大鼠全脑缺血再灌注脑微血管损伤与修复动态变化的实验研究

目的 通过检测FⅧ相关抗原(von Willebrand factor,vWF)和层粘蛋白(laminin)在大鼠全脑缺血再灌注后脑微血管的表达,以研究脑缺血再灌注过程中微血管的损伤与修复。方法 将大鼠随机分为假手术对照组和缺血再灌注(IR)组,两组又各分为再灌注1、3、6、12、24、48、72h组,动物模型采用全脑缺血模型中的三血管阻塞法建立,用免疫组化法检测脑缺血再灌注不同时间vWF和Laminin的表达规律。结果 假手术各组vWF和Laminin均成强阳性表达,脑缺血再灌注组各时间点表达均低于假手术组,缺血再灌注1h就出现表达降低,以后逐渐下降,24～48h表达达最低值,72h表达又开始上升。结论 大鼠全脑缺血再灌注病理过程中,再灌注1h就出现了脑微血管的损伤,48～72h出现了血管的修复。     

厄贝沙坦预处理对脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织含水量以及IgG和水通道蛋白4表达的影响

目的 探讨厄贝沙坦预处理对脑缺血再灌注(CIR)损伤大鼠脑组织含水量以及IgG和水通道蛋白4(AQP4)表达的影响.方法 用厄贝沙坦灌胃预处理SD大鼠,连续21d后用改良Longa法建立CIR模型,分别于缺血90 min再灌注2 h和48 h后测定其脑组织含水量,并采用免疫组化法测定相应时间点IgG及AQP4的表达.结果 与假手术组及CIR对照组进行比较.结果 各组中,CIR对照组大鼠脑组织含水量最高,其次是厄贝沙坦低剂量组,然后是厄贝沙坦高剂量组,假手术组最低(P＜0.05～0.01).再灌注2 h时,各组大鼠脑组织IgG表达差异无统计学意义;再灌注48 h时,CIR对照组大鼠脑组织IgG表达最高,其次是厄贝沙坦低剂量组,然后是厄贝沙坦高剂量组,假手术组最低(P＜0.05～0.01).再灌注2 h时,各组中厄贝沙坦高剂量组大鼠脑组织AQP4表达最多,然后是厄贝沙坦低剂最组与CIR对照组,假手术组最少(均P＜0.01);再灌注48 h时,各组中厄贝沙坦高剂量组及低剂量组大鼠脑组织AQP4表达最多,其次是CIR对照组,假手术组最少(均P＜0.01).结论 厄贝沙坦预处理可能通过上调CIR大鼠脑组织AQP4的表达以减少其脑组织含水量和IgG表达,从而起到脑保护作用.     

环氧合酶-2抑制剂对脑外伤大鼠大脑皮质水通道蛋白9表达的影响

目的 探讨环氧合酶-2抑制剂（塞来昔布）对脑外伤大鼠大脑皮质水通道蛋白9（AQP9）表达的影响.方法 SD大鼠150只,随机分为假手术组、脑外伤组和塞来昔布组,各50只.采用Feeney＇s自由落体法制作脑外伤模型,采用干湿重法测定脑含水量,免疫组化和Western blot方法检测大鼠大脑皮质水通道蛋白9的表达.结果 脑外伤后3h含水量明显上升,6h时皮质含水量最高,24 h明显下降,而相同时间点的塞来昔布组大鼠含水量则明显较低（P＜0.05）.免疫组化和Western blot结果显示,相同时间点的脑外伤组大鼠大脑皮质AQP9蛋白表达量明显高于假手术组（P＜0.05）,而给予塞来昔布处理后AQP9蛋白的表达明显降低（P＜0.05）.结论 塞来昔布能够通过降低AQP9蛋白表达参与脑外伤水肿的调节.     

腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的脑保护作用

目的 观察腺苷预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的改善作用及脑保护机制.方法 线栓法建立大鼠局灶性脑缺血2 h后再灌注损伤模型;SD大鼠60只,随机分为假手术组(F组),缺血再灌注组(IR组),腺苷预处理组(AP组),每组20只;通过HE 染色在光镜下观察神经细胞损伤变化,免疫组化法检测Bax蛋白的阳性表达.结果 光镜下,假手术组(F组)神经细胞结构正常,腺苷预处理组(AP组)和缺血再灌注组(IR组)均有不同程度的缺血再灌注损伤,腺苷预处理组较缺血再灌注组损伤轻;假手术组Bax蛋白表达极弱,缺血再灌注组和腺苷预处理组在脑缺血再灌注后2 h接近缺血核心区出现Bax蛋白阳性表达,6 h后表达增多,24 h达到高峰,72 h开始减少.与假手术组相比,腺苷预处理组和缺血再灌注组Bax蛋白阳性细胞数显著增多(P＜0.05);与缺血再灌注组相比,腺苷预处理组Bax蛋白阳性细胞数显著减少(P＜0.05).结论 腺苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,腺苷可通过下调Bax蛋白的表达发挥脑保护作用.     

粒细胞集落刺激因子对脑出血大鼠脑水肿及星型胶质细胞的影响

目的 研究粒细胞集落刺激因子(G-CSF)对大鼠脑出血(ICH)后脑水肿和星型胶质细胞可塑性的影响及神经保护作用.方法 SD大鼠随机分为假手术组、模型组、治疗组.断尾取自体血法制备大鼠ICH模型,治疗组于造模1h后腹腔注射重组粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF) 60 μg/kg.3组大鼠于术后6h、24h、48h、72h、7d、10d处死,干湿重法测定脑组织含水量、免疫组化检测血肿周围MMP-9、GFAP的动态变化.结果 模型组脑组织含水量明显高于假手术组(P＜0.05),造模后48h、72h最明显,与组内6h、24h、7d、10d相比差异显著(P＜0.05);治疗组脑组织含水量明显低于模型组(P＜0.05).模型组各时点MMP-9表达明显高于假手术组(P＜0.05),48h、72h表达最明显,与组内6h、24h、7d、1Od比较差异显著(P＜0.05);治疗组各时点MMP-9表达显著低于模型组(P＜0.05).假手术组脑组织含水量与MMP-9表达无相关性(r＝0.429,P＞0.05),模型组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r ＝0.922,P＜0.05),治疗组脑组织含水量与MMP-9表达呈正相关关系(r＝0.844,P＜0.05).假手术组未见GFAP阳性细胞表达;模型组6h出现少量GFAP阳性细胞表达,48h增多,72h大量表达,7d达高峰,10d表达减弱;治疗组GFAP阳性细胞表达6h与模型组相似,24h、48h、72h、7d、10d较模型组明显减少(P＜0.05).结论 ICH后G-CSF可抑制MMP-9表达减轻脑水肿程度,抑制星形胶质细胞过度活化,对出血后脑组织具有保护作用.     

依达拉奉对阿尔茨海默病模型大鼠认知损害的保护作用和脑内Bcl-2表达的影响

目的:观察依达拉奉对双侧脑室内注射链脲菌素(ICV-STZ)诱导的阿尔茨海默病(AD)模型大鼠认识功能的影响,并探讨其作用机制。方法:48只成年雄性SD大鼠随机分为4组：假手术组(S)、依达拉奉+假手术组(E+S)、模型组(L)、依达拉奉+制模组(E+L)。Morris水迷宫测试各组大鼠认知功能;比色法检测各组大鼠海马和皮质的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;免疫组织化学法检测大鼠海马和皮质的Bcl-2表达。结果: Morris水迷宫测试中,与S组比较,L组大鼠目标象限停留时间显著减少(P＜0.05),潜伏期显著延长(P＜0.05);E+L组比L组目标象限停留时间显著增加(P＜0.05),潜伏期显著缩短(P＜0.05)。E+L组与L组比较,脑内SOD含量显著增加(P＜0.05),MDA含量显著减少(P＜0.05)。免疫组织化学染色显示,与L组比较,E+L组Bcl-2表达阳性率显著增高(P＜0.05)。结论:依达拉奉能够保护STZ诱导的AD模型大鼠的认知损害,其机制可能是改善大鼠脑内氧化应激和减少神经细胞凋亡。     

脑出血大鼠血肿周围白介素-10的表达及其与脑水肿的相关性

目的 探讨脑出血(ICH)大鼠血肿周围白介素-10(IL-10)的表达及其与脑水肿的相关性.方法 130只SD大鼠随机分为正常对照组、假手术组和ICH组;应用肝素化Ⅶ型胶原酶建立大鼠ICH模型;制模后12 h、24 h、48 h、72 h、7 d及14 d应用Bederson量表评定神经功能缺损程度,干/湿重法测定脑组织含水量,免疫组化方法检测脑组织血肿周围IL-10的表达.结果 (1)ICH组大鼠神经功能缺损评分与脑组织含水量均在ICH 12 h升高,48 h达高峰,7 d后恢复正常.(2)ICH组脑组织IL-10表达ICH 12 h明显升高,14 d达高峰,各时间点间均显著高于正常对照组和假手术组(P＜0.05～0.01).(3)ICH组神经功能缺损评分与脑组织含水量呈正相关(r=0.761,P＜0.01),脑组织IL-10表达与脑组织含水量、神经功能缺损评分呈负相关(r=-0.65,-0.753,均P＜0.01).结论 ICH大鼠血肿周围脑组织IL-10表达逐渐升高,可能参与了ICH后减轻脑水肿、促进神经功能恢复的脑保护作用.     

黄芪多糖对脑出血大鼠脑组织含铁血红素氧合酶-1蛋白表达及含水量、超微结构的影响

目的 研究黄芪多糖对脑出血大鼠脑组织含铁血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白表达及含水量、超微结构的影响.方法 139只雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血组与黄芪多糖治疗组.采用Ⅶ型胶原酶诱导法制作SD大鼠脑出血模型,假手术组以等量生理盐水代替Ⅶ型胶原酶;黄芪多糖治疗组给予黄芪多糖25 mg/kg腹腔注射,每天1次,直至处死.分别于脑出血后12 h、24 h、2 d、4 d、7 d 5个时间点对各组大鼠进行神经行为学评分,测量脑组织含水量和用免疫组化法检测HO-1蛋白表达,透射电镜观察脑出血后4 d 血肿周围神经元的超微结构.结果 脑出血组与黄芪多糖治疗组大鼠脑出血后脑组织 HO-1 表达以及脑组织含水量较假手术组显著增高(均P＜0. 01);脑出血后12 h HO-1蛋白即有表达, 2 d 达高峰, 尔后逐渐下降. 黄芪多糖治疗组与脑出血组比较, HO-1表达的变化相同,但各时间点表达均高于脑出血组(P＜0.05～0.01);脑组织含水量各时间点均显著降低(P＜0.05～0.01);4 d、7 d时大鼠神经行为学评分明显减少(均P＜0.01),神经元超微结构病理改变轻.结论 黄芪多糖可促进脑出血后脑组织HO-1的表达, 这可能是其减轻脑出血后脑水肿和脑组织损伤的机制之一.     

垂体腺苷酸环化酶激活肽对大鼠脑缺血再灌注后细胞间黏附分子表达的影响

目的 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注时ICAM-1在PACAP脑保护机制中的作用.方法 采用大脑中动脉线栓法建立局灶性脑缺血再灌注模型,对54只大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和PACAP组,在大鼠脑缺血2h后进行再灌注.在再灌注2h、24h、48h,应用免疫组化法检测脑组织ICAM-1的表达.结果 局灶性脑缺血再灌注后,与假手术组比较,ICAM-1的表达量显著增加,灰度值分别为2h128.67±1.51(P＜0.05)、12h168.67±2.66(P＜0.01)、24h173.17±2.51(P＜0.01);应用PACAP与缺血再灌注组比较,ICAM-1表达的峰值明显降低,灰度值分别为123.00±2.98、143.67±2.42、144.67±3.01(P＜0.01.结论 PACAP能抑制大鼠局灶性脑缺血再灌注时ICAM-1的表达,进而抑制炎症反应,这可能是其脑保护作用之一.     

胰岛素对大鼠脑缺血再灌注后Bcl-2表达及细胞凋亡的影响

目的 探讨胰岛素对大鼠脑缺血再灌注后Bcl-2表达及细胞凋亡的影响.方法 将动物随机分为假手术组、缺血组及干预组,参照Zea Longa线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)再灌注模型,干预组大鼠在脑缺血即刻给予胰岛素及葡萄糖腹腔注射,分别在左侧MCAO2h再灌注不同时间点断头取脑,脑皮质神经元Bcl-2的表达通过免疫组化法来测定,并采用TUNEL法原住标记DNA片段,检测TUNEL阳性细胞的变化.结果 缺血组大鼠脑皮质Bcl-2的表达较假手术组显著增强(P＜0.01),TUNEL阳性细胞数较假手术组显著增多(P＜0.01);给予胰岛素处理后,Bcl-2的表达较缺血组显著增强(P＜0.01),TUNEL阳性细胞数较缺血组明显减少(P＜0.01),但两者均显著高于假手术组(P＜0.01).结论 短暂的脑缺血再灌注可导致脑皮质神经元中Bcl-2的表达增加,抗细胞凋亡;胰岛素可上调脑皮质神经元中Bcl-2的表达,发挥神经保护作用.     

电刺激预处理对大鼠颅脑创伤后认知功能的影响

目的探讨非创伤性（电刺激）动员外周血内皮祖细胞对大鼠颅脑创伤后认知功能的影响及其可能机制。方法于电刺激后24h对成年雄性Wistar大鼠施行液压打击术,制备颅脑创伤模型,流式细胞术测量创伤后外周血内皮祖细胞数量;免疫组织化学染色观察患侧海马区血管性血友病因子表达阳性（vwF）微血管密度;Morris水迷宫实验评价大鼠伤后认知功能恢复程度。结果与单纯打击组比较,创伤后3h和6h电刺激预处理组大鼠外周血内皮祖细胞数量显著升高（均P=0．000）,之后逐渐降至正常水平;与其他各组相比,伤后第1天电刺激预处理组大鼠海马区vWF微血管密度即开始增加,至第7天达高峰平台期（P=0．000）;与单纯打击组相比,Morris水迷宫实验训练第3天时电刺激预处理组大鼠逃避潜伏期开始缩短,随着训练时间的延长,组间差异明显增加且具有统计学意义（P=0．016）。结论电刺激预处理可促进颅脑创伤后认知功能的恢复。其潜在的机制可能与创伤前动员机体外周血内皮祖细胞,使得伤后更多的内皮祖细胞归巢到损伤区域,有助于伤后血管新生和神经功能的恢复。     

重组人促红细胞生成素对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨重组人促红细胞生成素(EPO)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤所致炎性反应的保护机制。方法采用线拴法制备大鼠局灶性大脑中动脉缺血再灌注模型,应用TTC染色法、干湿重法、常规HE染色法观察EPO治疗前后再灌注24h脑梗死体积、脑组织含水量以及组织学变化,应用RT- PCR方法检测EPO治疗前后再灌注lh、3h、6h、12 h、24h、72 h缺血侧脑皮质IL-1β、TNF-α基因表达的变化。结果与假手术组相比,EPO可显著缩小缺血再灌注24h所致的脑梗死体积(P＜0.01),降低梗死侧脑组织含水量(P＜0.01),减轻病理学变化。缺血再灌注各时相点缺血侧皮层IL -lβ mRNA和TNF -α mRNA表达均显著上调(P＜0.01),12 h达高峰。EPO治疗后lh、3h、6h缺血侧皮层IL - 13 mRNA表达显著下降,与病理组相应时间点相比,分别降低了63％、55％和84％(P＜0.01)。EPO治疗后lh、3h、6h缺血侧皮层TNF -α mRNA表达亦显著下降,与病理组相应时间点相比,分别降低了75％、76％和95％（P＜0.01）。结论EPO可能通过抑制IL - 1β、TNF-α的基因表达,降低缺血再灌注的炎性反应损伤而改善脑组织的结构和功能。     

电刺激预处理对大鼠颅脑创伤后认知功能的影响

目的探讨非创伤性(电刺激)动员外周血内皮祖细胞对大鼠颅脑创伤后认知功能的影响及其可能机制。方法于电刺激后24h对成年雄性Wistar大鼠施行液压打击术,制备颅脑创伤模型,流式细胞术测量创伤后外周血内皮祖细胞数量;免疫组织化学染色观察患侧海马区血管性血友病因子表达阳性(vwF~+)微血管密度;Morris水迷宫实验评价大鼠伤后认知功能恢复程度。结果与单纯打击组比较,创伤后3h和6h电刺激预处理组大鼠外周血内皮祖细胞数量显著升高(均P=0.000),之后逐渐降至正常水平;与其他各组相比,伤后第1天电刺激预处理组大鼠海马区vWF~+微血管密度即开始增加,至第7天达高峰平台期(P=0.000);与单纯打击组相比,Morris水迷宫实验训练第3天时电刺激预处理组大鼠逃避潜伏期开始缩短,随着训练时间的延长,组间差异明显增加且具有统计学意义(P=0.016)。结论电刺激预处理可促进颅脑创伤后认知功能的恢复。其潜在的机制可能与创伤前动员机体外周血内皮祖细胞,使得伤后更多的内皮祖细胞归巢到损伤区域,有助于伤后血管新生和神经功能的恢复。     

创伤性脑损伤后大鼠脑组织CtyC与AIF的变化及其对神经细胞的影响

目的 探讨创伤性脑损伤后大鼠脑组织中细胞色素C(ctyC)与凋亡诱导因子(AIF)的变化及其对神经细胞的影响.方法 70只SD大鼠按随机数字表法分为假损伤组(n=10)和脑损伤组,脑损伤组按伤后1、6、24、48、72和168 h观察时间点分为6个亚组(n=10).用Feeny氏自由落体撞击法制作重型颅脑损伤模型.利用免疫荧光和共聚焦显微镜技术测定损伤后不同时间点CtyC和AIF的荧光表达强度.用免疫荧光双标记技术观察损伤后24 h时CtyC及AIF对神经细胞的影响.结果 (1)脑损伤后脑组织中CtyC变化:伤后1、6、24、48 h,皮层CtyC分别增高为1.89±0.03、2.69±0.07、2.99±0.06、3.05±0.05,海马CtyC分别增高为1.34±0.04、1.87±0.03、2.60±0.03、2.80±0.06,明显高于假损伤组,差异有统计学意义(P<0.05).72h皮层与海马CtyC分别降为1.94±0.05及1.12±0.04,亦明显高于假损伤组,差异有统计学意义(P<0.05).168 h皮层与海马CtyC与假损伤组比较差异无统计学意义(P>0.05).(2)脑损伤后脑组织中AIF变化:伤后1、6、24、48 h,皮层AIF分别增高为1.82±0.16、2.16±0.34、2.75±0.22、2.87±0.12,海马AIF分别增高为1.27±0.06、2.01±0.05、2.49±0.02、2.62±0.05,明显高于假损伤组,差异有统计学意义(P<0.05).72 h皮层与海马AIF分别降为1.35±0.09及1.32±0.05,亦明显高于假损伤组,差异有统计学意义(P<0.05).168 h皮层与海马AIF恢复正常水平,与假损伤组比较差异无统计学意义(P>0.05).(3)CtyC与AIF都能引起神经细胞凋亡.结论 创伤性脑损伤后CtyC和AIF可从线粒体释放,并起到凋亡因子的作用,诱导神经细胞发生凋亡.     

高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液治疗颅脑创伤合并失血性休克的疗效及其脑保护作用

目的探讨高渗氯化钠羟乙基淀粉40注射液(hypertonic sodium chloride hydroxyethyl starch 40,HSH40)治疗颅脑创伤(traumatic brain injury,TBI)合并失血性休克患者的临床效果及其脑保护作用。方法入选45例TBI合并失血性休克患者,随机分为3组各15例。A组予乳酸林格液(Lactated Ringer's solution,LRS)500mL,20mL/min。B组予甘露醇250mL,15mL/min。C组予HSH40 250mL,15mL/min。3组均予常规急救处理。观察治疗30min后平均动脉压(mean arterial pressure,MAP)、心率(heart rate,HR)、Glasgow昏迷指数(Glasgow coma scale,GCS)的变化。同时,采用ELISA法检测各组血清S-100B、Nrf2、HO-1的表达。结果在液体复苏前,3组MAP、HR、GCS均无明显差异(P0.05)。治疗30 min后,A组MAP、HR较治疗前均明显好转(P0.05),但GCS无明显改变(P0.05)。B组GCS较治疗前均明显好转(P0.05),但MAP、HR无明显改变(P0.05)。C组MAP、HR、GCS较同组治疗前均明显好转(P0.05)。液体复苏前,3组血清S100B、Nrf2、HO-1表达均无明显差异(P0.05)。治疗后,A组、B组血清中S100B、Nrf2、HO-1表达与同组治疗前比较,均无显著性差异(P0.05)。C组血清中S100B、Nrf2、HO-1表达与同组治疗前比较,均有显著差异(P0.05)。结论在抢救TBI合并创伤失血性休克患者中,HSH40具有良好的抗休克作用,迅速、有效,同时具有脑保护作用,其机制可能与激活Nrf2,上调HO-1的表达有关。     

Early neuronal expression of tumor necrosis factor-alpha after experimental brain injury contributes to neurological impairment

Tumor necrosis factor-alpha (TNF alpha) is a pleiotropic cytokine involved in inflammatory cascades associated with CNS injury. To examine the role of TNF alpha in the acute pathophysiology of traumatic brain injury (TBI), we studied its expression, localization and modulation in a clinically relevant rat model of non-penetrating head trauma. TNF alpha levels increased significantly in the injured cortex at 1 and 4, but not at 12, 24 or 72 h after severe lateral fluid-percussion trauma (2.6-2.7 atm). TNF alpha was not elevated after mild injury. At 1 and 4 h after severe TBI, marked increases of TNF alpha were localized immunocytochemically to neurons of the injured cerebral cortex. A small population of astrocytes, ventricular cells and microvessels, also showed positive TNF alpha staining, but this expression was not injury-dependent. Macrophages that were present in a hemorrhagic zone along the external capsule, corpus callosum and alveus hippocampus at 4 h after TBI did not express TNF alpha. Intracerebroventricular administration of a selective TNF alpha antagonist--soluble TNF alpha receptor fusion protein (sTNFR:Fc) (37.5 microg)--at 15 min before and 1 h after TBI, improved performance in a series of standardized motor tasks after injury. In contrast, intravenous administration of sTNFR:Fc (0.2, 1 or 5 mg/kg) at 15 min after trauma did not improve motor outcome. Collectively, this evidence suggests that enhanced early neuronal expression of TNF alpha after TBI contributes to subsequent neurological dysfunction.     

硫氧还蛋白还原酶 TrxR2在颅脑损伤大鼠皮质的表达变化

目的：探究硫氧还蛋白还原酶2（TrxR2）在颅脑损伤大鼠皮质的动态表达变化。方法54只雄性 SD 大鼠,随机分为正常对照组（n =6）和颅脑损伤组（n =48）。颅脑损伤组采用改良的 Freeny＆#39;s 自由落体装置制作颅脑损伤大鼠模型,正常对照组不做处理。伤后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h、3 d、7 d、14 d,采用实时荧光定量 PCR （quantitative real-time PCR,qRT-PCR）和Western blot 检测挫伤区周围皮质 TrxR2 mRNA 和蛋白的表达变化情况。结果 qRT-PCR 结果显示：皮质中 TrxR2 mRNA 颅脑损伤后1 h 表达增加,24 h 达到高峰,7 d 恢复正常;颅脑损伤组伤后1 h~3 d 各时间点 TrxR2 mRNA 表达明显高于正常对照组（均 P ＜0.05）。Western blot 检测显示：TrxR2蛋白在颅脑损伤后1 h 表达增加,24 h 达到高峰,14 d 恢复正常;颅脑损伤组1 h~7 d 各时间点 TrxR2蛋白表达高于正常对照组（均 P ＜0.05）。结论颅脑损伤后 TrxR2表达增多,提示 TrxR2作为一种急性应激反应蛋白参与颅脑损伤早期抗氧化应激反应。     

大鼠颅脑创伤后肝细胞生长因子表达变化的实验研究

目的 探讨肝细胞生长因子(HGF)在颅脑创伤后的表达趋势,为颅脑创伤治疗中的HGF干预策略提供前期研究基础. 方法 96只wistar大鼠按随机数字表法分为实验组和假手术组,实验组为液压冲击中度颅脑创伤大鼠,并分为伤后2h、6h、12h、24 h、72h、168 h、336 h组,假手术组不致伤,每组再分为两个亚组.每亚组6只,一组行HE及免疫组化染色,观察伤后病理变化及HGF的表达部位和表达量,另外一组用RT-PCR的方法 观察创伤后HGF mRNA表达情况.结果 在创伤后的大鼠大脑皮层组织中,HGF在蛋白水平以及基因水平都出现表达增高的情况.创伤边缘区HGF阳性细胞数从伤后24 h开始增多,168 h达高峰,336 h有所下降,但仍高于伤前水平,差异有统计学意义(P<0.05).HGF mRNA表达量从创伤后72 h开始增加,168 h达高峰,与假手术组比较差异有统计学意义(P<0.05). 结论 HGF作为神经营养因子和血管生长因子,可能参与了颅脑创伤后神经元的保护和组织的修复、再生.     

Delayed hemorrhagic hypotension exacerbates the hemodynamic and histopathologic consequences of traumatic brain injury in rats.

Alterations in cerebral autoregulation and cerebrovascular reactivity after traumatic brain injury (TBI) may increase the susceptibility of the brain to secondary insults, including arterial hypotension. The purpose of this study was to evaluate the consequences of mild hemorrhagic hypotension on hemodynamic and histopathologic outcome after TBI. Intubated, anesthetized male rats were subjected to moderate (1.94 to 2.18 atm) parasagittal fluid-percussion (FP) brain injury. After TBI, animals were exposed to either normotension (group 1: TBI alone, n = 6) or hypotension (group 2: TBI + hypotension, n = 6). Moderate hypotension (60 mm Hg/30 min) was induced 5 minutes after TBI or sham procedures by hemorrhage. Sham-operated controls (group 3, n = 7) underwent an induced hypotensive period, whereas normotensive controls (group 4, n = 4) did not. For measuring regional cerebral blood flow (rCBF), radiolabeled microspheres were injected before, 20 minutes after, and 60 minutes after TBI (n = 23). For quantitative histopathologic evaluation, separate groups of animals were perfusion-fixed 3 days after TBI (n = 22). At 20 minutes after TBI, rCBF was bilaterally reduced by 57% +/- 6% and 48% +/- 11% in cortical and subcortical brain regions, respectively, under normotensive conditions. Compared with normotensive TBI rats, hemodynamic depression was significantly greater with induced hypotension in the histopathologically vulnerable (P1) posterior parietal cortex (P < 0.01). Secondary hypotension also increased contusion area at specific bregma levels compared with normotensive TBI rats (P < 0.05), as well as overall contusion volume (0.96 +/- 0.46 mm(3) vs. 2.02 +/- 0.51 mm(3), mean +/- SD, P < 0.05). These findings demonstrate that mild hemorrhagic hypotension after FP injury worsens local histopathologic outcome, possibly through vascular mechanisms.