类风湿关节炎患者Th17细胞与调节性T细胞失衡的研究

目的观察类风湿性关节炎（RA）患者外周血Th17细胞与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞（Treg）平衡状态与疾病的关系,分析Th17／Treg细胞免疫失衡在RA发病机制中的作用。方法采用流式细胞仪四色荧光抗体标记法分别对47例RA患者和39名健康志愿者（HVs）进行CD3、CD8、IL-17与CD4、CD25、F0xP3标记,测定Th17与调节性T细胞的比例变化及相关细胞因子IL-6、IL-23和IL-17水平。结果RA组患者外周血中,CD3^＋CD8^＋IL-17^＋T细胞占CD3^＋T淋巴细胞的百分比为（1．12±0．38）％,明显高于对照组（0．68±0．29）％（t=1．83,P〈0．05）;CD4’CD25’FoxP3^＋细胞占CD4^＋T淋巴细胞的百分比为（2．74±0．71）％,明显低于对照组（4．69±1．23）％（t=-2．94,P〈0．05）。相关细胞因子测定结果：IL-6水平在RA组为（13．5±3．7）ng／L,正常人为（4．6±0．9）ng／L（t=6．24,P〈0．01）;IL-23水平在RA组为（71±19）ng／L,正常人为（25±6）ng／L（t=14．37,P〈0．01）;IL-17水平在RA组为（122±33）ng／L,正常人为（37±9）ng／L（t=19．01,P〈0．01）;RA患者血清IL-6、IL-23和IL-17水平均明显升高。结论RA患者外周血Th17与CD4^＋CD25^＋FoxP3^＋调节性T细胞数量的异常可能是RA发病的重要因素,IL-6和IL-23的升高是引起这些改变的可能原因。     

中国HIV感染者细胞毒性淋巴细胞内穿孔素的差异性表达

目的 了解中国HIV感染者细胞毒性相关的NK细胞及CD8^＋T细胞内穿孔素表达水平，探讨HIV感染过程中穿孔素表达与机体免疫功能的关系。方法 采集31例未经抗病毒治疗的HIV感染者和经过高效抗逆转录病毒疗法（HAAS）治疗的17例HIV／AIDS患者以及15例健康对照的抗凝全血，应用流式细胞仪胞内染色法检测CD56^＋／CD3^-、CD3^-／CD16^＋NK细胞及CD8^＋／CD3^＋内穿孔素表达的百分数，分析其与NK细胞绝对值、NK细胞百分数、CD4^＋T、CD8^＋T淋巴细胞绝对值及血浆病毒载量的相关性。结果 中国HIV感染者的NK细胞CD56^＋／CD3^-及CD3^-／CD16^＋亚群穿孔素表达百分数（平均13．17％，平均24．05％）高于CD8^＋T细胞穿孔素表达百分数（平均9．03％）；NK细胞内穿孔素表达低于健康对照（P〈0．05，P〈0．05），CD8^＋T细胞内穿孔素表达高于健康对照（P〈0．05）；NK细胞及CD8^＋T细胞内穿孔素表达水平与其绝对计数显著相关，与疾病进展不相关。HAART治疗组NK细胞内穿孔素表达升高，CD8T^＋细胞内穿孔素表达无显著变化。结论 中国HIV感染者NK细胞内穿孔素表达降低，抗病毒治疗后升高；CD8^＋T细胞内穿孔素表达升高，抗病毒治疗后无显著变化。     

CD4+ CD25+调节性T细胞在HIV/AIDS患者中的作用及其与HIV病毒载量的相关性研究

目的 研究HIV感染者／AIDS患者外周血CD4^＋ CD25^＋ 调节性T细胞（CD4^＋ CD25^＋ regulatory Tcell，Treg）频率、功能及其临床意义。方法 选择31例HIV感染者／AIDS患者和30例健康对照者，采用流式细胞仪检测各组外周血Treg的表型和频率。采取MACS磁珠分选CD4^＋CD25^＋T细胞，利用[^3H]胸腺嘧啶掺入法检测CD4^＋ CD25^＋T细胞在特异性HIV抗原刺激下对CD4^＋ CD25-T细胞的增殖影响。结果HIV／AIDS患者组与正常对照组相比较，外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞频率在统计学上差异无统计学意义。与正常对照组比较，HIV感染者外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞频率升高，差异有统计学意义（P〈0.01）；与正常对照组比较，AIDS患者者外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞频率降低，差异有统计学意义（P〈0．0001）。HIV RNA病毒载量与患者外周血CD4^＋ CD25^＋ T细胞数量呈正相关性（P〈0．01）。CD4^＋ CD25^＋ T细胞具有抑制HIV特异性的CD4^＋ CD25^- T细胞的增殖作用。结论HIV感染者／AIDS患者的细胞免疫功能紊乱，CD4^＋ CD25^＋ T细胞能抑制HIV感染者／AIDS患者的HIV特异性细胞免疫反应，促进HIV病毒复制，与形成持续HIV感染有关。     

HIV/HCV合并感染者淋巴细胞活化及第二受体表达的研究

目的了解中国不同疾病进展阶段人类免疫缺陷病毒和丙型肝炎病毒（HIV／HCV）合并感染者T淋巴细胞与自然杀伤细胞（natural killer cells，NK）数量变化及T淋巴细胞活化、受体表达情况，并探讨HCV感染对HIV感染免疫指标及疾病进展的影响。方法应用流式细胞术分析228例不同疾病进展阶段的HIV／HCV合并感染者及101例单纯HIV感染者外周血T淋巴细胞、NK细胞数量及T淋巴细胞活化受体（HLA-DR、CD38）、第二受体（CCR5、CXCR4）表达情况。结果（1）HIV／HCV合并感染组中，CD4^＋T淋巴细胞、NK细胞数量随疾病进展持续下降，其中艾滋病组（AIDS）明显低于无症状HIV感染组（HIV）（P〈0．05），HIV组明显低于长期不进展组（LTNP）（P〈0．01），LTNP组与健康对照组差异无统计学意义。LTNP组、HIV组及AIDS组CD4^＋、CD8^＋T细胞表面活化受体HLA-DR、CD38的表达依次升高，其中各组间CD8／CD38的升高差异均有统计学意义（P〈0．05），AIDS组CD4／HLA-DR、CD8／HLA-DR的升高明显高于LTNP组和HIV组（P〈0．01）。LTNP组、HIV组及AIDS组CD4^＋、CD3^＋T细胞表面CCR5的表达亦依次升高，各组间差异均有统计学意义（P〈0．05）；CD3^＋T细胞表面CXCR4的表达依次升高，AIDS组明显高于HIV组和LTNP组（P〈0．01）。（2）HIV／HCV合并感染组与单纯HIV感染组相比，AIDS组NK细胞明显下降（P〈0．05），CD4^＋T细胞下降，但无统计学意义，CD4／HLA-DR、CD8／HLA-DR、CD4／CXCR4、CD3／CXCR4明显升高（P〈0．01）；HIV组NK细胞明显下降（P〈0．01），CD4／CXCR4明显升高（P〈0．05）；LTNP组各项指标与单纯HIV感染组相比差异无统计学意义。（3）HIV／HCV合并感染组的HIV病毒载量随疾病进展不断升高，与单纯HIV感染组相比差异无统计学意义；HCV病毒载量在疾病不同阶段差异无统计学意义（P〉0．05）。结论随疾病进展，HIV／HCV合并感染者的免疫功能逐渐下降，HIV病毒载量逐渐升高。与单纯HIV感染相比，合并HCV感染可通过破坏机体天然免疫功能、促进免疫系统活化和受体表达，加速HIV感染的疾病进展。     

输血相关急性肺损伤患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞变化的临床意义

目的检测输血相关急性肺损伤（TRALI）患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋调节性T淋巴细胞（Treg）的计数及其功能基因又头框蛋白3（Foxp3）mRNA的表达水平,以及探讨其与疾病预后的关系。方法收集2008年6月至2011年11月期间健康体检者（对照组,n=30）和重症监护病房收治的TRALI患者[TRALI组,n=26,TRALI组按预后又分为死亡组（n=5）和存活组（n=21）]外周抗凝血,采用流式细胞术分析各组T细胞亚群。采用四色流式细胞术以Foxp3-FITC／CD25-PE／CD4-PerCP／CD3-PC7抗体组合检测各组受试者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的计数,比较死亡组和存活组患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的水平。实时荧光定量PCR技术检测特异性转录因子Foxp3mRNA的表达水平,并分析患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg的比例与Foxp3mRNA的表达水平的关系。结果TRALI患者与对照组健康人间CD3＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞计数的差异无统计学意义,而CD3＋CD8＋T细胞则较对照组增加（P〈0．05）,CD4＋／CD8＋比值降低（P〈0．05）。死亡组CD3＋CD8＋T细胞比例高于存活组（P〈0．05）,C133＋T细胞、CD3＋CD4＋T细胞比例和CD4＋／CD8＋比值则低于存活组（均P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD2.5high Foxp3＋Treg计数为（8．86±3．14）％,明显高于健康对照组（5．67±2．43）％（P〈0．05）。TRALI死亡组患者外周血CD4＋CD2shighFoxp3＋Treg计数为（11．23±3．79）％,显著高于存活组患者（7．69±3．21）％（P〈0．05）。TRALI患者外周血Foxp3mRNA的表达水平为（3．77±2．73）×10^5拷贝/ug,显著高于对照组（0．43±0．21）×10^5拷贝／μg（P〈0．05）。TRALI患者外周血CD4＋CD25highFoxp3＋Treg计数与Foxp3mRNA的表达水平呈正相关（r=0．5131,P〈0．05）。结论TRAM患者外周血CD4＋CD.5highFoxp3＋Treg和Foxp3mRNA的变化可能是导致TRALI疾病发展的关键因素之一,与?     

自身免疫性溶血性贫血患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞的检测及意义

目的探讨自身免疫性溶血性贫血（AIHA）患者外周血Th1／Th2、Th3／Tr1细胞状态,分析它们在AIHA发病机制中的作用。方法收集AIHA患者及健康者外周抗凝静脉血,分离纯化淋巴细胞。运用FITC-CD3单抗,Cy5-CD4单抗,PE—CRTH2单抗,以CD3／CD4设门作三色流式细胞术检测Th1／Th2细胞,ELISA法检测血清中Th3细胞相关的细胞因子TGF-β1的含量和Tr1细胞的相关因子IL-10的含量。结果与正常对照相比．AIHA患者外周血CD3^＋CD4^＋CRTH2-T细胞（Th1）百分率、CD3^＋CD4^＋CRTH2^＋T细胞（Th2）百分率均下降（P〈0．05）,而CD4^＋CRTH2^-T／CD4^＋CRTH2^＋T比例（Th1／Th2）均明显升高（P〈0．01）,Th3／Tr1细胞分泌的相关细胞因子TGF-β1和IL-10的含量均降低（P〈0．05）。结论AIHA患者外周血存在细胞免疫功能失调,T细胞亚群极化状态发生改变,呈Th1型细胞优势,Th3／Tr1细胞因子含量下降,可能与AIHA的免疫学发病机制有关。     

HIV／AIDS患者体内Th17及Th1应答失衡

目的 探讨HIV/AIDS患者体内Th17、Th1应答情况及Th17与Th1应答之间的相互关系.方法 选取38例符合诊断标准的慢性HIV感染患者,根据抗病毒治疗与否,将其分为2组：治疗前16例,治疗后22例,同时选取24例健康志愿者为对照.采用全血胞内细胞因子染色方法,使用BD FACSCanto流式细胞仪检测各项指标,FACSDiva软件分析CD4^＋IL-17^＋T细胞及CD4^＋IFN-γ^＋T细胞表达情况,将结果进行统计学分析并比较各组之间的差异.结果 未治疗患者CIM^＋IL-17^＋T细胞表达显著低于健康对照（1.14±0.79）%vs（3.98±1.14）%,P=0.000,经抗毒治疗后明显升高（2.22±1.00）%,P=0.001;而CD4^＋IFN-γ^＋T细胞则在治疗前后没有显著变化（34.35±24.38% vs42.10＋15.57%）,与健康人比较亦差异无统计学意义P=0.383;进一步相关性分析表明CD4^＋IL-17^＋T细胞与CD4^＋T细胞计数呈正相关（R=0.345,P=0.034）,而CD4^＋IFN-γ^＋T细胞则与CD4^＋T细胞计数没有明显相关性（R=-0.247,P=0.136）.结论 人体感染HIV病毒以后,机体出现Th17应答显著下调,Th17/Th1平衡紊乱,Th17免疫应答可能在HIV感染致病机制中起着重要作用.     

经血感染HIV/AIDS患者pDCs与艾滋病疾病进展关系的研究

目的 了解中国HIV/AIDS患者外周血中类浆细胞样树突状细胞（plasmacytoid dendritic cells，pDC）绝对值的变化，分析其与HIV感染及疾病进展的关系。方法采集56例未经治疗的H1VIMDS患者及34例健康人抗凝静脉血，采用流式细胞仪单平台检测技术，分析计算三色荧光抗体标记的全血中pDC（Lin1^＋／HLA-DR^＋／CD123^＋）绝对值。结果MDS组pDC绝对值为3．31个／μl（0．31～6．46个/μl），显著低于正常对照组、HIV慢性感染组及HIV感染疾病长期不进展（long term non-progressors，LTNP）组（P〈0．01）。HIV慢性感染组pDC绝对值为5．27个/μl（2．25～9．80个/μl），显著低于正常对照组及LTNP组（P〈0．01）。LTNP组pDC绝对值为9．95个／μl（6．16～20．88个／μl），显著高于正常对照组（7．84个/μl，3．45～13．97个／μl，P〈0．01）。56例HIV/AIDS患者pDC绝对值与CD4^＋T淋巴细胞绝对值及百分率呈显著正相关（r=0．422，P〈0．01；r=0．488，P〈0．01），与病毒载量呈显著负相关（r=-0．444，P〈0．05）。结论HIV／AIDS患者pDC数量减少，并且随疾病进展逐渐下降；HIV感染LTNP的血pDC数量显著高于HIV慢悱感染者及MDS患者，甚至高于正常对照。提示外周血pDC在控制HIV感染方面有重要作用，与艾滋病疾病进展明显相关。     

重肌灵片对ⅡA型重症肌无力外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子IFN-γ、IL-4、TGF-β水平的影响

目的：探讨重肌灵片对重症肌无力（MG）患者的细胞免疫调节机制。方法：将60例MG患者随机分为治疗组30例、对照组30例，治疗组服用重肌灵片及泼尼松模拟片；对照组服用泼尼松片及重肌灵模拟片，疗程12周。应用流式细胞仪检测重症肌无力患者治疗前后外周血T淋巴细胞亚群分布的变化情况；ELISA法测定患者外周血单个核细胞培养上清液中细胞因子IFN-γ、IL-4和TGF-B的水平。结果：两组患者治疗后CD4^＋T细胞百分率、CD4^＋／CD8^＋比值均有明显下降，治疗组CD4^＋／CD8^＋比值与对照组比较有显著差异（P〈0．05）。治疗组治疗后CD8^＋T细胞百分率明显增加，与治疗前比较有显著性差异（P〈0．05），而对照组治疗后CD8^＋T细胞百分率无明显变化（P〉0．05）。与治疗前比较，治疗组治疗后IFN—γ、IL-4水平降低（P〈0．01），TGF-β水平升高（P〈0．01），而对照组三者水平皆降低。结论：通过调节T淋巴细胞亚群比例分布以及IFN-γ、IL-4、TGF-β等细胞因子的分泌，可能是重肌灵片发挥免疫调节作用机制之一。     

初发系统性红斑狼疮患者外周血CD4~+CD25~+Foxp3~+和CD4~+CD25~-Foxp3~+T细胞

目的：研究初发系统性红斑狼疮患者（Systemic lupus elythematosus，SLE）外周血CD4^＋T细胞中CD25和Foxp3表达及其在SLE发病中的意义。方法：根据SLE疾病活动积分（SLEDAI）将初发SLE患者分为活动组（10例）和不活动组（11例），流式细胞仪检测治疗前后外周血CD4^＋T细胞中CD25、Foxp3和CD127表达百分率，并对其与SLE临床活动度、尿蛋白、补体和anti-ds-DNA相关性进行研究。结果：初发活动组和不活动组SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞表达百分率分别为（1．91％～6．75％）和（2．74％～7．01％），与正常对照（2．11％～9．90％）相比没有统计学差异（P=0．524，P=0．794）；且初发SLE患者外周血CD4^＋CD25^＋T细胞在体外增殖反应和增殖抑制功能与正常对照相比无明显差别（P=0．174，P=0．689）；外周血CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞百分率在初发活动组（3．71％～10．94％）和不活动组（2．97％～7．69％）SLE患者均比正常对照（1．01％～3．62％）显著增高（P〈0．01和P〈0．01）；而CD4^＋CD2^＋Foxp34^-T百分率在初发活动组SLE患者（1．19％～9．23％）显著低于正常对照（2．67％～11．26％）和初发不活动组SLE患者（3．73～8．27％）（P=0．039，P=0．048）；与CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞类似，90％左右的CD4^＋CD25一Foxp3^＋T细胞不表达或低表达CD127，其百分率与anti-ds-DNA浓度呈正相关，且尽管未达到统计学意义，但激素和免疫抑制治疗后其水平下降。结论：初发未经治疗的SLE患者CD4^＋CD25^＋Foxp3^＋T细胞数量和功能无明显异常，而CD4^＋CD25^-Foxp3^＋T细胞数量增多，与SLE疾病活动相关，可能具有调节功能。     

湖南艾滋病患者Th17和Tr细胞及IL-17在抗病毒治疗过程中的变化

目的 观察HIV感染者和AIDS患者血IL-17、CD3+CD4+IL-17+细胞(Th17细胞)和CD4+CD25+Foxp3+T细胞(Tr细胞)的平衡状态及其在1年高效抗反转录病毒治疗(HAART)中的变化.方法 选取经HAART治疗的HIV/AIDS患者33例,同时选取33例健康志愿者为对照,分别于治疗0、6、12个月采集静脉血,检测血清IL-17水平、Th17细胞及Tr细胞百分比,并对比分析其相互关系.结果 HIV/AIDS在HAART治疗前、治疗6个月、12个月及健康对照外周血的Th17细胞在CD4+T细胞中的比例分别为(1.20±0.37)%、(2.50±1.03)%、(3.70±1.56)%和(4.70±1.43)%;Tr细胞在CD4+T细胞中的比例分别为(9.16±3.33)%、(7.19±2.91)%、(5.53±1.88)%和(4.43±0.97)%;血清IL-17水平分别为(5.3±2.5) pg/ml、(7.7±2.4) pg/ml、(10.4±3.1) pg/ml和(17.7±6.6) pg/ml.Th17细胞水平与CD4+T细胞计数正相关,与病毒载量负相关;Tr细胞水平与CD4+T细胞计数负相关,与病毒载量正相关.结论 HIV感染导致IL-17、Th17细胞和Tr细胞的失平衡,而HAART治疗可能逐渐恢复二者的免疫平衡状态.提示三者可能在艾滋病发病机制中起作用,并有可能成为观察艾滋病进展和HAART治疗效果的有效指标.

Abstract：

Objective To observe the Th17, IL-17 and Tr cells equilibrium state as well as their changes of HIV infected or AIDS suffered patients in one-year HAART treatment. Methods Select 33 HIV/AIDS patients received HAART treatment while 33 healthy volunteers as controls. Flow cytometry was used to analyze Th17 and Tr cells in venous blood at the time of pre-therapy, 6th, 12th month when IL-17 levels in serum are tested by ELISA. Results The ratio of Th17 cells in CD4 cells in HIV/AIDS patients and volunteers were (1.20±0.37)%, (2.50±1.03)%, (3.70±1.56)%, (4.70±1.43)%, respectively; The ratio of Tr cells were (9.16±3.33)%, (7.19±2.91)%, (5.53±1.88)%, (4.43±0.97)%, respectively; The levels of IL-17 in serum were (5.3±2.5) pg/ml, (7.7±2.4) pg/ml, (10.4±3.1) pg/ml, (17.7±6.6) pg/ml respectively. The Th17 cells' level was positively correlative with the amount of CD4 cells, negatively correlate with the count of viral load. However, the Tr cells level is positively correlative with the count of viral load, negatively relate to the quantity of CD4 cells. Conclusion HIV could make IL-17, Th17 cells and Tr cells lost their balance, but the immune equilibrium state may gradually recover after HAART treatment. Which indicates the IL-17, Th17 cells and Treg cells may play an important role in the pathogenesis of AIDS, and they are likely to be the effective indexes to observe the progress of AIDS and the treatment effect of highly active antiretroviral therapy(HAART).     

香烟烟雾暴露对肺气肿小鼠CD4+IL-17+辅助性T细胞的影响

目的 探讨香烟烟雾暴露对肺气肿小鼠肺实质、外周血中CD4+IL-17+辅助性T细胞(Th17)的影响。方法 将40只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为4组：对照12周组(C12)、对照24周组(C24)、烟雾暴露12周组(S12)、烟雾暴露24周组(S24),每组10只。香烟烟雾暴露法建立小鼠肺气肿模型。HE染色观察小鼠肺气肿的改变,计算平均内衬间隔(Lm)和肺泡破坏指数(DI);酶联免疫吸附法检测小鼠支气管肺泡灌洗液中IL-17、干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平及肺实质中IFN-γ和TNF-α水平;流式细胞术检测小鼠肺实质、外周血中CD4+ IL-17+T(Th17)细胞占CD4+T细胞的百分比;免疫荧光PCR法检测小鼠肺实质、外周血中RORγt和IL-17的mRNA表达,并分析这些指标的相互关系。结果 (1)S12组和S24组Lm为(39.19±3.51) μm和(46.87±7.16) μm,DI为39.13±1.57和45.16±3.13,均明显高于C12组和C24组(32.60±3.21) μm和(32.38±3.73) μm及28.23±1.62和28.86±2.07,以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义(均P＜0.05)。(2) S12组和S24组BALF中IL-17、IFN-γ及TNF-α水平[(119.72±10.72) ng/L和(296.40±14.00) ng/L、(129.7±22.2) ng/L和(251.1±62.4) ng/L,(17.35±1.60) ng/L和(36.35±1.43) ng/L]较C12组和C24组[(52.06±4.70) ng/L和(51.89±6.82) ng/L、(85.8±26.8) ng/L和(88.9±11.5) ng/L,(6.41±0.90) ng/L和(5.85±0.92) ng/L]明显增高;在肺实质中,S12组和S24组IFN-γ及TNF-α水平[(1124.3±174.4) ng/L和(1342.7±206.1) ng/L,(77.2±13.7) ng/L和(101.7±19.0) ng/L]亦较C12组和C24组[(946.2±81.9) ng/L和(1027.2±188.3) ng/L,(62.1±16.1) ng/L 和(64.4±15.1) ng/L]明显增高;且以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。(3)S12组和S24组肺实质中Th17细胞比例[(3.27±1.12)％和(7.19±2.24)％]明显高于C12组和C24组[(1.80±0.75)％和(1.99±0.59)％];S12组和S24组外周血中Th17细胞比例[(1.96±0.61)％和(3.82±1.26)％]亦明显高于C12组和C24组[(0.90±0.37)％和(0.97±0.32)％];且以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。(4) S12组和S24组肺实质中RORγt和IL-17 mRNA表达量（1.73±0.35和4.52±1.15,4.00±0.87和83.43±21.01）较C12组和C24组（0.83±0.21和0.90±0.36,0.80±0.22和0.64±0.31）明显增高,以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义(均P＜0.05);外周血中,S12组和S24组RORγt和IL-17 mRNA表达量(1.48±0.32和2.75±0.79,201.25±5.49和416.22±99.64)亦较C12组和C24组(0.59±0.25和0.75±0.36,24.90±5.49和22.28±4.24)明显增高,以S24组增高更为明显,差异均有统计学意义（均P＜0.05）。(5)烟雾暴露组中,外周血和肺实质的Th17细胞比例均与Lm、DI值显著正相关(r值分别为0.767、0.772;0.722、0.706,均P＜0.05)。结论 Th17细胞在香烟暴露肺部炎症、肺气肿小鼠外周血及肺内表达增高,并伴活性的增强,且随烟雾暴露时间延长而增强,提示香烟暴露肺气肿小鼠Th17细胞上调可能是导致小鼠肺内及全身炎症反应放大的原因之一。     

十一味参芪片对胃癌放化疗患者免疫功能及不良反应的影响

目的 研究十一味参芪片对胃癌放化疗患者的免疫功能及不良反应的影响.方法 选取本院2008年3月至2009年9月放疗科90例胃癌放化疗患者,随机分为十一味参芪片治疗组（治疗组,n=45）和单纯化疗组（对照组,n=45）.对照组给予放化疗,治疗组在对照组基础上给予十一味参芪片,21d为1个周期,2个周期后评价患者的生存质量,包括进食量和体质量;观察放化疗不良反应;采用流式细胞仪检测两组患者静脉血Th1、Th2及其比值;ELISA法检测静脉血干扰素γ（IFN-γ）和白细胞介素4（IL-4）的含量;测定白细胞（WBC）、血小板（PLT）、血红蛋白（Hb）水平.维持治疗2年后,进行总体评估,分析患者生存质量、放化疗不良反应、静脉血Th1和Th2及其比值、IFN-γ和IL-4含量、血常规等各个指标.结果 治疗2个周期后,治疗组患者进食量和体质量较对照组明显改善.治疗组各种不良反应发生率低于对照组（均P＜0.05）.治疗组患者外周血Th1、Th2及其比值Th1/Th2较对照组患者均有升高[Th1：（6.42±2.10）％比（4.10±2.70）％,Th2：（3.51±1.14）％比（2.81±2.30）％,Th 1/rh2：1.83±0.62比1.46±0.70,均P＜0.05].与对照组相比,治疗组患者血IFN-γ的含量增加,而IL-4含量明显降低[IFN-γ：（66.05±23.13）ng/L比（47.19±10.03）ng/L,IL-4：（34.62±5.34） ng/L比（45.35±6.03）ng/L,均P＜0.05].治疗组患者外周血WBC、Hb以及PLT减少均低于对照组（均P＜0.05）.维持治疗2年后,治疗组患者生存质量、不良反应、Th1、Th2、Th 1/Th2、IFN-γ、IL-4及血常规检查结果仍明显优于对照组.结论 十一味参芪片能有效提高胃癌放化疗患者的机体免疫功能,降低不良反应,改善生活质量,是胃癌放化疗治疗中有效的辅助用药.     

维生素D3对自然流产模型小鼠胚胎丢失率及外周血免疫细胞的影响

目的 探讨维生素D3（VitD₃）对自然流产模型小鼠胚胎丢失率及外周血免疫细胞的影响。 方法 采用CBA/J×BALB/c建立正常妊娠小鼠模型,采用CBA/J×DBA/2建立自然流产小鼠模型,实验动物分5组：正常组、自然流产组、VitD3低剂量组、中剂量组和高剂量组,每组15只。VitD₃各组自妊娠第1天开始腹腔注射VitD₃溶液,单次VitD₃给药剂量分别为1μg、4μg、16μg。记录和观察各组小鼠胚胎丢失情况,检测各组血清调节性T细胞（Treg）细胞因子：白细胞介素-10（IL-10）,辅助性T细胞17（Th17）细胞因子：白细胞介素-17A（IL-17A）以及各组外周血Treg、Th17。 结果 与正常组相比,自然流产组胚胎丢失率显著升高（χ2=16.045,P＜0.05）;与自然流产组比较,VitD₃低剂量组、中剂量组和高剂量组胚胎丢失率显著降低（χ2=5.881、13.704、15.663,P＜0.05）。与正常组相比,自然流产组Treg、IL-10、Treg/Th17、IL-10/IL-17A显著降低,Th17、IL-17A显著升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）;与自然流产组比较,VitD₃低剂量组、中剂量组和高剂量组Treg、IL-10、Treg/Th17、IL-10/IL-17A显著升高,Th17、IL-17A显著降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。 结论 VitD₃能够降低自然流产模型小鼠胚胎丢失率,可能与调节Treg/Th17平衡有关。     

大鼠胶原诱导性关节炎关节滑膜Treg/Th17 平衡及TNF-α拮抗剂的影响

目的: 探讨胶原诱导性关节炎(CIA)关节滑膜Treg/Th17平衡状态以及TNF-α拮抗剂TNFR-Fc对Treg/Th17的影响。方法: 建立CIA模型,观察踝关节组织病理变化,ELISA检测血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α),免疫荧光双标法检测关节滑膜Treg/Th17的表达。结果: CIA组TNF-α较正常对照组及TNFR-Fc治疗组显著升高(P<0.01),TNFR-Fc治疗组与正常对照组间差异无统计学意义(P>0.05);CIA组滑膜组织的CD4⁺Foxp3⁺Treg/CD4⁺细胞比例与正常对照组比较无明显差异(23.12%±4.93% vs 24.66%±5.82%,P>0.05),而TNFR-Fc治疗组则升高明显(33.07%±5.14%);CIA组CD4⁺RORγt⁺Th17/CD4⁺细胞比例显著增高(9.74%±2.23% vs 正常对照组1.00%±0.59%,TNFR-Fc治疗组5.63%±1.76%,P<0.01)。结论: CIA大鼠关节滑膜存在Treg/Th17分化失衡;TNFR-Fc可能通过抑制关节滑膜Th17细胞分化,诱导Treg细胞生成/聚集,使得病变关节的Treg/Th17平衡得以恢复。     

自体细胞因子诱导的杀伤细胞联合常规化疗治疗中晚期宫颈癌的临床研究

目的 探讨回输自体细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)联合顺铂治疗中晚期宫颈癌的临床疗效,并观察此治疗对患者外周血中Th1/Th2细胞因子的漂移的影响.方法 将我院在2013年2月至2014年2月接收的宫颈癌患者44例,随机分为单纯化疗组(n=22)和联合治疗组(n=22),并选取健康的女性个体20例作为对照组,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测检测所有样本外周血中Th1型细胞因子白细胞介素(IL)-2、干扰素-γ(IFN-γ)的表达水平,Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10的表达水平,流式细胞仪检测Th1/Th2细胞的比率变化.同时评价两组患者疗效及生活质量.结果 与健康对照组比较,治疗后两组患者血清中Th1型细胞因子IL-2、IFN-γ的浓度显著升高,且联合治疗组升高程度高于单纯化疗组,而Th2型细胞因子IL-4、IL-6、IL-10的浓度明显降低,且联合治疗组降低程度高于单纯化疗组(P＜0.05).治疗后单纯化疗组和联合治疗组Th1/Th2比率小于对照组,但联合治疗组高于单纯化疗组(P＜0.05).联合治疗组完全缓解率高于单纯化疗组(36.4％比22.7％,P＜0.05).联合治疗组有效率高于单纯治疗组(90.9％比72.7％,P＜0.05).联合治疗组的生活质量总提高率高于单纯化疗组(86.4％比72.7％,P＜0.05).结论 自体CIK细胞联合常规化疗能够改善中晚期宫颈癌的Th1向Th2漂移,是安全并且有效的.     

自身免疫性脑病患儿外周血中γδT细胞检测的临床意义

目的 探讨检测自身免疫性脑病（AE）患儿外周血中γδT细胞的临床意义.方法 应用流式细胞仪对36例AE患儿和23例健康儿童外周血中γδT细胞、CD3＋淋巴细胞以及CD4＋/CD8＋比值进行检测;同时分析AE患儿治疗前后的上述细胞变化情况.结果 AE患儿外周血γδT细胞和CD3＋淋巴细胞分别为17.54％±2.65％、66.57％±5.01％,显著高于健康对照组（6.47％±2.39％,P＜0.01,61.49％±3.87％,P＜0.05）;而CD4＋/CD8＋比值为1.05±0.27,显著低于健康对照组（1.43±0.28,P＜0.05）.AE患儿治疗后γδT细胞为9.12％±3.24％,较治疗前17.54％±2.65％明显降低,差异有统计学意义（t=10.467,P＜0.01）.结论 AE患儿外周血γδT细胞比例变化与病情有关,γδT细胞检测可作为AE治疗的一项监测指标.     

KD 患儿Th17 / Treg 细胞失衡和单核细胞趋化蛋白1 的关系研究

目的:探讨川崎病(KD)患儿外周血CD4+ CD25+调节T 细胞(Treg) / 辅助性T 细胞17(Th17)与单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的关系及其在KD 发病中的作用机制。方法:2014 年6 月至2015 年6 月选取本院收治的48 例KD 患儿(恢复期28 例,急性期20 例)为研究对象,另选取40 例健康体检儿童为对照组,采用ELISA 法测定两组血清中白细胞介素-15,17,23(IL-15,17,23)及MCP-1 水平,采用流式细胞术测定两组外周血Treg/ Th17 细胞比例。结果:KD 组患儿血清IL-15、IL-17、IL-23 及MCP-1 水平显著高于对照组(P<0.05),且急性期KD 患儿血清IL-15、IL-17、IL-23 及MCP-1 水平高于稳定期组。KD 组患儿Treg 细胞、Treg/ Th17、Th17 显著高于对照组(P<0.05),急性期KD 患儿Treg 细胞、Treg/ Th17 水平、Th17 高于稳定期(P<0.05)。经Pearson 单因素分析,IL-15、IL-17、IL-23 及MCP-1 与Treg/ Th17 呈负相关(P<0.05)。结论:Treg 与Th17 细胞间的失衡及MCP-1 水平在KD 患儿体内持续升高可能与KD 病情发病及进展有密切的关系,通过测定KD 患儿Treg/ Th17 细胞比例及MCP-1 对评估患儿病情及预后具有一定的指导意义。