促红细胞生成素对脊髓缺血再灌注损伤保护作用及其机理的实验研究

目的:探讨促红细胞生成素(EPO)处理对脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及其可能的作用机理.方法:建立兔脊髓缺血再灌注损伤模型,通过动物神经运动功能评分和组织学染色评价神经损伤程度;采用免疫组织化学染色测量bcl-2和bax蛋白表达情况;TUNEL法检测脊髓细胞凋亡情况.结果:EPO处理组能明显改善动物的神经运动功能并减轻脊髓由于缺血再灌注所引起的病理性损害:EPO组与对照组相比,脊髓前角细胞的凋亡指数明显下降(P＜0.05),脊髓内bcl-2表达增高(P＜0.01),而bax蛋白表达下降(P＜0.01).结论:EPO对脊髓由于缺血而引起的神经运动功能损害具有保护作用,此种保护作用与EPO能够上调bcl-2和下调bax蛋白表达有关.     

神经生长因子对大鼠脊髓损伤后神经元凋亡的影响

目的探讨神经生长因子(NGF)对脊髓损伤保护作用的分子机制.方法采用Allen's法以25 gcm力致伤大鼠T8脊髓,经蛛网膜下腔导管于术后即刻、2、4、8、12、24 h各注入NGF溶液,并与生理盐水组(NS组)和正常对照组作对照,采用免疫组织化学方法和末端单位标记法(TUNEL)原位末端标记法分别检测bcl-2、bax蛋白在脊髓神经元的表达及神经元凋亡情况.结果正常组中脊髓灰质bax蛋白阳性细胞吸光度(A)值为34.51±4.47,NS组中bax蛋白表达增加,以2 h及12 h最为显著,而NGF组与NS组相比,bax蛋白表达明显减少(P＜0.01).正常组中脊髓灰质bcl-2蛋白表达的A值为19.72±2.92,NS组中bcl-2表达下降,而NGF组与NS组相比较,bcl-2蛋白表达明显增多(P＜0.01).TUNEL检测结果显示,正常对照组中未见神经元凋亡,NS组中自2 h后可见神经元凋亡,NGF组与NS组相比,神经元凋亡指数明显减少(P＜0.01).结论NGF能通过抑制bax蛋白的表达,促进bcl-2表达抑制脊髓损伤后神经元凋亡,从而保护损伤的脊髓组织,这可能是NGF对脊髓损伤具有保护作用的机制之一.     

灯盏细辛对大鼠肾冷缺血再灌注损伤中细胞凋亡的影响

目的 观察中药灯盏细辛对大鼠肾脏冷缺血再灌注损伤(IRI)中肾脏细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法 封闭群SD大鼠36只,随机分为3组,每组12只.假手术组(A组),对照组(B组),实验组(C组).药物应用:C组术前15 min,灯盏细辛注射液按1.2 ml/100 g通过尾静脉注射,A、B组按相应剂量注射生理盐水.动物手术:A组,切除右肾.B、C组采用的是冷IRI模型,3组大鼠均在术后24h再次手术切除左肾进行检测.透射电镜检查肾组织形态学,免疫组织化学检测凋亡相关的基因bcl-2与bax的表达,原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡.结果 (1)超微结构检查(透射电镜):A组结构正常;B组细胞呈损伤形态:线粒体肿胀,微绒毛减少,胞质内空泡形成,部分细胞核可见凋亡迹象.C组病变较B组显著减轻.(2)免疫组织化学蛋白阳性染色指数(PI):缺血再灌注后B、C组的bcl-2表达分别为(21.21±1.18)％和(35.52±1.94)％,较A组(4.95±0.77)％均增多(P＜0.05),B组低于C组(P＜0.05).B、C组的bax表达分别为(58.55±2.90)％和(45.90±3.14)％,较A组(4.67±0.67)％增多(P＜0.05),而且B组高于C组(P＜0.05).A组的蛋白阳性染色指数的比值bcl-2/bax为(1.06±0.07)高于B组(0.35±0.03)和C组(0.78±0.07,P＜0.05),而且C组高于B组(P＜0.05).(3)细胞凋亡检测(TUNEL):细胞凋亡指数B组(28.57±3.58)％和C组(19.99±3.37)％均显著大于A组(2.33±0.42)％(P＜0.01),C 组小于B组(P＜0.01).结论 灯盏细辛减少大鼠肾脏冷IRI诱导的肾脏细胞的凋亡,与调节凋亡相关基因bcl-2与bax表达有关.     

力学刺激对软骨细胞凋亡信号转导分子Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达的影响

目的 观察力学刺激对软骨细胞凋亡信号转导分子半胱氨酸酶-3( Caspase-3)及B细胞淋巴瘤-2(bcl-2)、bax mRNA表达和凋亡的影响.方法 兔膝关节软骨分离培养,在第3代软骨细胞培养瓶中加入不同剂量的Caspase-3、bcl-2、bax抑制剂,力学刺激诱导凋亡,然后检测软骨细胞凋亡率,聚合酶链反应(PCR)半定量分析Caspase-3 bcl-2、bax mRNA表达.结果 力学刺激诱导软骨细胞凋亡,在加入抑制剂的各组和空白组的凋亡率差异有统计学意义(P＜0.05);各组Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达和空白组差异有统计学意义(P＜0.05).Caspase-3抑制剂组的凋亡率和Caspase-3表达明显相关(r=0.69,t=3.41,P＜0.01);bcl-2抑制剂组和bcl-2的表达明显相关(r=0.73,t=3.97,P＜0.01);bax抑制剂组和bax的表达明显相关(r=0.89,t =6.69,P＜0.01);各组差异均有统计学意义.结论 Caspase-3、bax抑制剂能对抗力学刺激诱导的凋亡,而bcl-2抑制剂使凋亡增加,各组Caspase-3及bcl-2、bax mRNA表达发生相应改变.     

术前介入动脉化疗对胰腺癌细胞凋亡和细胞增殖的影响

目的检测术前选择性介入动脉化疗对胰腺癌细胞凋亡和细胞增殖的作用,探讨区域性化疗抑制胰腺癌生长的分子机制.方法采用原位末端标记法(ISEL)对32例术前行介入化疗和未化疗的胰腺癌患者的病理切片进行细胞凋亡指数和增殖指数的检测,同时测定细胞凋亡调控基因bcl-2和bax的表达水平.结果(1)术前介入化疗组胰腺癌细胞凋亡率比未介入化疗组明显增高,两组的细胞凋亡率分别为(46.89±26.46)和(5.67±2.43)(P＜0.01);而细胞增殖指数(PCNA)在术前介入化疗组与非化疗组之间无显著差异(P＞0.05).(2)肿瘤细胞凋亡率与组织类型有关,高分化腺癌中的细胞凋亡率比低分化腺癌高(P＜0.05).(3)术前介入化疗组bcl-2表达率低于未介入化疗组,bax表达率高于未介入化疗组(P＜0.05).结论术前选择性的动脉介入化疗能够诱导胰腺细胞凋亡,诱导细胞凋亡是抑制胰腺癌细胞的生长重要途径.     

神经酰胺在葡萄糖腹膜透析液诱导的腹膜间皮细胞凋亡中的作用

目的 观察葡萄糖腹膜透析液(PDS)对人腹膜间皮细胞(PMC)凋亡的影响和细胞内神经酰胺在PMC凋亡中的作用,初步探讨神经酰胺信号通路是否参与高浓度PDS诱导的PMC凋亡.方法 PMC分别在正常对照、1.5％ PDS、4.25％ PDS条件下培养,以4.25％甘露醇作为高渗对照.高压液相色谱串联质谱法(LC-MS-MS)检测细胞内神经酰胺的变化.Annexin - FITC- PI双染流式细胞术检测细胞凋亡.Western印迹法检测bax、p53、bcl-2蛋白表达.结果 (1)PDS可上调PMC细胞内神经酰胺表达,正常对照组、高渗对照组对细胞内神经酰胺均无明显影响.酸性鞘磷脂酶抑制剂地昔帕明可显著抑制高浓度PDS诱导的神经酰胺生成[(56.08±12.24)μg/L比(91.25±15.89) μg/L,P＜0.01].(2)与1.5％ PDS组相比,4.25％PDS可显著诱导PMC细胞凋亡[(26.65±6.21)％比(4.04±1.86)％,P＜0.01],上调bax、p53蛋白表达(P＜0.01),下调bcl-2蛋白表达(P＜0.05).地昔帕明可明显抑制高浓度PDS诱导的PMC细胞凋亡,bax、p53上调以及bcl-2下调(均P＜0.05),外源性神经酰胺则可明显逆转地昔帕明的此类作用(P＜0.05).正常对照组、高渗对照组对细胞内神经酰胺表达及细胞凋亡均无明显影响.结论 细胞内神经酰胺增加可能参与了高浓度PDS诱导的PMC凋亡.     

保达新对缺血再灌注损伤大鼠心肌的影响

目的 观察保达新对缺血再灌注损伤心肌的保护作用.方法 将24只左冠状动脉前降支(LAD)结扎大鼠分成3组(假手术组、对照组、治疗组),分别在心肌缺血30 min后再灌注60min,复灌前5 min静脉注射0. 9%生理盐水0.25 ml/kg;或保达新0 .5 μg/kg,检测血液中乳酸脱氢酶(LDH)、血浆丙二醛(MDA)、白细胞介素(IL)-6及IL-8的差异和各组间bcl-2、bax蛋白表达的差异.结果 对照组与其他两组比较LDH、MDA、IL-6及IL-8明显增加(P＜0.05),治疗组中LDH、MDA、IL-6及IL-8较空白组明显增加(P＜0.05).对照组与假手术组比较bcl-2、bax蛋白表达明显增加(P＜0.05),治疗组中bcl-2表达较其他两组明显增加(P＜0.05),bax表达较对照组明显减少(P＜0.05).结论 保达新可通过减少脂质过氧化物产生、减轻过氧化反应,抑制细胞凋亡来保护缺血再灌注损伤的心肌.     

大蒜素对人胃腺癌BGC-823细胞影响的研究

目的探讨大蒜素诱导胃癌BGC-823细胞凋亡的作用及机制.方法传代培养人胃腺癌BGC-823细胞,使细胞浓度为5×105个/ml.分别加入10-5g/L(大蒜素1)和10-3g/L(大蒜素2)的大蒜素,另设对照组,培养时间分别为6 h、24 h、48h、72h.结果与对照组相比①大蒜素可明显提高胃癌细胞凋亡率、降低PI值(P＜0.01或P＜0.05),且表现出明显的细胞凋亡的形态学变化.②大蒜素可明显降低胃癌细胞CEA、GST-π的水平(P＜0.01或P＜0.05).③大蒜素可明显提高胃癌细胞的cAMP水平(P＜0.01),降低PKC水平(P＜0.01或P＜0.05).④大蒜素能够显著增加胃癌细胞fas基因及bax基因蛋白的表达(P＜0.05或P＜0.01);降低bcl-2基因蛋白的表达(P＜0.01).结论大蒜素可通过对第二信号系统cAMP、PKC的影响,增强细胞凋亡始动基因fas、凋亡促进基因bax的表达,抑制凋亡抑制基因bcl-2的表达,增加细胞凋亡率,并使胃癌细胞调亡,并抑制其增殖活性;并可导致胃癌细胞CEA、GST-π的合成减少,从而降低其水平.本研究为临床应用的中药大蒜素治疗胃癌提供了实验依据.     

热休克蛋白70对大鼠离体心脏细胞凋亡的影响

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)对离体大鼠供心心肌细胞凋亡相关蛋白bcl-2、bax表达的影响.方法 Wistar大鼠18只,分为2组:对照组(C,n=9),腹腔注射生理盐水0.5 ml,24 h后取离体心脏灌注HTK心脏保护液,4 ℃保存3 h后建立Langendorff离体心脏灌注模型,灌注KH液2 h;实验组(E,n=9)腹腔注射重酒石酸去甲肾上腺素(溶于生理盐水中)3.1 μmol/kg(0.53 mg/kg),腹腔注射24 h后取离体心脏,处理方法旧C组.运用免疫组织化学SP法测定心肌HSP70含量、bcl-2、bax蛋白的含量并做统计学处理比较.结果 HSPT0含量E组(17.78±1.82)较C组(5.22±1.05)明显增高(P＜0.01),bel-2的表达E组(41.88±5.09)较C组(31.36±3.27)明显增多(P＜0.01),bax的表达E组(22.61±3.49)较C组(40.52±4.17)明显减少(P＜0.01),bel-2/bax比值E组(1.86±0.11)较C组(0.77±0.01)明显增高(P＜0.05).结论 心肌HSP70高表达能促进心肌抗凋亡蛋白bcl-2的表达,减少促凋亡蛋白bax表达,增加bel-2/bax比率,抑制心肌细胞凋亡.     

梗阻性黄疸大鼠胆道引流时机对肝细胞凋亡的影响

目的 探讨不同引流时机对梗阻性黄疸大鼠肝细胞凋亡的影响.方法用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记(TUNEL)技术和免疫组织化学方法检测阻塞性黄疸大鼠胆道不同时机引流时肝脏组织细胞增殖、凋亡状态及凋亡相关基因bcl-2和bax蛋白的表达.结果 胆总管结扎后,随结扎时间的延长TBIL、ALP、ALT及细胞凋亡增加,结扎7d后肝细胞凋亡达高峰,14 d、21 d有_卜降趋势,胆道引流后,TBIL、ALP、ALT、凋亡指数(AI)迅速下降,早期引流(3天以前)下降程度明显高于晚期(7天以后),差异有显著性(P＜0.05).在阻塞性黄疽过程中,bax蛋白表达越强,bcl-2蛋白表达越弱,AI亦越高.结论 早期引流有利于改善肝功能、降低肝细胞凋亡率,bcl-2和bax蛋白均参与了阻塞性黄疸肝细胞凋亡的凋节.     

Effects of penehyclidine hydrochloride on apoptosis of lung tissues in rats with traumatic acute lung injury

Objective： To investigate the effects ofpenehyclidine hydrochloride on apoptosis of lung tissue cells and its mechanism in acute lung injury following blunt chest trauma in rats. Methods： Sprague Dawley （SD） rats （n=54） weighing （250-25） g were divided equally and randomly into three groups： normal control group （C group, n= 18）, trauma model group （T group, n= 18） and penehyclidine hydrochloride treatment group （P group, n=18）. Each group was further divided into three subgroups according to the time points of 3, 12 and 24 hours after experiment （at each time point, n=6 for each subgroup）. Rats of P group were intraperitoneally injected with penehyclidine hydrochloride for 2 mg/kg immediately after blunt chest trauma and rats in its 24 hours subgroup were once again injected with penehyclidine hy- drochloride in the same dose 12 hours after injury. Lung tissue samples were collected at every time point and cell apoptosis in lung tissues were measured by TUNEL. Apoptotic index （AI） was calculated, expressions of bax and bcl-2 were detected by immunohistochemical staining of SABC, and lung tissue sections were taken for light and electron microscopic observation. Results： As compared with C group, at every time point, AI and expressions ofbax and bcl-2 in T group were higher （P〈0.05）, and the ratio of bcl-2/bax markedly decreased （P〈0.05）, especially in the 24 hours subgroup. The ratio in T group （0.468±0.007） was lower than that in C group （1.382±0.058, t=12.5, P〈0.01）. Lung tissue injuries were significant under a light microscope, and the number of apoptotic cells increased obviously under a transmission electron microscope. As compared with T group at the same phase, AI and expression of bax decreased in P group （P〈0.05 and P〈0.01）, while the expression of bcl-2 increased significantly （P〈0.01）, and the ratio of bcl-2/bax markedly increased （P〈0.05）, especially in the 24 hours subgroup. The ratio in P group （1.012-0.070） was much higher than that in T group （0.468±0.007, t=-8.3, P〈0.01）. The injury of lung tissues was relieved, and apoptosis of cells decreased obviously under a transmission electron microscopic observation. Conclusions： Apoptosis and expressions ofbax and bcl-2 in lung tissues might be involved in the pathogenesis of lung injury induced by blunt chest trauma. Penehyclidine hydrochloride can alleviate lung injuries by inhibiting apoptosis of lung tissue cells, during which effects ofpenehyclidine hydrochloride on regulating expressions ofbax and bcl-2 may play an important role.     

高压氧对精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡及其基因缺氧诱导因子-α、bcl-2及bax表达的影响

目的 观察高压氧(HBO)对精索静脉曲张(VC)SD大鼠生精细胞凋亡的影响,探讨精索静脉曲张导致男性不育的机制.方法 50只青春期雄性SD大鼠,随机抽出10只作为假手术对照组(A).A组只游离左肾静脉不予结扎,其余40只部分结扎左肾静脉建立VC模型,8周后,将建立了VC模型的40只随机分为VC模型组(B)和HBO干预的VC模型组(C),C组用HBO对VC模型进行干预.实验结束后各组大鼠切取双侧睾丸,采用原位末端标记法(TUNEL)检测大鼠睾丸生精细胞凋亡,免疫组织化学检测低氧诱导因子(HIF)-α、bcl-2及bax的基因表达.结果 B组较A组生精细胞凋亡数明显增多,HIF-α、bax表达增强(P＜0.01),bcl-2表达减弱(P＜0.01),bcl-2/bax比值降低;C组大鼠较B组生精细胞凋亡数减少(P＜0.01),HIF-α表达减弱(P＜0.01)、bcl-2/bax比值上升,而与A组比较差异无统计学意义.结论 VC大鼠生精细胞凋亡率增加,HIF-α表达增强、bcl-2和bax基因表达失调为其凋亡机制之一;高压氧可能通过HIF-α、bcl-2和bax基因调控途径调节生精细胞凋亡,从而改善VC所致的生精功能障碍.     

髓鞘相关蛋白抗体对大鼠脊髓损伤早期bcl-2与bax表达的影响

目的 探讨髓鞘相关蛋白(Nogo-A)抗体应用于脊髓损伤动物模型中对bcl-2与bax表达的影响.方法 建立大鼠急性脊髓损伤实验动物模型.180只大鼠随机分成对照组、损伤组和损伤后Nogo-A抗体治疗组,每组各60只.不同时间点损伤节段脊髓取材,分别行苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学法检测bcl-2、bax表达并进行定量分析.结果 HE染色后光镜下观察:损伤后治疗组出血、小胶质细胞增生和炎细胞浸润均较损伤组轻.bcl-2、bax在损伤组和治疗组表达呈现动态变化,损伤后24 h bcl-2表达达高峰(3组分别为0.1004±0.0091、0.1890±0.0100、0.2456±0.0179,F=197.541,P＜0.01);损伤后8 h bax表达达高峰(3组分别为0.1084±0.0041、0.3440±0.0070、0.2472±0.0071,F=1856.199,P＜0.01);3组各时间点的图像分析结果 经单因素方差分析,差异有统计学意义(P＜0.05),治疗组和损伤组比较,bcl-2表达增强而bax表达减弱.结论 Nogo-A抗体治疗脊髓损伤能抑制bax表达,促进bcl-2表达,减轻脊髓继发性损伤.     

蛋白酪氨酸激酶Pyk2在胃癌中的表达及作用机制

目的 观察蛋白酪氨酸激酶Pyk2在胃癌组织中的表达,探讨Pyk2在胃癌中的作用机制.方法 应用Western blot和荧光定量PCR方法检测正常胃黏膜组织和胃癌组织中Pyk2表达的差异.应用质粒转染的方法,将质粒PKH3-Pyk2和PKH3-PKM(PKM,dominant-negative Pyk2 mutant)转染胃癌细胞系BGC-803,观察凋亡相关蛋白bcl-2和bax的变化,探讨Pyk2在胃癌中作用机制.结果 Western blot结果显示Pyk2蛋白在28例正常胃黏膜组织中均有表达,在胃癌组织中表达水平很低或几乎无表达,差异有统计学意义(t=3.53,P＜0.05).荧光定量PCR结果显示:胃癌组织中Pyk2 mRNA表达水平明显低于正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(t=8.02,P＜0.05).转染PKH3-Pyrk2质粒后,对凋亡抑制蛋白bcl-2影响不明显,而促凋亡蛋白bax的表达升高.结论 Pyk2在正常胃黏膜组织中高表达,在胃癌组织中低表达.Pylc2可能通过上调bax蛋白的表达而促进胃癌细胞凋亡.     

TSEG-2基因真核表达载体的构建及其在细胞内的表达

目的 构建睾丸特异表达基因2(TSEG-2)的真核表达载体,探讨TSEG-2在细胞中的表达及其生物学功能.方法 以小鼠睾丸组织cDNA为模版,设计携带HindⅢ和BamH Ⅰ酶切位点的引物序列,聚合酶链反应(PCR)扩增基因片段,克隆至携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的真核表达载体pEGFP-N1;在阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)的介导下,重组质粒转染体外培养的精母细胞株GC-2spd 48 h后,荧光显微镜下观察TSEG-2基因在细胞内的表达定位,噻唑蓝(MTT)比色法测定细胞生长活性,AO/EB荧光染色法、Hoechst 33258荧光染色法、Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡,实时定量PCR测定Fas、bcl-2、bax表达水平.结果 成功构建了TSEG-2与EGFP的融合表达载体pEGFP-TSEG2,转染GC-2spd细胞后可见胞质内绿色荧光蛋白表达.转染pEGFP-TSEG2 48 h后,GC-2spd细胞生长抑制39.2%(P＜0.05),出现细胞凋亡形态学改变,凋亡率为28.3%(P＜0.05);GC-2spd细胞中Fas和bcl-2的表达分别下调17.9%、64.8%(P＜0.05),而bax的表达上调25.1%(P＜0.05).结论 成功构建TSEG-2基因的真核表达载体,能在精母细胞株中表达并促进细胞凋亡.     

缺氧诱导因子-1α对体外模拟CO2气腹下人胃癌细胞凋亡的影响

目的 通过体外模拟CO2气腹环境,构建沉默缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的RNAi表达载体,探讨HIF-1α对CO2气腹环境下人胃癌细胞MKN-45凋亡的影响及机制.方法 利用密闭培养箱模拟CO2气腹,气腹机维持培养箱内压力分别为0、5、10、15 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa),采用RT-PCR方法和Western blot方法观察沉默HIF-1α前后MKN-45细胞HIF-1α mRNA和蛋白表达变化.免疫组化技术观察沉默HIF-1α前后细胞bcl-2/bax表达变化.Annexin V-FITC/PI舣标染色、流式细胞仪检测沉默HIF-1α前后细胞凋亡比例变化.结果 沉默HIF-1α前15 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA和蛋白表达(1.48±0.22和1.34±0.09)以及10 nnn Hg组细胞蛋门表达(1.25±0.10)均显著高于对照组(0.55±0.17和0.83±0.04)(P＜0.05).0、5、10 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA和0、5 mm Hg蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P＞0.05).沉默HIF-1α前15 mm Hg组细胞bcl-2/bax比值(0.78±0.05)较对照组(1.43±0.15)明显降低(P＜0.05),细胞凋亡比例(11.70±0.12)较对照组(0.22±0.07)显著增加(P＜0.01).而在沉默HIF-1α后15 mm Hg组细胞HIF-1α mRNA表达(0.52±0.11)和蛋白表达(0.92±0.02)、bcl-2/bax比值(1.57±0.04)、细胞凋亡比例(0.45±0.11)与对照组比较均无显著差异(P＞0.05).结论 在CO2气腹环境压力为0、5、10 mmHg CO2时MKN-45细胞凋亡比例与对照组比较无显著差异,压力为15 mm Hg时CO2气腹可促进胃癌细胞凋亡,HIF-1α可能为促进细胞凋亡的重要因子.     

缺血-再灌注损伤对大鼠急性胰腺炎胰腺细胞凋亡的影响

目的探讨缺血一再灌注(I／R)损伤对大鼠急性胰腺炎(AP)胰腺细胞凋亡的影响。方法将SD大鼠54只按编号法随机分为对照组(n=6)、胰腺炎组(n=24)和I／R损伤组(n=24)。经胆胰管逆行加压注入3％牛磺胆酸钠建立大鼠AP模型，在此基础上，I／R损伤组通过暂时阻断脾下动脉造成局部胰腺I／R模型，对照组于术后lh，其余两组于术后1h、3h、6h和12h采取断颈方法分批处死动物，应用末端脱氧核苷酸转换酶(TdT)介导的原位末端标记(TUNEL)法检测缺血一再灌注区胰腺细胞凋亡。并观察其病理改变。结果胰腺炎组大鼠术后1h、3h胰腺组织仅为充血、水肿性改变，6h出现出血、坏死性改变；而1／R损伤组大鼠术后1h缺血一再灌注区胰腺呈现出血、坏死性改变，病变持续加重；AP后胰腺凋亡细胞明显增多，I／R损伤组和胰腺炎组的凋亡细胞高峰值分别在术后3h和6h；I／R损伤组术后1h、3h缺血一再灌注区胰腺凋亡细胞显著高于相应时相的胰腺炎组(P＜0．01，P＜0．05)．而6h、12h明显低于胰腺炎组(P＜O．05，P＜O．01)。结论I／R损伤在促发胰腺炎从水肿型向出血坏死型转化过程中，同时诱导胰腺细胞凋亡，细胞凋亡可能是阻止AP病变加重的一个有利反应。     

Apoptosis in prostate cancer: Bax correlation with stage

BACKGROUND: Dysregulation of apoptosis may contribute to the process of prostate tumorigenesis by reducing the rate of cell death. Bcl-2 and bax are important molecules involved in the regulation of apoptosis. The aim of the present study is to examine apoptosis and related regulatory molecular markers in a group of Iranian patients with prostate cancer. METHODS: Paraffin-embedded tissues from 50 patients of prostate carcinoma were examined for the expression of bcl-2 antiapoptotic and bax proapoptotic markers and also proliferation marker, Ki-67, by immunohistochemistry. Detection of apoptotic cells was performed using TUNEL method. Correlation between apoptotic index, proliferation index and bcl-2 and bax expression with stage, pathological grade and Gleason score was determined. RESULTS: Apoptosis was detected in 12% of prostate cancers. No correlation was observed between apoptosis and differentiation status of carcinoma. Bcl-2 expression was detected in 21 of samples. A significant correlation between bcl-2 expression and Ki-67 staining index (r = 0.349, P = 0.012) was observed. High bax protein expression was shown in our study. We found a significant correlation between bax expression and stage of carcinoma (r = 0.388, P = 0.031), but not with the apoptosis index, suggesting the presence of a non-functional bax protein or the role of other proapoptotic molecules. CONCLUSION: The patients in the present study showed a different pattern of apoptosis positivity compared to other reports. Bax expression may be a useful marker for prognosis of prostate cancer.