玉米赤霉烯酮检测方法研究进展

研究者通过对世界上不同国家的谷物及动物饲料中的真菌毒素含量调查发现,许多国家的谷物和动物饲料均不同程度地受到玉米赤霉烯酮毒素(zeralenone,ZEN)的污染并已导致对家畜的毒害.ZEN是一种真菌毒素,雌性激素类物质,是一种稳定的化合物,其主要衍生物为α-玉米赤霉烯醇(α-zearalenol)和β-玉米赤霉烯醇(β-Zearalenol).被污染的粮食如果被人或其他动物摄入,就可能造成危害.     

玉米赤霉烯酮检测方法比对研究

玉米赤霉烯酮（zearalenone，以下简称ZEN）是由禾谷镰刀菌和黄色镰刀菌等产生的真菌毒索，可引起动物（猪最敏感）和人的雌激素过多综合征，还具有生殖发育毒性、免疫毒性、基因毒性及可疑致癌性等。ZEN主要污染玉米、小麦、大麦等粮谷类作物。为了控制ZEN对人和动物产生的危害，至2003年止，已有19个国家制订了食品中ZEN限量标准，JECFA和欧盟分别制定了最大允许摄入量值（ADI）。为保护我国在世界粮食贸易中的经济利益和消费者健康，应尽快制定出风险评估基础上的ZEN的限量标准，风险评估的基础是污染调查，要使污染调查数据更具说服力，则建立稳定、可靠的检测方法是首要任务。     

玉米赤霉烯酮的研究概况

玉米赤霉烯酮的研究概况华西医科大学（成都６１００４）陈永红（综述）鲁长豪（审校）玉米赤霉烯酮（Ｅｅａｒａｌｅｎｏｎｅ）又称Ｆ－２雌性发情毒素，是由玉米赤霉菌、禾谷镰刀菌、三线镰刀菌等真菌所产生的真菌毒素，它具有动物雌性激素的作用，又是某些真菌的一种性...     

玉米赤霉烯酮毒性研究及检测方法进展

玉米赤霉烯酮是由镰刀菌产生的一种广泛污染谷物食品的真菌毒素,对动物、人类都会产生毒害,人们食用被其污染的食物会导致肝癌、睾丸癌、食道癌及青春期早熟等疾病。目前的检测方法有:高效液相色谱、气相色谱、薄层色谱、无毒检测体系和免疫学检测。综述玉米赤霉烯酮的毒性研究、检测方法及其预防。     

高效液相色谱法测定小麦,玉米中玉米赤霉烯酮

高效液相色谱法测定小麦、玉米中玉米赤霉烯酮广东药学院营养与食品卫生学教研室（广州５１０２２４）叶蔚云中华人民共和国进口食品卫生监督检验中心陈永红玉米赤霉烯酮（ｚｅａｒａｌｅｎｏｎｅ）又称为Ｆ－２雌性发情毒素，是由玉米赤霉菌、禾谷镰刀菌、三线镰刀菌等真...     

免疫亲和柱-高效液相色谱法检测玉米中的玉米赤霉烯酮

目的：建立了检测玉米中玉米赤霉烯酮的快速、准确方法。方法：采用免疫亲和柱净化，高教液相色谱法进行毒素的定性和定量。玉米样品采用乙腈-水（9＋1）提取，将提取液用水稀释后过Vicam ZearalaTest免疫亲和柱，甲醇洗脱后以反相高效液相色谱荧光检测器检测，激发波长为274nm，发射波长为440nm，流动相采用乙腈-水-甲醇（46＋46＋8）。ZearalaTest免疫亲和柱的吸附效率高于95％，最大吸附容量为4．0μg。结果：在玉米样品中，本方法在0．005—0．5mg／kg添加水平范围内的平均回收率为82．9％-94．4％，相对标准偏差〈10％，最低检出限为0．005mg／kg（S／N=5）。结论：方法灵敏度高，选择性好，准确度高，用于玉米样品中玉米赤霉烯酮的测定，获得了满意的结果。     

高灵敏度玉米赤霉烯酮免疫层析检测卡的研制

目的 研制高灵敏度玉米赤霉烯酮免疫层析检测卡。方法 制备一种粒径为(116.7±2.0)nm、分支多的金纳米花(AuNFs),用AuNFs标记玉米赤霉烯酮(ZEN)单克隆抗体(AuNF-ZEN-Mab),研制出用于检测粮食和饲料中的玉米赤霉烯酮金纳米花免疫层析卡(ZEN-GFICT)。结果 对比法ZEN-GFICT和消线法ZEN-GFICT对ZEN标准品的检测灵敏度分别为0.5和6 ng/mL,对实际样品检出限分别为5和60μg/kg,是传统ZEN纳米金免疫层析检测卡(ZEN-GICT)的6倍(对比法)和4.5倍(消线法)。21份样品的ZEN-GFICT判断结果(对比法和消线法)与ELISA试剂盒检测结果相比,总符合率均为90.5%。结论 ZEN-GFICT对比法和消线法可以对样品中ZEN含量做出5、 5～60和60μg/kg的三个区间判定。检测样品时,能够筛查ZEN污染程度低的样品。     

小麦、小麦制品及玉米中玉米赤霉烯酮的薄层色谱测定

<正> 玉米赤霉烯酮是禾谷镰刀菌、三线镰刀菌等菌种产生的具有雌性激素作用的霉菌毒素。主要污染小麦、大麦、燕麦、玉米等谷物,该毒素可引起家畜和实验动物外阴肿大、乳房肿胀、子宫增大等雌性激素中毒症状;对大鼠有致畸作用。目前测定玉米赤霉烯酮的方法,有薄层色谱法、气相色谱法、高压液相色谱法等。AOAC已将Shotwell等经过协作研究的玉米中玉米赤霉烯酮的测定定为标准方法。该方法是用三氯甲烷提取样品中     

抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体免疫亲和柱的研究制备

目的研究制备抗玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEN）单克隆抗体免疫亲和柱（IAC）。方法用辛酸硫酸铵法纯化抗ZEN单克隆抗体,将纯化好的单抗与溴化氰活化的4FF葡聚糖偶联制备抗ZEN单克隆抗体免疫亲合柱。采用紫外扫描鉴定偶联反应,间接竞争酶联免疫吸附法及高效液相色谱法（HPLC）对制备好的免疫亲合柱进行评价。结果每根抗ZEN单克隆抗体免疫亲和柱,使用0．5ml溴化氰活化的4FF葡聚糖,350ugZEN单克隆抗体,柱容量为0．40ug。小麦样品添加ZEN标品60—300ug／kg,回收率76．33％-90．10％,相对标准偏差6．68％-10．93％。使用本实验室制备的抗ZEN单克隆抗体免疫亲合柱建立了IAC．HPLC方法,并检测小麦、玉米、饲料样品30份,结果有17份样品为阳性,阳性率56．67％,样品中ZEN含量为31．33～377．84ug／kg;信噪比为3：1时,检测下限为10．00ug／kg。结论抗ZEN单克隆抗体免疫亲和柱能快速特异地将ZEN从样品中分离出来,并同时完成净化和浓缩步骤,是一种简便的净化方法。     

HPLC法测定常用食品中玉米赤霉烯酮

目的:建立了常用食品中玉米赤霉烯酮的HPLC检测方法。方法:样品经提取、过免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-荧光检测器进行分析。结果:玉米赤霉烯酮在5~100 ng/m l范围内线性关系良好,r>0.999。回收率在80%~110%之间,定量限为10μg/kg,检测限为2μg/kg。结论:该方法快速、简便、准确,可作为常用食品中玉米赤霉烯酮定量测定的有效手段。     

河豚毒素单抗ELISA检测试剂盒的研制

目的研制快速检测河豚鱼类中的河豚毒素（tetrodotoxin,TTX）试剂盒.方法在生产的抗TTX单克隆抗体基础上,利用间接竞争酶联免疫吸附方法研制TTX快速检测试剂盒.结果该试剂盒的最低检出浓度为5ng/ml,标准曲线的线性范围为5～500ng/ml,回归方程为Y＝-0.3546x＋1.1006,r=0.99（P〈0.05）;河豚鱼25和100ng/ml 2个水平的加标回收率为72.45%～111.24%;试剂盒常温下可保存225d;与牛血清白蛋白（BSA）无交叉反应;实验室内的变异系数和实验室间的变异系数均〈20%.结论该试剂盒快速、简单、灵敏,可满足实际工作需要.     

抗伏马菌素B_1单克隆抗体的制备及试剂盒的研制

目的为了能够快速检测粮谷类食品中伏马菌素B_1的污染水平,研制具有我国自主知识产权的针对伏马菌素B_1快速检测试剂盒。方法制备了能分泌抗伏马菌素B_1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,建立了敏感、特异、快速的酶联免疫吸附试验检测方法,最终形成具有中国自主知识产权的伏马菌素B_1快速检测试剂盒。结果该试剂盒所用单克隆抗体的Ig亚类为IgG1,亲和常数为8·3×10-8mol/L。该抗体与其他结构类似物无明显交叉反应,具有较高的特异性。试剂盒对伏马菌素B_1最低检出限5ng/ml,标准曲线的线性范围(50~500ng/ml),回归方程^Y=-0·582X+1·793(r=0·99,P<0·05);对玉米作50ng/ml,200ng/ml和500ng/ml3个加标浓度的回收率在71·89%~112·95%之间;试剂盒在常温状态下有效期至少10个月;实验室内的变异系数和实验室间的变异系数均小于20%。     

伏马菌素B1单抗ELISA检测试剂盒研制

目的研制快速检测粮食中伏马菌素BI（FB1）的试剂盒。方法在制备抗FB1单克隆抗体基础上，利用间接竞争酶联免疫吸附方法研制FB，快速检测试剂盒。结果该试剂盒最低检出浓度为5ng／ml，校正曲线线性范围50～500．g／ml，线性方程Y=-0．582X＋1．793（r=0．99，P〈0．05）。与脱氧雪腐镰刀菌烯醇、玉米赤霉烯酮、T-2毒素均无交叉反应。回收率在71．89％～112．95％之间，平均回收率为100．23％。试剂盒常温下可保存225d，实验室内的变异系数和实验室间变异系数均〈20％。结论该试剂盒快速、简单、灵敏，可满足实际工作需要。     

总黄曲霉毒素ELISA定量检测试剂盒研制

目的研究并建立敏感、特异和快速的针对食品中总黄曲霉毒素的ELISA检测方法,形成具有我国自主知识产权的快速定量检测试剂盒。方法在生产抗总黄曲霉毒素单克隆抗体基础上,利用间接竞争ELISA方法,研制出食品中总黄曲霉毒素快速检测试剂盒,并对试剂盒的各项技术参数进行测定。结果该试剂盒对黄曲霉毒素B G标准品的最低检出浓度为0.26 ng/ml,标准曲线的线性范围为0.26-20.00 ng/ml,线性方程y=-0.4463x 0.3532(R2=0.9915);对黄曲霉毒素B G50%的抑制浓度为2.08 ng/ml;试剂盒的条内变异系数为4.18%,条间变异系数为5.21%,抗体亲和力常数为1.52×10-10mol/L;对玉米3个加标水平的平均回收率分别为98.63%,94.56%和1 12.05%;对花生的3个加标水平的平均回收率分别为88.66%,87.50%和85.60%。试剂盒37℃可放置96 h以上;试剂盒对黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2的交叉反应率分别为100%,57.5%,104%和19%,与其他真菌毒素无交叉反应。结论研制出的ELIS试剂盒能定量检测食品中总黄曲霉毒素。     

Development and validation of a quantitative competitive ELISA for potency testing of equine anti rabies sera with other potential use

In case of a bite by a rabies infected animal, the World Health Organisation recommends a prophylactic treatment including the administration of Human Rabies Immunoglobulins (HRIGs) or highly purified F(ab′)₂ fragments produced from Equine Rabies Immunoglobulin (F(ab′)₂ – ERIGs). According to international regulation, quality control of F(ab′)₂ – ERIGs lots requires potency testing by the in vivo Mouse Neutralisation Test (MNT) prior marketing. However, the strategy of the 3Rs (Reduce, Refine, Replace) for animal testing required by the European Directive encourages the replacement of the in vivo potency test by an in vitro assay. In this context, a competitive ELISA method (c-ELISA) has been developed by the Agence Nationale de Sécurité du Médicament et des Produits de Santé where F(ab′)₂ – ERIGs are in competition with a monoclonal antibody recognizing the trimeric native form of the rabies glycoprotein. After a full validation study, the c-ELISA has been applied to commercial batches of F(ab′)₂ – ERIGs. A correlation study with the MNT demonstrated a similarity between the two methods (r = 0.751). Moreover, the c-ELISA method which does not need any species specific reagent has been applied to HRIGs potency testing as an alternative method to Rapid Fluorescent Focus Inhibition Test (RFFIT), thus avoiding the handling of live rabies virus in BSL3 containment. In conclusion, the c-ELISA has shown its potential to replace MNT and possibly RFFIT for the quantification of rabies immunoglobulin. After optimisation it may be used for the quantification of rabies immunoglobulin in any animal species, notably for rabies immunogenicity assay in mice.     

Development of quantitative exposure data for a pooled exposure-response analysis of 10 silica cohorts

BACKGROUND: Comprehensive quantitative silica exposure estimates over time, measured in the same units across a number of cohorts, would make possible a pooled exposure-response analysis for lung cancer. Such an analysis would help clarify the continuing controversy regarding whether silica causes lung cancer. METHODS: Existing quantitative exposure data for 10 silica-exposed cohorts were retrieved from the original investigators. Occupation- and time-specific exposure estimates were either adopted/adapted or developed for each cohort, and converted to milligram per cubic meter (mg/m(3)) respirable crystalline silica. RESULTS: Quantitative exposure assignments were typically based on a large number (thousands) of raw measurements, or otherwise consisted of exposure estimates by experts (for two cohorts). Median exposure level of the cohorts ranged between 0.04 and 0.59 mg/m(3) respirable crystalline silica. Exposure estimates were partially validated via their successful prediction of silicosis in these cohorts. CONCLUSIONS: Existing data were successfully adopted or modified to create comparable quantitative exposure estimates over time for 10 silica-exposed cohorts, permitting a pooled exposure-response analysis. The difficulties encountered in deriving common exposure estimates across cohorts are discussed.     

双抗夹心ELISA法检测血浆HSP70的建立及初步应用

[目的]建立双抗体夹心法检测血浆中热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)水平。[方法]制备兔抗HSP70抗体 ,建立双抗体夹心法标准曲线 ,鉴定其最小检出限、精确度、回收率 ,并初步应用于检测40例男性健康成人血浆样本的HSP70水平。[结果]双抗夹心ELISA法检测HSP70的最小检出限为10ng/ml,标准曲线在10～100ng/ml范围内线性良好。3份同批血清标本分别重复8次测定 ,平均批内变异系数为7.6 % ;3份不同批血清分别重复6次测定 ,平均批间变异系数为12.7 %。血清中加入已知量的标准抗原 ,测得回收率为85.5 %。对40例男性健康成人(20.0±0.9)岁血浆样本检测 ,其HSP70浓度均值为 (151.0±13.8)ng/ml。[结论]本方法检测HSP70的可测范围广 ,灵敏度和精密度较高变异系数较小 ,表明其灵敏、特异、可靠     

乙型肝炎五项标志物定量检测的临床分析

目的 探讨酶联免疫吸附法(ELISA)和微粒子化学发光法检测乙型肝炎表面抗体(HBsAb)的结果并进行对比分析.方法 每份标本均用ELISA和MCLIA两种方法,同时进行血清学标志物的定量和定性检测,均严格按照各自试剂盒说明书和《全国临床检验操作规程》的要求进行操作,定性结果参照试剂说明书中的判定方法.结果 MCLIA法和ELISA法检测乙型肝炎病毒标志物结果比较,HBsAg、HBsAb、HBeAg和HBcAb结果符合率较高均＞90.0％,差异无统计学意义,HBeAb结果符合率均为47.7％,符合率较低,差异有统计学意义(P＜0.05);MCLIA法和ELISA法检测HBsAg含量符合率＞90.0％.结论 用MCLIA检测乙型肝炎血清标志物具有灵敏度高、重复性和准确性好、特异性强、检测快速、无放射性危害等优点,对于少见模式、可疑的低值血清检测效果更好.     

Diagnostic tools in linkage analysis for quantitative traits

Diagnostic methods are key components in any good statistical analysis. Because of the similarities between the variance components approach and regression analysis with respect to the normality assumption, when performing quantitative genetic linkage analysis using variance component methods, one must check the normality assumption of the quantitative trait and outliers. Thus, the main purposes of this paper are to describe methods for testing the normality assumption, to describe various diagnostic methods for identifying outliers, and to discuss the issues that may arise when outliers are present when using variance components models in quantitative trait linkage analysis. Data from the Rochester Family Heart Study are used to illustrate the various diagnostic methods and related issues.     

70家集体食堂卫生许可审查量化评分情况分析

为使我国食品卫生监督模式与国际接轨,卫生部在总结国外食品安全监督经验的基础上,结合我国食品生产经营现状,于2 0 0 2年4月下发《关于推行食品卫生监督量化分级管理制度的通知》,对食品生产经营单位实施量化分级管理。本文对餐饮中的重点行业集体食堂新发、换发卫生许可证进行量化评分情况作了分析。1　材料和方法资料来源于广州市内部分省属企事业单位的集体食堂新发、换发卫生许可证现场审查的量化评分表。评分标准参照卫生部制订的《食品卫生监督量化分级管理指南》和《餐饮业卫生许可审查量化评分表》。2　结果70家集体食堂行业包括厂…