高效液相色谱法测定尿中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松的含量

目的:建立测定尿液中氢化可的松和6β-羟基氢化可的松含量的方法.方法:尿样9 mL以5 mL醋酸乙酯-乙醚(4∶1)提取后,有机相以氮气吹干,以甲醇溶解后进样,检测波长为240 nm.结果:6β-羟基氢化可的松和氢化可的松标准曲线方程分别为Y=0.033X-0.007,r=0.998 9和Y=0.067X 0.002,r=0.999 6;两者的回收率分别为98.56%和99.45%;RSD分别为4.47%和3.85%.10例健康志愿者的定时尿中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的含量分别为(194.1±66.8) μg·L-1和(24.0±9.4) μg·L-1.两者之间的比值为(8.5±2.9).结论:本法灵敏可靠,符合人体尿样中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松测定的要求.     

高效液相梯度洗脱法测定尿液中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的含量

目的:用HPLC法(梯度洗脱)测定尿液中6β-羟基氢化可的松(6β-OHC)和氢化可的松(HC)的含量,计算6β-OHC和HC的比值以反映人体中CYP3A酶的活性,为其研究提供有效的分析手段。方法:采用YMC-PACK-ODS-A色谱柱(250 mm×4．6 mm,5 0μm),流动相为乙腈-0．1％硫酸铵水溶液梯度洗脱,流速:1 ml·min-1,紫外检测波长:240 nm。结果:尿液中6β-OHC在20-800 ng·ml-1浓度范围内(r=0．998 6),HC在10-480 ng·ml-1浓度范围内(r=0．999 9)线性关系良好,6β- OHC和HC的加样回收率分别为(99．8±3．6)％和(101．8±2．9)％,63名正常儿童的尿液中6β-OHC和HC的平均浓度分别为(109．94±57．13)ng·ml-1和(18．87±12．89)ng·ml-1,其比值为8．02±5．28。结论:本法操作简便、快速,准确度较高,适合人体尿样中糖皮质激素含量测定。     

RP-HPLC法测定健康者尿液中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的含量

目的建立RP-HPLC法同时检测人尿样中内源性氢化可的松及其代谢产物6β-羟基氢化可的松的含量。方法采用岛津Insertil ODS-3反相色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）进行梯度洗脱,柱温为30℃,流动相为水-乙腈,检测波长240nm。尿样用液-液萃取法处理,萃取剂为乙酸乙酯。结果 6β-羟基氢化可的松和氢化可的松标准曲线分别为y=0.004 l x-0.119 2,r=0.999 0;y=0.0127x-0.050 5,r=0.997 8,两者回收率均>95%,日内、日间RSD均<5%。20名健康志愿者尿中6β-羟基氢化可的松与氢化可的松质量浓度分别为（151.90±94.05）和（26.38±20.07）μg·L^-1,比值为6.32±2.36。结论本方法专属性强、灵敏度高、简单可靠,适用于大样本分析。     

高效液相梯度洗脱法测定尿液中羟基氢化可的松和氢化可的松的含量

目的用HPLC法(梯度洗脱)测定尿液中6β-羟基氢化可的松(6β-OHC)和氢化可的松(HC)的含量,计算6β-OHC和HC的比值以反映人体中CYP3A酶的活性,为其研究提供有效的分析手段.方法采用YMCPACK-ODS-A色谱柱(250mm×4.6 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.1%硫酸铵水溶液梯度洗脱,流速1 ml·min-1,紫外检测波长240 nm.结果尿液中6β-OHC在20～800ng·ml-1浓度范围内(r=0.998 6),HC在10～480ng·ml-1浓度范围内(r=0.999 9)线性关系良好,6β-OHC和HC的加样回收率分别为(99.8±3.6)%和(101.8±2.9)%,63名正常儿童的尿液中6β-OHC和HC的平均浓度分别为(109.94±57.13)ng·ml-1和(18.87±12.89)ng·ml-1,其比值为8.02±5.28.结论本法操作简便、快速,准确度较高,适合人体尿样中糖皮质激素含量测定.     

RP-HPLC法同时测定人血清中内源氢化可的松与可的松的含量

目的:建立测定人血清中内源性氢化可的松与可的松含量的方法。方法:采用迪马Diamonsil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水-甲醇(51:136:77);流速:1.2 ml·min~(-1);紫外检测波长:245 nm;柱温:30℃;进样量:30μl。结果:氢化可的松在50.0～300.0μg·L~(-1),可的松在10.0～100.0μg·L~(-1)的浓度范围内线性关系良好。氢化可的松与可的松的方法回收率分别为(101.83±1.19)%和(100.52±5.91)%。92名健康者血清中氢化可的松、可的松的浓度分别为(111.60±27.30)和(18.66±4.44)μg·L~(-1),其比值为(6.08±1.10)。结论:本法操作简便,灵敏度高,快速可靠,适用于氢化可的松与可的松含量的测定,为研究人体肝脏11β-羟基类固脱氢酶(11β-HSD)的活性及调整激素治疗方案提供有效的分析手段。     

高效液相色谱-二极管阵列法同时检测尿中内源性氢化可的松及其代谢产物

目的:建立高效液相色谱-二极管阵列法同时检测尿中内源性氢化可的松及其代谢产物的方法。方法:采用KromasilC18反相色谱柱(250mm×4·6mm,5μm),柱温为40℃,流动相为水-乙腈(78∶22,V/V,用磷酸调pH值至2·8,流速梯度洗脱),检测波长为238nm,尿液用固相萃取法处理。结果:6β-羟基氢化可的松和氢化可的松分别在20~1000、5~100μg/L浓度范围内线性关系良好,最低检测浓度分别为2、3μg/L,萃取回收率均大于80%,日内、日间相对标准差均小于5%。尿中6β-羟基氢化可的松与氢化可的松浓度的平均比值为0·66±0·37。结论:本方法专属性强、灵敏度高、简单可靠,可用于研究体内药物代谢机制及药物相互作用。     

高效液相色谱法测定分析中小学男生CYP3A活性

目的通过高效液相色谱法测定CYP3A酶活性,研究中小学男生CYP3A酶活性变化及其趋势。方法用高效液相色谱法梯度洗脱法测定并计算515名中小学男生尿液中6β-羟基氢化可的松和氢化可的松的比值,以反映CYP3A的活性。通过统计分析,研究CYP3A的活性的变化及其趋势。结果酶的活性在青春期前后都较平稳,但在开始发育时出现酶活性降低,有统计学意义,且发育后酶活性个体差异变大。结论中小学男生年龄跨越大,临床用经CYP3A酶代谢药物时,应根据身体发育情况适当调整。     

CYP3A酶内源性标志物的研究进展

CYP3A酶主要分布于人体肝脏和小肠,广泛参与各种药物代谢。该酶在介导药物代谢的同时也会受底物影响,其活性被诱导或抑制,从而影响其他经由CYP3A酶代谢的药物体内过程。目前可以通过体外探针药物和内源性生物标志物评价CYP3A酶活性,前者需要口服探针药物,后者只需检测内源性标志物如4β-羟基胆固醇和6β-羟基氢化可的松。文献报道,研究CYP3A酶活性除了有助于阐明不同个体的药物代谢差异,还可以提示药物相互作用情况下合用药物的剂量调整,预测药物疗效和毒性反应,为个体化用药提供理论指导,评估新药潜在的药物相互作用,降低新药上市风险。笔者对上述2种常用的内源性标志物的相关研究和临床应用进行综述。     

HPLC法同时测定氯霉素氢化可的松搽剂中氯霉素和氢化可的松的含量

目的 建立同时测定氯霉素氢化可的松搽剂中氯霉素和氢化可的松的含量测定方法.方法 采用高效液相色谱法.色谱柱为Agilent TC-C18,流动相为甲醇-水(60∶40),流速为1mL·min-1,检测波长为240nm.结果 氯霉素和氢化可的松浓度分别在19.06～762.36μg·mL-1和2.01～80.52μg·mL-1内线性关系良好,r分别为0.9997和0.9999;平均回收率分别为101.8%和102.0%,RSD分别为1.46%和1.24%(n=9).结论 该方法简单、快速、准确,可用于同时测定氯霉素氢化可的松搽剂中氯霉素和氢化可的松的含量.     

高效液相色谱法测定氯霉素氢化可的松滴耳液的含量

目的：采用ＨＰＬＣ法测定氯霉素氢化可的松滴耳液中氢霉素和氢化可的松的含量。方法：采用Ｃ１８色谱柱,流动相为甲醇－水（６０：４０ｖ／ｖ）,检测波长为２４０ｎｍ。结果：氯霉素在２５０～７５０ｕｇ．ｍｌ＾－１浓度范围内,ｒ＝０．９９９９,回收率９９．０％,ＲＳＤ＝０．５％;氢化可的松在４９．９６～１４９．８８ｕｇ．ｍｌ＾－１浓度范围内,ｒ＝０．９９９９,回收率９７．７％,ＲＳＤ＝０．８％。结论：该方法可     

HPLC法测定肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度

目的:建立测定肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18,流动相为乙腈-水-甲醇(51∶136∶77),流速为1.2 mL·min-1,紫外检测波长为245 nm,柱温为30 ℃,进样量为30 μL。结果:氢化可的松血药浓度在50～300 μg·L-1范围内线性关系良好,最低检测限为8 μg·L-1;日内、日间RSD分别为4.04%～6.81%、4.09%～9.16%,低、中、高3种浓度的方法回收率分别为(103.12±4.53)%、(100.77±4.07)%、(101.61±6.92)%。肾移植患者内源性氢化可的松术后1～3、3～6、6～12、>12个月的浓度分别为(31.89±21.42)、(45.26±29.26)、(49.69±22.00)、(53.56±29.86)μg·L-1。结论:本法操作简便、灵敏度高、快速可靠,适用于肾移植患者血清中内源性氢化可的松浓度的测定。     

HPLC法同时测定氯霉素氢化可的松滴耳液的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定氯霉素氢化可的松滴耳液含量。方法：色谱柱为Shim—packVP—ODSC18（150mm×4．6mln,5μm）;流动相为甲醇-水=65：35;氯霉素和氢化可的松检测波长分别选择为277nm和246nm;柱温为25oC,流速1．0ml·min-1。结果：氯霉素在1．41～45μg·ml-1,r=0．9997,氢化可的松在0．94～30μg·ml-1,r=0．9999范围内,线性关系良好。平均回收率氯霉素为100．5％,氢化可的松为100．7％。结论：方法快速灵敏、结果准确、重复性好,可用于该制剂的质量控制。     

反相高效液相色谱法测定注射用氢化可的松琥珀酸钠的含量

目的:采用反相高效液相色谱法测定注射用氢化可的松琥珀酸钠中21-氢化可的松半琥珀酸钠、17-氢化可的松半琥珀酸钠与游离氢化可的松的量.方法:ODS柱(4.0×250mm,10μm),流动相为甲醇:磷酸盐缓冲液,用0.008mol/L K2HP04溶液调节0.008mol/L KH2 P04溶液至pH=5.0)(43 : 57),检测波长242nm,流速1.0ml/min,柱温40℃.结果:氢化可的松琥珀酸钠的平均回收率99.68%.RSD为0.26%,氢化可的松琥珀酸钠在0.16～1.44μg浓度范围内呈良好线性,r=0.9999.游离氢化可的松在0.240～0.560μg浓度范围内呈良好线性,r=0.9999.结论:该方法快速、准确、灵敏,并能更好地控制药品质量.该方法已被中国药典2000年版2002增补本收载.     

高效液相色谱法同时测定血清中氢化泼尼松和氢化可的松

本文报道用高效液相色谱法同时测定血清中氢化泼尼松和氢化可的松浓度，血清样品经醋酸乙酯１次提取浓集后进样，采用ＹＱＧ－８０国产硅胶分析柱，以二氯甲烷─甲醇（９７：３）为流动相，地塞米松作内标，在２５４ｎｍ波长下测定洗提液，按内标法定量，并对提取及色谱条件等进行了探讨。本法具有快速、简便、灵敏、准确等特点，适用于使用相关药物或未用药病人血中氢化泼尼松、氢化可的松浓度的同时或单独测定。     

以睾酮为探针测定大鼠CYP3A酶活性的实验研究

目的建立一种简便、快速、可靠的以睾酮作为探针药物,评价大鼠CYP3A酶活性的高效液相色谱检测方法。方法色谱柱为HypersilBDSC18柱(4.6mm×150mm,5μm),柱温为25℃,检测波长为254nm,内标为氢化可的松,流动相为甲醇-10mmol·L-1Na2HPO4水溶液(pH8.25)(55∶45),流速为1mL·min-1。睾酮以大鼠肝微粒体温孵后,用乙酸乙酯萃取,离心取上清液挥干后用甲醇-水(1∶1)复溶进样分析。结果睾酮和氢化可的松的保留时间分别为17.74min和6.05min;睾酮的孵育产物6β-羟基睾酮的保留时间为4.72min,回归方程为Y=0.0756X-0.0214(r=0.9980),线性范围为0.3125～20μg·mL-1,检测限下限质量浓度为(0.078±0.016)μg·mL-1(S/N≥3),提取回收率为79.3%～95.1%,方法回收率为98.0%～104.0%,低、中、高三个浓度日内、日间RSD均小于10.4%;温孵体系中其他内源性物质不干扰测定。结论所建立的HPLC稳定、高效,适合睾酮及其代谢产物6β-羟基睾酮的测定,可应用于药物对大鼠CYP3A酶活性的评价。     

反相高效液相色谱法同时测定氯霉素氢化可的松滴耳液中氯霉素和氢化可的松含量的方法学研究

目的建立用反相高效液相色法同时测定氯霉素氢化可的松滴耳液中氯霉素和氢化可的松含量的方法.方法以Shim-pack VP-ODS柱(4.6mm×15cm,5μm)为色谱柱,甲醇-水(内含1.5%冰醋酸)(65:35)为流动相,流速1.0mL/min,进样量10μL.结果一次进样可同时测定两种组分的含量,氯霉素在154.5～1030.0μg/mL,氢化可的松在32.4～210.0μg/mL范围内,峰面积与其浓度均呈良好的线性关系,r值分别为0.999 9和0.999 6,日内精密度和日间精密度良好,平均回收率分别为100.1%,RSD=0.49%(n=9)和100.2%,RSD=0.42%(n=9)结论方法简单快速,结果准确,可作为该制剂的质控分析.     

HPLC法测定氢化可的松二甲基亚砜搽剂中氢化可的松的含量

目的 建立测定氢化可的松二甲基亚砜搽剂中氢化可的松含量的方法。方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Agela Venusil MP C₁₈(3μm, 4.6×150 mm),流动相为乙腈∶水(25∶75),流速为1.0 mL·min^-1;氢化可的松的检测波长为246 nm;柱温为30℃,进样量为10μL。结果 氢化可的松在4.12μg·mL^-1～82.4μg·mL^-1(r=0.9999)范围内,线性关系良好,平均回收率为99.2%(RSD=0.53%)。结论 方法专属性强、重现性好、结果准确,可用于该制剂的质量控制。     

HPLC法测定丁酸氢化可的松凝胶中丁酸氢化可的松的含量

目的:建立测定丁酸氢化可的松凝胶中丁酸氢化可的松含量的方法。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Phenomen C18柱,流动相为乙腈-0.5%醋酸水溶液(51:49,V/V),检测波长为240nm,流速为1.0ml/min,柱温为25℃,进样量为20μl,灵敏度为1.0AUFS。结果:丁酸氢化可的松的进样量在97.6～878.4ng范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9991);平均回收率为99.5%,RSD=0.45%(n=9)。结论:该方法简便、灵敏、准确,可用于丁酸氢化可的松凝胶的质量控制。     

反相高效液相色谱法测定醋酸氢化可的松软膏的含量

目的:改进了醋酸氢化可的松软膏的含量测定方法,为其质量控制提供快速、有效的分析方法。方法:色谱柱为ODS柱(4.6mm×150mm,4.5μm),流动相:乙腈-水(38∶62),检测波长254nm,流速:1.0mL.min-1,柱温:40℃。结果:醋酸氢化可的松的平均回收率为99.89%(n=3);醋酸氢化可的松的浓度在4.5-53.9μg.mL-1范围内呈良好线性关系(r=0.9990)。结论:该方法快速、简单、准确、灵敏、重复性好。     

HPLC测定黄体酮氢化可的松霜中黄体酮和氢化可的松的含量

目的 建立黄体酮氢化可的松霜中黄体酮和氢化可的松含量测定的高效液相法.方法采用C18色谱柱,,流动相为乙腈-水(11),检测波长为240 nm,流速为1.0 mL·min-1.结果黄体酮浓度在8.012～40.06μg·mL-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 91),平均回收率为99.56%(RSD%为1.47%).氢化可的松浓度在59.43～138.67 μg·mL-1内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.999 94),平均回收率为100.19%(RSD%为1.28%).结论 本法简便、快捷,结果准确,适用于该制剂的质量控制.