白藜芦醇对小鼠胰岛样细胞团的抗移植排斥作用及其IL-2、IL-1O表达的影响

目的探讨白藜芦醇(Res)对小鼠胰岛样细胞团(ICCs)的抗移植排斥作用及相关细胞因子表达的影响。方法采用BALB/c小鼠胚胎干细胞系B/c-ES在体外定向诱导形成ICCs,DIPA标记后移植至近交系昆明小鼠皮下。将小鼠随机分为环孢素A(CsA)组(阳性对照)、Res组、CsA+Res组和PBS组(阴性对照),每组6只,移植前3d开始给药(CsA及Res剂量均为50mg/kg),每天1次直至取材日。分别于ICCs移植后第5天和第10天取移植物常规病理切片,观察免疫排斥情况,部分切片行免疫组化染色,检测IL-2、IL-10表达情况。结果移植后第5天各组均出现不同程度的移植排斥反应,除不用免疫抑制剂的PBS组外,其余各组均有移植细胞存活;Res组和CsA+Res组IL-2表达率分别为17.5%及14.5%,明显低于CsA组(59.5%,P<0.05),而Res组与CsA+Res组比较差异无统计学意义(P>0.05);Res组和CsA+Res组IL-10阳性表达率(分别为23%和48%)明显高于CsA组(12.5%,P<0.05),且CsA+Res组明显高于Res组(P<0.05)。移植后第10天,仅CsA+Res组有少量移植细胞存活,其余各组未见移植细胞;CsA组IL-2和IL-10表达明显减弱,其余各组几乎不表达IL-2和IL-10。结论 Res可抑制小鼠ICCs移植后的急性排斥反应,其机制可能与下调IL-2表达及上调IL-10表达有关。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的:探讨腹腔巨噬细胞(PM)在大鼠重症急性胰腺炎(SAP)中的作用,并观察白藜芦醇(Res)对SAP大鼠PM功能的影响.方法:36只大鼠随机分为假手术(SO)组、SAP组和Res组3组.制模后4、12 h剖杀大鼠.分离PM并培养24 h.RT-PCR法检测PM中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA和白介素-1β(IL-1β)mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β的水平.取胰腺组织行HE染色及病理学评分.结果:与SAP组比较,Res组胰腺损伤程度明显减轻;SAP组PM中TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达、细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β水平均高于SO组(P<0.001);与SAP组比较,Res组PM中TNF-αmRNA和IL-1βmRNA的表达、细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β水平明显下降(P<0.001),但仍高于SO组(P<0.05).结论:PM在SAP发病机制中起非常重要的作用;Res能显著减轻SAP时胰腺组织损伤,其机制与抑制PM功能,从而抑制TNF-α和IL-1β的分泌有关.     

OK-432增加肿瘤局部IL-12阳性细胞浸润

目的 :探讨溶血链球菌制剂OK - 432的抗肿瘤机理。方法 :B16黑色素瘤细胞接种于C5 7BL/ 6小鼠皮下 ,3d后腹腔注射1KE的OK - 432 ,每周 1次 ,连续 3周。观察肿瘤生长体积 ,并采用ELISA法和ABC免疫染色法分别测定OK - 432治疗后荷瘤小鼠脾细胞IL - 12的分泌及肿瘤局部IL - 12阳性细胞的表达。结果 :OK - 432治疗能显著抑制B16黑色素瘤的生长 (P <0 .0 5 ) ;刺激荷瘤小鼠脾细胞IL - 12的分泌 (P <0 .0 5 ) ;诱导肿瘤局部IL - 12阳性细胞的表达。结论 :OK - 432可刺激荷瘤小鼠脾细胞IL - 12的分泌 ;增加肿瘤局部IL - 12阳性细胞的浸润 ,从而增强宿主的抗肿瘤免疫功能     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

目的：探讨腹腔巨噬细胞（PM）在大鼠重症急性胰腺炎（SAP）中的作用,并观察白藜芦醇（Res）对SAP大鼠PM功能的影响。方法：36只大鼠随机分为假手术（SO）组、SAP组和Res组3组。制模后4、12h剖杀大鼠。分离PM并培养24h。RT—PCR法检测PM中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA和白介素-1β（IL-1β）mRNA的表达;酶联免疫吸附法（EUSA）检测细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β的水平。取胰腺组织行HE染色及病理学评分。结果：与SAP组比较,Res组胰腺损伤程度明显减轻;SAP组PM中TNF—mnRNA和IL—1βmRNA的表达、细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β水平均高于SO组（P〈0．001）;与SAP组比较,Res组PM中TNF-αmRNA和1L-1βLRNA的表达、细胞培养液及血清中TNF-α和IL-1β水平明显下降（P〈0．001）,但仍高于SO组（P〈0．05）。结论：PM在SAP发病机制中起非常重要的作用;Res能显著减轻SAP时胰腺组织损伤,其机制与抑制PM功能,从而抑制TNF-α和IL-1β的分泌有关。     

黄芪甲苷对哮喘模型小鼠气道炎症及IL-22的影响

目的 观察白介素22(IL-22)在哮喘模型中的作用,研究黄芪甲苷(AS-Ⅳ)对哮喘小鼠模型气道炎症及IL-22的调控作用,探讨AS-Ⅳ治疗哮喘的作用机制.方法 32只4周龄BALB/c小鼠随机分为对照组、哮喘组、布地奈德(BUD)组和AS-Ⅳ组4组,用卵清蛋白(OVA)致敏、激发小鼠以制备哮喘模型.小鼠肺组织行HE及AB-PAS染色,进行气道炎症评分,ELISA法检测4组小鼠肺泡灌洗液(BALF)中IL-22的水平,实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测小鼠肺组织中IL-22 mRNA的表达水平,流式细胞术检测小鼠脾单细胞悬液中Th22的比例.结果 与对照组相比,哮喘小鼠肺组织炎症评分增加(P<0.05),BALF中IL-22水平增高(P<0.01),肺组织中IL-22 mRNA表达水平升高(P<0.01),脾单细胞悬液中Th22比例增加(P<0.01),差异具有统计学意义.给予BUD及AS-Ⅳ治疗后,小鼠气道炎症评分降低(P<0.05),IL-22 mRNA的表达水平及Th22细胞的比例均较哮喘组降低(P<0.01),差异具有统计学意义.结论 AS-Ⅳ对哮喘气道炎症发挥治疗性作用,这可能与AS-Ⅳ通过抑制Th22细胞分化、抑制IL-22的表达和分泌有关.     

高压水动力法建立肝特异性白细胞介素-6报告基因小鼠模型

目的 建立一种可实时、无创、特异监测肝白细胞介素-6(IL-6)瞬时表达的小鼠模型.方法 通过水动力高压转染法将IL-6启动子启动的萤火虫荧光素酶(Fluc)报告基因载体定向转染至小鼠肝,采用活体生物发光成像检测炎症刺激条件下肝Fluc的表达情况,并考察发光强度与肝IL-6表达的相关关系.结果 高压水动力法成功将pIL-6-Fluc报告基因递送至小鼠肝,约使20%肝实质细胞表达目的基因.该法可造成一过性肝损伤但可在5~7 d恢复正常.pIL-6-Fluc可被脂多糖(LPS)激活,峰值时可上升(46.80±13.35)倍,远高于ELISA检测结果[(4.09±0.96)倍].结论 通过尾静脉水动力高压转染法可将pIL-6-Fluc特异性地递送至小鼠肝进而建立活体成像法检测小鼠肝IL-6瞬时表达模型;经验证,该模型可特异性地反映IL-6激活情况,且其灵敏度高于经典的ELISA方法.     

稳定转染小鼠IL-17全长基因的乳腺癌细胞株的建立及基因转染对4T1细胞的影响

目的建立稳定转染小鼠IL-17基因全长的小鼠乳腺癌4T1细胞株,并进行鉴定。方法脂质体法将携带小鼠IL-17基因全长的真核表达载体pcDNA3．1转染小鼠乳腺癌细胞4T1,经G418筛选出稳定表达IL-17的细胞株;镜下观察细胞形态,RT-PCR法、Western印迹和激光共聚焦法检测目的基因和蛋白的表达;收集转染和未转染IL．17的4T1细胞的培养上清,分别与巨噬细胞RAW264．7共培养,ELISA法检测RAw264．7细胞培养上清中IL-6水平;MTS法检测细胞的增殖情况,流式细胞技术检测细胞周期、凋亡以及细胞表面MHCI、MHC11、淋巴细胞功能相关抗原-1（LFA-1）等分子表达。结果获得1株稳定表达IL-17的4T1细胞,而且其培养上清可刺激小鼠巨噬细胞RAW264．7产生IL-6,证明该细胞可表达功能性IL-17。结论成功建立了稳定转染IL-17基因的小鼠乳腺癌细胞株。     

人骨髓间充质干细胞Toll样受体3和4活化对IL-10、IL-12和IL-6分泌的影响

目的：研究人骨髓间充质干细胞（BM—MSCs）中Toll样受体（TLR）3和4的活化对IL-10、IL-12和IL-6分泌的影响。方法：用RT—PCR法检测体外培养的BM—MSCs中是否存在TLR3和TLR4的表达;用不同剂量的聚肌胞和脂多糖分别进行诱导后,用ELISA法检测培养上清中IL-10、IL-12和IL-6的变化。结果：BM—MSCs中有较高水平的TLR3和TLR4mRNA表达。聚肌胞可明显促进IL-6分泌（P〈0．05）,且0．025g／L组明显强于0．0025g／L组（P〈0．01）;明显抑制IL-10分泌（P〈0．01）,且0．25g／L组明显强于0．025g／L组（P〈0．05）;对IL-12的分泌无明显影响。脂多糖可明显促进IL-6的分泌（P〈0．01）,而对IL-12和IL—10的分泌无明显影响。结论：BM—MSCs中有较高水平的TLR3和TLR4表达。TLR3活化影响BM—MSCs对IL-6和IL-10的分泌,TLR4活化影响IL-6的分泌,TLR3或TLR4活化均不影响IL-12的分泌。     

单核细胞在脂多糖刺激下发生基因转录并分泌炎症因子(IL-6)的实验研究

目的　新生儿感染导致机体严重病理变化的原因与内毒素有关 ,而内毒素的化学本质是脂多糖 (LPS) ,通过观察 LPS对新生儿脐血单核细胞 (MNC)分泌 IL-6及表达 IL-6m RNA基因的影响 ,探讨严重细菌感染时新生儿机体的防御反应机制。方法　取肝素抗凝脐血 ,用密度离心分离法分离 MNC,以 RPMI1 640培养液调整细胞浓度为 1× 1 0 6 /ml,将细胞悬液铺于 2 4孔培养板上 ,依次加入不同浓度脂多糖 (LPS)培养 3 6h或同一浓度 LPS(1 μg/ml)培养不同时间 ,收集培养上清液及细胞 ,分别用 ELISA和 RT-PCR方法测定 IL-6及 IL-6m RNA表达情况。结果　 (1 )脐血 MNC在 LPS刺激 3 ,6,1 2 ,1 8,2 4,3 6h后 IL-6分泌水平逐步增高 ,6h以后增加尤为明显 ,与其他各时间点比较有非常显著差异 (P<0 .0 0 1 )。LPS刺激组与无 LPS对照组相同时间点比较 ,6h内 IL-6变化水平无差异 ,6h以上各点有显著差异 (P<0 .0 1 )。RT-PCR方法检测显示 LPS刺激后 3 h即可见 IL-6m RNA基因表达。 (2 )脐血 MNC受不同浓度 LPS刺激时 ,IL-6分泌水平随 LPS浓度递增。(3 )全部脐血 MNC均检测到 IL-6m RNA基因表达。结论　 LPS能诱导新生儿脐血 MNC IL-6m RNA基因转录 ,从而促使IL-6合成、分泌 ,该作用呈时间、剂量依赖性变化     

垂体腺瘤细胞VEGF表达与细胞因子分泌的关系

目的:探讨垂体腺瘤细胞株HP75 VEGF表达与细胞因子IL-1α和IL-6分泌的关系。方法:HP75细胞常规培养,经各种因素处理后,取培养上清液,采用ELISA方法分别检测VEGF、IL-1α和IL-6的分泌水平。结果:①HP75细胞时间依赖性分泌VEGF、IL-1α和IL-6;②较大剂量的IL-1α剂量依赖性的刺激VEGF表达;③所用各种剂量的IL-6对VEGF的分泌均无显著影响;④IL-1α和IL-6中和抗体对VEGF基础分泌无显著影响。结论:VEGF的表达与IL-1α和IL-6的分泌密切相关,提示细胞因子在垂体腺瘤的生长过程中发挥重要作用。     

失血性休克对脾脏细胞因子释放的影响

目的　观察脾脏对肿瘤坏死因子 (TNF)、白细胞介素 1 (IL 1 )、白细胞介素 2 (IL 2 )、白细胞介素 6(IL 6)和白细胞介素 8(IL 8)等细胞因子的生成和释放的影响 ,进一步探讨脾脏在休克发生发展中的作用。方法　取失血性休克犬动、静脉血及脾组织匀浆放免法测定IL 1 ,IL 2 ,IL 6,IL 8和TNF含量。结果　休克后 2h休克组动物动脉血浆IL 1 ,IL 6,IL 8,TNF水平均显著低于休克治疗组和对照组水平 ,仅有IL 2水平休克组高于对照组。从脾静脉取血测定结果与动脉取血测定结果类似 ,仅IL 8的含量明显高于对照组。脾组织内各指标含量不定。结论　失血性休克对脾脏细胞因子的生成和释放有一定影响 ,脾脏也是细胞因子来源的重要场所。     

白藜芦醇对重症急性胰腺炎大鼠炎性细胞因子的影响

目的观察白藜芦醇对重症急性胰腺炎（severeacutepancreatitis,SAP）大鼠血清炎性细胞因子的影响。方法取SD大鼠,经胆胰管逆行注射5％牛磺胆酸钠制备SAP模型,分为假手术组、模型组、白藜芦醇组（20、10、5ms／kg）,每组16只。采用尾静脉注射给药,术后6h和12h分别于光镜下观察胰腺组织的病理学改变,ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α（TNF—α）、白介素-1（IL-1）和IL-6水平。结果白藜芦醇各剂量均能减轻胰腺组织的炎性反应,病理评分与模型组比较,明显降低（P〈0．01）;术后6h各剂量对应TNF-α[（89．0±19．2）、（84．7±16．0）、（105．6±22．3）ns／L]、IL-1[（109．3±19．8）、（114．5±30．2）、（135．5±29．2）ns／L]和IL-6[（185．3±28．8）、（201．5±44．0）、（213．0±30．7）ns／L],水平均明显低于模型组（P〈0．05或P〈0．01）。术后12h情况同术后6h。结论白藜芦醇通过减少炎性细胞因子的过度释放,对大鼠SAP具有保护作用。     

白细胞介素12真核表达载体对DNA疫苗诱导免疫应答的影响

目的 观察白细胞介素１２真核表达载体（ｐＷＲＧ３１６９）对ＨＢＶ－ＳＤＮＡ疫苗（ｐＣＲ３．１－Ｓ）诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠（Ｈ－２ｄ）的特异性细胞免疫应答及其对稳定表达ＨＢｓＡｇ的小鼠肥大细胞瘤Ｐ８１５细胞（Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ）成瘤性的影响。方法 肌肉注射ＤＮＡ疫苗主白细胞介素１２真核表达载体,背部皮下接种Ｐ８１５－ＨＢＶ－Ｓ细胞,观察成瘤情况,４ｈ＾５１Ｃｒ释放法检测小鼠脾细胞ＣＴＬ活性。结果：对     

Science to practice: why is the liver a radiosensitive organ?

Christiansen et al irradiated rat livers in vivo; isolated rat hepatocytes in vitro; and measured hepcidin, hemojuvelin, and ferroportin-1 gene expression. They also evaluated the influence of proinflammatory cytokines (interleukin [IL]- 1beta, IL-6, and tumor necrosis factor [TNF]-alpha) on the expression of these proteins. In this issue of Radiology, Christiansen et al conclude that radiation-induced cell-cell interactions by way of the cytokines can lead to death of irradiated hepatocytes.     

C6细胞表达的人Angiostatin Kringle(1-3)体外抑制血管内皮细胞生长的研究

为研究人AngiostatinKringle( 1 3) [AK( 1 3) ]抑制血管内皮细胞生长的活性 ,利用脂质体法将带有大鼠血清白蛋白分泌信号的人AK( 1 3)基因导入大鼠C6胶质瘤细胞 ,并用G41 8筛选获得目的细胞株。采用电镜、流式细胞术、免疫组化和Westernblot等方法 ,检测转染前后细胞超微结构、细胞周期及AK( 1 3)蛋白表达情况 ,并用人脐静脉内皮细胞增殖实验检测目的细胞株表达的AK( 1 3)蛋白抑制血管内皮细胞生长的活性。结果表明 ,成功转染人AK( 1 3)基因的大鼠C6胶质瘤细胞可稳定表达AK( 1 3)蛋白 ,且具有抗血管内皮细胞增殖活性的良好作用 ,为进一步进行体内抗血管生成基因治疗奠定了基础。     

老年COPD急性加重期血清IL-6、hs-CRP、α1-AG的检测及临床价值

目的 探讨白细胞介素-6（IL-6）、超敏C反应蛋白（hs-CRP）、α1酸性糖蛋白（α1-AG） 在慢性阻塞性肺病急性加重期（AECOPD）老年患者血清中的表达变化和临床价值.方法 运用ELISA法检测40例老年 AECOPD患者治疗前后血清IL-6、hs-CRP、α1-AG含量,并与30例正常老年人比较,分析3个指标与AECOPD的关系.结果 COPD急性加重期IL-6、hs-CRP、α1-AG均高于缓解期,有显著性差异（P＜0.01）,实验组无论是加重期还是缓解期IL-6、hs-CRP、α1-AG均高于对照组,有显著性差异（P＜0.01）.实验组加重期及缓解期3个指标两两比较均呈正相关性（P＜0.05）.结论 IL-6、hs-CRP、α1-AG参与了老年COPD急性加重期的过程,3个指标对AECOPD早期诊断、治疗疗效评估有重要参考价值.     

氯胺酮对体外循环诱导炎性细胞因子表达的影响

目的观察氯胺酮对体外循环（ECC）诱导外周血炎性细胞因子表达的影响。方法选择先天性室间隔缺损心脏病需行体外循环心脏直视手术患儿20例，随机双盲分为对照组和氯胺酮组，每组10例。氯胺酮组在ECC前给予1mg／kg氯胺酮。分别在ECC前（T0）、ECC 30min（T1）、停ECC后1h（T2）、停ECC后4h（T3）时测定血浆肿瘤坏死因子（TNF）-α、白介素（IL）-1β、IL-6、IL-10的表达。结果两组外周血血浆TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-10表达水平在TI、T2、T3时均有不同程度升高，但氯胺酮组表达水平在相应的时间点却显著低于对照组。结论氯胺酮可抑制炎性细胞因子表达和释放，减轻ECC诱导的炎症反应。     

乌藤镇痛胶囊对佐剂性关节炎大鼠NO及炎性细胞因子的影响

目的探讨乌藤镇痛胶囊对佐剂性关节炎（AA）大鼠细胞致炎因子的影响。方法采用弗氏完全佐剂AA大鼠模型,以雷公藤多苷为阳性对照药物,观察WTZT对RA大鼠血清TNF-α、IL-1β和NO的影响。结果与模型组比较,WTZT和雷公藤多苷均能显著降低AA大鼠血清TNF—α、IL-1β和NO的含量（P〈0．01）。结论WTZT可通过下调炎症介质和细胞因子合成发挥抗炎和抗风湿作用。     

Possible beneficial role of exercise in modulating low-grade inflammation in the elderly

Aging is associated with increased levels of tumor necrosis factor-alpha (TNF) and interleukin (IL)-6. These two cytokines are tightly linked in that TNF induces production of IL-6, which again inhibits TNF gene expression. In epidemiological studies, both cytokines have been associated with obesity, insulin resistance and atherosclerosis. However, based on basal studies, we suggest that TNF (and not IL-6) is the driver behind insulin resistancy. Thus, it is possible that selective enhancement of the IL-6 level may inhibit TNF-induced insulin resistance. Muscle contractions induce production and release of IL-6, but not TNF, into the circulation, in both young and elderly humans. We suggest that muscle-derived IL-6 contributes to mediate the beneficial metabolic effects of exercise and may contribute to inhibit TNF-production and thereby insulin resistance.