人凋亡相关因子配体及人转化生长因子-β1基因共转染大鼠未成熟树突状细胞对其生物学活性的影响

目的 观察人凋亡相关因子配体(hFasL)及人转化生长因子-β1( hTGF-β1)基因共转染的大鼠未成熟树突状细胞(imDC)对其生物学活性影响.方法 实验分6组:mDC组、imDC组、空载体组、hFasL基因转染组、hTGF-β1基因转染组及hFasL-hTGF-β1基因共同转染组(即共转染组).用hFasL或(和)hTGF-β1真核表达载体(pIRES2-EGFP-hFasL、pIRES2-EGFP-hTGF-β1)转染培养6d后大鼠骨髓来源的imDC,转染24 ～48 h后应用荧光显微镜、酶联免疫吸附试验(ELISA)、Western blot、流式细胞术及混合淋巴细胞反应(MLR)检测不同基因修饰的imDC的生物学活性.结果 荧光显微镜观察显示pIRES2-EGFP-hFasL及pIRES2-EGFP-hTGF-β1质粒转染imDC后可见绿色荧光;ELISA检测共转染组和转化生长因子(TGF)组TGF-β1基因表达均高于mDC组、imDC组、空载体组及FasL组(P值均＜0.01),imDC组、空载体组及FasL组的TGF-β1基因表达均高于mDC组(P＜0.05).hFasL基因表达各组间的差异均无统计学意义(P值均＞0.05);经Westen blot检测hFasL及hTGF-β1基因转染组有均有相应蛋白表达(相对分子质量分别为31×103和43×103);流式细胞术显示表面分子CD86、CD80在mDC表达高于imDC及各基因转染组和空载体组;转染后混合淋巴细胞反应(MLR)显示,共染组T细胞的增殖反应均明显弱于TGF组和FasL组(P＜0.05).结论 联合FasL和TGF-β1基因转染的imDC在体外诱导同种异体免疫耐受的能力强于FasL或TGF-β1单基因转染.     

转化生长因子-β1基因修饰未成熟树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受

目的 观察转化生长因子-β1 (TGF-β1)基因转染未成熟树突状细胞(imDC)对大鼠肝移植免疫耐受的诱导作用.方法 利用大鼠骨髓细胞诱导培养imDC,以脂质体介导的pIRES2-EGFP-hTGF-β1转染imDC,于移植前5d输注受体Lewis大鼠体内,移植后分别于3、7、10d抽血检测肝功能[总胆红素( TBIL)和谷丙转氨酶(ALT)]、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-12(IL-12)水平、肝组织苏木素-伊红(HE)染色急性排斥反应病理评分、原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测肝脏淋巴细胞的凋亡及观察各组大鼠肝移植后的生存时间.结果 TGF-β1组移植后肝功能(TBIL和ALT)优于各对照组(P＜0.05);TGF-β1组移植后3、7d血清IL-12浓度分别为71.03±10.70、80.88±14.23均低于各对照组(P＜0.05);TGF-β1组移植后7d出现交界性排斥反应,移植10 d后出现轻度排斥反应(P＜0.05);TGF-β1基因转染组移植后3、7、10d汇管区淋巴细胞凋亡指数分别为6.75±1.93、14.00±2.19、18.25±1.38,较各对照组均明显增高(P＜0.05);TGF-β1组大鼠移植后中位生存期为58 d,明显长于各对照组.结论 TGF-β1基因改造的imDC能诱导大鼠移植免疫耐受,在诱导器官移植耐受中有良好的应用前景.     

联合输注受者Treg细胞和供者未成熟DC延长肝移植大鼠的存活时间

目的 探讨联合输注受鼠调节性T淋巴细胞(Treg细胞)和供鼠未成熟树突状细胞(imDC)延长同种肝移植大鼠存活时间的作用.方法 以DA大鼠为供鼠,Lewis大鼠为受鼠,采用改良二袖套法进行原位肝移植100例.采用随机数字表法将受鼠平均分为5组,急性排斥反应(AR)组、成熟树突状细胞(mDC)组、imDC组、Treg组及imDC+Treg组受鼠分别于术前5d经尾静脉注射生理盐水、供鼠的mDC、供鼠的imDC、受鼠的Treg细胞及供鼠的imDC+受鼠的Treg细胞.术后每组预留8只受鼠观察和记录存活时间.术后3、7、10d,检测各组肝功能指标,采用酶联免疫吸附试验法检测血清白细胞介素2(IL-2)、IL-10及转化生长因子β(TGF-β)的浓度 ;取各组受鼠移植肝组织进行病理学检查,采用原位末端标记法检测各组肝组织细胞的凋亡情况.结果 与其他4组相比,imDC+Treg组受鼠术后肝功能恢复明显较快 ;imDC+Treg组术后7d时外周血IL-10和TGF-β浓度均升高,IL-2浓度降低.imDC+Treg组移植肝组织仅有较少量的单核细胞浸润,属非确定型AR至轻度AR,术后10d开始出现肝细胞再生,有少量的中性粒细胞浸润 ;imDC+Treg组肝组织汇管区淋巴细胞凋亡数量高于mDC组,肝脏汇管区淋巴细胞凋亡数量最多.imDC+Treg组受鼠中位存活时间为37 d,明显长于imDC组的23 d和Treg组的15 d(P＜0.05),AR组和mDC组受鼠存活时间均未超过12 d.结论 单独输注供鼠的imDC或受鼠的Treg细胞均未能诱导同种肝移植大鼠的长期存活 ;而联合输注受鼠的Treg和供鼠的imDC能显著延长同种肝移植大鼠的存活时间.     

受体来源未成熟树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫低反应性的实验研究

目的 研究不负载供者抗原的受者未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)对大鼠肝移植的保护作用,探讨imDC抑制排斥反应的机理.方法 以SD大鼠作为供体,雄性Wistar大鼠作为受体,随机分为4组,每组10只,建立肝移植急性排斥反应模型,移植前对受体进行不同的处理. 对照组: 受体未接受任何处理; 环孢素A(CsA)组: 术后第2 d开始给予CsA[10 mg/(kg*d)]灌胃; 成熟树突状细胞(mDC)组: 受体术前1 d经阴茎背静脉注射受体来源的mDC 1×106个/只; imDC组: 受体术前1 d经阴茎背静脉注射受体来源的imDC 1×106个/只.模型建立后10 d各组随机处死5只,取移植肝脏组织行HE染色和免疫组化(FasL/Fas)染色,观察肝脏组织形态结构和排斥反应,根据Banff评分系统判断排斥反应程度; Western blot分析检测各组Foxp3编码的Scurfin蛋白的表达.另留5只大鼠观察术后存活时间; 收集血标本,全自动生化分析仪测定ALT、TBIL; 双抗体夹心ELISA法检测血清IL-2、IFN-γ、IL-4和IL-10水平.结果 CsA组和imDC组术后大鼠中位生存时间明显长于对照组和mDC组,差异有统计学意义(P＜0.05).移植术后各组大鼠血清生化检查: 对照组和mDC组ALT及TBIL明显高于CsA组和imDC组(P＜0.05); 且IL-2和IFN-γ也明显高于CsA组和imDC组(P＜0.01),但IL-4和IL-10明显低于CsA组和imDC组(P＜0.01).移植肝脏形态学检测: 对照组和mDC组与CsA组和imDC组比较,排斥反应更严重(P＜0.05).Western blot检测: imDC组Foxp3编码的Scurfin蛋白的表达明显高于其他3组(P＜0.05).结论 imDC通过阻断间接识别能明显延长移植物存活时间.imDC可能通过以下机理诱导免疫低反应: 诱导T细胞凋亡; 选择性激活Th2细胞亚群,诱导Th1/Th2偏移; 诱导调节性T细胞产生.     

TGF-β1mRNA与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系

目的:研究TGF-β1mRNA与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系.方法:试验分2组,Ⅰ组:Wistar→SD小肠移植;Ⅱ组Wistar→SD小肠移植 CsA.术后3,5,7d观察病理学改变并用半定量RT-PCR方法检测IFN-γ、IL-2、TGF-β1mRNA.结果:病理改变:Ⅰ组术后3d出现排斥反应,7d最重,Ⅱ组术后7d部分出现轻度排斥反应.Ⅰ组IFN-γ、IL-I mRNA术后明显增高,Ⅱ组术后略升高,两者相比差异有统计学意义(P＜0.01).Ⅰ组TGF-β1mRNA术后增高,Ⅱ组TGF-β1mRNA术后增高大于Ⅰ组,两者差异有统计学意义(P＜0.01).结论:TGF-β1mRNA转录水平增高可抑制大鼠小肠移植急性排斥反应.     

脾脏在小鼠同种肝移植排斥反应中的作用

目的 观察脾切除在小鼠同种肝移植急性排斥反应过程中的作用.方法 双袖套法建立小鼠原位肝移植模型,随机分为3组,即建模保留脾脏组、建模3 d后切除脾脏与建模同时切除脾脏组,各组于移植术后14 d处死,ELESA法测定血清IgM水平;肝功能检测采用速率法;流式细胞仪检测CD4与CD8T细胞亚群;并同时行肝脏及脾脏的病理形态观察.结果 建模保留脾脏组、建模3 d后切除脾脏与建模同时切除脾脏组血清IgM水平分别为3.0181±0.4627、3.0936±0.4559、3.1953±0.4449,各组间差异无统计学意义(P＞0.05);ALT水平分别为108.6875±20.3657、83.0000±22.7799、76.8000±19.5784,差异有统计学意义(P＜0.05);AST水平分别为:105.3750±29.0583、93.0000±22.7799、93.2000±33.4220,各组间差异无统计学意义(P＞0.05);CD46+/CD8+T细胞分别为:1.9162±0.2778、1.5654±0.4750、1.4616±0.2762,差异有统计学意义(P＞0.05);3组肝脏间质及汇管区淋巴细胞浸润程度依次减弱,供肝灶状坏死程度逐渐减轻,在保留脾脏组中建模后第14天脾脏边缘区及淋巴鞘较建模同时切除的脾脏增宽.结论 在小鼠同种异体肝移植排斥反应中细胞免疫起主要作用,脾切除可部分抑制同种异体肝移植急性排斥反应,保护供体肝脏.     

转化生长因子β1与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系

目的　研究转化生长因子 β1(TGF -β1)与大鼠小肠同种异体移植急性排斥反应的关系。方法　试验分 3组。Ⅰ组 :Wistar→SD小肠移植 ;Ⅱ组 :Wistar→SD小肠移植 +环孢素A(CsA) ;Ⅲ组 :Wistar→SD小肠移植 +重组人转化生长因子 β1(rhTGF -β1)。术后 3、5、7d观察病理学改变并用半定量RT -PCR方法检测干扰素γ(IFN -γ)、白细胞介素 2 (IL -2 )、TGF -β1mRNA。结果　病理改变 :Ⅰ组术后 3d出现排斥反应 ,7d最重 ;Ⅱ组术后 7d部分出现轻度排斥反应 ;Ⅲ组术后 5d出现轻度排斥反应 ,术后 7d中度排斥反应。Ⅰ组IFN -γ、IL -2mRNA术后明显增高 ;Ⅱ组术后略升高 ,与Ⅰ组相比差异有统计学意义 ( P <0 .0 1) ;Ⅲ组IFN -γ、IL -2mRNA术后升高 ,较Ⅰ组升高程度低 ,二者比较差异有统计学意义 (P <0 .0 5 )。Ⅰ组TGF -β1mRNA术后增高 ,Ⅱ组术后增高大于Ⅰ组 ,两者差异有统计学意义 (P <0 .0 1)。结论　TGF -β1可抑制大鼠小肠移植急性排斥反应     

大鼠原位肝移植中血红素加氧酶-1表达对BCL-2和VCAM-1影响

目的 探讨血红素加氧酶-1(HO-1)对大鼠原位肝移植后BCL-2和VCAM-1的影响.方法 建立大鼠原位肝移植排斥模型,将大鼠分为三组:对照组(A组),ZnPP组(B组)和CoPP组(C组).三组分别于3 d和7 d处死,取肝脏标本.荧光实时RT-PCR检测HO-1及VCAM-1的表达,免疫组化方法(SP)检测BCL-2的表达.结果 (1)HO-1在C组表达明显升高,B组不明显,A组介于两组之间.(2)VCAM-1在3 d时C组与A或B组相比有明显统计学意义(P＜0.05),A组与B组相比无统计学意义(P＞0.05).7 d时B组与C组相比有明显统计学意义(P＜0.05),A组与B或C组相比无统计学意义(P＞0.05).(3)BCL-2免疫组化染色阳性面积百分率(-x±S,%)统计学分析显示,3 d和7 d时C组与A或B组相比较有明显的统计学意义(P＜0.05),A组和B组相比无统计学意义(P＞0.05).结论 HO-1过表达上调BCL-2的表达,抑制VCAM-1的表达.     

大鼠肝移植术后并发症的预防

目的 探讨大鼠肝移植术后并发症的预防措施.方法 比较建立模型初期所行50例大鼠肝移植前20例(前组)与后30例(后组)的手术时间、无肝期、手术成功率、术后生存率及并发症.结果 与前组相比,后组供体手术时间、供体修整与套管安装时间、无肝期及受体手术时间明显缩短(P＜0.05),手术成功率与术后3 d及7 d生存率明显提高(P＜0.05),早期术后出血并发症明显减少(P＜0.05),但胆道并发症差异无统计学意义(P＞0.05).结论 掌握大鼠肝移植技术存在明显的学习曲线,熟练的手术操作及术后并发症的合理预防可提高手术成功率及术后大鼠生存率.     

绿茶多酚保存同种异体神经移植体的实验研究

[目的]研究绿茶多酚溶液保存的同种异体神经修复大鼠坐骨神经缺损的效果.[方法] 48只成年雄性Wista大鼠,随机分为4组,每组12只,将坐骨神经在梨状肌孔下5 mm 处切除1.0 cm, 神经缺损分别用4种移植物桥接.A组:自体神经移植;B组:新鲜异体神经移植;C组:经冷冻处理的异体神经移植;D组:用绿茶多酚保存的异体神经移植.术后6、12周通过大体观察、电生理学检查、组织学观察、透射电镜观察、图像分析与定量学检测评价各组修复神经缺损的效果.[结果]A、D组间差异无统计学意义(P＞0.05),A组、D组的各项指标均优于B组、C组(P＜0.05或P＜0.01).[结论]绿茶多酚溶液保存的同种异体神经是良好的神经移植替代材料.     

转录因子T-bet与GATA结合蛋白3的比值在大鼠肺移植急性排斥反应中的mRNA表达及其意义

目的 探讨T-bet(T-box expression in T cells)和GATA结合蛋白3(GATA-3)在大鼠肺移植急性排斥反应中的mRNA表达及其意义.方法 建立同种异体大鼠肺移植模型,实验分为正常对照组(n=5只)、同种异体移植3 d组(n=4只)和5 d组(n=6只),用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法,检测移植后肺组织中T-bet和GATA-3的mRNA表达.结果 实时荧光定量RT-PCR检测T-bet和GATA-3的扩增效率为78%～85%,批内和批间实验循环阈值(Ct)变化均＜0.15.与止常对照和右侧非移植肺比较,同种异体移植术后3 d组,T-bet和GATA-3无显著性改变,但其比值明显高于右侧肺;同种异体移植术后5 d组,T-bet表达增高(9.31拷贝/106 18 S拷贝),但差异无统计学意义(P＞0.05),GATA-3表达下降(0.88拷贝/105 18 S拷贝),T-bet/GATA3的比值增高(1.12),差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 实时荧光定量RT-PCR检测T-bet和GATA-3结果准确可靠.在急性排斥反应中,T-bet表达升高,GATA-3表达降低,其中GATA-3的表达起主导作用.T-bet/GATA-3的比值比单独检测T-bet或GATA-3更能客观地评价大鼠肺移植急性排斥反应.     

供者未成熟树突状细胞联合西罗莫司诱导大鼠皮肤移植物免疫耐受研究

目的：观察大鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞（i mDCs）联合西罗莫司（SRL）在诱导大鼠同种异体皮肤移植免疫耐受中的协同作用。方法：以雄性Lewis大鼠为供者、Brown-Norway大鼠为受者,建立大鼠同种异体皮肤移植模型。对照（control）组术前不给予任何干预;未成熟树突状细胞（imDCs）组于术前7天经尾静脉注射供者骨髓来源的未成熟树突状细胞;西罗莫司（SRL）组于术后连续7天经胃管灌注西罗莫司;联合（imDCs＋SRL）组于术前7天经尾静脉注射供者骨髓来源的未成熟树突状细胞,并于术后连续7天经胃管灌注西罗莫司。结果：对照组、未成熟树突状细胞（imDC）组、西罗莫司（SRL）组、联合（imDCs＋SRL）组大鼠同种异体皮肤移植物术后存活时间分别为（8.25±1.75）（、10.25±1.91）（、10.64±2.50）（、21.38±2.97）天。方差分析提示组间差异有统计学意义（P〈0.05）;S-N-K检验提示除单独应用未成熟DC组与单独应用SRL组外,各组间的差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论：供者骨髓来源未成熟树突状细胞可诱导大鼠同种异体皮肤移植免疫耐受;联合使用西罗莫司可延长移植皮片成活时间。     

猪肝肠联合移植免疫耐受的实验研究

目的 研究猪肝肠联合移植中肝移植物对同源小肠移植物免疫耐受的作用.方法 70头杂交长白猪分为4组,A、B、C组为辅助性同种异体肝肠联合移植(每组20头);D组为节段性间种异体小肠移植(10头).移植后A、D组未用免疫抑制剂治疗,B、C组分别采用常规剂量和小剂量的环孢素和甲基强的松龙治疗.结果 A组术后小肠移植物较D组排斥反应时间延迟,程度明显减轻(P＜0.05).常规剂量的B组与小剂量的C组在术后存活时间、排斥反应开始时间以及排斥反应程度方面差异无统计学意义(P＞0.05).结论 猪同种异体肝肠联合移植中肝移植物可以诱导同源小肠移植物免疫耐受.     

骨髓间充质干细胞对大鼠慢性胰腺炎炎性因子的影响

目的 观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠慢性胰腺炎(CP)炎性因子的影响。方法 将80只SD大鼠随机分为空白组(20只,注射无菌生理盐水),模型组[20只,尾静脉注射二丁基二氯化物(DBTC)制作大鼠CP模型],假治疗组(20只,尾静脉注射DBTC制作大鼠CP模型后,输入和BMSCs等量的无菌生理盐水)和治疗组(20只,于CP模型制作成功后尾静脉注射体外培养的同种异体BMSCs)。80 d后采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠胰腺中白细胞介素(IL)-1、IL-6、IL-8、IL-10、肿瘤坏死因子(TNF)-d、转化生长因子(TGF)-β水平。结果 治疗组中IL-1 (652.326±36.424) ng/L,IL-6(8.347±1.094) ng/L,IL-8( 352.487±69.340) ng/L,rGF-β(0.020±0.006) μg/L,均低于假治疗组与模型组(P＜0.05),IL-10(603.799±89.374) ng/L,TNF-α( 507.450±90.130)μg/L则高于假治疗组和模型组(P＜0.05)。模型组和假治疗组之间IL-1、IL-6、IL-8、IL-10、TNF-α、TGF-β的表达水平差异无统计学意义(P＞0.05)。结论 同种异体BMSCs的输入可以降低CP中促炎因子的水平,提高抗炎因子的浓度,有助于减轻CP的炎症反应,减缓甚至阻止CP的发展。     

抗CD-40L单抗加小剂量、短程CsA对肝移植大鼠生存期和Th1/Th2平衡偏移的影响

目的 采用抗CD-40L单抗加小剂量CsA的联合免疫治疗,观察其对大鼠肝移植受体生存时间和Th1/Th2细胞因子谱变化的影响.方法 在建立稳定大鼠肝移植模型的基础上,将整个实验分为4组.A组(同基因对照组):SD→SD;B组(同种异体基因免疫排斥组):SD→Wistar,不用任何治疗措施;C组:SD→Wistar,CsA应用d1～d5;D组:SD→Wistar,CsA应用d1～d5加抗CD-40L(CD-154)单抗应用d0、d2.观察各组大鼠肝移植受体生存时间,移植后第7天用ELISA法检测外周血细胞因子水平.结果 A组、D组受体大鼠均可长期存活,B组生存时间仅为(13.8±2.4)d.IL-2、IFN-γ在B组的血清水平显著高于其余各组(P＜0.05),TNF-α在B组的表达水平高于不同免疫抑制组,但差异无显著统计学意义.IL-4、IL10较A组均有所增加,尤其D组的IL-10表达水平较B组显著增高(P＜0.05).结论 抗CD-40L单抗加小剂量CsA(伴或不伴DSBT)联合免疫治疗,可有效延长大鼠肝移植受体的生存时间,Th2类细胞因子的高水平表达与诱导移植耐受、抑制排斥反应有重要关联,有助于大鼠肝移植受体和移植肝的长期存活.     

受体性别对肝移植术后早期肝功能的影响

目的 探讨受体性别对肝移植术后早期肝功能的影响.方法 根据受体性别将21例肝移植病人分为2组:男性(M)和女性(F)组,比较两组术后7 d ALT、AKP,ALB的水平.结果 F组肝移植效果优于M组病人,两组术后7 d ALT及AKP水平有显著性差异(P＜0.05).术后7 d白蛋白(ALB)水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 性别对肝移植病人术后早期肝功能的恢复有重要影响.     

深低温冻储在大鼠同种异体气管移植中免疫抑制作用

目的探讨深低温冻储在同种异体气管移植中的作用.方法选择近交系Lewis大鼠自体气管移植(L-L组),及F344和Lewis行未冻储(F-L组)、冻储(CF-L组)同种异体气管移植,分别在术后2、7、30天观察各组移植段光镜下免疫排斥反应变化.结果①CF-L组在移植术后各时间点与F-L组相比较,炎细胞浸润程度及上皮下组织增殖相比显著降低(P＜0.05).②CF-L组PBMC内γ-IFN表达量在术后2、7、30天均明显低于F-L组(P＜0.01).③F-L组在移植术后2、7、30天,凋亡细胞计数均较L-L组和CF-L组高(P＞0.05).结论深低温冻储可能通过调节同种异体气管移植术后Th型细胞因子的变化和移植物细胞凋亡,从而抑制了免疫排斥反应.     

TGF-β1修饰的未成熟树突状细胞对大鼠移植小肠细胞凋亡的影响

目的 探讨经TGF-β1修饰的未成熟树突状细胞(imDC)预处理大鼠小肠移植受体后移植肠细胞凋亡的变化及意义.方法 选用近交系F344/N和BN大鼠建立全小肠异位移植模型,分4组,每组24只.A组:同基因移植组(BN→BN);B组:异基因移植组(F344/N→BN);C组:F344/N→BN异基因移植+TGF-β1基因转染imDC;D组:F344/N→BN异基因移植+TGF-β1基因转染imDC+FK506.术后3、5、7 d各处死6只,取出移植肠.行免疫组化检测Bcl-2和Bax表达,TUNEL及电镜观察细胞凋亡.同期进行移植肠组织病理学检查.结果 C组中Bcl-2在术后有轻度下降,而Bax的表达则略有升高,但明显低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05);D组术后Bcl-2及Bax的表达与A组无明显差异.C组的凋亡细胞数在术后逐渐增加,但数量始终较少,与B组比较差异有统计学意义(P＜0.05);D组仅见少量凋亡细胞.结论 经TGF-β1基因转染的imDC预处理受体可以抑制细胞凋亡,从而减轻小肠移植术后急性排斥反应的程度.     

树突状细胞诱导大鼠肝移植免疫耐受的研究

目的 观察大鼠骨髓来源的树突状细胞(DC)对同种异体肝移植大鼠免疫耐受的影响.方法 用不同细胞因子诱导培养大鼠骨髓来源的成熟DC(mDC)和不成熟DC(imDC),采用形态学观察、表型分析和功能学实验对培养细胞进行鉴定,构建Wistar大鼠和SD大鼠肝移植模型,并于移植前5 d注射到受体大鼠内,研究它们对移植后大鼠肝脏病理及存活时间的影响情况.结果 DC细胞形态不规则,大多数细胞表面有细长树枝状突起,mDC和imDC表面均表达表面分子OX62,而表面分子CD86在imDC表面低表达,在mDC表面高表达.imDC和mDC与淋巴细胞相互作用,发现imDC对淋巴细胞的增殖无明显作用,相反mDC对淋巴细胞的增殖有明显的促进作用.注射imDC的受体大鼠的存活时间显著长于注射mDC的受体大鼠,注射mDC的肝移植大鼠在移植后较早且出现较强的急性排斥反应,而注射mDC的大鼠在移植后16 d才开始出现轻度急性排斥反应.结论 建立了在体外大量扩增大鼠骨髓来源DC的方法,imDC能显著延长受体大鼠肝移植的存活时间.     

SX-1液对肝脏保存效果的实验研究

目的 应用改良后的Kamada二袖套法大鼠原位肝移植模型,检验SX-1液、HC-A液和UW液对肝脏保存的效果.方法 在无菌条件下配制肝脏保存液.建立大鼠原位肝移植模型.使用SX-1液、UW液和HC-A液保存大鼠肝脏2、8、24 h后行大鼠原位肝移植,于移植后6 h比较各项肝脏功能.结果 对于ALT、AST,SX-1液组(2、8、24 h)与UW液组同步升高,分析无统计学意义(P＞0.05),与HC-A液组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).对于LDH,SX-1液组(2 h、8 h、24 h)与HC-A液组同步升高,差异无统计学意义(P＞0.05),与UW液组相比,差异有统计学意义(P＜0.05).对于分泌胆汁的肝脏个数,各组别与分泌胆汁的肝脏个数无差别(P＞0.05).本组内各时间点分泌胆汁个数有差别(P＜0.05).随肝脏保存时间增长,分泌胆汁的肝脏个数减少.结论 经大鼠原位肝移植模型证实,SX-1液在肝脏酶学方面与UW液作用相当,超过HC-A液水平.肝移植后6 h肝脏分泌胆汁的个数方面,SX-1液与HC-A液、UW液间无明显差别.