ELISA和荧光定量PCR诊断婴幼儿巨细胞病毒感染的临床价值

目的探讨ELISA法检测血清特异性抗体Ig M、荧光定量PCR检测尿液巨细胞病毒(HCMV)-DNA和血清HCMV-DNA对婴幼儿HCMV感染的诊断价值。方法回顾性分析广东省人民医院2013年1月-2017年1月410例住院治疗的3岁以内婴幼儿的临床资料。计算并比较尿液HCMV-DNA、血清HCMV-DNA及HCMV Ig M阳性率及检测灵敏度、特异度等指标。结果婴幼儿HCMV感染的主要临床表现包括支气管肺炎(37. 3%)、肝功能损害(31. 0%)、胆汁淤积综合征(17. 6%)、贫血(12. 4%)、神经系统损害(11. 5%)等。尿液HCMV-DNA、血清HCMV-DNA、HCMV Ig M阳性分别率为53. 9%、29. 2%、34. 1%;检测灵敏度分别为96. 9%、50. 4%和57. 5%;特异度分别为99. 5%、97. 8%和95. 1%。结论荧光定量PCR检测尿液HCMV-DNA诊断HCMV感染的价值较高,可作为婴幼儿HCMV感染的早期筛查指标。     

FQ—PCR技术在儿童尿液巨细胞病毒检测的临床应用

目的探讨实时荧光定量聚合酶链式反应（FQ—PCR）方法检测尿液巨细胞病毒在儿童CMV感染诊断中的意义。方法分别应用FQ—PCR和ELISA法检测75例确诊或高度怀疑为CMV感染和25例对照儿童尿CMV—DNA和血清CMV—IgM,比较病毒DNA与血清抗体的平行性和敏感性。结果75例确诊或疑诊CMV活动性感染患儿中,检测到CMV—DNA65例;检测到CMV—IgM54例。两种方法阳性符合率为77％,FQ—PCR和ELISA法阳性检出率分别为88％和72％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论FQ～PCR法检测尿CMV—DNA对诊断活动性CMV感染具有良好的应用价值。     

育龄妇女孕前巨细胞病毒感染筛查方法及临床意义的探讨

<正> 近年来,我国已逐步开展传染性致畸因子TORCH的筛查与防治工作,并发明了多种快速诊断技术,这对及时发现育龄妇女及孕妇感染TORCH起到了积极作用,并逐步成为开展优生服务的一项重要内容。巨细胞病毒(CMV)是导致宫内感染和新生儿出生缺陷最重要的病原微生物之一,母婴垂直传播是胎儿先天性感染的主要途径。为     

耳聋基因检测在孕前筛查中的应用

目的探讨耳聋基因检测对孕前妇女筛查的应用意义。方法选择2015年1月-2016年6月在该院优生门诊咨询的孕前检查妇女,在知情同意原则下,应用实时荧光PCR法进行中国人常见的7个位点耳聋基因检测,根据结果进行优生指导。结果在631例孕前妇女检测中,共24例检测出基因突变,总突变率3.8%,其中SLC26A4基因IVS7-2 A>G杂合突变8例,2168 A>G杂合突变2例;GJB2基因299~300del杂合突变2例,235del C杂合突变11例,线粒体基因12S rRNA 1555A>G纯合突变1例。结论通过对孕前妇女进行耳聋基因检测,预防耳聋患儿出生有重要价值。     

黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的荧光定量PCR检测

目的:调查黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的情况。方法:采用荧光定量PCR方法对203例黄疸婴儿尿液标本进行HCMV-DNA定量检测。结果:在所检测的203例婴儿中,HCMV-DNA阳性的有52例,感染率为25.62%。HCMV-DNA拷贝数与黄疸持续时间无相关性。结论:HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,荧光定量PCR检测婴儿尿液中的HCMV-DNA快速、方便,检出率高,可及时诊断出巨细胞病毒的感染,以便及时治疗,降低畸形儿发生率。     

荧光定量PCR检测巨细胞病毒感染的标本选择

目的优化检测标本,提高巨细胞病毒的阳性检出率,为临床诊断和治疗提供可靠依据。方法实时荧光定量PCR检测患者血、淋巴细胞和尿中的人巨细胞病毒DNA(HCMV-DNA),比较其阳性检出率。结果通过实时荧光定量PCR检测的572例患者标本中血浆标本300例,HCMV-DNA阳性45例,阳性率为15.0%;淋巴细胞标本176例,HCMV-DNA阳性30例,阳性率为17.0%;尿标本96例,HCMV-DNA阳性60例,阳性率为62.5%;45例患者配对检测血、尿标本HCMV-DNA,血HCMV-DNA阳性7例,阳性率15.6%,尿HCMV-DNA阳性率64.4%,采用χ2检验显示,血浆、淋巴细胞HCMV-DNA的检出率差异无统计学意义,而血和尿标本HCMV-DNA的检出率差异有统计学意义(P<0.05)。结论采用实时荧光定量PCR检测患者巨细胞病毒感染,以尿作为检测材料的阳性率高于淋巴细胞及血浆,可提高HCMV-DNA的阳性检出率。     

呼吸道感染患者巨细胞病毒检测及临床意义

目的探讨呼吸道感染患者巨细胞病毒感染状况及其临床意义。方法采用荧光定量PCR法对256例呼吸道感染患者进行血清、呼吸道分泌物的巨细胞病毒DNA检测。结果256例呼吸道感染患者,血清巨细胞病毒DNA阳性率为21．1％,呼吸道分泌物巨细胞病毒DNA阳性率为34．0％,两者差异有统计学意义（P〈0．05）。50名正常对照组阳性率为2．0％,感染组与对照组相比差异有统计学意义（P〈0．05）。上呼吸道感染、急性支气管炎、肺炎、支气管扩张合并感染,4种疾病的巨细胞病毒DNA阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）。结论巨细胞病毒的检测对于呼吸道感染的诊断具有重要意义。     

应用荧光定量PCR技术检测小儿尿液中人巨细胞病毒

目的：探讨荧光定量聚合酶链式反应(FQ—PCR)方法检测尿液中人巨细胞病毒(HCMV)对儿童HCMV活动性感染的检测价值。方法：对收集的175份临床标本分别用FQ—PCR方法及低基质磷酸化蛋白(pp65)抗原血症检测方法进行平行检测比较。结果：71例临床患者尿液FQ—PCR检测阳性59例；血液pp65抗原检测阳性53例。尿液中HCMV DNA检测结果与HCMVpp65抗原血症的一致性为84．2％。结论：FQ—PCR检测敏感性要高于pp65抗原血症检测，可以有效提示体内病毒的活跃程度，具有良好的应用价值。     

母亲巨细胞病毒DNA检测与新生儿感染的相关性研究

目的研究产妇人巨细胞病毒（HCMV）感染乳汁与血液中病毒载量相关性,探讨乳汁HCMV检测在HCMV感染中的临床应用价值。方法采用荧光定量PCR（FQ—PCR）检测疑似HCMV感染的502例产妇乳汁及血液HCMV．DNA,并对其新生儿血清及尿液HCMV—DNA进行检测,观察新生儿的感染情况。结果502例产妇乳汁阳性率12．15％,血液阳性率15．74％,两组阳性率差异无统计学意义（x2=2．396,P〉0．05）,而血液中平均拷贝对数值高于乳汁中,差异有统计学意义（t=7．706,P〈0．05）。且乳汁与血液HCMV—DNA拷贝数对呈显著正相关（r=0．698,P=0．000）。502例疑似HCMV感染产妇的新生儿血液、尿液HCMV—DNA检测共63例阳性,阳性率12．55％。母乳HCMV阳性组与母乳HCMV阴性组、母血HCMV阳性组和母血HCMV阴性组比较,新生儿血液、尿液HCMV—DNA阳性检测率均升高（x2值分别为438．69、63．71、407．48,均P〈0．05）。结论巨细胞病毒感染孕产妇血液与乳汁的病毒载量存在相关性,乳汁携带病毒为婴幼儿发生感染的重要原因。     

西尼罗病毒PCR检测方法的建立

[目的]应用通用引物建立快速、敏感、特异的PCR检测方法,用于西尼罗病毒感染相关疾病的实验室监测和早期诊断。[方法]以西尼罗病毒感染者血清分离得到的病毒RNA逆转录cDNA为检测样本,通过对多株病毒基因组序列各区段保守性进行分析比较,在基因组非编码区设计引物和探针,分别用巢式PCR和荧光定量PCR方法对样本进行扩增。[结果]以西尼罗病毒RNA逆转录cDNA为模板,采用所建立的两种PCR方法,均可得到阳性检测结果。[结论]本研究设计的PCR扩增引物具有较好的通用性;建立的实时荧光定量PCR结合巢式PCR用于检测WNV的分析方法具有互补性,为研制成熟的西尼罗病毒检测试剂盒提供实验基础。     

婴儿黄疸患儿尿中及母乳中人巨细胞病毒感染的研究

目的:了解婴儿黄疸患儿尿中人巨细胞病毒(HCMV)感染情况及HCMV通过母乳对婴儿的传播情况。方法:应用荧光定量PCR方法对858例患黄疸的婴儿尿及配对的316例母乳进行HCMV-DNA检测。结果:黄疸患儿尿中的HCMV-DNA阳性率为29.02%,母乳中的阳性率为59.18%;母乳HCMV-DNA阳性配对的患儿尿的HCMV-DNA阳性率为40.11%,母乳HCMV-DNA阴性配对患儿尿HCMV-DNA阳性率为18.60%,两组之间具有显著性差异(P<0.01)。结论:婴儿黄疸与HCMV感染有一定关系,HCMV感染母乳是婴儿获得性感染引起黄疸的主要途径之一。     

实时荧光定量PCR技术及在植入前遗传学诊断中应用

实时荧光定量聚合酶链反应技术是一种基于荧光共振能量转移原理进行核酸定量的新型技术，常用荧光检测系统主要包括SYBR GreenⅠ染料、Taqman探针、分子信标探针、蝎子引物探针、杂交探针、LUXTM引物、Amplisensor探针等。目前该技术已成功应用于胚胎植入前遗传学诊断的性别鉴定、基因型分析、基因突变检测和基因表达研究等方面，具有潜在的应用价值。     

沈阳地区巨细胞病毒母婴传播的研究

目的:了解母婴之间巨细胞病毒的传播情况。方法:应用实时荧光定量PCR的技术对764名婴儿及其母亲进行巨细胞病毒DNA的检测。结果:母乳HCMV-DNA阳性,其配对的婴儿尿HCMV-DNA阳性率为31.67%;母乳HCMV-DNA阴性,其配对的婴儿尿HCMV-DNA阳性率为22.54%。两组间差异有统计学意义(P0.05)。结论:感染巨细胞病毒的母乳是婴儿获得性感染的主要途径之一。     

用PCR技术对人巨细胞病毒与膀胱癌关系的研究

采用一种新的定量PCR技术，对膀胱癌患者12人及正常对照5人的尿脱落细胞病理涂片标本进行人巨细胞病毒（HCMV）的定量检测，参照常规PCR，初步探讨了膀胱癌与HCMV感染的关系。结果表明，膀胱肿瘤细胞内存在HCMV基因的DNA。提示，HCMV的感染可能与膀胱癌的发生有一定的关系，也可成为判断膀胱癌患者预后的敏感指标。     

荧光定量PCR法检测乙肝病毒DNA与乙肝病毒标志物相关性

目的：探讨乙肝病毒DNA（HBV—DNA）与乙型肝炎患者血清病毒标志物（HBV～M）的相关性,为乙肝的早期诊断、病情预测及临床用药提供指导。方法：选择2012年1月到2012年6月半年内682例乙肝患者,分离患者血清标本,采用荧光定量PCR法检测HBV—DNA,并采用ELISA法检测HBV～M,以不同的HBV—M模式做统计分析。结果：大三阳与[-HBsAg（＋）＋HBeAg（＋）]模式的HBV—DNA阳性率分别98．85％和98．04％,两者HBV—DNA阳性率明显高于其他HBV—M模式,差异具有统计学意义（P〈0．05）。大三阳的HBv—DNA含量为（5．8×10^6土2．3×10^5）,明显高于其他模式。结论：不同乙肝病毒标志物模式HBV—DNA的检出率及病毒含量有差异,同时对患者做HBV—DNA检测与乙肝病毒标志物检测,对乙肝的早期诊断、病情判断及临床用药都有重要意义。     

PCR方法检测小儿血尿中CMV的临床意义

目的：分析血尿患儿与巨细胞病毒(cytomegalovirus，CMV)感染的关系。方法：对397例血尿患儿行血清检测CMV IgM(酶联免疫吸附法)，得阳性188例。对阳性者按单纯性血尿(n=107)和非单纯性血尿(n=81)分组；另设健康对照组93例。应用聚合酶链反应法对3组尿液进行CMV检测，以244bp条带出现橙黄色为CMV DNA阳性。结果：单纯性血尿组、非单纯性血尿组、对照组CMV DNA阳性率分别为75．70％，17．28％，15．05％，经X^2检验，非单纯性血尿患儿与单纯性血尿患儿之差异有显著性(X^2=62．94，P=0．000)；非单纯性血尿患儿与健康对照者之间的差异无显著性(X^2=0．16，P=0．690)；单纯性血尿患儿与健康对照者之间差异有显著性(X^2=122．81，P=0．000)。结论：CMV病毒感染可能是单纯性血尿的重要病因。     

225名育龄妇女孕前、孕中及产后微量元素调查

目的了解育龄妇女在孕前、孕中及产后微量元素水平变化及影响因素,为育龄妇女营养保健提供科学依据。方法连续收集2009年1月-2011年5月在本院孕前、孕中检查及产后体检的225例育龄妇女血样,用原子吸收光谱分析仪检测Ca、Mg、Fe、Zn、Cu的含量。结果不同时期妇女全血中Ca、Mg、Fe、Zn、Cu含量呈偏态分布,孕期及产后铁缺乏常见（P〈0.05）。另外,孕期和产后妇女锌、钙也总体偏低（P〈0.05）。结论孕期及产后妇女微量元素营养状况处在一个较低的水平,提示应注意合理营养摄入,根据饮食习惯科学补充必需的微量元素,适当加强锻炼,对体内胎儿发育及自身恢复都有一定的意义。     

基于AllGlo探针的双重实时荧光定量PCR法检测高危型人乳头瘤病毒HPV16/18

目的建立基于AllGlo探针的双重实时荧光定量PCR检测高危型人乳头瘤病毒HPV16/18的方法。方法针对HPV16/18病毒基因组保守序列,设计引物和AllGlo探针,建立双重荧光定量PCR检测方法,评价其敏感性、特异性和稳定性,并与传统HC2方法比较。结果成功建立了双重实时荧光定量PCR检测HPV16/18的方法,检测限均为10copies/μL,敏感性和特异性均为100%。应用该方法检测160份宫颈肿瘤患者样本,与传统HC2法结果一致性为100%。结论该研究建立的快速、准确、可同时检测HPV16/18的双重实时荧光定量PCR法,具有较高的敏感性、特异性和稳定性,操作简单,可用于HPV16/18的临床筛查和诊断。     

实时荧光定量PCR技术及在植入前遗传学诊断中应用

实时荧光定量聚合酶链反应技术是一种基于荧光共振能量转移原理进行核酸定量的新型技术,常用荧光检测系统主要包括SYBR Green Ⅰ染料、Taqman探针、分子信标探针、蝎子引物探针、杂交探针、LUXTM引物、Amplisensor探针等.目前该技术已成功应用于胚胎植入前遗传学诊断的性别鉴定、基因型分析、基因突变检测和基因表达研究等方面,具有潜在的应用价值.     

贝类中诺如病毒ELISA与荧光定量PCR检测技术的研究

目的:贝类中诺如病毒是世界范围内急性非细菌性流行性胃肠炎的重要病原。目前我国沿海地区也暴发了诺如病毒,为了更准确的检测,本文寻找和建立了贝类产品中诺如病毒的快速检测方法。方法:用荧光定量PCR和ELISA法对大连地区的贝类样品进行检测。结果:大连地区的贝类样品未检测出诺如病毒。结论:通过实验证明荧光定量PCR法和ELISA法都可用于快速检测诺如病毒,但ELISA法更适于检测诺如病毒含量低的样品。