妊娠高血压综合征患者胎盘组织中TGFβ1的表达及意义

目的探讨转化生长因子β1(TGFβ1)在妊高征患者胎盘组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SABC法检测64例妊高征患者(轻度21例，中度20例，重度23例)胎盘组织中TGFβ1的表达，20例正常孕妇为对照组。结果(1)TGFβ1主要表达于胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞。(2)妊高征患者胎盘绒毛滋养细胞及蜕膜细胞TGFβ1的表达均明显增高，且随病情严重程度的增加而升高。(3)妊高征患者胎盘重量及新生儿体重与胎盘组织TGFβ1呈明显负相关。结论胎盘TGFβ1升高引起滋养细胞浸润不足，可能是妊高征的发病因素之一。     

鸡冠花黄酮类对成骨细胞增殖和TGFβ1的作用

目的 探讨鸡冠花黄酮类化合物对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和转化生长因子β1(TGFβ1)表达的影响作用，为临床骨质疏松症的预防和治疗提供参考。方法 提取新生大鼠颅骨成骨细胞制作体外培养模型．然后用噻唑盐(MTT)法测定鸡冠花黄酮类化合物对体外培养成骨细胞的增殖作用，氨基安替吡啉测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶(ALP)活性，SP免疫组化法研究鸡冠花黄酮类化合物对成骨细胞TGFB。表达的影响。结果 鸡冠花黄酮类化合物可以促进体外培养大鼠成骨细胞的增殖，并显性促进成骨细胞分化。对第3代成骨细胞TGFβ1。表达进行图像分析，培养3d，鸡冠花黄酮类化合物剂量在0．5以上组TGFβ1表达阳性，培养5d，所有实验TGFβ1均表达阳性促使成骨细跑合成TGFβ1的免疫组化阳性表达。结论 鸡冠花黄酮类化合物可以提高成骨细胞的增殖和分化，并有促进分泌TGFβ1的功能．对于预防骨质疏松症的发生有重要的参考价值。     

TGF-β1在胃癌中表达及意义

目的 研究TGF－β1在胃癌中表达，并评价其临床病理价值。方法 采用免疫组化S－P法研究，20例正常胃黏膜，46例胃癌中TGF－β1表达。结果 胃癌组TGF－β1阳性率100％，正常胃黏膜组为5％，TGF－β1在胃癌淋巴结转移组表达高于淋巴结无转移组。结论 TGF－β1在胃癌进展中起重要作用。     

氯沙坦对日本血吸虫病肝纤维化小鼠αSMA及TGFβ1的影响

目的探讨氯沙坦影响日本血吸虫病鼠早期肝纤维化的部分相关机制。方法将36只昆明小鼠随机分为正常对照组,感染对照组及氯沙坦组,采用日本血吸虫尾蚴35条/只鼠攻击感染小鼠建立血吸虫性肝纤维化模型,氯沙坦10 mg/(kg.d),灌胃,1次/d,连续6周,HE染色观察肝组织病理学改变;放射免疫法检测血清中透明脂酸(HA)含量,SP法检测α平滑机动蛋白(SMA),金属蛋白酸因子(TIMP)-1在肝组织中的表达;实时荧光定量法检测AT1R mRNA及转化生长因子β1(TGFβ1)mRNA的含量。结果氯沙坦组小鼠肝组织病理学改善明显;与感染组相比,氯沙坦组小鼠血清中HA含量降低,肝组织αSMA、TIMP-1的水平和AT1R mRNA、TGF1βmRNA的相对量均显著下降(P0.05)。结论研究结果显示,氯沙坦改善肝组织病理学改变,降低血清中HA含量,与其能减少αSMA、TIMP-1的表达,下调AT1R mRNA、TGFβ1mRNA的水平有关。     

毛蕊异黄酮对TGFβ1诱导的内皮细胞转分化相关细胞因子的影响

目的 探讨毛蕊异黄酮对转化生长因子β1(TGFβ1)诱导的人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs)转分化相关细胞因子的影响.方法 TGFβ1(10μg/L)刺激生长良好的HUVECs,用毛蕊异黄酮(25、50、100μmol/L)进行干预;MTT法检测毛蕊异黄酮对HUVEC的细胞毒性作用;实时定量PCR法检测细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Gremlin、CD31、骨形态发生蛋白7(BMP7)mRNA的表达水平.结果 ①TGFβ1(10μg/L)、25、50、100μmol/L浓度的毛蕊异黄酮对HUVECs无细胞毒性作用(P>0.05).②用TGFβ1刺激HUVECs后,细胞中 α-SMA、Gremlin mRNA的表达水平显著升高,CD31、BMP7 mRNA的表达水平显著降低(P<0.05);毛蕊异黄酮(25、50、100μmol/L)进行干预后,α-SMA、Gremlin mRNA的表达水平显著降低,CD31、BMP7 mRNA的表达水平显著升高,并且表现出一定的浓度依赖性(P<0.05).结论 毛蕊异黄酮能抑制TGFβ1诱导的内皮细胞转分化,具有内皮细胞保护作用.     

叶酸对高同型半胱氨酸小鼠心脏TGFβ1表达影响

目的研究叶酸（Folic Acid,FA）对高同型半胱氨酸（HCY）小鼠心脏转化生长因子-β1（TGFβ1）表达的影响,探讨心血管疾病防治措施。方法昆明种小鼠24只,雄性,随机分为3组：正常对照组（NS组,腹腔注射生理盐水0.1ml）,高同型半胱氨酸组（HCY组）与叶酸处理组（FA组）[腹腔注射HCY16μmol（kg·d）]。腹腔注射2h后,NS组和HCY组经口灌胃给生理盐水0.1ml,FA组给FA1.0μmol/（kg·d）连续5d。末次给药后4h,分离脏器。测定小鼠体重、心脏重,常规石蜡切片,免疫组织化学法测定心肌TGFβ1,HPIA-2000高清晰度彩色图文分析系统对心肌细胞面积进行图像分析。结果与HCY组比较,叶酸组的心脏增重及心/体比值及心肌细胞TGFβ1表达差异有统计学意义（P〈0.01和P〈0.05）,可显著性抑制HCY所引起的心肌细胞面积扩大及乳酸脱氢酶活力过渡增强（P〈0.01）。结论叶酸作为一种细胞的保护因子,可能通过调节TGFβ1的表达而降低高HCY所致的心肌组织损伤,预防心脏疾病发生。     

醋酸铅对小鼠星形胶质细胞凋亡及Caspase-3表达影响

目的 探讨醋酸铅对小鼠星形胶质细胞凋亡和Caspase-3表达的影响.方法 10 μmol/L醋酸铅处理小鼠星形胶质细胞24、48 h后,采用Hoechst33258染色法观察细胞形态学变化;聚合酶链反应(PCR)、细胞免疫化学法测定Caspase-3的转录与表达水平;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 经10μmol/L醋酸铅处理24、48 h后小鼠星形胶质细胞呈凋亡形态学改变.Caspase-3转录与表达水平升高,醋酸铅组细胞凋亡率与对照组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 醋酸铅可促进小鼠星形胶质细胞凋亡,Carpase-3参与了凋亡过程.     

PTEN和TGFβ-1蛋白在宫颈鳞癌组织中的表达及其意义

[目的]探讨宫颈癌、原位癌及正常宫颈组织中PTEN和TGF-β1蛋白的表达及意义. [方法]采用免疫组化Envision法检测宫颈癌组织56例、原位癌24例、正常宫颈组织20例中FFEN和TGF-β1的表达水平. [结果]宫颈癌组织中的PTEN和TGF-β表达明显低于原位癌和正常宫颈组织,差异有统计学意义(X2=18.76,P<0.01;X2=15.04.P<0.01),PTEN在宫颈原位癌、官颈鳞癌I～Ⅱ期和官颈鳞癌Ⅲ期中的表达差异有统计学意义(P<0.05),宫颈癌高分化和中低分化程度与淋巴结转移间差异都有统计学意义(P<0.05);TGF-β1在官颈原位癌、宫颈鳞癌I-Ⅱ 期和宫颈鳞癌Ⅲ期中以及宫颈癌高、中低分化程度间差异无统计学意义,在有无淋巴结转移间差异有统计学意义(P<0.05). [结论]PTEN蛋白的表达缺失与宫颈癌的发生、发展过程有关,TGF-β1表达与宫颈癌的侵袭转移有关.检测宫颈癌中PTEN和TGF-β1蛋白表达对宫颈癌早期诊断和判断预后有一定价值.     

糖尿病肾病患者血清TGFβ1、Ⅳ型胶原水平的变化及临床意义

目的探讨糖尿病肾病患者血清中TGFβ1、Ⅳ型胶原水平变化的临床意义。方法用ELISA法测定健康对照组、糖尿病无肾病组、糖尿病肾病组血清中TGFβ1、Ⅳ型胶原水平,同时测定24h尿蛋白含量。结果正常对照组、糖尿病无肾病组及糖尿病肾病组的血清中TGFβ1、及Ⅳ型胶原水平呈递增状,无肾病组的尿蛋白含量与正常对照组比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,但其血中TGFβ1及Ⅳ型胶原高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）,糖尿病肾病组尿中尿蛋白含量、血清中TGFβ1及Ⅳ型胶原均明显高于正常对照组,差异有统计学意义（P〈0.001）,和糖尿病无肾病组比较,亦明显升高,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 TGFβ1、Ⅳ型胶原在糖尿病肾病的发生发展过程中其重要作用,是诊断糖尿病灵敏、可靠的实验室指标。     

铅对小鼠肝脏超氧化物歧化酶活性及CuZn-SOD mRNA表达的影响

[目的]以醋酸铅染毒小鼠为模型,研究铅对肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活性及CuZn-SODmRNA表达的影响。[方法]分别以浓度为0、0.1%、0.2%、0.4%醋酸铅喂养小鼠。6周后取肝脏,试剂盒测定SOD活性;RT-PCR法测定CuZn-SODmRNA表达水平。[结果]与对照组比较,染毒组SOD活性明显下降(P﹤0.01),CuZn-SODmRNA表达显著下调(P﹤0.01),且两指标均存在剂量-效应关系(r=0.901,P﹤0.01)。[结论]铅可致小鼠肝脏SOD活性下降,CuZn-SODmRNA表达下调,两者存在良好效应关系,呈正相关。     

铅暴露对PC12细胞活力及DMT1表达影响

目的 探讨不同浓度、时间铅暴露对PC12细胞活力及DMT1表达的影响。方法 PC12细胞生长至对数期, 将其暴露于不同梯度(0、0.01、0.1、1、10、100 μmol/L)醋酸铅, 分别继续培养24、48、72 h;噻唑蓝法检测细胞活力, 逆转录-聚合酶链反应检测细胞二价金属离子转运体1(DMT1)mRNA的表达水平, Western blot检测DMT1蛋白表达水平。结果 铅暴露24 h时, 各剂量染铅组细胞活力无明显差异(P>0.05), 铅暴露48、72 h时, 细胞活力随染铅剂量增加而递减, 呈剂量效应关系(P<0.05);在铅暴露24 h时, DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达量随染铅浓度增加而升高(P<0.05), 铅暴露48 h时, 细胞DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达无明显变化(P>0.05), 在铅暴露72 h时, 细胞DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达水平随染铅浓度增加呈递减趋势(P<0.05);各组DMT1(-IRE)mRNA表达无明显改变(P>0.05)。结论 铅暴露可降低PC12细胞活力, 铅早期诱导PC12细胞DMT1(+IRE)mRNA及蛋白表达上调, 晚期使其表达量下降。     

醋酸铅对人肾小管上皮细胞凋亡及Caspase-3的表达影响

目的探讨醋酸铅对人肾小管上皮细胞(HK-2)凋亡作用及Caspase-3活性的影响。方法醋酸铅(5、10、20μmol/L)染毒HK-26、12、24、48h后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖。经铅(5、10、20μmol/L)染毒24h后细胞免疫化学法、RT-PCR和Western Blotting检测Caspase-3的转录与表达。结果与空白对照组相比,不同浓度的铅均不同程度的抑制了HK-2的增殖(P﹤0.01)。细胞免疫化学法、RT-PCR和Western Blotting结果显示醋酸铅组的Caspase-3转录与表达升高。结论醋酸铅可促进人肾小管上皮细胞的凋亡,Caspase-3参与了凋亡过程。     

Snail基因甲基化与TGFβ1诱导前列腺癌细胞发生EMT的相关性研究

目的探讨Snail基因甲基化与转化生长因子β1(TGFβ1)诱导前列腺癌细胞上皮间质转化(EMT)过程的相关性。方法 TGFβ1诱导前列腺癌PC3、DU145细胞,通过细胞形态、划痕及侵袭实验筛选EMT明显的细胞系;利用Western blot、RT-PCR技术检测该细胞系EMT时相关Marker表达的变化,确定EMT过程中的决定性转录因子;沉默组蛋白去甲基化酶KDM4A的表达,观察前列腺癌细胞形态学及转录因子Snail表达的变化;收集前列腺良性增生组织(对照组)及Gleason分级四级以上的前列腺癌组织(实验组)各60例,检测Snail、E-cadherin和Vimentin的表达。结果细胞形态学变化、划痕及侵袭实验证明TGFβ1诱导后前列腺癌细胞PC3具有明显的迁移及侵袭能力;Western blot、RT-PCR实验表明PC3细胞EMT时E-cadherin表达下调,Snail1和Vimentin表达上调,其中Snail1变化最为明显。免疫组化结果显示对照组E-cadherin细胞膜表达强阳性,Vimentin、Snail细胞质表达弱阳性;实验组E-cadherin细胞膜表达弱阳性,Vimentin、Snail细胞质表达强阳性。沉默KDM4A表达,PC3细胞由间质转变为上皮形态,Snail1表达上调。结论 Snail1甲基化富集程度改变与TGFβ1诱导前列腺癌细胞上皮间质转化相关。     

铅对仔鼠学习记忆及海马中IL-1β表达影响

目的 探讨母体铅染毒对其仔鼠学习记忆及海马中白细胞介素-11β(IL-1β)mRNA和蛋白表达量的影响,为进一步揭示铅的神经毒性机制提供科学依据.方法采用自由饮水的方式于母鼠孕哺期染毒,染毒剂量为0.3、1.0、3.0g/L,每组10只;仔鼠出生后7、14、21 d分别测其血铅,海马铅浓度;仔鼠21d时,测定其学习记忆能力的变化和海马组织中IL-1p mRNA和蛋白表达.结果各剂量染铅组血铅、海马铅含量与对照组比较明显升高(P＜0.05);迷宫实验中,与对照组比较,1.0和3.0 g/L组差异均有统计学意义(P＜0.05);逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),ELISA实验中,在对照组0.3、1.0、3.0 g/L组仔鼠海马组织中,IL-1β mRNA的相对表达量分别为(0.073±0.016)、(0.572±0.287)、(1.090±0.521)、(1.312±0.837);IL-1ββ蛋白表达分别为(0.708±2.260)、(8.958±2.257)、(19.375±1.644)、(25.125±4.748);与对照组比较,染毒组海马IL-1β mRNA和蛋白表达量明显升高(P＜0.05).结论铅可能通过诱导海马中IL-1β高表达,影响学习记忆,从而造成神经系统的损害.     

叶酸对AD模型小鼠脑内Aβ沉积及BACE1表达影响

目的探讨叶酸对阿尔茨海默病(AD)小鼠脑内β–淀粉样蛋白(Aβ)沉积影响及机制。方法将6月龄雄性APP/PS1模型小鼠随机分为4组:叶酸缺乏组、叶酸对照组、叶酸低、高剂量组(120、600μg/kg);同月龄野生型小鼠作为阴性对照组。叶酸缺乏组小鼠饲以叶酸缺乏饲料,其他各组饲以普通饲料,干预60 d。采用实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测β位淀粉样前体裂解酶–1(BACE1)mRNA水平;免疫印迹法(WB)检测脑组织BACE1蛋白表达;免疫组化法检测脑组织Aβ表达;酶联免疫吸附法检测脑组织中和含量。结果与叶酸对照组比较,叶酸高剂量组小鼠脑组织中Aβ蛋白表达降低,叶酸缺乏组Aβ蛋白表达升高(P<0.05);与叶酸对照组(0.295±0.034)比较,叶酸高剂量组小鼠脑组织含量(0.209±0.041)降低,叶酸缺乏组含量(0.396±0.043)升高(P<0.05);与叶酸对照组(15.99±1.434)比较,叶酸缺乏组小鼠脑组织BACE1 mRNA水平(21.97±4.396)升高,叶酸低、高剂量组小鼠脑组织中BACE1 mRNA表达水平[分别为(9.932±1.903)、(10.53±2.750)]均降低(均P<0.05);与叶酸对照组(1.371±0.213)比较,叶酸缺乏组小鼠脑组织中BACE1蛋白表达水平(1.655±0.241)升高,叶酸低、高剂量组小鼠脑组织中BACE1蛋白表达水平[分别为(1.003±0.271)、(0.906±0.188)]均降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论补充叶酸可减少AD小鼠脑组织中Aβ沉积及含量,其机制可能与叶酸抑制小鼠脑组织中淀粉样蛋白生成途径的分泌酶BACE1表达有关。     

铅对小鼠睾丸脂质过氧化作用的研究

为探讨铅的生殖毒性，研究了小鼠睾丸的脂质过氧化作用。将动物分为３组，对照组（Ⅰ），（１５ｍｇ／ｋｇ）（Ⅱ）和３０ｍｇ／ｋｇ（Ⅲ）铅染毒组，腹腔注射染毒１１次。结果表明，染毒组体重明显降低，血铅浓度比对照组增加１５０～２１０倍，骨铅增加７７～１０倍。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的睾丸ＴＳＯＤ分别为４０、３２、２４Ｎｕ／ｍｌ，差异具有显著性。血铅与睾丸ＴＳＯＤ有显著的负相关。睾丸ＧＳＨｐｘ也有明显改变。血浆维生素Ｃ和睾丸ＭＤＡ随着铅染毒剂量增加而有降低倾向。因此，脂质过氧化是铅导致生殖腺损伤的机理之一。     

转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性与Alzheimer病的关系

目的探讨转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性与Alzheimer病的关系。方法运用多聚酶链反应技术检测66例阿尔茨海默病及143例正常人转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性。结果AD组转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性基因型频率分别为18.18%、43.94%、37.88%,对照组分别为对15.38%、44.07%、40.55%,转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性各种基因型频率在患者组与正常对照组之间的差异无统计学意义(P>0 05)。结论转化生长因子TGFβ1-509C/T基因多态性与AD无明显相关。     

醋酸铅染毒小鼠肝、肾及睾丸中微量元素分析

关于铅的毒性,近年又有新的报道。为此,我们进行了醋酸铅染毒小鼠肝、肾及睾丸中微量元素分析,探讨了醋酸锌对醋酸铅毒性的拮抗作用,以期为铅毒性的预防与治疗提供依据。 1 材料与方法 选用体重为18～25g的健康昆明种雄性小鼠50只(华北制药厂动物中心提供),随机分成5组:0组为对照组:A组为醋酸     

二甲基甲酰胺对小鼠睾丸组织结构和睾丸酶的影响

目的探讨二甲基甲酰胺（DMF）对睾丸组织结构及睾丸酶活力的影响。方法将40只SPF级健康成年雄性昆明种小鼠随机分为空白对照组（0g／kg）、低（0．5g／kg）、中（1g／kg）、高（2g／蝇）剂量染毒组。每天灌胃染毒DMF一次，空白对照组以蒸馏水灌胃，连续灌胃30d。于染毒前1d称重小鼠，以后每3d称重1次。于第31日摘除眼球取血并颈椎脱臼处死小鼠。每组随机抽取两只小鼠的一侧睾丸，制备病理切片。采用试剂盒测定其余睾丸琥珀酸脱氢酶（SDH）、乳酸脱氢酶（LDH）、酸性磷酸酶（ACP）活力。结果与空白对照组（0g／kg）比较，染毒第9天后各染毒组小鼠体重下降（P〈0．05）。随染毒剂量增高，睾丸组织中ACP活力有增高趋势，各染毒组ACP活力显著高于空白对照组（P〈0．01）。中、高剂量染毒组SDH活力显著低于空白对照组（P〈0．01）。各染毒组LDH活力显著低于空白对照组（P〈0.01）。结论在本实验染毒时间和剂量范围内，DMF能引起小鼠睾丸组织病理学改变并且抑制睾丸酶的活力。