄体酮的浓度,以用于黄体酮脂质纳米粒的药动学研究.方法大鼠血样用乙酸乙酯提取,采用达那唑为内标,以Hypersil C18柱(150 mm×3.9 mm,5 μm) 为分析柱,甲醇∶水(60∶40)为流动相,流速0.6 ml/min,检测波长为240 nm.以去势大鼠为模型动物,应用建立的方法,测定大鼠口服黄体酮脂质纳米粒后的血浆药物浓度.结果黄体酮在0.02～2 μg/ml浓度范围内线性关系良好(r＝0.9999,n=3),定量限为(0.02±0.004)μg/ml(n=3),最低检测线为0.005 μg/ml(S/N≥3).高、中、低质控样品的日内、日间RSD均小于10%,平均提取回收率为90.5%,方法学回收率为93.4%～107.5%.血药浓度-时间曲线提示,脂质纳米粒延缓药物的达峰时间,并明显提高药物的生物利用度.结论本测定方法稳定,操作简便、快速、准确、灵敏,可用于黄体酮脂质纳米粒的药动学研究.     

脂质体纳米粒组装体作为药物载体的研究进展

脂质体纳米粒(Liposparticle)是一定浓度的脂质囊泡和米粒分散在水溶液中自组装形成的具有脂质外壳和纳料粒核心的新型组装体(图1),近来,在生物科技和药物、抗源、基因传递系统领域引起人们极大兴趣[1].     

鬼臼毒素固体脂质纳米粒经皮渗透和皮肤贮留研究

目的研究鬼臼毒素固体脂质纳米粒经皮渗透和皮肤贮留情况。方法采用Franz扩散池测定鬼臼毒素固体脂质纳米粒的经皮渗透速率,扩散池与供给池之间为大鼠或家兔腹部皮肤,扩散池面积为2.92 cm^2。在体外透皮试验完结后,取下皮肤,剪碎匀浆,用50%异丙醇-生理盐水提取,提取液处理后用HPLC测定药物浓度。结果制得的鬼臼毒素固体脂质纳米粒包封率平均为95.28%,RSD为2.53%（n=5）,粒径在50-200 nm之间。固体脂质纳米粒作为载体时,鬼臼毒素经大鼠和家兔离体腹部皮肤的平均渗透速率和累积透过量较市售酊剂明显降低,同时药物贮留量较市售酊剂明显提高。结论鬼臼毒素固体脂质纳米粒具有较强的皮肤靶向性。     

聚糖纳米粒阿霉素对移植瘤小鼠的体内抑瘤作用探讨

目的:探讨聚糖纳米粒载导的阿霉素移植瘤小鼠的体内抑瘤作用。方法:利用研制的聚乳酸阿霉素纳米粒对移植瘤小鼠的抑瘤作用,并选取生理盐水、空白脂质体以及游离阿霉素作为对照组,观察各组体内抑瘤情况。结果:聚乳酸阿霉素纳米粒组动物平均瘤重较对应游离阿霉素组明显减轻,药物抑瘤率显著提高(P<0.05),两组治疗组较生理盐水对照组、空白脂质体对照组抑瘤率有显著提高(P<0.05),而空白脂质体组与生理盐水对照组抑瘤率无显著差异(P>0.05)。结论:聚糖纳米粒阿霉素对移植瘤小鼠的体内抑瘤作用较游离阿霉素效果显著,作用时间更持续长久。     

白蛋白阿霉素磁纳米粒在大鼠体内的生物分布

目的：观察白蛋白阿霉素磁纳米粒肝动脉给药与肝动脉给予高剂量的游离药物在体内生物分布上的差异。通过直接测量组织中阿霉素的浓度,进一步证实白蛋白阿霉素磁纳米粒的靶向性。方法：大鼠正中开腹,胃十二指肠动脉插管。实验组：肝动脉注射白蛋白阿霉素磁纳米粒（相当0．5mg/kg阿霉素）左肝外叶应用磁场30min,磁场去除后,动物处死。对照组：肝动脉注射10倍于实验组剂量的阿霉素（5mg/kg),30min后处死。动物处死后,取靶区肝组织、非靶区肝组织、心、肾、脾和肺捣碎、匀浆,用乙醇提取法提取阿霉素,用荧光光度计测量。结果：实验组左肝外叶应用磁场30min,磁区肝组织阿霉素的浓度较非磁区肝组织的阿霉素浓度明显升高,磁共肝组织阿霉素浓度为非磁区肝组织的2．6倍,对照组靶区肝组织和非靶区肝组织的阿霉素浓度无统计学差异,对照组和心和肾组织的阿霉素浓度平均为实验组的9倍以上,脾为4．6倍,肺两组之间无统计学差异。而对照组靶区肝组织的阿霉素只有磁区肝组织阿霉素浓度的1／4。实验组心、肾、肺和脾组织与靶区肝组织阿霉素浓度的比值大大低于对照组。结论：通过纳米粒加磁场的方法从肝动脉给予阿霉素在靶区产生的药物浓度比肝动脉给予10倍剂量的游离阿霉素在靶区产生的药物浓度高3倍。而在心、肾和脾的阿霉素浓度比对照组大为降低。另外,实验组心、肾、肺和脾组织和与靶区肝组织阿霉素的比值比对照组明显降低,其意义若在靶区产生同样的阿霉素的浓度,实验组肝外脏器的阿霉素浓度将大大降低对照组。     

槲皮素固体脂质纳米粒体外释放度考察

目的考察槲皮素固体脂质纳米粒的体外释放度,为处方设计、制备工艺、质量评价及合理用药提供依据。方法以生理盐水为释放介质,采用透析袋-高效液相色谱法研究其在0～48h内的体外释药特性。结果48h内槲皮素累积释放度为95．6％。结论槲皮素固体脂质纳米粒具有良好的缓释特性;该方法用于考察槲皮素固体脂质纳米粒的体外释放度,操作便利,方法稳定,结果重现性好。     

应激大鼠血清对淋巴细胞转化的抑制作用与刀豆素A浓度的关系

目的　探讨应激大鼠血清对淋巴细胞转化的抑制作用与刀豆素A浓度的关系。方法　雄性SD大鼠随机分成实验组和对照组 ,实验组大鼠应激 15d。取正常雄性BALB C小鼠脾细胞悬液分别给予不同浓度刀豆素A ,以MTT法测定应激大鼠血清对脾淋巴细胞在刀豆素A诱导下的转化率。结果　给予浓度为 2 .5～ 5 μg ml的刀豆素A的实验组与对照组相比具有显著性差异 (P <0 .0 1,n =6 ) ,给予浓度为 10 μg ml的刀豆素A的实验组与对照组相比差异不显著 (P >0 .0 5 ,n =6 )。结论　刀豆素A在应激大鼠血清对淋巴细胞转化的抑制作用中的适当浓度为 2 .5～ 5 μg ml。     

Changes in serum concentration of podophyllotoxin after its topical application with liposome on rat skin]

OBJECTIVE: To investigate the changes of serum concentration of podophyllotoxin after topical application of liposome podophyllotoxin suspension on rat skin. METHODS: SD rats were used in this study, which were divided into test group (n=48) to receive application of liposome podophyllotoxin (0.5 % ) suspension and control group (n=48) treated with 0.5 % podophyllotoxin alcohol solution. Blood samples were obtained from the heart at 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 and 24 h respectively after drug application, and the serum concentration of podophyllotoxin was determined by spectrofluorometry. RESULTS: The area under the curve of plasma drug concentration of the control group was 2.3-fold greater than that of the test group. Eight hours after drug application, the serum concentration of podophyllotoxin reached the peak in the test group, while in the control group, only two hours was needed to reach the peak. The peak serum level of podophyllotoxin in the test group were significantly lower than that of the control group (166.395 +/- 14.634 ng/ml vs 378.603 +/- 26.105 ng/ml, P<0.001). CONCLUSION: The systemic absorption of podophyllotoxin in rats after its topical application in liposome suspension is significantly lower than that after application of 0.5 % podophyllotoxin alcohol solution, therefore the systemic toxicity may be reduced.     

大鼠外用脂质体鬼臼毒素后血液中鬼臼毒素浓度观察

目的评价大鼠外用脂质体鬼臼毒素混悬液后经时血药浓度变化规律。方法观察组大鼠涂抹脂质体鬼臼毒素混悬液（载药量0.5％）,对照组大鼠涂抹0.5％鬼臼毒素酊剂。涂药后1、2、4、6、8.10、12和24h心脏采血,用荧光光度法测定不同时间血中鬼臼毒素浓度。结果对照组浓度曲线下面积是观察组的2.3倍。观察组用药8h后鬼臼毒素血药浓度达峰值[（166.395±14.634）ng/ml],而对照组用药后2h即达峰值[（378.603±26.105）ng/ml]。观察组鬼臼毒素的峰值浓度较低,与对照组相比有显著性差异（P<0.001）。结论　脂质体鬼臼毒素混悬液外用后,全身吸收明显低于外用鬼臼毒素酊剂,表明脂质体鬼臼毒素外用后能降低全身毒副作用。     

miR-122在骨髓间充质干细胞治疗大鼠急性肝损伤中的作用

目的:探讨miR-122在骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠急性肝损伤中的作用,阐明相关作用机制。方法:密度梯度离心法分离收集雄性大鼠的BMSCs,分为转染组和对照组,其中转染组BMSCs采用脂质体介导转染miR-122 mimics,对照组BMSCs未接受转染。将60只四氯化碳(CCl₄) 诱导的急性肝损伤大鼠随机分为肝损伤对照组(静脉注射生理盐水)、普通治疗组(静脉移植普通BMSCs)和实验治疗组(静脉移植转染miR-122的BMSCs)(n=20)。移植细胞后1、7和14 d检测大鼠肝功能,肝组织行HE染色观察其病理学改变。结果:转染miR-122 mimics后7 d,BMSCs中白蛋白(ALB)表达水平明显上调,而甲胎蛋白(AFP)的表达水平则明显下调。移植细胞后1d,与普通治疗组比较,实验治疗组血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)活性差异无统计学意义(P>0.05);移植细胞后7和14 d时,实验治疗组大鼠血清ALT和AST活性均低于普通治疗组(P<0.05);HE染色,实验治疗组大鼠肝脏充血、细胞质内空泡变性及肝细胞坏死情况明显好于普通治疗组。结论:上调BMSCs中miR-122表达水平能够促进其分化为肝样细胞,并可明显改善CCl₄所致大鼠肝脏损伤。     

脐带血干细胞移植对失代偿性肝硬化大鼠模型的治疗作用

目的探索人脐带血干细胞(umbilical cord blood stem cells,UCBSCs)经尾静脉移植后,对失代偿性肝硬化大鼠的治疗作用。方法腹腔注射CCl4加酒精溶液法制备失代偿性肝硬化大鼠模型,随机分为实验组和对照组,每组10只,分别从大鼠尾静脉注射UCBSCs和DMEM/F-12,治疗后每周分别取血测定肝功能和肝纤维化指标,4周后处死所有大鼠。所有死亡的大鼠肝脏组织切片进行HE和Masson染色,检测大鼠肝细胞组织损伤和纤维化情况。观察并记录各组大鼠的生存状态及生存时间。结果实验组大鼠治疗后ALT的含量逐周下降且每周均低于对照组(P<0.05),而且PCⅢ有统计学差异(P<0.05)。大鼠治疗后肝脏切片HE和Masson染色显示,实验组病理组织分级评分低于对照组(P<0.05)。对两组大鼠进行生存分析发现,实验组与对照组的大鼠的生存率无统计学差异(P=0.259)。结论 UCBSCs移植可以改善失代偿性肝硬化大鼠的肝功能,为失代偿性肝硬化的治疗提供了一种有效的途径。     

同种异体骨髓干细胞移植对急性心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡基因的影响

目的探讨同种异体骨髓单个核细胞（BM—MNCs）对急性心肌梗死后心肌细胞凋亡基因的影响。方法健康雄性Wistar大鼠40只,随机分为对照组（20只）和实验组（20只）。分别将培养基和BM—MNCs悬液经心外膜下种植对照组和实验组梗死心肌周围。结果术后4周,实验组左心室非梗死区心肌细胞凋亡指数、TNF-α含量和PDCD5mRNA均显著低于对照组（P均〈0．05）。Pearson直线回归分析表明,两组左心室非梗死区心肌组织中TNF—α含量、心肌细胞凋亡指数和PDCD5mRNA表达三者之间两两均呈正相关（P均〈0．05）。结论BM—MNCs移植可能通过抑制TNF—α表达而降低PDCD5基因促凋亡作用,从而降低心肌细胞凋亡指数,抑制急性心肌梗死后心肌细胞凋亡。     

PLGA纳米载体介导的端粒酶反义核酸体外转染率及对肝肿瘤细胞的影响

目的通过以PLGA纳米粒作为端粒酶hTEKT反义核酸的载体，促进反义核酸对肝肿瘤细胞的抑制作用。方法用绿色荧光蛋白报道基因pEGFP—N1表达质粒DNA转染细胞；观测不同转染方法的转染率，TRAP—ELISA法检测端粒酶活性；噻唑蓝（MTT）法测定端粒酶反义核酸对肝肿瘤细胞HepG2的抑制；过氧化物酶的抗荧光素抗体法检测肿瘤细胞凋亡指数。结果裸DNA和磷酸钙的转染效率均不高，分别为18％和24％；脂质体的转染效率为42％，纳米粒的转染效率最高，达61％；以脂质体或PLGA纳米粒为载体介导端粒酶反义核酸处理的肿瘤细胞，其端粒酶活性和生长与空白对照相比明显下降（P〈0．05），两种载体之间的差异也非常显著（P〈0．05）；处理72h后，纳米粒介导组的肿瘤细胞凋亡率显著高于脂质体介导组，分别为23．1％和16．4％。结论PLGA纳米粒是一种非常有前途的非病毒基因治疗载体。     

亚急性氟中毒小鼠抗氧化能力及肾功能的变化

目的探讨亚急性氟中毒小鼠抗氧化能力及肾功能的变化。方法实验时间为10d,将40只昆明种小鼠随机分对照组10只和中毒组30只,雌雄各半。对照组小鼠腹腔注射生理盐水13ml/（kg.d）,中毒组小鼠腹腔注射氟化钠溶液（1.0g/L）13ml/（kg.d）。第10天剪尾取血测定血浆中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性、丙二醛（MDA）含量、尿素（Urea）含量和肌酐（Cr）含量。结果中毒组与对照组相比血浆MDA含量明显升高[（7.39±1.67）vs（5.89±0.81）,t=3.52,P〈0.01],GSH-Px活性和Urea含量、Cr含量三项指标比较,差异无统计学意义[（426.40±50.92）vs（422.0±52.24）,（7.32±1.60）vs（6.87±2.14）]。结论本实验结果证明,亚急性氟中毒小鼠抗过氧化能力明显下降,尚未见到对肾排泄功能的严重影响。     

重组人表皮生长因子对云南高海拔地区敏感性肌肤的修复效果

目的 观察重组人表皮生长因子（Research and Application of Recombinant Human Epidermal Growth actor,EGF）对云南高海拔地区敏感性肌肤的修复效果。方法 回顾性分析2021年03月至2021年09月收集采样100例20岁至60岁云南籍皮肤敏感的女性受试者伴有发红、瘙痒、红血丝、色斑、毛孔粗大等症状。分为对照组（25例）和实验1组（25例）,实验2组（25例）,实验3组（25例）,4组均使用德玛莎1代电子注射仪进行常规14 mg/mL的非交联透明质酸钠2 mL真皮层全脸注射,每30 d注射1次,连续注射5次,实验1组每次注射添加10 000 UEGF溶液,实验2组每次注射添加5 000 UEGF溶液,实验3组添加2 500单位EGF溶液。注射前使用VISIA皮肤检测仪进行数据分析并分别记录4组注射前,1次注射后、2次注射后、3次注射后、4次注射后、5次注射后的受试者皮肤敏感自评数据、医生客观评分数据及VISIA红区特征计数数据。收集整理后进行统计分析。并对照前后皮肤质地,肤色,毛孔改善情况。结果 数据分析结果显示：（1）实...     

锌缺乏对生长期大鼠免疫系统的影响研究

目的:探讨锌缺乏对生长期大鼠免疫系统的影响。方法:wistar大鼠刚断乳雄性60只,分为:A组进食正常饲料,B组为缺锌组。4周后分别向鼻腔注射12×109/mL的肺炎球菌的悬浮液感染后观察记录大鼠症状,第7天,取血样分别测锌含量和血培养,在无菌环境下打开喉咙和胸部,在咽上部喉侧切口并注入无菌磷酸盐缓冲液,收集缓冲液做咽拭子培养。结果:缺锌组体重及血锌明显低于正常对照组(P<0.05),血培养及气管灌洗液检出病原菌比例明显高于正常对照组。结论:缺锌可使机体免疫功能降低,对外界感染抵抗能力下降。     

大鼠腹腔异位心脏移植及移植物血管病模型的建立

目的探讨建立大鼠腹腔异位心脏移植及移植物血管病模型的方法和意义。方法将健康Witar大鼠和SD大鼠,建立腹腔异位心脏移植模型。分对照组、实验组和同系移植组,实验组腹腔注射CsA,对照组和同系移植组注射生理盐水。术后15、60d切取供心,观测移植物冠状血管的病理变化。结果大鼠腹腔异位心脏移植成功建立,手术成活率90%。实验组术后15d出现冠状血管内膜增厚,60d出现明显的移植物血管病理改变。结论建立Witar大鼠和SD大鼠腹腔异位心脏移植,可复制出移植物血管病病理变化,是一种理想的移植物血管病实验模型。