环氧乙烷消毒皮毛监测菌片的研制

<正> 全国皮毛厂自从采用环氧乙烷消毒和用蜡状杆菌(4001株)芽胞菌片监测消毒效果以来,没有再发生炭疽病例。这表明使用该菌片,代替皮毛上的炭疽杆菌,来检查消毒效果是安全可靠的。但近年来,在使用菌种方面出现了不少问题,主要有以下几点:①绝大多数厂送检的芽胞悬液已失去它本来应     

内蒙古地区炭疽芽胞杆菌基因单核苷酸多态性研究

目的研究内蒙古地区炭疽芽胞杆菌基因单核苷酸多态性(SNP)特征。方法选择内蒙古地区不同分离年代、地点和来源的22株炭疽芽胞杆菌,采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法扩增染色体上的13个SNP位点,进行聚类分析。结果使用的13个SNP位点中8个位点相同,5个位点存在多态性。通过聚类分析,22株炭疽芽胞杆菌可分为4个群,属于A.Br.Aust94亚群和A.Br.008/009亚群的菌株各有1株,A.Br.Ames亚群和A.Br.001/002亚群菌株占大多数。结论内蒙古地区炭疽芽胞杆菌基因SNP位点具有遗传稳定性,目前5个SNP位点可作为内蒙古地区炭疽杆菌荚膜质粒SNP位点基因分型的指标,A.Br.Ames亚群和A.Br.001/002亚群是内蒙古地区优势亚群。     

蜡样芽胞杆菌快速检测及其毒力基因筛选

目的筛选蜡样芽胞杆菌鉴定基因和快速检测毒力基因。方法选择分离自食品和土壤的代表性蜡样芽胞杆菌共329株,聚合酶链式反应（PCR）方法检测gyrB和groEL基因的种特异性,检测毒力基因在菌株中的分布特征。 基于检测结果,用多重PCR检测方案快速检测蜡样芽胞杆菌鉴定基因及其毒力因子。结果在蜡样芽胞杆菌及其近缘芽胞杆菌中,除1株苏云金芽胞杆菌扩增阳性外,gyrB基因具有蜡样芽胞杆菌种特异性;而groEL基因在4种芽胞杆菌中均有扩增。 6种毒力基因nheA、entFM、bceT、hblC、cytK和ces的携带率分别为84.19%、79.64%、49.24%、47.72%、47.11%和1.52%。 选择nheA、hblC、entFM、ces、cytK和gyrB用于快速鉴定蜡样芽胞杆菌及其毒力基因,获得了双重PCR扩增体系（gyrB和cytK）与4重PCR扩增体系（nheA、hblC、entFM和ces）的最佳检测方案。结论筛选的蜡样芽胞杆菌鉴定基因和毒力基因能够全面、特异、简便、高效地检测蜡样芽胞杆菌,可为食品安全检测及快速诊断提供依据,在实际检验工作中具有良好的应用前景。     

一起GⅠ型诺如病毒混合感染多克隆蜡样芽胞杆菌致急性胃肠炎暴发事件实验室分析

  目的  通过一起急性胃肠炎暴发事件的实验室检测,分析暴发相关病原特征。  方法  对患者粪便、呕吐物标本以及可疑污染食品样本进行相关病原及毒力基因的实时荧光PCR筛查以及阳性菌的培养检测,对分离菌株进一步进行毒力基因分布分析和脉冲肠凝胶电泳分型分析。  结果  25例患者的粪便标本诺如病毒荧光PCR阳性,检出率为71.43%（25/35）,均为GⅠ型;5例患者的6份标本中蜡样芽胞杆菌荧光PCR和病原培养均为阳性,1名厨师粪便标本蜡样芽胞杆菌荧光PCR和培养结果均为阳性。 7件可疑食品样本中4件检出蜡样芽胞杆菌,其中5份食品样本ces基因阳性。 19株蜡样芽胞杆菌分离株脉冲场凝胶电泳（PFGE）分为14种带型,5例患者分离株中有2株PFGE带型相同且与厨师来源菌株分型一致,相同食品来源分离株的PFGE带型不完全一致。 19株分离株均不携带ces基因。  结论  诺如病毒和蜡样芽胞杆菌可能是导致本次急性胃肠炎暴发事件重要病原,以多病原快速筛查为指导的实验室检测对于病原的识别具有重要意义。     

一起疑似食物中毒暴发事件的病原学分析

目的 阐明一起疑似由蜡样芽胞杆菌污染奶源引起的食物中毒暴发事件的病原学特征,为查明暴发源头和临床治疗提供依据.方法 对198例患儿进行流行病学调查,采集可疑奶制品和病例标本,进行菌株分离和鉴定.分离到的蜡样芽胞杆菌菌株进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)分子分型、全基因组测序以及毒力基因分析.采用微量肉汤稀释法进行药物敏感性...     

臭氧杀灭水中枯草杆菌黑色变种芽胞的实验效果观察

<正> 饮用水源有可能受到炭疽杆菌芽胞等抵抗力强的致病菌污染。以往多采用含氯消毒剂处理,但这类消毒药存在一定程度的缺点。臭氧具有强氧化能力,不仅杀菌能力强,还可改善水质,为探讨其是否可用于消毒炭疽杆菌芽胞污染的饮水,我们以枯草杆菌黑色变种芽胞作为指标菌进行了试验。     

过氧戊二酸杀菌作用测定

<正> 抚顺市师范学校黄德贵等合成了白色粉末状固体过氧戊二酸消毒剂。为鉴定其杀菌作用,选用枯草杆菌黑色变种(8017株)芽胞、类炭疽杆菌(8008株)芽胞、蜡状杆菌     

三合二室外地面消毒效果的观察

<正> 炭疽杆菌芽胞对外界理、化作用因子具有很强的抵抗能力,在适宜条件下于土壤中能存活多年,存在着造成人、畜感染发病的危险性。因此,一旦发现地面受到污染,及时进行消毒处理是非常重要的。以往多用喷     

ITS基因测序分析对89株病原真菌鉴定的应用评价

摘要：目的：探讨内转录间隔区（ITS）基因扩增测序技术在病原真菌鉴定中应用价值。 方法：应用通用引物ITS1和ITS4对收集的89株真菌（包括酵母菌标准菌株6株,室间质评菌7株,临床分离的酵母样真菌42株和丝状真菌34株）进行PCR扩增和基因测序。测序成功的ITS序列在CBS数据库(http://www.cbs.knaw.nl/Collections)进行序列比对,结合Mycobank(http://cn.mycobank.org/)分类信息以获得其菌种鉴定信息。 结果：89株不同种类的真菌均成功扩增到ITS靶基因,经测序,89株真菌均获得扩增的全序列。序列比对结果显示,6株酵母菌标准株中,5株鉴定到种,1株鉴定到属;7株室间质评株中,1株酵母菌鉴定到种,6株丝状真菌中2株鉴定到种,1株鉴定到属,3株鉴定到复合群;42株临床分离的酵母样真菌中,39株鉴定到种,3株鉴定到属;34株临床分离的丝状真菌中,10株鉴定到种,18株鉴定到属,6株鉴定为复合群。 结论：通用引物ITS1和ITS4广谱性强。ITS基因序列扩增和测序分析可快速、有效鉴定临床疑难真菌,但仍存在数据分析过程烦琐和结果解释困难的问题。     

炭疽杆菌芽胞染色法的改进

芽胞是某些细菌在一定条件下形成的特殊结构 ,不同种类的细菌其芽胞的形态、染色和位置等有较大差异 ,因此直接观察细菌的芽胞可作为鉴定细菌的方法之一。常用的芽胞染色方法很多 ,但这些常规方法用于炭疽杆菌芽胞染色 ,效果总是不很满意。我们通过用微波多次加热菌液 ,对炭疽杆菌芽胞常规染色方法进行了改进 ,取得了较好的效果。1　材料和方法1 .1　材料　 1石碳酸复红染液 :取碱性复红酒精饱和溶液 1 0ml,加 5 %石碳酸水溶液 90 ml。 2 95 %酒精 ;3美兰染液 :取2 %美兰酒精饱和溶液 3 0 ml,加 0 .0 1 %KONa水溶液 1 0 0 ml。4炭疽杆菌…     

安徽省马鞍山市腹泻患者变形杆菌感染状况的初步探讨

目的掌握安徽省马鞍山市腹泻患者中变形杆菌的感染状况,为建立食源性疾病主动监测体系提供必要的参考。 方法采集该市医院门诊腹泻患者粪便标本,经分离培养、生化学、血清学、鲎实验等一系列微生物学方法,对检出的变形杆菌和其他病原菌进行鉴定,部分菌株进行内毒素检测和药敏试验。结果460份腹泻粪便标本中,检出腹泻性病原菌200株,其中变形杆菌131株（检出率28.48％）,包括奇异变形杆菌115株(25.00％)和普通变形杆菌16株(3.48％);变形杆菌占病原菌构成比的65.50％,居首位。男、女性感染人数分别占32.02％和25.00％,差异无统计学意义;各年龄组感染差异也无统计学意义。对其中80株变形杆菌进行了内毒素检测,64株内毒素阳性,阳性率为80.00％。结论变形杆菌可能是马鞍山市引起腹泻和食物中毒的主要病原菌,应引起高度重视。     

四川省普格县小兴村霍乱流行区消毒处理措施及其效果

目的扑灭农村霍乱流行,实施疫区消毒,考察消毒效果。方法采用化学消毒剂对疫区进行全面消毒处理,进行采样检测,以考核消毒效果。结果该村经济条件比较落后;交通不便,村民均为人畜混居,环境卫生较差;三条水沟贯穿全村,随时从沟中取用生活饮用水,无任何处理措施。村民发病是自参加1名急性腹泻爆死病人丧事大吃大喝之后;所有病人临床症状类似,都有急性腹泻,部分病人有呕吐和腹痛;多数病人经积极治疗之后康复;经过按消化道传染病积极预防服药,消毒和卫生管理,疫情很快得到控制。从病人肛拭和粪便采样标本中检出革兰阴性弧菌,经鉴定为霍乱弧菌。对病家门前水源、堆肥等媒介采样75份,检出21份阳性,阳性率为28%;个别堆肥经漂白粉消毒处理4次之后,仍然检出阳性,在处理6次之后全部达到阴性。结论经过卫生防疫人员和医护人员积极预防和治疗,很快控制了疫情,自首例病人出现至第32天疫情全部被扑灭,经随访1年,未出现1例类似病人,说明此次处理措施效果很好。     

纤溶酶产生菌的分离筛选与鉴定

目的分离筛选具有较高纤溶活性的产酶菌株,对产酶菌株进行初步鉴定,并进一步对产酶菌株的体外溶栓机制进行初步研究。方法用生理盐水浸提实验菌固体发酵的大豆制备纤溶酶粗酶,通过纤维蛋白平板法筛选具有较高纤溶活性的产酶菌株,并进一步对菌株的菌落形态、菌体特征和生理生化特征进行鉴定。同时采用加热纤维蛋白平板法对菌株产生的纤溶酶在体外水解纤维蛋白的方式进行研究。结果从采集的多个样品中分离筛选到两株具有较高纤溶活性的产酶菌株C1A-01和C1A-03,初步确定这两个菌株均属于枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。体外溶栓实验表明,C1A-01和C1A-03是通过直接溶解纤维蛋白的方式发挥溶栓作用,而不是通过激活纤溶酶原间接起作用。结论获得了两株产较高纤溶酶活性的枯草芽孢杆菌菌株C1A-01和C1A-03,而且溶纤方式特殊,有望开发成新一代的抗栓溶栓药物。     

化学消毒试验用芽胞指标菌的选择

<正> 在判断杀芽胞效果的试验中,为使结果稳定可靠,便于对比和操作简便安全起见,多以无毒菌株作为指标菌进行试验。因此,合理地选择一株能代表毒株的芽胞指标菌,是研究杀芽胞效果的重要前提。国外在     

应用噬菌体进行炭疽疫苗纯菌检查方法的建立

目的 建立应用噬菌体进行炭疽活疫苗纯菌检查的方法,并与现用纯菌检查方法进行比较.方法 使用噬菌体对与炭疽芽孢杆菌分类学上接近以及常见污染细菌进行裂解观察,确定噬菌体特异性.选取具有代表性的可能污染菌定量掺入炭疽疫苗中,制备模拟污染疫苗,进行噬菌体裂解纯菌检查方法的灵敏度研究,同时与现用的直接接种纯菌检查方法进行比较.结果 炭疽噬菌体能特异地裂解炭疽芽孢杆菌,对与炭疽芽孢杆菌分类学上接近以及常见污染细菌无裂解作用.噬菌体裂解法对掺入炭疽疫苗中蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌及大肠埃希菌的检出限均为1 CFU/人份,而现用纯菌检查方法的检出限分别为5、5及50 CFU/人份.结论 噬菌体裂解法检测炭疽活疫苗中污染菌有较好的特异性和灵敏度,该方法的应用对疫苗质量控制具有重要意义.     

一例肺炭疽死亡病例的流行病学调查分析

2011年8月内蒙古自治区乌兰浩特市发生一起炭疽死亡病例疫情。采用流行病学调查、噬菌体裂解实验及青霉素敏感实验进行分析和诊断。共确诊6例病例,其中5例皮肤炭疽病例治疗痊愈,1例肺炭疽死亡。患者有明确的病、死畜接触史。通过对感染病畜肉的追踪销毁、接触人群的隔离检查及患者接触环境的消毒,及时有效地控制了病情的发展。     

一起疑似炭疽疫苗菌株毒力恢复事件中炭疽芽孢杆菌的毒力鉴定与分析

目的 对某校疑似炭疽疫苗菌株毒力恢复事件（事件）中,教学实验使用的炭疽芽孢杆菌毒力及其环境污染情况进行鉴定和调查,为合理处理该事件提供参考依据。 方法 调查事件发生的情况、采集实验用培养物、冻存菌株和实验室环境样本。 对实验用培养物进行噬菌体裂解和青霉素敏感试验鉴定;选取炭疽芽孢杆菌的rpoB基因和毒力相关的pagA和capC基因,应用TaqMan荧光探针法对采集样本进行检测。 结果 实验用培养物的噬菌体裂解试验显示有明显的噬菌斑,青霉素敏感试验显示在青霉素纸片周围有明显的抑菌环,并且培养物和冻存菌株rpoB和pagA基因检测为阳性,capC基因检测为阴性;教学场所的环境样本rpoB、pagA和capC基因检测均为阴性。 结论 该事件中实验用培养物和冻存菌株均为缺少capC基因的减毒炭疽芽孢杆菌,未发现毒力恢复情况;教学场所中无炭疽芽孢杆菌的污染。      

"Bacillus hackensackii" sp. nov., a novel carbon dioxide sensitive bacterium isolated from blood culture

An endospore-forming, gram-positive bacillus was isolated from a patient's blood culture. This bacillus did not grow in the presence of 5% carbon dioxide although it grew well in ambient air at 37 degrees C. Although the organism thus is an aerobic bacterium, its sensitivity to increased carbon dioxide concentration places it in a distinct category of gaseous atmospheric requirement: capnophobic. Based on its morphology, growth characteristics, biochemical reactions and a complete 16S rRNA gene nucleotide sequence analysis, this microorganism represents a novel Bacillus species. The clinical significance of this isolate is unknown. It is proposed that the bacterium be classified in the genus Bacillus as "Bacillus hackensackii".     

我国炭疽高发省监测与控制研究

为了解我国炭疽的流行规律，从而采取有效的预防措施，选择１０个炭疽高发省（区）组成炭疽监测网，并分别在各省（区）设立监测点，人流行病学、病原学、血清学、免疫学、外环境净化效果五方面开展监测，取得了有意义的结果。我国炭疽的传染源以草食动物为主，呈现南牛北羊的特点；剥食病死动物为主要传播方式，发病相对集中于本地区低洼地势，春旱夏涝为主要诱发因素。６～９月为流行高峰期、占全年发病数的８２．４％，在２０－４９岁间的人群居多，占发病总数的６０％以上。皮肢型占９１．８４％，肠型占５．９７％，肺型占２．１８％，暴发点呈灶状性分布，且具有移动性；我国炭疽疫源面积广，污染相当严重（采集样本阳性检出率为６．１％），且持续存在，构成局部暴发的潜在危险因素；暴发点的人群，动物中存在轻型、不典型或隐姓感染的情况；肯定了预防接种的重要性，而且是有效易行的措施。     

北京市零售鸡肉标本中弓形杆菌污染初步分析

目的 了解北京市零售鸡肉标本中弓形杆菌的污染情况。方法 随机购买北京地区6个农贸市场零售鸡肉样本60份，应用驱动增强双孔滤膜法对鸡肉样品进行弓形杆菌的分离培养，利用多重PCR及16S rRNA、rpoB基因测序的方法进行菌株及菌种鉴定。结果 60份零售鸡肉样本弓形杆菌的检出率为73.33%（44/60）。44份阳性标本中，共获得125株弓形杆菌分离株，其中以嗜低温弓形杆菌为主（91.20%），其次是布氏弓形杆菌（8.00%），斯氏弓形杆菌（0.80%）。两种及以上菌种混合污染率为15.00%（9/60）。结论 驱动增强双孔滤膜法可有效分离肉类样本中弓形杆菌。本地区零售鸡肉样本中弓形杆菌污染严重，鸡肉中嗜低温弓形杆菌的污染高于布氏弓形杆菌。