补肾壮骨胶囊治疗膝关节骨性关节炎的实验研究

为观察补肾壮骨胶囊治疗膝骨性关节炎的疗效,并探讨其作用机理及膝骨性关节炎的发病机制。按照Hulth造模方法将30只新西兰大白兔造成膝骨性关节炎模型,并随机分为正常组、模型组、壮骨关节丸对照组、补肾壮骨胶囊治疗组,给药8周后拍摄膝关节正位CR片并测定血清、关节液一氧化氮(NO)含量,动物处死后取关节软骨进行电镜观察,并对软骨及滑膜组织的匀浆进行一氧化氮合酶(iNOS)的测定。结果显示补肾壮骨胶囊治疗组关节液NO含量降低的程度与壮骨关节丸对照组比较,差异显著(P<0.05),软骨及滑膜组织中iNOS的含量同对照组比较有显著性差异(P<0.05)。电镜观察胶囊组关节软骨退变较模型组和壮骨关节丸组轻。表明补肾壮骨胶囊通过抑制iNOS的表达,降低NO含量,减少软骨细胞凋亡,促进软骨基质合成及抑制其分解,抑制滑膜炎症,延缓关节软骨退变,促进了关节软骨的修复。     

化淤祛湿法对膝骨关节炎早期诱导型一氧化氮合酶炎症途径影响的实验研究

目的 观察化淤祛湿法对膝骨性关节炎早期诱导型一氧化氮合酶(iNOS)炎症途径的影响,探讨其治疗作用机理.方法 通过切断膝关节前交叉韧带和内侧副韧带造成膝OA模型.将24只日本雄性大耳白兔随机分为A组(正常组)、B组(模型组)、C组(补肾法)、D组(化淤祛湿法).给药4周后处死实验兔,行关节腔大体观察,关节液NO含量检测,滑膜、关节软骨组织学观察,滑膜、关节软骨iNOS含量检测.结果 D组关节腔大体观察与C组比较,差异无显著性(P>0.05);D组关节液NO含量检测与C组比较,差异显著(P<0.05);D组滑膜、关节软骨组织学观察评分与C组比较,差异显著(P<0.05);D组滑膜组织及软骨中iNOS含量与C组比较有显著性差异(P<0.05).结论 化淤祛湿法通过抑制膝OA早期NO及iNOS的表达,可降低NO及iNOS含量,减少软骨细胞凋亡,促进软骨基质合成及抑制其分解,抑制滑膜炎症,延缓关节软骨退变,促进了关节软骨的修复.     

关节止痛胶囊对兔膝骨性关节炎模型血清和关节液中自由基水平的影响

为探讨关节止痛胶囊治疗膝骨性关节炎的作用机理,将32只新西兰兔随机分为A正常组、B模型组、C对照组、D治疗组,B、C、D三组按照Hulth造模方法造成膝骨性关节炎模型.治疗组给予关节止痛胶囊,对照组给予壮骨关节丸.给药8周后测定兔血清和关节液中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量.结果显示,各组血清中SOD和№含量变化比较,无显著性差异(P＜0.05);而治疗组关节液中SOD升高及NO含量降低的程度与模型组、对照组比较,差异显著(P＜0.05、P＜0.01);与正常组比较无显著性差异(P＞0.05).表明关节止痛胶囊通过提高关节液SOD含量,降低№含量,从而达到保护关节软骨,防治膝骨性关节炎的目的.     

早期膝骨性关节炎NO炎症途径及中药干预的实验研究

目的:探讨NO炎症途径在早期膝关节骨性关节炎中的作用及透骨消痛颗粒对膝骨性关节炎早期NO炎症途径的影响。方法:用改良的Hulth法建立骨关节炎动物模型,随机分为6组,模型组、对照组(壮骨关节丸组)、实验Ⅰ组(透骨消痛颗粒低剂量组)、实验Ⅱ组(透骨消痛颗粒中剂量组)、实验Ⅲ组(透骨消痛颗粒高剂量组)及正常组,4周后行关节腔大体观察、关节软骨和滑模组织学观察、关节滑液NO、NOS活性检测、软骨和滑膜组织中iNOS含量测定。结果:骨性关节炎关节局部表达NO。透骨消痛颗粒具有延缓关节大体形态,透骨消痛颗粒可降低关节液NO、NOS含量,降低关节软骨及滑模iNOS的表达。其中透骨消痛颗粒中剂量组及高剂量组作用更明显,但两者之间比较差异无统计学意义。结论:关节局部NO是引起膝骨性关节炎的重要介质;透骨消痛颗粒可抑制NO炎症途径,缓解软骨细胞的退变和软骨基质的降解,有效改善膝骨性关节炎患者的临床症状。     

关节止痛胶囊对膝骨性关节炎血清、关节液自由基水平影响的研究

目的:观察关节止痛胶囊对膝骨性关节炎血清、关节液自由基水平的影响,并探讨其作用机理及膝骨性关节炎的发病机制.方法:将符合纳入观察标准的膝骨性关节炎的患者540例随机分为关节止痛胶囊治疗组180例、壮骨关节丸时照1组180例和维骨力对照2组180例.4周为1疗程,服药8周(2个疗程)后观察疗效.测定3组治疗前后血清、关节液超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)含量变化,评价治疗疗效.结果:治疗后3组患者的血清、SOD、NO含量降低,并且关节止痛胶囊治疗组作用较两对照组明显.治疗组总有效率为83.89%,显效率为50.56%.结论:关节局部氧自由基、NO是引起膝骨性关节炎的重要介质;软骨细胞凋亡过盛可能是关节软骨退变的重要原因之一.关节止痛胶囊通过提高血清、关节液SOD含量,降低其NO含量,减少软骨细胞凋亡,有效改善了膝骨性关节炎患者的临床症状,恢复膝关节功能.     

健膝汤对兔膝骨性关节炎模型血清和关节液中自由基水平的影响

目的:探讨健膝汤治疗膝骨性关节炎的作用机理。方法:将40只新西兰兔随机分为A正常组、B模型组、C对照组、D治疗组,B、C、D三组按照Hulth造模方法造成膝骨性关节炎模型。治疗组给予健膝汤,对照组给予维骨力。给药8周后测定兔血清和关节液中超氧化物歧化酶(SOD)、一氧化氮(NO)的含量。结果:各组血清中SOD和NO含量变化比较,差异无统计学意义(P0.05);而治疗组关节液中SOD升高及NO含量降低的程度与模型组、对照组比较,差异有统计学意义(P0.05、P0.01),与正常组比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:健膝汤可以提高膝骨性关节炎模型兔的关节液SOD含量,降低NO含量,从而达到保护关节软骨,防止被进一步破坏的作用,对防治膝骨性关节炎具有一定意义。     

蠲痹胶囊醇提工艺对大鼠骨性关节炎模型的影响

目的比较醇提工艺和水煎工艺生产的蠲痹胶囊(熟地黄、肉苁蓉、骨碎补等)防治大鼠膝骨性关节炎的差异。方法 90只SD大鼠,除空白组10只外,其余采用4%木瓜蛋白酶制备膝骨性关节炎模型,随机分为模型组,壮骨关节丸组,水煎工艺和醇提工艺蠲痹胶囊的低、中、高剂量组。给药30 d后,各组大鼠称重,检测血清及关节腔液中环氧化酶-2(COX-2)、一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(i NOS)水平;病理学检查取各组胫骨平台关节软骨,分别进行HE、AB-PAS染色及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)免疫组化染色,观察各组关节软骨形态及炎性因子表达。结果醇提工艺蠲痹胶囊比水煎工艺更能显著降低膝骨性关节炎和大鼠血清及关节液中COX-2、NO、i NOS及TNF-α、IL-1β含有量,延缓软骨降解。结论蠲痹胶囊醇提工艺取代水煎工艺是合理的。     

滑膜炎胶囊对兔膝骨性关节炎组织病理学及NO、SOD、COMP等的影响

目的观察滑膜炎胶囊对模型兔膝骨性关节炎关节软骨的病理及一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)、关节软骨转化生长因子β1(TGF-β1)等的影响。方法健康新西兰白兔35只,随机分为空白组、滑膜炎胶囊组、玻璃酸钠组和模型组。以改良Hulth法实施手术造模,造模成功后,各组分别按照设计程序予以处理。动物处死后分别采集血液与关节液,检测一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、软骨寡聚基质蛋白(COMP)等指标,并行关节软骨大体观察、组织病理形态学观察,及免疫组化染色法检测关节软骨转化生长因子-β1(TGF-β1)。结果与模型组比较,滑膜炎胶囊可以明显降低关节炎模型兔血清及关节液NO含量,降低血清COMP含量,提高关节软骨中TGF-β1表达,差异均有统计学意义(P0.01);滑膜炎胶囊组在减少组织病理学评分方面也明显优于模型组(P0.01)。滑膜炎胶囊组与玻璃酸钠组各指标差异无统计学意义(P0.05)。结论从关节软骨的大体观察及HE染色、SO染色组织病理学光镜观察,兔膝骨性关节炎的造模成功;滑膜炎胶囊可有效延缓关节炎模型兔软骨退化。     

荣骨定痛膏对骨性关节炎大鼠IL-1β、NO及氧自由基代谢的影响

目的:探讨荣骨定痛膏对骨性关节炎模型大鼠白介素1β(IL-1β)、一氧化氮(NO)及氧自由基代谢的影响。方法:采用注射4%木瓜蛋白酶复制骨性关节炎大鼠模型,通过观测膝关节功能,血清IL-1β、关节液NO与NOS、关节组织氧自由基代谢等指标,探讨荣骨定痛膏对骨性关节炎的治疗作用及作用机制。结果:荣骨定痛膏可明显减小骨性关节炎大鼠关节滑膜肿胀厚度,扩大膝关节的活动范围,降低血清IL-1β、关节液NO及NOS的水平,提高滑膜组织中SOD的活性而降低MDA的含量。结论:荣骨定痛膏对骨性关节炎模型大鼠具有一定治疗作用,抑制IL-1β诱导的NO的产生而发挥抗氧化、抑制滑膜细胞的凋亡是其治疗骨性关节炎的作用机制之一。     

健骨伸筋汤对大鼠膝关节炎关节软骨病理改变及关节液IL-1β及NO含量的影响

目的观察健骨伸筋汤对大鼠膝关节炎关节软骨病理改变及关节液IL-1β及NO含量的影响。方法 45只雌性SD大鼠随机分为5组,每组9只。通过改良的Hulth法制成肾虚型大鼠的膝骨性关节炎模型,2周后,对空白对照组、模型组生理盐水灌胃;治疗组分低、高浓度进行中药灌胃,于灌胃后第7周、13周各组随机挑选一半观察大鼠膝关节炎关节软骨病理改变及关节液IL-1β及NO含量的变化。结果造模后大鼠膝关节软骨评分远高于空白对照组,软骨破坏严重,差异有统计学意义(P0.01);经治疗后,评分均有所降低,IL-1β和N O含量有所改善,说明治疗对膝关节软骨有修复作用,健骨伸筋汤低剂量组、高剂量组与壮骨关节丸组比较,差异有统计学意义(P0.01)。结论健骨伸筋汤可降低IL-1β和NO含量,有一定的关节软骨保护作用,可一定程度地延缓膝骨关节炎动物模型软骨的退变。     

中药关节康对骨性关节炎软骨TGF-β1、IL-1β表达的影响

目的:观察复方中药关节康对骨性关节炎软骨TGF-β1、IL-1β表达的影响,探讨其疗效机制.方法:通过左膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成骨性关节炎模型,36只新西兰兔随机分为6组:A组(正常组),B组(造模组)、C组(空白对照组)、D组(关节康组)、E组(西乐葆组)和F组(壮骨关节丸组).木瓜蛋白酶注射结束后2周D、E、F组分剐予以关节康、西乐葆、壮骨关节丸治疗4周,取左膝关节软骨行IL-1β、TGF-β1免疫组化染色.结果:关节康组提高关节软骨TGF-β1表达的效果最明显,而西乐葆组降低关节软骨IL-1β表达的效果最明显.结论:关节康治疗膝骨性关节炎的疗效机理可能在提高关节软骨的TGF-β1含量,降低IL-1β含量,从而直接或间接促进了损伤关节软骨的修复.     

复方补筋片对肾虚血瘀型膝骨性关节炎IL-1β、TNF-α干预作用的研究

目的:观察复方补筋片对肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者血清和关节液中IL-1β、TNF-α水平的影响,探讨复方补筋片的作用机理,为本院制剂的推广与开发应用提供科学依据。方法:收集漳州市中医院2010年6月～2011年6月骨伤科门诊和康复科门诊就诊符合纳入条件的肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者,共60例。将纳入患者用随机数字表分为两组,治疗组口服漳州市中医院本院制剂复方补筋片;对照组口服壮骨关节丸组,治疗周期均为4周,所有患者分别在治疗前及治疗周期结束1周内测定血清和关节液中IL-1β、TNF-α含量。结果:1.在降低肾虚血瘀型膝骨性关节炎患者血清和关节液中IL-1β、TNF-α含量比较,(P0.05),有差异性,治疗组疗效优于对照组。2.治疗组与对照组在临床疗效方面比较,(P0.05),有差异性,治疗组疗效优于对照组。结论:复方补筋片可能通过降低关节滑液中IL-1β、TNF-α含量,从而保护膝关节软骨及软骨下骨、改善膝骨性关节炎患者的症状。     

骨宝丸对肾虚型膝骨性关节炎模型大鼠组织形态学及Hyp含量的影响

目的:研究骨宝丸对肾虚型膝骨性关节炎大鼠组织形态学及羟脯氨酸(Hyp)含量的影响。方法:60只健康SD大鼠随机分为手术组、骨宝组、壮骨组和空白组,分别以Hulth造模方法及去势手术造成肾虚型膝骨性关节炎模型,4周后行血清雌二醇检测及光镜观察,确定造模成功。予相应药物灌胃,于6周、8周、12周取大鼠右膝关节软骨行光镜、透射电镜观察,并以碱水解法测定关节软骨中Hyp含量。结果:骨宝丸组光镜及透射电镜表现优于壮骨组及手术组。Hyp含量,骨宝组、空白组和手术组、壮骨组相比有显著性差异(P<0.05),尤以6周明显。结论:骨宝丸可明显改善实验大鼠膝骨性关节炎组织形态学表现并增加Hyp含量,减轻或缓解肾虚型膝骨性关节炎的病理发展。可能与其增加软骨组织中胶原纤维含量、增强其抗拉力及张力强度有关,从而缓解关节软骨退变。     

消痹灵胶囊对骨性关节炎家兔血清及关节液中IL-1、TNF-α和NO的影响

目的探讨消痹灵胶囊对家兔血清及关节液中白细胞介素-1（IL-1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和一氧化氮（NO）的影响。方法将32只健康雄性新西兰长耳大白兔随机分为消痹灵胶囊组、壮骨关节丸组、模型对照组、空白对照组。将家兔右腿膝关节伸直,用石膏外周管形固定1圈,使其右侧膝关节不能活动,制造家兔膝关节骨性关节炎模型。从关节固定第2周开始给药,直至第9周后停止石膏固定及给药。在造模第3、6、9周分别测定家兔血清及关节液中IL-1、TNF-α及NO含量变化。结果消痹灵胶囊能减轻实验家兔血清和关节液中IL-1、TNF-α和NO的含量,较壮骨关节丸组及模型对照组的差异均有统计学意义。结论消痹灵胶囊有助于改善骨内微循环,降低骨内压;抑制免疫因子反应,减轻软骨基质的降解;抑制关节软骨降解酶,延缓软骨退变。     

壮骨1号方对大鼠骨性关节炎的抗损伤作用

目的:观察壮骨1号方对大鼠骨性关节炎的抗损伤作用及病理形态学的影响。方法:SD大鼠,以0.05ml(1.6U)/关节剂量,双侧膝关节注射4%木瓜蛋白酶-泊洛沙姆温敏型原位凝胶控释剂复制大鼠骨性关节炎模型。选成功模型鼠48只,随机分为骨性关节炎模型组、壮骨1号方2.20 g/kg、1.10g/kg、0.55 g/kg组、壮骨关节丸组和氨基葡萄糖组,另设正常对照组,每组8只,按设定剂量每天灌胃1次,连续治疗8周。测定关节液前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量;测定关节软骨诱导型一氧化氮合成酶(iNOs)mRNA、转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA表达;观察关节软骨病理组织学变化并进行病理损伤评价。结果:模型组大鼠关节液PGE2和TNF-α含量明显升高(P<0.01),治疗8周后,壮骨1号方2.20、1.10 g/kg组关节液PGE2和TNF-α含量明显降低(P<0.01)。模型组大鼠软骨iNOs mRNA、TGF-β1 mRNA表达明显增强(P<0.05或P<0.01),壮骨1号方2.20,1.10,0.55 g/kg治疗8周后,iNOs mRNA、TGF-β1 mRNA表达均减弱(P<0.05或P<0.01)。模型组大鼠关节软骨病理损伤明显,病理总评分为2.75±1.03,用壮骨1号方2.20,1.10g/kg治疗8周后,关节软骨损伤明显减轻,病理总评分分别为1.62±0.91和1.87±0.64(P<0.05或P<0.01)。结论:壮骨1号方具有一定的抗软骨损伤作用,能延缓软骨退行性变的进程,这种抗损伤作用可能与通过壮骨1号方的补益肝肾功能,调节PGE2、TNF-α、iNOS、TGF-β1的作用相关。     

骨痛膜对兔膝关节骨性关节炎血清中SOD、NO、HA含量影响的实验研究

目的探讨骨痛膜对兔实验性膝关节骨性关节炎血清中超氧化物歧化酶(SOD)活性及透明质酸(HA)、一氧化氮(NO)含量的影响。方法将日本大耳白兔随机分成正常组、模型组、治疗组、对照组、基质组,除正常组外均行右股静脉结扎法造模。造模5周后各组采用相应的方法进行治疗,3周后将动物处死,取血清检测SOD活性、HA及NO的含量。结果模型组血清中SOD活性明显下降,对照组、治疗组SOD活性升高;模型组血清中HA含量明显升高,对照组、治疗组HA含量明显下降;模型组血清中NO含量明显升高,对照组、治疗组NO含量明显下降。结论骨痛膜能提高OA滑膜组织中SOD的活性,减少HA及NO的含量,抑制氧自由基对软骨细胞及基质的损害,改善关节软骨的血液循环,从而对关节软骨起到保护作用,从而防治膝关节骨性关节炎。     

穴位注射鹿瓜多肽注射液对膝骨性关节炎患者关节液一氧化氮含量的影响

目的:观察穴位注射鹿瓜多肽注射液对膝骨性关节炎患者膝关节液一氧化氮含量的影响.方法:将100例患者随机分为2组,治疗组51例,采用穴位注射鹿瓜多肽注射液2 ml;对照组49例,采用穴位注射透明质酸钠注射液2 ml.治疗前、治疗1个疗程、2个疗程后分别测定膝关节关节液中NO含量.结果:治疗前两组关节滑液NO含量差异无统计学意义(P>0.05),按疗程治疗后治疗组比对照组膝关节液NO含量明显降低(P<0.05).结论:鹿瓜多肽注射液对NO有明显抑制作用,穴位注射鹿瓜多肽注射液对膝骨性关节炎有较好的治疗作用.     

中药萃取超导透入治疗兔膝骨关节炎疗效的实验研究

目的:研究中药组方补肾通络方萃取物经超导透入治疗膝骨性关节炎的疗效,探讨其防治骨性关节炎的可行性。方法:24只新西兰大白兔随机分为模型组(8只)、中药组(8只)、治疗组(8只)。右膝关节内注射木瓜蛋白酶建立兔膝骨性关节炎模型,左膝为正常对照组。成模后中药组患膝外涂中药组方萃取物,治疗组将中药萃取物经超导透入患膝,8周后镜下观察各组动物模型关节软骨、滑膜组织形态学变化及硝酸还原酶法测NO浓度。结果:中药组滑膜及软骨组织形态学改变略轻于模型组,治疗组关节改变较模型组明显减轻,且滑膜组织NO浓度明显降低(P<0.01);结论中药萃取物超导透入较传统外敷用药更能够减轻兔膝骨性关节炎的软骨退行性变和滑膜炎症。     

止骨增生合剂对兔膝骨关节炎治疗作用的实验研究

目的:通过观察止骨增生合剂对兔骨关节炎模型中关节软骨结构的改变,及对血清、关节液中一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白介素-1β(IL-1β)水平的影响,探讨其对骨关节炎的治疗作用及机制。方法:新西兰兔66只,随机分为8组,即空白组,假手术组,模型对照组,低剂量组1.22 g(生药)/kg、中剂量组2.45 g(生药)/kg、高剂量组4.90 g(生药)/kg,中药阳性药双腾筋骨片对照组0.24 g/kg,西药阳性药双氯芬酸钠肠溶片对照组3.50 mg/kg。4周后各组心脏采血,分离血清,抽取关节液,进行血清及关节液中IL-1β,NO、iNOS的测定.全部处死66只兔,取股骨内髁全层软骨切下后,肉眼大体观察软骨面情况,而后光镜观察病理学形态变化。结果:止骨增生合剂中2.45 g(生药)/kg、高4.90 g(生药)/kg剂量组能明显降低家兔关节软骨的评分值,与模型组比较差异显著(P<0.01);各剂量组对家兔关节软骨Mankin's评分无明显影响(P>0.05);低1.22 g(生药)/kg)、高4.90 g(生药)/kg剂量组能明显降低关节炎兔血清中的NO含量,与模型组比较差异显著(P<0.05);各剂量组对关节液中NO、iNOS、IL-1β含量无明显影响(P>0.05)。结论:止骨增生合剂中2.45 g(生药)/kg)、高4.90 g(生药)/kg剂量组能明显降低家兔关节软骨的评分值,低1.22 g(生药)/kg)、高4.90 g(生药)/kg剂量组能明显降低关节炎兔血清中的NO含量,对兔关节炎具有一定的保护作用。     

杜灵注射液对兔膝骨性关节炎TGF-β1水平的影响作用

目的:通过检测杜灵注射液对兔膝骨性关节炎滑膜、关节软骨中TGF-β1水平的影响,探讨杜灵注射液治疗骨性关节炎的疗效与作用机理。方法:将40只健康成年日本大耳白兔随机分为5组,每组8只:空白组、模型组、对照组、杜灵组和杜灵组。除空白组外均采用Hulth造模方法建立骨性关节炎模型。模型组膝关节注射生理盐水0.5ml,每周1次;对照组注射透明质酸钠注射液0.5ml,每周1次;杜灵组注射杜灵注射液0.5ml,每周1次;杜灵组注射杜灵注射液0.5ml,每周两次。治疗8周后处死动物,采集滑膜、关节软骨标本并用免疫组织化学方法检测其中TGF-β1的含量,同时观察滑膜及关节软骨肉眼及光镜下的病理变化。结果:实验结果显示模型组发生明显的膝关节软骨退行性改变及滑膜炎性改变;杜灵组、杜灵组及对照组经治疗后,滑膜和关节软骨中TGF-β1的含量明显增高,与模型组相比均有非常显著性差异(P<0.01),杜灵组与杜灵组及对照组相比有显著性差异(P<0.05),杜灵组与对照组相比无显著性差异(P>0.05);经肉眼及光镜观察治疗组滑膜和关节软骨的病理改变明显轻于模型组。结论:杜灵注射液对兔早期骨性关节炎滑膜炎症及关节软骨退变有防治作用,可能是通过提高TGF-β1的含量,从而促进软骨基质合成及抑制其分解,抑制滑膜炎症反应。