玻璃化冷冻法和程序化冷冻法对人卵裂期胚胎冷冻复苏效果的比较

目的:比较辅助生殖技术中玻璃化和程序化2种冷冻方法对卵裂期胚胎的冷冻复苏效果。方法:对265个玻璃化冷冻周期和276个程序化冷冻周期的相关资料进行回顾性统计学分析,比较冷冻胚胎复苏后的胚胎存活率、胚胎种植率和临床妊娠率等指标。结果:玻璃化冷冻复苏265个周期,解冻809个胚胎,存活710个(87.8%),移植259个周期,临床妊娠98个周期(37.8%),其中双胎妊娠26例,三胎妊娠3例。程序冷冻复苏276个周期,解冻968个胚胎,存活532个(55.0%),移植246个周期,临床妊娠70例(28.5%),其中双胎妊娠4例,三胎妊娠1例。玻璃化冷冻后的胚胎存活率和完整性胚胎存活率均显著高于程序化冷冻,复苏周期移植取消率显著低于程序化冷冻,而临床妊娠率则明显高于程序化冷冻,差异均有统计学意义(P<0.05)。但2种方法的胚胎种植率无统计学差异(P>0.05)。结论:玻璃化法能够较好地避免冷冻引起的损伤,适用于卵裂期胚胎的冷冻保存。     

透明带薄化法激光辅助孵化对慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎临床结局的影响

目的:探讨透明带薄化法激光辅助孵化技术对慢速冷冻和玻璃化冷冻卵裂期胚胎临床结局的影响。方法:回顾性分析复苏后至少有1个胚胎是完整存活的564例卵裂期冻融胚胎移植周期,根据胚胎移植前是否行激光辅助孵化,分为辅助孵化组(研究组)与非辅助孵化组(对照组),分别观察透明带薄化法激光辅助孵化技术对慢速冷冻胚胎及玻璃化冷冻胚胎的临床妊娠率、种植率及流产率的影响。结果:胚胎经慢速冷冻后,研究组胚胎种植率(19.5%)显著高于对照组(13.5%),差异有统计学意义(P<0.05),而临床妊娠率及流产率(37.9%vs 28.5%、15.5%vs 10.8%)无显著差异;胚胎经玻璃化冷冻后,研究组和对照组胚胎的临床妊娠率(38.0%vs 35.6%)、种植率(17.3%vs 15.9%)及流产率(7.6%vs 19.2%)相比较均无统计学差异;研究组中来源于2种冷冻方法的卵裂期胚胎的临床妊娠率(37.9%vs 38.0%)和种植率(19.5%vs 17.3%)无统计学差异(P>0.05)。结论:透明带薄化法激光辅助孵化能够提高慢速冷冻的卵裂期胚胎的种植能力,且不会增加其流产风险,但并不能提高玻璃化冷冻的卵裂期胚胎的种植能力。     

人工皱缩囊胚腔对囊胚玻璃化冷冻后妊娠结局的影响

目的 探讨人工皱缩囊胚腔对囊胚玻璃化冷冻的效果、妊娠结局及新生儿的影响.方法 2006年1月至2009年12月,选择在广西壮族自治区妇幼保健院生殖医学中心接受体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或卵母细胞胞质内单精子注射(ICSI)治疗的患者,新鲜胚胎移植妊娠失败后要求行冻融囊胚移植的342个周期,其中,314个周期的囊胚在玻璃化冷冻前,用显微注射针刺入囊胚腔内抽出囊胚液使之皱缩,然后以玻璃微细管为载体行玻璃化冷冻(皱缩组),28个周期未行囊胚腔人工皱缩(未皱缩组).比较两组经冷冻、复苏及移植后的胚胎存活率、种植率、临床妊娠率和取消移植率等.在已妊娠者中,比较两组的流产率、活胎分娩率、分娩孕周、新生儿出生缺陷发生率、新生儿平均出生体质量等,并与同期新鲜移植周期(新鲜周期组,520个周期)进行比较.结果 皱缩组胚胎存活率、种植率及临床妊娠率分别为95.3%(403/423)、38.0%(153/403)、44.6%(140/314),未皱缩组分别为64.3%(27/42)、7.4%(2/27)、7.1%(2/28),分别比较,差异均有统计学意义(P＜0.05);皱缩组取消移植率为0,未皱缩组为25.0%(7/28),两组比较,差异也有统计学意义(P＜0.05).皱缩组的流产率[18.2%(10/55)]、活胎分娩率[80.0%(44/55)]、分娩孕周[(38.2±1.3)周]、新生儿出生缺陷发生率[2.1%(1/47)]、新生儿平均出生体质量[(2989±640)g]与新鲜周期组[17.5%(91/520)、74.0%(385/520)、(37.9±2.3)周、1.7%(8/479)、(2856±640)g]比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 人工皱缩囊胚腔能明显提高囊胚玻璃化冷冻效果,并且新生儿先天异常发生率无明显升高.     

桑葚期胚胎玻璃化冷冻在体外受精-胚胎移植中的应用

目的:探讨用玻璃化冷冻法冷冻桑葚期胚胎的可行性.方法:选择2010年6月至2012年9月在河北医科大学第二医院生殖医学门诊行体外受精-胚胎移植患者784例(829个周期)为研究对象,对照组(606例)为前期采用玻璃化冷冻法冷冻第3天卵裂期胚胎637个周期;研究组A(145例)采用玻璃化冷冻法冷冻第4天桑葚期胚胎159个周期;研究组B(33例)为前期采用玻璃化冷冻法冷冻胚胎在第3天评分较差,介于冷冻和非冷冻之间的胚胎,通过继续培养至第4天采用玻璃化冷冻法冷冻桑葚期胚胎33个周期.3组均解冻以后行冻融胚胎移植,比较3组复活周期的胚胎完整率、周期临床妊娠率、种植率以及流产率.结果:①研究组A的完整胚胎存活率、周期临床妊娠率和流产率高于对照组,但差异无统计学意义(P＞0.05).而研究组A的胚胎种植率(33.2％)高于对照组(27.0％),差异有统计学意义(P＜0.05);②研究组B和对照组比较,完整胚胎存活率、种植率、周期临床妊娠率和流产率方面,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论:桑葚期胚胎较原核期胚胎和早期卵裂期胚胎处于胚胎发育的更晚阶段,是胚胎的进一步选择,其玻璃化冷冻是可行的,能获得较好的妊娠率和种植率,值得临床推广应用.     

新鲜周期和玻璃化冻融周期卵裂期胚胎移植的围生期结局比较

目的:探讨新鲜周期和玻璃化冻融周期卵裂期胚胎移植的围生期结局,评估玻璃化冻融方法的安全性和有效性。方法:回顾性分析重庆市妇幼保健院遗传与生殖研究所2010年1月至2015年12月出生儿随访数据,分别比较6786例玻璃化冻融周期和14672例新鲜周期单胎出生儿和双胎出生儿的围生期结局,包括流产、孕龄、早产、出生体质量和出生缺陷情况。结果:对于单胎分娩,在生产方式、平均孕龄和极早产率(孕龄<32周)方面两组比较,两组差异无统计学意义(P>0.05);新鲜周期组的早产率高于玻璃化冻融周期组(12.42%vs 7.66%,P<0.05),玻璃化冻融周期组新生儿平均出生体质量明显高于新鲜周期组(3349.63 g vs 3265.37 g,P<0.05)。对于双胎分娩,在生产方式、平均孕龄、早产率、极早产率和平均出生体质量方面比较,两组差异无统计学意义(P>0.05);新鲜周期组的低出生体质量比率明显高于玻璃化冻融周期组(P<0.05)。无论单胎分娩还是双胎分娩,两组的围生期死亡率和出生缺陷发生情况差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在围生期结局方面,无论单胎分娩还是双胎分娩,玻璃化冻融对卵裂期胚胎并未增加负性影响。     

玻璃化冷冻与程序化冷冻对胚胎发育潜能及临床结局的影响

目的:比较玻璃化冷冻与程序化冷冻对胚胎发育潜能及临床结局的影响。方法:回顾性分析590个复苏周期,比较2种冷冻方法的胚胎复苏率、临床妊娠率、胚胎种植率和流产率等各项指标。结果:玻璃化冷冻组的平均移植胚胎数(2.2±0.5枚)显著少于程序化组(2.5±0.6枚)(P<0.05),复苏率(94.4%)、完整胚胎率(73.7%)、临床妊娠率(50.8%)和种植率(30.2%)显著高于程序化组(77.2%、44.3%、36.2%、21.1%)(P<0.05),而流产率和周期取消率组间均无统计学差异(16.6%vs 27.7%,1.3%vs 2.3%)(P>0.05)。程序化冷冻胚胎的种植率在完整胚胎(13.5%)和非完整胚胎(16.0%)组间无统计学差异(P>0.05);玻璃化冷冻完整胚胎组的种植率(30.4%)显著高于非完整胚胎组(20.1%)(P<0.05);而2种冷冻方法的流产率完整胚胎组(35.7%,15.1%)均显著高于非完整胚胎组(8.7%,2.9%)(P<0.05)。在玻璃化冷冻中,卵裂期胚胎组的各项指标与囊胚期组相比均无统计学差异(P>0.05)。结论:玻璃化冷冻法适用于人类胚胎的保存,对卵裂期和囊胚期胚胎有同样理想的保存效果和临床结局,玻璃化冷冻中,胚胎完整性对胚胎种植率起着重要的作用。     

开放式和封闭式玻璃化冷冻法对人类胚胎发育潜能的影响

目的:比较开放式与封闭式自制叶片玻璃化冷冻技术对人早期胚胎冷冻复苏的效果。方法:以自制开放式与封闭式的叶片为冷冻载体,用玻璃化冷冻方法冷冻体外受精-胚胎移植第3天移植后剩余的优质胚胎,观察胚胎复苏及临床妊娠情况。结果:开放式冻存组共复苏112个周期、288个胚胎,胚胎复苏率、复苏5h继续卵裂率、空泡出现率、胚胎丢失率、临床妊娠率、植入率及流产率分别为97.2%、30.7%、9.3%、1.7%、50.5%、23.6%、14.5%,相较于封闭式冻存组(共复苏93个周期、222个胚胎)的胚胎复苏率(96.4%)、复苏5h继续卵裂率(34.6%)、空泡出现率(7.9%)、胚胎丢失率(1.4%)、临床妊娠率(59.8%)、植入率(29.0%)、流产率(10.9%)均无统计学差异(P>0.05)。结论:封闭式玻璃化冷冻法能获得与开放式同样的冷冻效率,且能使胚胎与液氮完全隔离,能更好地保护胚胎避免潜在的病原微生物、病毒的污染,是冷冻人早期胚胎理想的方法。     

卵母细胞玻璃化冷冻的临床结局分析

目的探讨卵母细胞玻璃化冷冻后解冻行体外受精-胚胎移植的临床结局。方法回顾性分析2010年1月至2014年10月北京大学第三医院生殖医学中心68例不孕症患者卵母细胞玻璃化冷冻后解冻行体外受精-胚胎移植(in vitro fertilization-embryo transfer,IVF-ET)的复苏率、2PN受精率、胚胎着床率、流产率和分娩率等临床结局。结果解冻玻璃化冻存的卵母细胞756枚,复苏率80.69%(610/756),其中MII卵母细胞519枚,2PN受精率53.56%(278/519)。68例患者中,12例无胚胎形成,占17.65%。56例患者共移植66个周期,其中新鲜胚胎移植51个周期,解冻胚胎移植15个周期。新鲜胚胎移植51个周期的临床妊娠率为54.90%(28/51),活胎分娩率为45.10%(23/51)。解冻胚胎移植15个周期的临床妊娠率为60.00%(9/15),活胎分娩率为46.67%(7/15)。累积妊娠率为55.88%(38/68)。每解冻一枚卵母细胞获得活胎分娩率为5.03%(38/756)。结论卵母细胞玻璃化冷冻技术在取卵日不能获得精子的患者中应用,可以获得良好的妊娠结局。     

玻璃化冷冻活检后人胚胎的探索

目的:探索玻璃化方法冷冻活检后人胚胎的可行性。方法:实验组中活检后的胚胎先后在含10%乙二醇平衡液和30%乙二醇加0.5mol/L蔗糖的玻璃化液中进行平衡,然后将胚胎置于冷冻薄膜上,直接在液氮中快速冷冻。复温时采用1mol/L浓度的蔗糖液。对照组中活检后的胚胎进行标准程序化丙二醇慢冻。结果:采用玻璃化冷冻技术后,活检后的人胚胎冻存率、完整率、卵裂球总体存活率、囊胚形成率均显著比使用标准程序化丙二醇慢冻方法提高(95%对15%,P<0.01;75%对9%,P<0.01;89%对24%,P<0.01;20%对2%,P<0.05)。结论:玻璃化冷冻可以显著提高活检后的卵裂期的人胚胎的冻存结局。     

冷冻膜及冷冻环在人早期胚胎玻璃化冷冻中的应用比较

目的探讨冷冻膜和冷冻环2种载体行玻璃化冷冻对人卵裂期胚胎和囊胚的效果。方法采用回顾性队列研究分析912个解冻复苏周期,比较2种载体行玻璃化冷冻后胚胎复苏结局和临床结局的差异及其相关危险因素。结果 (1) 385枚卵裂期胚胎中,冷冻环组(n=251)和冷冻膜组(n=134)的胚胎复苏率、完整胚胎存活率、临床妊娠率、种植率、流产率、移植周期出生率、双胎出生率、早产率及出生男女比率差异均无统计学意义(P0.05);冷冻环组新鲜周期优质胚胎率(24.78%)、平均移植周期数(1.3±0.6)、复苏后优质胚胎率(40.76%)、复苏后平均移植胚胎数[(2.1±0.4)个]及低体质量儿出生率(19.01%)均明显高于冷冻膜组[18.59%,P=0.002;1.2±0.4,P=0.001;28.13%,P=0.001;(1.9±0.4)个,P=0.000;4.08%,P=0.015]。(2) 527枚囊胚中,冷冻环组(n=287)和冷冻膜组(n=240)的平均移植周期数、胚胎复苏率、完整胚胎存活率、复苏后囊胚扩张率、流产率、双胎出生率、早产率、低体质量儿出生率及出生男女比率差异均无统计学意义(P0.05);冷冻环组的临床妊娠率(67.94%)、种植率(49.72%)、移植周期出生率(52.96%)、新鲜周期优质胚胎率(27.0%)、平均移植胚胎数[(1.9±0.4)个]显著高于冷冻膜组[54.17%, P=0.001;39.58%,P=0.002;41.25%,P=0.047; 23.0%, P=0.002;(1.8±0.5)个,P=0.004]。Logistic回归显示,新鲜周期优质胚胎数、内膜厚度及冷冻胚胎所用载体类型与冷冻囊胚复苏移植后临床妊娠密切相关(P=0.017、P=0.049、P=0.044),而年龄、复苏后平均移植胚胎个数、复苏后囊胚扩张数、平均移植周期数及内膜分型等差异均无统计学意义(P0.05)。结论对于卵裂期胚胎,冷冻膜和冷冻环冷冻胚胎的复苏结局和临床结局均是相当的。对于囊胚,冷冻环组的临床结局优于冷冻膜组。