TRAIL受体在子宫内膜癌细胞株的表达

目的:研究肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织的表达特征。方法:采用RT-PCR技术,检测20例正常子宫内膜、20例子宫内膜癌及癌旁组织中TRAIL受体DR4、DR5和假受体DcR1、DcR2阳性表达情况。结果:TRAIL受体DR4、DR5的mRNA在人正常子宫内膜组织、子宫内膜癌组织和癌旁组织中均表达,诱骗受体DcR1的mRNA在子宫内膜各组织中的表达率不同,但差异无统计学意义(P>0.05),而诱骗受体DcR2的mRNA在子宫内膜癌组织中的表达率明显低于正常子宫内膜组织和癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.005),癌旁组织细胞中DcR2表达和正常子宫内膜组织相近(P>0.05)。结论:TRAIL诱骗受体DcR1、DcR2在子宫内膜癌中的低表达可能与其发病机制有关,可能对防止子宫内膜癌变具有一定作用。     

RRM2在人胆管癌组织及胆管癌细胞系中的表达和意义

目的:探讨核糖核苷酸还原酶M2(RRM2)在人胆管癌组织及胆管癌细胞系中的表达、分布以及生物学意义。方法:采用免疫组织化学技术(SP法)检测RRM2基因和蛋白在40例胆管癌标本、40例癌旁胆管组织以及10例正常胆管组织标本中的表达;同时采用RT-PCR法及Western blot法分别检测了RRM2基因mRNA及其蛋白在人胆管癌细胞系QBC939以及人正常胆管上皮细胞系HIBEC中的表达。结果:RRM2基因蛋白在胆管癌组织中表达阳性率为72.5%,而在癌旁胆管组织和正常胆管组织中未能检测到RRM2表达。在人胆管癌细胞系QBC939中,RRM2的mRNA及蛋白均特异性表达,而在正常人胆管上皮细胞系HIBEC中未见RRM2的表达。结论:RRM2在人类胆管癌组织和胆管癌细胞系中选择性高表达,可能与胆管癌的发生、发展密切相关。     

TRAIL联合5-氟脲嘧啶体外杀伤胆管癌细胞作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)对人胆管癌的作用及联合化疗药物5-氟脲嘧啶(5-FU)共同作用胆管癌细胞对TRAIL抗瘤活性的影响。方法:应用四氮唑蓝快速比色(MTT)检测单独应用不同浓度TRAIL(1、10、100、1000ng/ml)及不同浓度(1、10、100、1000ng/ml)TRAIL 10mmol/ml5-FU对胆管癌细胞QBC939活性的抑制作用。结果:单独应用(1、10、100、1000ng/ml)TRAIL作用于QBC939细胞后抑制率分别为15.6%、31.2%、37.5%、40.6%(1、10、100、1000ng/ml)TRAIL 10mmol/ml5-FU作用于QBC939细胞后抑制率分别为46.9%、62.4%、68.7%、78.1%,5-FU与TRAIL联合应用对QBC939细胞抑制率明显高于单独应用TRAIL(P<0.05)。结论:TRAIL通过诱导胆管癌细胞凋亡而起到抑癌作用,化疗药物5-FU能加强TRAIL的抗癌活性。     

星形细胞瘤组织中TRAIL及其受体的表达

目的：研究不同级别星形细胞瘤组织中肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)及其受体的表达。方法：应用原位杂交法检测45例星形细胞瘤和8例正常脑组织中TRAIL及其受体DR4、DR5、DcR1、DcR2的mRNA转录表达。结果：在45例星形细胞瘤组织中,TRAIL、DR4、DR5、DcR1、DcR2的mRNA的阳性例数分别为44例、38例、41例、40例、2例。有36例星形细胞瘤DR4、DR5、DcR1的mRNA协同转录,阳性率80％。TRAIL及其受体在低级别（Ⅰ～Ⅱ级)与高级别(Ⅲ～Ⅳ级)星形细胞瘤组织中的表达差异无统计学意义。结论：TRAIL及其受体在星形细胞瘤组织中表达,且与肿瘤的恶性程度无关。     

直肠癌组织中TRAIL、DcR1、DR4、caspase3与bcl-2的表达及其相关性的初步研究

目的探讨TRAIL选择性诱导肿瘤细胞凋亡,而不损伤正常组织的可能机制。方法采用免疫组织化学SP法,检测38例直肠癌及其癌旁组织,14例正常直肠黏膜组织中TRAIL及DcR1、DR4受体、caspase3、bcl-2在直肠癌及癌旁组织中的蛋白表达情况,结合其临床病理学资料,分析它们之间的相关性。结果TRAIL、DcR1、DR4、caspase3与bcl-2在正常直肠黏膜、癌旁6cm组织、癌组织上皮中阳性表达有显著性差异(P<0.05),其中TRAIL、DcR1、DR4、caspase3、bcl-2癌组织上皮与正常直肠黏膜阳性表达均有显著性差异(P<0.05),TRAIL、DcR1、DR4、bcl-2在癌组织上皮与癌旁6cm组织上皮中的表达有显著性差异(P<0.05);TRAIL、DcR1、DR4、caspase3与bcl-2在正常直肠黏膜与癌旁6cm组织上皮中的表达均无显著性差异(P>0.05);TRAIL与bcl-2高中分化癌组织中与低分化癌组织中的表达均有显著性差异(P<0.05);DcR1、DR4、caspase3与肿瘤分化程度无关;TRAIL、DcR1、DR4、caspase3与bcl-2在癌组织中的表达与性别、年龄、分期、肿瘤位置、肿瘤大小及组织类型无关(P>0.05)。结论DcR1、DR4、caspase3、bcl-2与TRAIL作用机制相关,其中DcR1与bcl-2可能是抑制因素,而DR4、caspase3是TRAIL作用环节的关键指标。     

标记TRAILR地高辛探针及原位杂交检测喉癌组织mRNA

目的:标记肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体(TRAILR)地高辛(DIG)探针,检测喉癌组织中TRAILR mRNA,并探讨其意义.方法:采用RT-PCR原位杂交法检测喉癌组织TRAILR mRNA. 结果:TRAILR地高辛探针标记成功;喉癌和正常对照中死亡受体4、5(DR4,DR5)mRNA呈强阳性,阳性率均为100%(34/34,5/5);正常对照中诱捕受体2(DcR2)mRNA呈强阳性,阳性率100%(5/5);喉癌中DcR2 mRNA可检出,阳性率14.71%(5/34);DcR2 mRNA主要分布在癌巢组织边缘,强度由癌巢中央到癌巢边缘逐渐加强.结论:TRAIL受体基因可能在喉鳞状细胞癌凋亡调控机制中发挥重要作用.     

肝癌组织及肝癌细胞株中TRAIL受体的检测

目的:检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TNF related apoptosis inducing ligand,TRAIL)受体在原发性肝癌(PHC,简称肝癌)组织及肝癌细胞株HepG2及SMMC7721中的表达,以期选出与肝癌组织中TRAIL受体表达相近的细胞株。方法:收集原发性肝癌组织30例,以常规方法培养人肝癌细胞株HepG2及SMMC7721,以半定量RT-PCR法,对TRAIL受体的表达作半定量检测。结果:30例肝癌组织及HepG2细胞中均有TRAIL受体DR4(deathrecptor4)、DR5、DcR1(decoy receptor1)、DcR2的表达,而SMMC7721细胞中不表达DcR1;半定量结果显示肝癌组织及HepG2中DR4及DR5的表达量明显高于DcR1及DcR2;肝癌组织中4对受体间的表达量存在相关性,HepG2细胞中DR4的表达与DcR1及DcR2间存在相关性。结论:HepG2中TRAIL受体的表达类似于肝癌组织。     

三氧化二砷对胆管癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 观察三氧化二砷(As2O3)对胆管癌癌细胞株QBC939的增殖抑制作用并初步探讨其机制。方法 胆管癌细胞株QBC939用不同浓度As2O3处理，活细胞计数和细胞克隆试验观察As2O3对细胞动力学的影响；丫啶橙荧光染色、透射电镜，TUNEL观察细胞凋亡；流式细胞仪测定细胞凋亡和细胞周期变化；增殖细胞核抗原(PCNA)、bcl-2单抗SABC免疫组化染色。结果 在0．75-6μmol/L范围内，As2O3明显抑制QBC939细胞增殖和诱导细胞凋亡，其作用随As2O3浓度增加和作用时间延长而增强；相应地PCNA和bcl-2表达减弱。流式细胞仪检测可见明显的凋亡峰，并阻滞细胞周期的G2-M期。结论 As2O3可明显抑制胆管癌细胞株QBC939的生长、诱导癌细胞凋亡，有临床治疗胆管癌的潜在价值。     

瘤坏死因子相关调亡诱导配体及其受体在喉鳞状细胞癌中的表达

目的 探讨肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体(TRAIL)及其4个受体DR4、DR5、DcR1、DcK2在喉鳞状细胞癌中的表达及意义.方法 应用RT-PCK方法,检测68例喉鳞状细胞癌和30例正常喉黏膜组织中TRAIL及其受体的表达分布情况,并探讨其与喉鳞癌临床各指标之间的关系.结果 在喉鳞癌组织及正常喉黏膜中均检测到TRAIL及其4个受体的表达,其中TRAIL及诱骗受体DcR1、DcR2在喉鳞癌组织中表达低,而在正常喉黏膜组织中表达较高,差异具有显著性(P均<0.01);而死亡受体DR4、DR5在2种组织中表达均较高,差异不具有显著性(P均>0.05).在早期喉癌(Ⅰ+Ⅱ期),其表达TRAIL及DcR1、DcR2较高,而晚期喉癌(Ⅲ+Ⅳ期)中则表达较低,差异具有显著性(P均<0.05),死亡受体DR在2组间差异无显著性(P均>0.05);TRAIL及DcR在分化程度高的肿瘤组中表达也高,在分化程度中、低组的肿瘤表达低,差异具有显著性(P均<0.01).死亡受体DR在2组间差异无显著性(P均>0.05).结论 喉鳞癌中普遍存在着TRAIL及其受体的表达,并存在着表达类型的差异,这是TRAIL选择性诱导肿瘤细胞凋亡的原因.TRAIL及DcR1、DcR2的表达分布与喉鳞癌的病理分期以及分化程度相关.     

TRAIL受体在子痫前期患者胎盘的表达及意义

目的 检测肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的受体(DR4,DB5,DcR1,DcR2)在子痫前期患者胎盘的表达,初步探索其与子痫前期的关系.方法 选择子痫前期患者34饲作研究组,正常妊娠组31例作对照组,分别对两组的胎盘免疫组化染色,观察两组TRAIL受体(DR4,DR5,DcR1,DcR2)表达量的差异.结果 研究组胎盘组织中TRAIL受体DR4,DR5表达较强,而DcR1,DcR2表达较少(P＜0.05).结论 TRAIL受体表达失衡可能导致胎盘滋养细胞凋亡紊乱,可能是子痫前期发生的机制之一.     

Antitumor Effects of Soluble TRAIL in Human Hepatocellular Carcinoma

TNF related apoptosis inducing ligand(TRAIL) is a promising cancer therapeutic agent,which appears to specifically kill transformed cells,and spare most normal cells[1, 2]. In the presentstudies, we investigated the expression of TRAILand TRAIL receptors in 60 HCC tissues, 20 nor mal liver samples and two HCC cell lines (HepG2and SMMC 7721). The effects of TRAIL on pro moting apoptosis in the HCC cell lines were ana lyzed after the cells exposed to the…     

PTEN and PDCD4 are bona fide targets of microRNA-21 in human cholangiocarcinoma

Objective To investigate the expression profile of microRNA-21 in human cholangiocarcinoma tissues and to validate its bona fide targets in human cholangiocarcinoma cells. Methods The expression profile of microRNA-21 in human cholangiocarcinoma tissues and cholangiocarcinoma cell line, QBC939, was evaluated by using real-time PCR analysis. The bona fide targets of microRNA-21 were analyzed and confirmed by dual luciferase reporter gene assay and western blot, respectively. The expressional correlation of microRNA-21 and its targets was probed in human cholangiocarcinoma tissues by using real-time PCR, locked nucleic acid in situ hybridization (LNA-ISH), and immunohistochemistry analysis. Results Real-time PCR analysis revealed that microRNA-21 expression depicted a significant up-regulation in human cholangiocarcinoma tissues about 5.6-fold as compared to the matched normal bileduct tissues (P<0.05). The dual luciferase reporter gene assay revealed endogenous microRNA-21 in cholangiocarcinoma cell line, QBC939, inhibited the luciferase reporter activities of wild-type PTEN (P<0.01) and PDCD4 (P<0.05) and had no this effect on mutated PTEN and PDCD4. Moreover, loss of microRNA-21 function led to a significant increase of PTEN and PDCD4 protein levels in QBC939 cells. Elevated microRNA-21 levels were accompanied by marked reductions of PTEN and PDCD4 expression in the same cholangiocarcinoma tissue. Conclusion microRNA-21 expression is up-regulated in human cholangiocarcinoma and PTEN, PDCD4 are direct effectors of microRNA-21.     

TRAIL及其受体DcR1和DR4在宫颈癌组织中的表达及意义

目的检测宫颈癌和正常宫颈组织中人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TNF related apoptosis inducing ligand, TRAIL）及其受体DcR1和DR4的表达,探讨TRAIL及其受体的表达与宫颈癌发生、发展的关系。方法免疫组织化学Envision法检测43例宫颈癌和30例正常宫颈组织中TRAIL及其受体DcR1、DR4的表达。结果TRAIL、DcR1、DR4免疫阳性产物为棕黄色,定位于胞浆或胞膜, TRAIL及DcR1在宫颈癌组织中的表达显著低于正常宫颈组织,DR4在宫颈癌组织中的表达显著高于正常宫颈组织(P＜0.05);TRAIL、DcR1、DR4在宫颈癌组织中的表达与患者的年龄、分期、淋巴结转移无关(P＞0.05)。结论TRAIL是肿瘤细胞分化差的标志之一;宫颈癌细胞由于DR4的高表达和DcR1的低表达而易被TRAIL诱导凋亡。     

microRNA143?microRNA145对胆管癌细胞株QBC939生长周期及凋亡的影响

目的:探讨microRNA143、microRNA145与肝外胆管癌的关系以及microRNA143、microRNA145对胆管癌细胞株QBC939细胞周期及凋亡的影响。方法:提取11对肝外胆管癌组织标本和正常胆管组织标本的RNA,实时荧光定量PCR(realtimePCR)检测microRNA143、microRNA145的表达;将microRNA143、microRNA145质粒转染人胆管癌细胞株QBC939,分别以流式细胞仪和噻唑蓝(MTT)的方法检测转染前后细胞周期、凋亡及生长情况。结果:相对正常胆管组织,胆管癌组织microR-NA143、microRNA145表达率分别为0.048、0.035(P<0.05)。较对照质粒组,microRNA143组、microRNA145组G1期细胞百分比明显增多[(66.08%±1.93%、65.57%±1.85%)vs(42.87%±1.37%)]、S期细胞百分比明显减少[(19.16%±1.15%、21.40%±1.65%)vs(38.76%±1.83%)]、细胞凋亡率增加[(18.49%±2.26%、16.89%±2.47%)vs(4.68%±1.65%...     

肝门部胆管癌裸鼠动物模型的建立

目的建立胆管癌细胞系裸鼠肝门部胆管原位种植瘤模型。方法应用自制显微注射针将培养的胆管癌细胞系QBC939细胞接种于裸鼠肝门部胆管与门静脉组织间隙紧贴胆管处,15d后行种植瘤组织解剖学和病理学检查。结果每只裸鼠肝门部胆管与门静脉组织间隙内可接种浓度为1×107个/ml的胆管癌细胞悬液100μl;原位种植15d后,肝门部胆管原位种植瘤成瘤率为100%（7/7）;病理学观察显示为典型的瘤组织表现。结论成功建立了胆管癌细胞系裸鼠肝门部胆管原位种植瘤模型。     

PPAR-γ在肝门部胆管癌中的表达及其配体激活后对胆管癌细胞的作用

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPAR-γ）在人类肝门部胆管癌细胞系QBC939中的表达及经其配体吡格列酮（pioglitazone）激活后对QBC939细胞生长的影响。方法 培养QBC939细胞并分别加入不同浓度的吡格列酮进行干预培养,通过RT—PCR检测QBC939中PPAR—γmRNA的表达;光镜下细胞计数了解吡格列酮干预后对细胞增殖的作用;流式细胞技术了解吡格列酮对QBC939细胞周期及凋亡的影响。结果 QBC939中有PPAR—γmRNA表达;PPAR-γ经其配体激活后明显抑制细胞增殖,使细胞周期出现G2／M期停滞,并诱导细胞凋亡。结论 PPAR-γ经其配体激活后通过抑制细胞增殖及促使细胞周期G2／M期停滞而抑制细胞的生长,且诱导细胞凋亡的发生。因此PPAR-γ有可能成为胆管癌治疗的新的分子靶点。