高效液相色谱法测定养血祛风丸中士的宁的含量

目的 建立高效液相色谱法测定养血祛风丸中士的宁的含量. 方法 采用HyperClone BDS C₁₈柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）; 流动相：乙腈 0.01 mol•L^-1庚烷磺酸钠与0.02 mol•L^-1磷酸二氢钾等量混合溶液（用10%磷酸调节pH值为2.8）（21：79）; 流速1.0 mL•min^-1; 检测波长：260 nm; 柱温35 ℃. 结果 士的宁浓度的线性范围为4.8～191.8 μg•mL^-1,r＝0.999 8,回收率为101.30%,RSD＝1.3%. 结论 该方法方便、快速、准确,可用于养血祛风丸的质量控制.     

疏风活络片质量标准研究

目的 建立疏风活络片的质量标准. 方法 采用薄层色谱(TLC)法对处方中马钱子、麻黄进行定性鉴别; 采用高效液相色谱(HPLC)法, 以乙腈-0.01mol•L^-1庚烷磺酸钠与0.02 mol•L^-1磷酸二氢钾等量混合溶液(用10%磷酸调节pH值为2.8)(22：78)为流动相; 检测波长：260 nm, 流速l mL•min^-1, 进样量10 μL, 对方中马钱子中所含士的宁进行含量测定. 结果疏风活络片中马钱子、麻黄薄层色谱鉴别特征明显, 专属性强; 疏风活络片中士的宁的含量测定线性范围为0.002 8～0.056 0 mg•mL^-1 (r＝0.999 9), 平均回收率为99.81%, RSD为1.42%(n＝5). 结论薄层色谱鉴别和含量测定方法 准确可行, 重复性好, 可有效地控制疏风活络片的质量.     

柱切换高效液相色谱法测定血浆左氧氟沙星浓度

目的 应用柱切换高效液相色谱(HPLC)技术直接测定血浆中左氧氟沙星的浓度.方法 采用手动柱切换装置,分析柱采用大连依利特公司的Hypersil ODS C18柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,预柱采用μBondapak C18（50 mm×4.6 mm,37～50 μm,干法自填）.分析流动相（AMP）为甲醇 磷酸二氢钾缓冲液（0.01 mol•L-1,pH值＝2.5） 四丁基溴化铵（0.05 mol•L-1） 三乙胺＝40：60：4：0.2（V/V）;预处理流动相（PMP）为磷酸二氢钾缓冲液（0.01 mol•L^-1,pH值＝2.5） 四丁基溴化铵（0.05 mol•L^-1）＝100：1（V/V）.分析流动相流速1 mL•min^-1,预处理流动相流速2 mL•min^-1.检测波长为294 nm.结果左氧氟沙星在100～8 000 ng•mL^-1内有良好的线性关系.相关系数r＝0.999 8,方法平均相对回收率98.8%,日内及日间差小于10%,最低检测限0.05 μg•mL^-1（S/N≥3）.结论 样品无须预处理,直接进样分析测定,简便易行.     

动态浊度法定量检查注射用乙酰谷酰胺的内毒素含量

目的 应用动态浊度法鲎实验定量测定注射用乙酰谷酰胺中细菌内毒素含量. 方法 用 0.5,0.25,0.125,0.063,0.031 EU•mL^-1内毒素标准品溶液作标准曲线. 结果 通过对样品进行干扰预实验, 筛选出注射用乙酰谷酰胺最佳的检测浓度1 mg•mL^-1 , 进行正式干扰实验. 样品中定量添加内毒素0.125 EU•mL^-1, 回收率为50%～200% . 结论 浊度法鲎实验可有效检查注射用乙酰谷酰胺中的内毒素含量.     

大鼠烯丙基半胱氨酸浓度的测定及组织分布

目的 建立高效液相色谱法测定血清和组织烯丙基半胱氨酸（SAC）浓度的 方法 , 并进行组织分布研究. 方法 采用Hypersil ODS2 色谱柱, 以50 mmol•L^-1 醋酸盐缓冲液 （pH 5.8 ）：甲醇：乙腈（50：22：28）为流动相; 柱温为35 ℃ , 荧光检测激发波长为350 nm , 发射波长为455 nm.样品的预处理后邻苯二甲醛（OPA）-2-巯基乙醇柱前衍生; 进样10 μL. 结果 血清样品在2～120 mg•L^-1浓度范围内, 线性关系良好; 组织样品在2～120 mg•g^-1浓度范围内, 线性关系良好.低、中、高3种浓度的萃取回收率为70.9%～83.5%; 相对回收率为90.2%～110.0%; 日内、日间RSD为4.1%～7.7%.肾脏达峰浓度Cmax为65.7 mg•kg^-1, 肝脏为58.1 mg•kg^-1, 脾脏为51.3 mg•kg^-1, 心脏为43.3 mg•kg^-1, 肺为35.1 mg•kg^-1, 脑组织为26.7 mg•kg^-1 ; 各组织AUC _0~8肾脏为171.9 mg•h•kg^-1, 心脏为113.9 mg•h•kg^-1, 肝脏为107.2 mg•h•kg^-1, 脾脏为90.4 mg•h•kg^-1, 肺为93.6 mg•h•kg^-1,脑组织为79.8 mg•h•kg^-1. 结论 该法简便、快速、准确、灵敏、选择性强, SAC在大鼠体内分布广泛, 其中肾脏分布较多, 而在脑组织中分布较少.     

高效液相色谱法测定头孢克洛分散片的含量

目的 建立高效液相色谱法测定头孢克洛分散片中头孢克洛的含量. 方法色谱柱为资生堂SCX柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为磷酸二氢钾溶液-乙腈(95:5),检测波长为254 nm,流速为1.0 mL•min^-1,柱温:21 ℃. 结果 头孢克洛在0.010 4 ～0.622 3 mg•mL^-1范围内呈良好线性关系,r＝0.999 9(n＝7),平均回收率为100.54%, RSD=1.03%(n＝9). 结论 该方法简便、快速、准确、灵敏度高,可用于头孢克洛的含量测定.     

丁二磺酸腺苷蛋氨酸致过敏性荨麻疹1例

患者, 女, 36岁. 因反复乏力、纳差2 a余, 巩膜及皮肤黄染3 d, 于2008年入住我院感染科治疗. 否认既往药物变态反应史. 实验室检查肝功能：丙氨酸氨基转移酶(ALT)537 U•L^-1, 天冬氨酸氨基转移酶(AST) 436 U•L^-1, 碱性磷酸酶(ALP) 107 U•L^-1, r-谷氡酰转肽酶(r-GT) 113 U•L^-1, 总胆汁酸(TBA) 79.4 μmol•L^-1, 总胆红素(T-BiL) 134.8 μmol•L-1, 直接胆红素(D-BiL) 80 μmol•L^-1, TP 67g•L^-1, A/G 36/31 g•L^-1. 乙肝全套定性：HBsAg(+), HBsAb(+), HBeAg(+), HBeAb(-), HBcAb(+). 腹部B超显示胆囊壁增厚、胆汁淤积, 脾稍大. 诊断：慢性乙型肝炎急性发作期. 入院后首先单用5%葡萄糖注射液250 mL+注射用丁二磺酸腺苷蛋氨酸1 000 mg, 静脉滴注. 当丁二磺酸腺苷蛋氨酸输入后约10 min, 患者从脸部开始出现红色斑块, 逐渐扩散至颈部, 上胸部, 腹部两侧及大腿上部, 红色斑块密集, 感觉不适, 但无瘙痒, 拟诊为过敏性荨麻疹. 生命体征平稳, 体检：体温 37.0 ℃, 呼吸率 20次•min^-1, 心率 80次•min^-1, 血压126/80 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa). 立即停药, 换用输液器, 静脉注射10 mg地塞米松, 10%葡萄糖酸钙注射液10 mL, 约30 min后皮疹部分消退, 直至完全消退. 以后未再使用该药, 其他治疗继续, 也未再发生类似反应.     

高效液相色谱法测定人血浆中氯氮平浓度

目的 建立测定人血浆中氯氮平浓度的高效液相色谱法. 方法 以DiamonsilTM C18反相柱（150 mm×4.6 mm,5 μm）为色谱柱,流动相为0.03 mol•L^-1醋酸铵 甲醇（25：75）;流速0.8 mL•min^-1,柱温40 ℃,检测波长 254 nm. 以醋酸乙酯与二氯甲烷（80：20）为提取剂. 结果 氯氮平的高、中、低（1 000.0,400.0,10.0 ng•mL^-1）3种浓度平均回收率分别为98.28%,97.63%,101.41%,日内、日间精密度RSD均＜7%（n＝5）;分析方法 的检测限为5.0 ng•mL^-1;线性范围为10.0～1 000.0 ng•mL-1. 曲线方程：C＝25.69F＋3.47,r＝0.999 7（n＝10）. 结论 该方法 灵敏、准确、简单、快速,可用于临床血药浓度监测和药动学研究.     

双氯芬酸钠贴剂相对生物利用度与局部组织药物浓度测定

目的 研究兔经皮给予双氯芬酸钠贴剂的相对生物利用度和局部组织药物浓度,为临床用药提供参考.方法 单剂量给予贴剂和凝胶剂,采用反相高效液相色谱法测定血浆和局部组织中的双氯芬酸钠浓度.结果 兔表皮给予双氯芬酸钠贴剂的药动学参数如下.AUC：22.63 μg•h•mL^-1,t1/2Ka：0.82 h,t1/2Ke：8.51 h,tmax：2.53 h,Cmax：1.64 μg•mL^-1,CL/F（s）：1.52 L•h^-1, Ka：1.15 h^-1,Ke：0.12 h^-1;凝胶剂在兔体内的药动学参数为AUC：13.07 μg•h•mL^-1, t1/2Ka：0.27 h,t1/2Ke：1.92 h,tmax：0.88 h,C_max：1.45 μg•mL^-1,CL/F（s）：1.71 L•h^-1;Ka：2.62 h^-1,Ke：0.37 h^-1,求算得双氯芬酸钠贴剂的相对生物利用度为173.14%.对2种制剂的药动学参数进行双侧t检验,均差异有显著性（均P＜0.05）.再对给予贴片和凝胶剂的兔皮肤、关节腔、血液3组之间进行LSD检验,各组差异有显著性,给予贴剂的皮肤中药物浓度是血浆的36.5倍,给予凝胶剂的皮肤中药物浓度是血浆的18.68倍.结论 双氯芬酸钠贴片的Cmax高于双氯芬酸钠凝胶外擦给药,贴片的AUC大于凝胶给药的AUC,但具有达峰时间长和在体内时间长的特点,具有长效作用,贴片的生物利用度优于凝胶.     

复方盐酸苯海拉明凝胶的制备与质量控制

目的 研制复方盐酸苯海拉明凝胶,并建立其质量控制方法. 方法 以卡波姆作为凝胶基质,制备复方盐酸苯海拉明凝胶,采用高效液相色谱法进行含量测定. 结果 制备的凝胶均匀细腻,稳定性好;盐酸苯海拉明检测浓度在100～500 μg• mL^-1 范围内线性关系良好（r＝0.999 9）,平均回收率为100.41%,RSD＝0.87%;地塞米松磷酸钠检测浓度在10～50 μg•mL^-1范围内线性关系良好（r＝0.999 4）,平均回收率为100.96%,RSD＝1.15%. 结论 该凝胶制备工艺简单,质量稳定,质量控制方法准确可靠.     

High Throughput Prediction Approach for Monoclonal Antibody Aggregation at High Concentration

Purpose

Characterization of the monoclonal antibody aggregation process and identification of stability factors that could be used as indicators of aggregation propensity with an emphasis on a large number of samples and low protein material consumption.

Methods

Differential scanning calorimetry, dynamic light scattering and size exclusion chromatography were used as the main methodological approaches. Conformational stability, colloidal stability and aggregation kinetics were assessed for two different IgG monoclonal antibody (mAbs) subclasses. Aggregation was induced by exposing the mAbs to 55°C for 3 weeks. mAb samples were prepared in different formulations and concentrations from 1 mg/mL to 50 mg/mL.

Results

High temperature stress of mAb samples revealed that monoclonal antibodies followed first order aggregation kinetics, which suggests that the rate-limiting step of monomer loss was unimolecular. Conformational stability of mAbs was estimated with denaturation temperature measurements. Colloidal stability was assessed with dynamic interaction parameter k _D . The correlation between aggregation kinetics and colloidal and conformational stability factors was evaluated and the dynamic interaction parameter was found to be a promising predictor of aggregation propensity of monoclonal antibodies. The meaning of using an intermolecular interaction parameter for prediction of what is essentially a unimolecular process is also discussed.

Conclusions

This work estimates the significance of different predictors of aggregation propensity at high concentrations as a part of a high throughput, low resource screening method and is a contribution towards determining protein aggregation phenomena in actual systems used for the development and production of biopharmaceuticals.

     

表达重组人红细胞生成素细胞株的高密度、高表达培养

用生物反应器培养能表达重组人红细胞生成素的工程细胞,使其达到高密度高表达。方法：先将工程细胞在含有５％胎牛血清的 ＤＭＥＭ－Ｆ１２培养基中培养,待细胞总数达到 ２×１０~８个以上时,接种到５ Ｌ生物反应器中。用含有血清的培养基培养 ７ｄ后转为无血清ＣＨＯ专用培养基,继续培养 ３０ ｄ。在整个培养过程中,采用流加的方式连续培养,根据情况随时测定培养基中葡萄糖浓度,使其保持高于０．５ｇ／Ｌ,同时监测氨及乳酸盐浓度,避免浓度过高。每日采样测定收获液中红细胞生成素含量与活性,培养结束后,以０．２５％胰酶消化载体,待细胞全部脱落后计数细胞总量。 结果：细胞密度达 ６×１０~６个／ｍｌ培养液,表达量约 ３０ ０００ ＩＵ／ｍｌ左右,且表达的红细胞生成素具有较高的生物比活性。结论：在较为适当的培养条件下,利用生物反应器可使工程细胞的培养达到高密度、高表达。     

Continuing Care in High Schools: A Descriptive Study of Recovery High School Programs

Data from 17 recovery high schools suggest programs are dynamic and vary in enrollment, fiscal stability, governance, staffing, and organizational structure. Schools struggle with enrollment, funding, lack of primary treatment accessibility, academic rigor, and institutional support. Still, for adolescents having received treatment for substance abuse, recovery schools appear to successfully function as continuing care providers, reinforcing and sustaining therapeutic benefits gained from treatment. Small size and therapeutic programming allow for a potentially broader continuum of services than currently exists in most of the schools. Recovery schools thus provide a useful design for continuing care, warranting further study and policy support.     

High dose diazepam in schizophrenia

The effects of flurazepam (0.0, 0.5, and 3.0 mg/kg) on methylphenidate-induced increases in stereotypy, gnawing, sniffing, and locomotion were evaluated in Swiss-Webster mice in daytime and night-time experiments. Methylphenidate (50 mg/kg) increased overall stereotypy and stereotyped gnawing behavior; two doses of methylphenidate (25 mg/kg and 50 mg/kg) increased locomotion and sniffing behavior. Flurazepam 3.0 mg/kg augmented methylphenidate-induced stereotyped gnawing behavior and stereotypy. Flurazepam significantly decreased locomotion and sniffing, but did not interact with methylphenidate's effects on locomotion and sniffing.