高脂诱导胰岛素抵抗ApoE基因敲除小鼠糖脂代谢的变化

目的建立高脂诱导ApoE基因敲除（ApoE^-/-）小鼠胰岛素抵抗（IR）模型,并探讨其糖脂代谢的变化。方法高脂喂养ApoE叫小鼠16周建立IR模型,采用3-^3H葡萄糖为示踪剂的扩展高胰岛素钳夹技术评价其胰岛素敏感性和糖脂代谢变化。结果普通饲料喂养ApoE^-/-小鼠（NF组）血浆FFA、TC、TG、LDL-C、HDL-C和Ins明显高于C57BL／6J小鼠对照（NC）组（P〈0．01和P〈0．05）,而高脂喂养ApoE叫小鼠（HF组）上述指标又明显高于NF组（P均〈0．01）,并且FBG也明显高于NF和NC组（P均〈0．01）。钳夹稳态时,HF组Ins明显高于NF和NC组（P均〈0．01）,FFA、TC、TG虽被抑制,但仍明显高于NF和NC组（P均〈0．01）;HF组葡萄糖输注率明显低于NF和NC组（P均〈0．01）。在钳夹结束时,HF组葡萄糖清除率明显低于NF和NC组（P均〈0．01）,而肝糖输出率则明显高于NF和NC组（P均〈0．01）,仅被抑制51％。结论ApoE^-/-小鼠存在糖脂代谢紊乱和IR的遗传特征,长期高脂饲养后更为明显。     

高糖对小鼠胰岛和胰岛b细胞株INS-1E的长期作用

目的探讨高糖对胰岛B细胞INS-1E和小鼠胰岛的慢性作用。方法雌性NMRI小风6-10周龄,苯巴比妥腹腔注射麻醉,应用胶原酶技术消化胰腺分离胰岛。传代培养的INS-1E细胞和分离的小鼠胰岛分别于含11．1,25．0mmol/L葡萄糖的RPMll640培养液中培养72h,然后于含3．3,16．7mmol／L葡萄糖的Krebs-Ringer缓冲液中培养60min,留取上清液行胰岛素测定。INS-1E细胞在含不同浓度的葡萄糖的RPMI1640培养液中培养72h,提取其总RNA,合成相应的cDNA,再行RT-PCR检测胰十二指肠同源异形盒-1（Pdxl）,胰岛素1（Insl）,胰岛素2（Ins2）和葡萄糖转运子2（Glut2）的基因表达。结果高糖培养后INS-1E细胞和小鼠胰岛的基础INS分泌增加[INS-1E细胞：（10．47±0．78）vs（7．71±0．59）ng／10000细胞,P〈0．01;小鼠胰岛：（3．85±0．26）vs（2．18±0．21）μg／L,P〈0．001],糖刺激的INS分泌减少[INS-1E细胞：（17．11±1．98）vs（30．76±2．20）ng／10000细胞,P〈0．001;小鼠胰岛：（14．78±1．03）VS（20．46±1．49）μg／L,P〈0．01];高糖处理后INS-1E细胞的Pdxl,Insl,Ins2和Glut2的mRNA水平下降。结论高糖对胰岛β细胞具有慢性毒性作用。     

以Botnia葡萄糖钳夹术评估多囊卵巢综合征患者胰岛β细胞功能

目的了解多囊卵巢综合征(PCOS)患者胰岛β细胞功能状况。方法对47例PCOS患者(肥胖组16例,非肥胖组31例)和年龄相当的非肥胖健康妇女20例(对照组)行口服葡萄糖耐量试验(OGTr)和Botnia葡萄糖钳夹术,该钳夹术包括静脉葡萄糖耐量试验(IVGTT,0-60 min)和随后的高胰岛素-正糖钳夹术(简称正糖钳夹术,61-180 min)。胰岛素敏感性(IS)用正糖钳夹术稳态阶段胰岛素介导的葡萄糖代谢率与稳态胰岛素浓度比值表示(M/I)。胰岛β细胞功能采用IVGTT第一时相胰岛素分泌量(AIR)评估。葡萄糖处置指数(DI)=IS×AIR。结果(1)3组间年龄、空腹血糖差异无统计学意义,但PCOS组腰臀比高于对照组,肥胖PCOS患者OGTT 2h血糖比对照组和非肥胖PCOS组高[分别为(7．89±1．72)、(5．94±1．10)和(6．31±1．42)mmol/L,均P<0．05]。(2)非肥胖PCOS组与肥胖PCOS组IS(分别为2,89±O．16和1．96±0．16)均低于对照组(5．76±0．16),其中肥胖PCOS组最低(均P<0．05)。(3)3组间AIR差别无统计学意义,但PCOS患者有增高趋势,尤以肥胖者明显(P=0．08)。(4)非肥胖和肥胖PCOS组DI(分别为1．07±0．45和1．12±0．45)比对照组(1．46±0．50)降低(均P<0．05),但前两组间差异无统计学意义。结论无论肥胖与否,PCOS患者均存在胰岛素抵抗;PCOS患者糖刺激后第一时相胰岛素分泌未降低,但其DI降低,提示胰岛β细胞对胰岛素抵抗代偿能力下降。     

替米沙坦对db／db小鼠胰岛分泌功能影响的研究

目的探讨替米沙坦阻断肾素一血管紧张素系统（RAS）对db／db小鼠胰岛分泌功能的影响。方法将8周龄db／db小鼠随机分为两组,分别给予6周替米沙坦或安慰剂灌胃治疗,同周龄的db／m小鼠作为非糖尿病对照。喂药6周后行糖耐量实验,然后取胰腺,进行胰岛素免疫组化检测,另用离体胰岛灌流系统测定胰岛素第一时相的分泌。结果替米沙坦组治疗6周后空腹血糖显著下降（P〈0．05）。糖负荷120min后葡萄糖曲线下面积（AUC）低于安慰剂对照组（P〈0．05）,AUCIns0-30高于安慰剂对照组（P〈0．05）。离体胰岛灌流结果显示,替米沙坦组胰岛素第一时相分泌得到改善。胰岛内胰岛素表达强度替米沙坦组明显高于安慰剂对照组。结论替米沙坦能改善糖耐量,恢复胰岛素第一时相分泌,保护β细胞功能。     

解偶联蛋白2基因表达对游离脂肪酸升高所致β细胞功能障碍的影响

目的观察血浆游离脂肪酸（FFA）水平短期升高对β细胞胰岛素分泌功能的影响,探讨线粒体氧化应激在其中的作用及机制。方法将24只8周龄体重160-170g雄性SD大鼠采用随机数字表法分为脂肪乳输注组（FFA组,12只）和生理盐水输注组（NS组,12只）。分别输注48h,检测以下指标：（1）采静脉血检测胰岛素和FFA水平;（2）静脉葡萄糖耐量实验,评价活体胰岛β细胞分泌功能;（3）胰岛细胞表面灌注实验,评价离体胰岛β细胞动态分泌功能;（4）实时荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测胰岛细胞胰岛素受体底物1和2（IRS-1、IRS-2）和解偶联蛋白-2（UCP-2）mRNA表达的变化。两组间差异比较采用独立样本t检验。结果FFA组血胰岛素水平较NS组增高[（25．2±2．3）比（18．6±1．7）mU／L,t=7．9,P〈0．05],FFA水平也显著高于Ns组[（1．39±0．18）比（0．64±0．10）mmol／L,t=12．8,P〈0．05]。FFA刺激后,FFA组活体和离体的胰岛β细胞分泌功能均较NS组增强[活体分别为（137±24）、（80±16）mU／L,t=6．8,P〈0．05;离体分别为（272±4）、（227±4）mU／L,t=28．6,P〈0．05]。与NS组相比,FFA组胰岛细胞IRS-1mRNA表达增加了29．3％4-2．6％（t=2．2,P〈0．05）,IRS-2mRNA及UCP-2mRNA表达分别增加了345．1％±4．7％、228．4％±4．2％（t=3．4、3．0,均P〈0．05）。结论血浆FFA水平短期升高对β细胞胰岛素分泌有刺激作用,但同时激活线粒体氧化应激,使UCP-2表达相应增加。     

非糖尿病高胰岛素血症人群的胰岛b细胞功能分析

目的 分析正常血糖及糖调节受损合并高胰岛素血症（HINS）人群的胰岛β细胞功能状态。方法对北京某高校年度查体人员中无糖尿病史者行口服75g葡萄糖耐量试验（75gOGTT）,资料完整的非糖尿病人群共634例,其中HINS者94例,分析正常血糖及糖调节受损HINS人群的胰岛功能的差异。结果正常血糖及糖调节受损人群中高胰岛素组胰岛素抵抗指数HOMA—IR、△I120／△G120、第一时相及第二时相胰岛素分泌指数显著高于对照组（P〈0．05）;胰岛素敏感指数（ISI～Stumvoll）、HOMA—IR校正后β细胞功能指数（HBCI／IR）显著低于对照组（P〈0．05）;β细胞功能指数（HBCI）高于对照组,但差异无统计学意义（P〉0．05）;△I120/△G120／IR两组间无统计学差异（P〉0．05）。糖调节受损HINS组年龄、服糖后2h血糖、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、收缩压、2h胰岛素水平显著高于正常血糖HINS组（P〈0．05）;HBCI、HBCI／IR、第一时相及第二时相胰岛素分泌指数显著低于正常血糖HINS组（P〈0．05）;HOMA—IR和ISI—Stumvoll两组间无统计学差异（P〉0．05）。结论正常血糖及糖调节受损HINS人群虽然胰岛素分泌绝对值增加,但实际的胰岛6细胞功能在逐渐减退。正常血糖-HINS和糖调节受损-HINS是2型糖尿病发生发展的中间过渡状态,应该尽早检出、早期干预。     

mTOR／S6K1信号通路在高脂饮食诱导小鼠胰岛素抵抗发生中的作用

目的探讨mTOR及其下游效应因子S6K1在胰岛素抵抗（IR）发生中的作用。方法C57BL／6雄性小鼠20只随机平均分为正常饮食组（NC组）和高脂饮食组（HF组）。后者喂养14周后建立IR模型。检测两组血清胰岛素水平和葡萄糖耐量,显微镜下观察胰岛形态学变化;检测骨骼肌中mTOR和S6K1mRNA的表达,以及mTOR、S6K1和其磷酸化水平蛋白的表达。结果与NC组相比,HF组小鼠表现出明显的IR症状,其体重和空腹胰岛素分别升高了21．99％（P〈0．05）和181．82％（P〈0．01）;胰岛8细胞团面积也显著增加,糖耐量明显受损,骨骼肌细胞中mTOR mRNA和蛋白分别升高了25．61％（P〈0．05）和37．41％（P〈0．01）,S6K1 mRNA和蛋白分别升高了54．98％（P〈0．01）和37．36％（P〈0．01）,S6K1磷酸化水平蛋白表达在高脂饮食后升高了680．15％（P〈0．01）。结论mTOR／S6K1信号通路与高脂饮食诱导IR的发生密切相关。     

果糖联合高脂饮食对金黄地鼠糖脂代谢的影响

目的通过果糖或葡萄糖联合高脂饮食喂养叙利亚金黄地鼠,比较不同饮食成分喂养对地鼠糖脂代谢的不同影响。方法将金黄地鼠随机分成正常对照组（NC）、高脂组（HF）、果糖高脂组（FRU＋HF）、葡萄糖高脂组（Glu＋HF）,喂养12周,测定体重、血脂、血糖、胰岛素、肝指数,观察肝脏及胰腺形态及组织学变化。结果各高脂喂养组地鼠与对照组比较TC、TG、血糖、LDL-C、HDL-C、肝指数升高,胰岛素水平降低,肝脂肪样变,胰岛增生,其中FRU＋HF组TG、胰岛素敏感性降低,肝指数升高,肝及胰岛病理变化更明显（P〈0．05）。结论果糖高脂喂养的金黄地鼠模型特点为TG显著增高、糖耐量减低、胰岛素抵抗及脂肪肝,更适合作为现代人高果糖高脂饮食导致糖脂代谢紊乱的研究模型。     

胰岛素治疗对高脂喂养的糖尿病大鼠胰岛B细胞分泌变化的影响

目的 观察胰岛素治疗对长期高脂喂养的糖尿病（DM）大鼠B细胞分泌功能的影响。方法 2003—08—2004-11对华中科技大学同济医学院附属协和医院内分泌实验室的DM大鼠随机分为糖尿病正常饮食组（DN，n=10）、糖尿病高脂饮食组（DH，n=10）、糖尿病高脂饮食胰岛素治疗组（DHI，n=10）及正常Wistar大鼠正常饮食对照组（NC，n=10）。于胰岛素治疗后行口服葡萄糖耐量试验（OGTF）和胰岛素释放试验（IRT），并根据血糖和血胰岛素值计算糖负荷后胰岛素增值与血糖增值的比值（A130／AG30）和修正的B细胞胰岛素分泌指数（MBCU。留取空腹血浆测定游离脂肪酸（FFA）和甘油三酯（TG）。留取尾部胰腺组织测定胰腺内TG和FFA。结果 与DN组和NC组相比，DH组血和胰腺内TG及FFA计量明显增多（分别为对DN组，P〈0．01、P〈0．01；对NC组，P〈0．01、P〈0．01；时DN组，P〈0．01、P〈0．05；对NC组，P〈0．01、P〈0．01），此外，△130／ΔG30和MBCI显著降低（分别为对DN组，P〈0．01、P〈0．05，对NC组，P〈0．01、P〈0．01）。胰岛素治疗后，与DH组相比，胰腺内TG和FFA计量明显下降（分别为P〈0．01、P〈0．01），同时A130／AG30、MCBI均得到明显改善（P〈0．01、P〈0．05）.结论 长期高脂饮食喂养可导致T2DM大鼠胰腺内FFA和TG沉积，并进一步损伤胰岛B细胞胰岛素的分泌；胰岛素治疗对高脂饮食所致的上述影响有一定的改善作用。     

利拉鲁肽在体内外调节microRNA促进胰岛β细胞增殖

目的探讨利拉鲁肽对db／db小鼠胰腺及大鼠胰岛细胞瘤细胞系INS-1中microRNA表达的影响。方法将20只4周龄雄性db／db小鼠按随机数字表法分为对照组和利拉鲁肽组（每组10只）。分别给予0．1ml生理盐水或300ng／g利拉鲁肽皮下注射,每E12次。8周后测定糖化血红蛋白,行腹腔注射葡萄糖耐量试验（TPGTT）。8周末处死小鼠,免疫组化法分析小鼠胰腺B细胞增殖水平;实时荧光定量聚合酶链反应（RT-PCR）测定小鼠胰腺microRNA（miR．375和miR-34a）的表达。INS-1细胞分别给予0．5mmol/L棕榈酸培养0、48、72h或100nmol／L利拉鲁肽预处理12h后,给予0．5mmol／L棕榈酸培养72h,RT—PCR测定miR-375和miR-34a表达水平。采用t检验及方差分析进行组间数据比较分析。结果与对照组相比,利拉鲁肽组小鼠糖化血红蛋白水平降低（分别为7．3％±0．3％和4．7％±0．6％,t=16．47,P〈0．01）;IPGTT血糖曲线下面积降低[分别为（4568-4-197）和（1927±127）mmol·L-1·min-1,t=26．53,P〈0．05];胰岛素曲线下面积增加[分别为（1080±247）和（2818±378）μg·L-1·min-1,t=7．73,P〈0．05]。免疫组化法显示,与对照组相比,利拉鲁肽组小鼠胰岛素阳性面积增加（分别为1．40±0．30和0．37±0．09,t=19．14,P〈0．01）,Brdu染色阳性细胞比例增加（分别为2．40％±0．22％和0．73％±0．10％,t=4．97,P〈0．01）。利拉鲁肽组小鼠胰腺miR-375与miR-34a表达较对照组分别降低50％（分别为1．1±0．3和2．2±0．5,t=3．08,P〈0．05）和71％（分别为1．1±0．3和3．8±1．2,t=2．80,P〈0．05）。棕榈酸培养使INS-1细胞miR-375表达呈剂量、时间依赖性增加,利拉鲁肽可抑制棕榈酸诱导的miR-375表达（F=7．20,P〈0．01）。结论microRNA可能是利拉鲁肽调节β细胞增殖的靶点之-。     

单纯葡萄糖筛查试验异常孕妇的胰岛素敏感性与β细胞功能变化

目的探讨单纯葡萄糖筛查试验（GCT）异常孕妇在孕期24～28周及产后6～12周胰岛素敏感性和胰岛B细胞功能。方法50gGCT异常而75g口服葡萄糖耐量试验（OGTT）正常者120例为单纯GCT异常组;50gGCT正常,75gOGTF亦正常者80名为正常对照组。采用稳态模式胰岛素抵抗指数（HOMA．IR）和胰岛素敏感指数（ISOGTF）评价胰岛素敏感性,稳态模式胰岛13细胞功能指数（HBCI）和30min净增胰岛素／30min净增血糖比值（△I30／△G30）评价胰岛β细胞分泌功能。比较孕期24～28周及产后6～12周的相关指标。统计学计量资料采用x±s表示,计数资料采用x2检验。结果（1）孕期24～28周,两组孕妇葡萄糖曲线下面积（AUCG）、糖化血红蛋白（HbAlC）和△I30／△G30比较差异无统计学意义;单纯GCT异常组空腹胰岛素（Fins）、HOMA—IR明显高于对照组（分别为14±6VS13±4,t=12．814;2．8±1．3VS2．5±0．9,t=11．7,均P〈0．01）;单纯GCT异常组ISOGTT低于对照组（0．8±0．6VS1．1±1．0,t=4．837,P〈0．05）;单纯GCT异常组胰岛13细胞功能指数（HBCI）低于对照组（369±301VS567±486,t=5．321,P〈0．05）;（2）单纯GCT异常组新生儿出生体质量高于对照组[（3．4±0．2）VS（3．2±0．1）kg,P〈0．01];（3）产后6～12周,单纯GCT异常组AUCG、HbAlc明显高于对照组[分别为30．7±2．6VS27．7±1．2,（5．6±0．3）％VS（5．3±0．2）％,均P〈0．01];单纯GCT异常组Fins、HOMA—IR明显高于对照组（分别为124-5VS11±3,P〈0．05：2．5±0．9VS2．2±0．6,P〈0．01）;单纯GCT异常组的ISOGTT低于对照组（1．0±0．6VS1．5±1．0．P〈0．01）;单纯GCT异常组HBCI低于对照组（1794-95VS307±165,P〈0．01）;（4）单纯GCT异常组产后有9．1％糖代谢异常者,对照组有1．2％糖代谢异常者,两组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论单纯GCT异常者孕期和产后均存在更重的胰岛素抵抗和β细胞功能受损。单纯GCT异常产后糖代谢异常发生的风险增加。     

增龄对Wistar大鼠胰岛b细胞胰岛素受体的影响

目的观察增龄对大鼠胰岛β细胞胰岛素受体的影响,探讨老年糖耐量受损的机制。方法将Wistar大鼠30只分为青年组（15只）和老年组（15只）,观察空腹血糖、空腹胰岛素、血清游离脂肪酸（FFA）、血脂的变化,同时进行高胰岛素．正葡萄糖钳夹实验观察胰岛素敏感性。两组大鼠胰腺石蜡切片,免疫荧光双标染色,标染胰岛β细胞上胰岛素受体,利用软件进行荧光强度分析。结果青年组和老年组的大鼠体重分别为（490．6±7．72）g和（728．9±7．57）g,有明显统计学意义（P〈0．01）;两组大鼠空腹血糖无明显差异,空腹胰岛素青年组为（0．59±0．14）ng／ml,老年组为（2．37±0．04）ng／ml,差异有统计学意义（P〈0．01）;空腹血清FFA水平青年组为（0．76±0．14）mmol／L,老年组为（1．51±0．04）mmol／L,有统计学差异（P〈0．01）;高胰岛素-正葡萄糖钳夹结果显示青年组大鼠葡萄糖输出速率为（26．02±2．83）mg／（kg·min）,老年组为（10．73±0．72）mg／（kg·min）,差异有统计学意义（P〈0．01）;使用稳态模型评估胰岛素分泌指数（HOMA—β）随年龄增长呈递增趋势,未达到统计学差异;而胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）在青年组和老年组分别为3．09±0．80和13．14±1．59,差异有统计学意义（P〈0．01）：免疫荧光染色显示老年组胰岛13细胞上胰岛素受体荧光强度减弱,荧光强度分析值青年组为63．55±5．20、老年组为23．26±2．50,差异有统计学意义（P〈0．01）。结论随着年龄的增长,老年大鼠存在一定的胰岛素抵抗和代偿性胰岛素分泌增加,同时胰岛13细胞胰岛素受体减少,可能存在胰岛p细胞自身胰岛素抵抗。     

糖耐量正常的2型糖尿病一级亲属氧化应激水平与胰岛素敏感性的相关性研究

目的观察2型糖尿病（T2DM）患者及糖耐量正常的T2DM一级亲属（FDRs）体内氧化应激状态,探讨氧化应激与胰岛素敏感性之间的关系。方法检测外周血清丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、超氧化物歧化酶（SOD）、8-异前列腺素F2a（8-isoPGF2a）水平,高胰岛素正葡萄糖钳夹技术评估胰岛素敏感性。结果T2DM组、FDRs组较NC组MDA、8-isoPGF2a水平升高（P〈0．05）,而血GSH—PX、SOD水平降低,差异有统计学意义（P〈0．05）;MDA、8iso—PGF2a与葡萄糖输注速率（GIR）呈明显负相关（r=-0．415和-0．443,P〈0．05）,GSH—PX、SOD与GIR呈明显正相关（r=0．327和0．439,P〈0．05）。结论T2DM患者及糖耐量正常的T2DM一级亲属存在氧化应激状态的改变,且与胰岛素敏感性密切相关。     

核糖体蛋白S6激酶1基因沉默对高脂喂养小鼠肝脏炎性因子和肝脏胰岛素抵抗的影响

目的研究核糖体蛋白S6激酶1（S6K1）基因沉默对肝脏炎性因子表达的影响,探讨S6K1在肝脏胰岛素抵抗中的作用机制。方法将48只体重12．6～14．8g的6周龄雄性C57BL／6J小鼠按随机数字表法分为4组：普食对照组[普通饲料（ND）＋含U6启动子空载体腺病毒组（pU6Ax组）,即ND＋pU6Ax组]、普食实验组[ND＋S6K1短发夹RNA（shRNA）重组基因腺病毒组,即ND＋S6KIAx组]、高脂对照组[高脂饲料（HFD）’pU6Ax组,即HFD＋pU6Ax组]、高脂实验组（HFD＋S6K1Ax组）,分别喂养16周。实验组和对照组尾静脉分别注射S6K1Ax、pU6Ax（均为普食实验组及对照组90ml,高脂实验组及对照组120ml,效价为2．0×10^10pfu／m1）。注射后第6天过夜饥饿后,4组各随机抽取6只行葡萄糖耐量实验,剩余的小鼠处死取肝脏,逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测肝脏炎性因子单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素（IL）-1β、IL-6、IL-10mRNA的表达,Western blotting观察肝脏蛋白S6K1、S6K1苏氨酸389（S6K1-thr389）、胰岛素受体底物1（IRS1）丝氨酸1101（IRS1-ser1101）、IRS1丝氨酸636／639（IRS1-ser636／639）、蛋白激酶B丝氨酸473（Akt—ser473）、c—Jun氨基末端激苏氨酸183／酪氨酸185（JNK—thr183／tyr185）表达。两组比较采用t检验,多组问比较采用单因素方差分析。结果肝脏S6KI基因沉默后,与高脂对照组相比,HFD＋S6K1Ax组小鼠炎性因子MCP-1、TNF-α、IL-1βmRNA均表达下降（分别为0．549±0．016比0．871±0．081、0．635±0．079比0．905±0．059、0．642±0．042比1．327±0．025;t=9．55、6．71、34．07,均P〈0．05）。IL-6mRNA未表现出组间差异（P〉0．05）,抗炎因子IL-10mRNA在HFD＋S6KIAx组肝脏S6K1基因沉默后升高（0．773±0．076比0．436±0．046,t=9．27,P〈0．05）。Western blotting显示与HFD＋pU6Ax组相比,HFD＋S6K1Ax组肝脏S6K1基因沉默后,IRS1－serll01、IRS1-ser636／639、S6K1-thr389、JNK—thr183／tyr185表达下降,Akt—ser473表达增强（t=6．59、8．44、5．37、3．15、6．52,均P〈0．05）。结论高脂喂养可引起肝脏低度炎症并介导胰岛素抵抗的发生,肝脏S6K1可能通过促进炎症因子、抑制抗炎因子表达参与了肝脏胰岛素抵抗发生。     

应用高胰岛素正葡萄糖钳夹技术评价我国LADA患者的胰岛素抵抗

目的应用高胰岛素正葡萄糖钳夹技术评估我国成人隐匿性自身免疫性糖尿病（LADA）患者的胰岛素抵抗。方法研究对象分为LADA组、2型糖尿病（T2DM）组、正常对照（NC）组。糖尿病患者均为初诊未治,经2周胰岛素强化治疗血糖控制达标后进行研究。对全部研究对象空腹测定临床参数及生化指标,应用高胰岛素正葡萄糖钳夹技术测定胰岛素敏感性指数（ISI）。结果LADA组FC-P及Fins显著低于NC组（P〈0．05）,年龄、BMI、wHR、SBP、DBP、TC、TG、LDL—C、HDL-C与NC组比较,均无统计学差异。LADA组BMI、WHR、SBP、Fins、FC-P、TC、TG、LDL-C均显著低于T2DM组（P均〈0．05）。NC组、LADA组、T2DM组ISI分别为12．83±1．09、6．70±0．71、3．80±0．20,三组间比较有统计学差异（P〈0．05）。结论与NC组相比,LADA患者存在胰岛素抵抗,其程度较T2DM组轻。     

小鼠扩展胰岛素钳夹术中糖代谢的变化

目的建立小鼠扩展胰岛素钳夹技术并观察其体内糖代谢的变化。方法分别采用[3-^3H]葡萄糖和2-脱氧-^3H葡萄糖（2-DOG）作为示踪剂,建立自由状态下小鼠正糖-高胰岛素钳夹技术,并观察其体内糖代谢的动态改变。结果在钳夹稳定状态,血糖稳定在基础水平（7.0±1.3mmol/L）,在高血浆胰岛素水平下,血浆FFA明显抑制（从1.45±0.15到0.45±0.08mmol/L,P〈0.01）。葡萄糖输注率为46.7±4.7mg·kg^-1·min^-1,葡萄糖清除率为11.2±0.6mg·kg^-1·min^-1,肝糖产生被完全抑制,骨骼肌葡萄糖摄取率为20.9±2.5μmol·100g^-1·min^-1,而TG和TC浓度较钳夹前明显降低（P均〈0.01）。平均血糖变异系数为5.19%,平均GIR变异系数为9%。结论采用上述示踪剂建立的小鼠扩展胰岛素钳夹技术,能准确评价小鼠机体胰岛素敏感性,同时能动态反映体内糖代谢变化。     

智能化高胰岛素——正常葡萄糖钳夹技术评价

目的评价智能化高胰岛素-正常葡萄糖钳夹（简称葡萄糖钳夹,IGC）技术的临床实用价值。方法应用IGC技术对20例实验对象[正常糖耐量（NGT）16例,糖耐量减低（IGT）4例,其中合并多囊卵巢综合征（PCOS）2例]进行试验,3例NGT者在1月内重复试验。结果（1）23例次钳夹试验进入稳态期时间为105．57±26．72min;（2）稳态期血糖离散值为0．10±0．06mmol／L;血清胰岛素水平94．64±13．72pmol／L;（3）3例NGT者重复试验稳态葡萄糖利用率（GUR）差值为-0．19±0．91mg·kg^-1·min^-1（P=0．754）;（4）IGC测定的GUR与HOMA1-IR的线性相关系数为R=0．614（P=0．011）,与HO-MA2-IR线性相关系数为R=0．593（P=0．02）。结论IGC技术操作相对简捷,较快进入稳态,血糖钳夹精确性高,稳定性和重复性好。HOMA-IR指数与钳夹技术测定的GUR有显著的线性关系。     

2型糖尿病患者肾小球滤过率与胰岛β细胞功能的关系

目的探讨2型糖尿病（T2DM）患者胰岛β细胞功能与肾小球滤过率（GFR）之间的关系。方法T2DM患者421例,计算其GFR估计值（eGFR）,按eGFR水平分为肾功能正常组（A组）、肾小球高滤过组（B组）、肾功能轻度下降组（C组）和肾功能中重度下降组（D组）。进行口服葡萄糖耐量试验（OGTT）及胰岛素释放试验,比较各组间胰岛8细胞分泌功能及胰岛素抵抗（IR）和胰岛素敏感性（IS）相关指标间的差异,并对eGFR与胰岛功能相关指标进行相关性分析。结果C组和D组HOMA-IR高于A组,IS指数（ISI）、葡萄糖处置指数（DI）低于A组（P〈0．05）;D组胰岛素曲线下面积／葡萄糖曲线下面积（AUC／AUCG）、AUCI高于其他三组（P〈0．05）。多元逐步回归分析结果显示,eGFR与收缩压、病程、AUC1／AUCG呈负相关（P〈0．05）。结论在T2DM中,IR与eGFR呈负相关,IR可能参与了T2DM患者肾功能损害。     

高脂饲养诱导大鼠胰岛素抵抗的动态观察

目的观察高脂饲养诱导大鼠胰岛素抵抗（IR）过程中血液生化指标和IR程度的动态变化。方法雄性Sprague-Dawley（SD）大鼠30只。随机分为高脂组和对照组。对照组喂养标准饲料，高脂组喂养高脂饲料，脂类以猪油为主，热量比占59．8％。高脂喂养2、4、6和8w，分别用口服糖耐量（OGTT），胰岛素敏感指数（ISI）和正常葡萄糖-高胰岛素血糖钳夹等方法检测IR；用快速血糖测定仪检测血糖，用氧化酶法测定血中甘油三酯（TG）和胆固醇（TC）浓度，并分析TG和TC浓度与ISI的相关性。结果高脂饲料喂养4w，检测到IR产生，随着喂养时间延长，IR程度增大。比较两组OGTT，各时间点血糖出现差异的顺序是30和60、120、0min。两组大鼠血中脂肪酸浓度在4w开始出现差异（P〈0．05），TC在6w开始出现差异（P〈0．01），TG和TC浓度在8W时与IS1具有相关性（P〈0．01）。结论高脂饲料成功诱导出IR，高脂组与对照组从4w末开始具有明显不同的代谢特征。     

多氯联苯118对大鼠胰岛素敏感性影响的研究

目的探讨多氯联苯（polychlorinated biphenyl,PCB）118对大鼠胰岛素敏感性的影响。方法将40只清洁级成年雄性Wistar大鼠[体重（200±10）g]按随机数字表法分为4组,每组10只,除正常对照组外,其余3组给予不同剂量PCB118：低、中、高剂量组分别为10、100、1000μg·kg^-1·d^-1,每周腹腔注射5d,造模13周后行腹腔葡萄糖耐量试验（IPGTT）,计算糖负荷后30min胰岛素增值与血糖增值比值（△I30／△G30）、葡萄糖、胰岛素曲线下面积（AUCg、AUCi）、AUCi／AUCg及稳态模型胰岛素抵抗指数（HOMA—IR）。采用单因素方差分析进行多组间均数比较。结果低、中、高剂量组空腹胰岛素水平[（19．0±7．1）、（18．5±3．1）、（22．1±1．2）mU／L]、30min胰岛素[（55．0±1．9）、（55．0±2．4）、（72．3±1．0）mU／L]及30min血糖水平[（22．32±2．44）、（19．87±1．89）、（21．90±2．88）mmol／L]明显高于对照组[（10．05±3．59）、（25．68±1．27）mU／L、（17．08±1．35）mmol／L],差异有统计学意义（F值分别为3．622、8．798、7．024,均P〈0．05）;高剂量组60、120min胰岛素水平高于对照组[60min（46．3±1．2）比（18．1±1．1）mU／L,t=3．287,P〈0．05;120min（39．5±1．3）比（24．5±9．4）mU／L,t=2．435,P〈0．05],各剂量组△I30／AGmAUCi、AUCi／AUCg明显高于对照组（F值分别为15．548、7．130、5．509,均P〈0．05）,低、中、高剂量组HOMA—IR亦明显高于对照组（1．26±0．42、1．35±0．22、1．52±0．47比0．65±0．37,F=6．937,P〈0．05）,上述指标在各剂量组问比较差异无统计学意义（均P〉0．05）。结论低剂量PCB118持续暴露可能引起大鼠胰岛素敏感性降低。