白细胞介素12能增强百日咳无细胞菌苗的效力

作者曾用小鼠呼吸道感染模型证实,百日咳杆菌感染或百日咳全细胞菌苗免疫能诱导抗原特异性Th1细胞,且能完全抵御百日咳杆菌的气雾攻击,而用含脱毒百日咳毒素(PTd)、丝状血凝素(FHA)和69kDa外膜蛋白(pertactin)的无细胞菌苗免疫则诱导Th2细胞。     

百日咳全菌体菌苗中百日咳毒素、丝状血凝素、69KDa外膜蛋白、凝集原2和3及脂多糖含量的测定

百日咳全菌体菌苗可诱导对多种抗原[如百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69KDa外膜蛋白(69KDa OMP)、凝集原2和3(AGG 2和3)以及其他外膜蛋白]的抗体应答。在百日咳菌苗中,这些抗原成分的含量影响其免疫应答。 作者测定了丹麦当地4种百日咳菌株等量混合的百日咳全菌体菌苗中相应抗原成分的含量。菌苗经甲醛和硫柳汞灭活制成。每剂菌苗含16浊度单位(菌体数约为16×10~9)。从菌苗中提取各种抗原,用ELISA测定菌苗中各种抗原和脂多糖(LPS)含量。 应用2M尿素,在60℃加热30分钟,随后超声处理45秒是提取FHA、69KDa OMP、AGG2和3的最有效方法。提取PT的最佳方法是1M NaCl 4℃过夜,随后超声处理。     

百日咳杆菌感染和百日咳菌苗接种后的人体血清抗体应答

作者采用免疫印迹技术比较了百日咳感染和百日咳全菌体菌苗免疫后抗百日咳毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)、69千道尔顿(kDa)的腺苷酸环化酶相关蛋白(69kDa蛋白)和百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)的血清抗体应答.试验血清样品取自1985年7月～1987年2月百日咳流行期的8例百日咳患者、4名百日咳家庭接触者和4名经吸附DTP全程免疫的儿童.百日咳杆菌抗原的SDS-PAGE表明,     

化学交联抗原组成的无细胞百日咳疫苗的效力

在联合疫苗与多价疫苗研制过程中 ,抗原总量的增加可能是个问题 ,制备高效抗原可使疫苗的抗原含量减至最小。研究发现弱抗原性抗原经化学交联后能诱生抗体。为此作者在小鼠呼吸道感染模型中研究了化学交联抗原组成的无细胞百日咳疫苗的效力。　　作者将百日咳杆菌 Tohama株在改良的S- S液体培养基中静止培养 5天后 ,取上清液提纯百日咳杆菌丝状血凝素 ( FHA)、百日咳毒素 ( PT)、百日咳 6 9k Da外膜蛋白( PRN)。然后将上述三种抗原以 9∶ 2∶ 1的蛋白比混合 ,加入 2或 50 m M 1 -乙基 - 3- ( 3-二甲胺基丙基 )碳化二亚胺 ( EDC)和 0 …     

百日咳疫苗的新进展

百日咳疫苗的不良反应主要是接种后发热，考虑到引起这种发热的内毒素与感染防御抗原无关，因此，首先进行了从百日咳菌体去除内毒素的研究。经过研究有力地证明存在于菌体表面纤维样红细胞凝集素（FHA）是百日咳菌的感染防御抗原，于是从1975年开始大力研制主要含有FHA的HA疫苗。其后，进而认为淋巴细胞增殖因子（LPF（PT））也是重要的感染防御抗原，认为此LPF也具有强力的FHA活性，因而也称其为LPF－HA并进行了广泛的含HA疫苗的开发研究。1981年日本6家公司完全按国际规定的小鼠脑内接种试验，经3次接种取得了12个国际单位，…     

在百日咳杆菌感染的鼻内鼠模型中吸附于不同铝盐的无细胞百日咳杆菌抗原对保护活性的影响

已证明三组分无细胞百日咳疫苗 DTP( DTPa)〔 GSKBio( 3)〕和五组分 DTPa〔 AV-P( 5)〕在临床试验中具有相同的效力 ,但应用小鼠鼻内攻击模型研究免疫原组分作用发现 ,三组分 GSKBio联合抗原的保护性明显低于五组分 AV- P联合抗原。为此 ,作者研究了不同铝盐对百日咳杆菌组分的吸附程度及小鼠肺清除效力的影响。　　用 1 /4人用剂量间隔 3周皮下注射 5周龄雌性 BAL B/c小鼠两次 ,用 ELISA检测抗百日咳类毒素 ( PT)、丝状血凝素 ( FHA)和6 9k Da蛋白 ( PRN)抗体滴度。百日咳杆菌攻击后每组 5只小鼠在 0、2、5、8天深度麻醉…     

改良的百日咳菌苗

改良百日咳菌苗的研究是尽可能地去除或减少内毒素等与副反应相关的成分,提取在防御感染上有用的成分。从百日咳杆菌培养上清中回收百日咳毒素(PT)以及丝状血凝素(FHA)组分,去除内毒素,用福尔马林处理清除PT的毒性,加少量铝佐剂,制定沉淀精制百日咳菌苗,与白喉和破伤风类毒素一起组成新的DTP。实验室和临床试验结果表明,新型DTP保持了国际公认的免疫效力,与全菌体菌苗相比,其发热以及接种部位红肿和硬结等局部反应轻得多。这种改     

对百日咳杆菌丝状血凝素和淋巴细胞增多促进毒素的血清学应答

本文用ELISA测定百日咳患者和DTP免疫后婴儿对百日咳杆菌丝状血凝素(FHA)和淋巴细胞增多促进毒素(LPT)的抗体应答。所用FHA和LPT系从百日咳杆菌Tohama株静止培养物上清中提取,按Cowell法精制。经鉴定证明FHA和LPT间无交叉污染。试验组婴儿于出生后1周内和2、4、6     

三组分百日咳无细胞菌苗与百日咳全菌体菌苗在2月龄婴儿中的比较

作者对含百日咳无细胞菌苗[由百日咳类毒素(PT)、丝状血凝素(FHA)和69kDa外膜蛋白(pertactin)组成]的DTP(DTaP)和含百日咳全菌体菌苗的DTP(DTwP)引起的副作用发生率以及血清学应答作了比较。     

5种组分的新百日咳无细胞菌苗在成人和幼儿中的对照研究

作者报道一种含有5种组分的百日咳无细胞(AP)菌苗,它含有百日咳类毒素(PT)10μg,丝状血凝素(FHA)5μg,混合的凝集原(Agg)2和3 5μg及pertactin(Per)3μg。Per是69kDa腺苷酸环化酶相关蛋白,与FHA结合,在小鼠脑内攻击效力试验中具有保护作用。在自然感染百日咳患者或全细胞菌苗接种者的在血清中发现抗69kDa腺苷酸环化.酶相关蛋白的抗体。这个新鉴定的蛋白质,     

对百日咳杆菌外膜蛋白的血清抗体应答

本文报道并比较了小鼠和婴儿对百日咳杆菌各种抗原成分的免疫应答情况.抗原制备:用理化方法从W28X和C株百日咳杆菌中提纯百日咳杆菌外膜蛋白(OMP)、丝状血凝素(FHA)和白细胞增多促进因子(LPF).抗血清:置W28X株于56℃加热30分钟,用DTP免疫6～8周龄的C_3H/He小鼠,收集小鼠血清,并用磷酸盐缓冲液(PBS)免疫小鼠作为对照.用DTP免疫12～15月龄健康婴     

百日咳菌苗中的抗原及儿童接种后的抗体水平

作者测定了英国现行百日咳菌体菌苗中的丝状血凝素(FHA)、血清型特异性凝集原2(AGG2)和3(AGG3)及淋巴细胞增多促进因子(LPF),同时还测定了接种和未接种菌苗的儿童血清中抗上述三种抗原及百日咳菌的脂多糖(LPS)和外膜蛋白(OMP)的抗体水平。     

制备百日咳无细胞菌苗的简易方法

作者应用染色配体层析法从百日咳杆菌的培养上清中提取百日咳毒素(PT)和丝状血凝素(FHA),并研究了用水溶性1-乙基-3-(3-二甲氨丙基)-碳化二亚胺(EDAC)进行类毒化的条件。应用SS培养基加环糊精和环糊精液体(CL)培养基制备PT和FHA。用Blue Sepharose层析从培养上清中提取抗原。SS培养基加环糊精产生的PT是FHA的2.5倍,     

一种新的百日咳无细胞菌苗在健康成人志愿者中的试验

本文作者用一种新的百日咳无细胞菌苗(PV)在54名健康成人志愿者(男42人,女12人)中进行免疫原性和反应原性试验。这种新菌苗含丝状血凝素(FHA)、百日咳毒素(BT)和菌毛凝集原2和3(AGG 2+3)3种成份。PT和FHA是从百日咳杆菌培养物上清中纯化,AGG 2+3是从菌体中纯化。PT、FHA和AGG 2+3用甲醛脱毒。每份菌苗含有脱毒后的PT、FHA和AGG 2+3各10μg和1份佐剂。佐剂分氢氧化铝(A)和磷酸铝(B)两种。在54名志愿者中,15人接种PVA,20     

百日咳杆菌丝状血凝素经鼻腔免疫小鼠后的免疫应答和保护作用

作者用百日咳杆菌丝状血凝素(FHA)或掺入生物降解微粒中的FHA经鼻腔免疫小鼠,另用FHA经腹腔免疫小鼠,同时设未免疫小鼠对照组。初免4周后,用相同剂量再次免疫,复免2周后用百日咳杆菌气溶胶攻击,并检测抗体应答。     

比较自然感染和初免DTaP-HBV联合疫苗后的长期百日咳特异性免疫

为比较自然感染后和初免三组分无细胞百日咳疫苗 DTP-乙型肝炎疫苗 ( DTa P-HBV)联合疫苗 5年后的百日咳特异性体液免疫和细胞免疫 ,作者选取 5～ 6岁儿童 ,其中 38人在 3、5、1 1月龄接种过 DTa P- HBV,2 1人在 1岁以前自然感染过百日咳。用ELISA法测定血清抗百日咳毒素 ( PT)、丝状血凝素 ( FHA)和 6 9k Da外膜蛋白 ( PRN)特异性 Ig G抗体滴度 ;同时收集外周血单个核细胞 ( PBMC) ,用 PT、FHA和 PRN与之一起培育 ,测定淋巴细胞增殖应答及细胞因子的分泌水平。　　结果表明 ,免疫组的 PRN特异性 Ig G抗体阳性率和抗 PR…     

应用小鼠呼吸道感染模型评价百日咳杆菌丝状血凝素作为保护性抗原和定居因子的作用

丝状血凝素(FHA)是百日咳杆菌的表面蛋白,具有粘附作用,也是百日咳无细胞菌苗的一种组分.FHA免疫作用的动物试验结果不太一致.为此,作者用小鼠上呼吸道感染模型来重新测定FHA的保护作用.给4周龄BALB/c小鼠免疫1或2次FHA,剂量为4μg或8μg,然后用百日咳Tohama I相菌气溶胶攻击.对照组小鼠接种破伤风类毒     

基因脱毒的PT与FHA、69KDa联合的百日咳无细胞菌苗Ⅰ期临床试验

脱毒的百日咳毒素(PT)在全菌体菌苗中是主要成份,对儿童具有保护性,PT菌苗用化学处理灭活,此过程既降低分子的免疫原性,而且不可能完全排除毒性逆转的危险性,为避免这些问题,作者系用基因诱变,得到自然脱毒的PT,并将其与丝状血凝素(FHA)、69KDa蛋白制成一种新的菌苗,并进行Ⅰ期临床试验。新菌苗基因脱毒PT-9K/129G和FHA由     

百日咳杆菌丝状血凝素的制备及百日咳毒素和丝状血凝素血清抗体的分析

近十年来,提纯和检测百日咳杆菌丝状血凝素(FHA)、百日咳毒素(PT)和其它一些抗原技术的不断发展,为应用百日咳抗原检测血清学应答成为可能.可是这些技术通常十分复杂并且相当费钱.提供纯化抗原仅局限于少数专门研究实验室.作者建立了一种为临床和公共卫生实验室制备FHA血清的简单而经济的方法,利用这个方法开展了百日咳血清诊断的研究.     

注射或口服包被在可生物降解颗粒内的抗原能预防百日咳杆菌感染

作者在小鼠呼吸道攻击模型中 ,对包被在可生物降解的聚丙交酯 -乙交酯 ( PLG)微粒和纳粒中的百日咳抗原的免疫原性及保护效力进行研究。　　将 2 5μg百日咳类毒素 ( PTd)或丝状血凝素 ( FHA)与 750 μg铝凝胶混合制成铝吸附抗原。通过蒸发技术和凝聚作用制备 PLG微粒和纳粒 ,并将 PTd和 FHA包被于颗粒中。 6～ 8周龄 Balb/c小鼠分别经腹腔 ( ip)、肌肉 ( im,4个位点 )、皮下 ( sc)或口服途径接种 30 0、1 2 5、2 0 0或 50 0μl包被 PTd和 FHA的颗粒或包被 PTd颗粒 +包被 FHA颗粒的混合液 3次 ( 0、4及 8周 )。第 3次免疫后 2、6…