黄芪注射液对高糖或AGEs培养肾小球系膜细胞增殖和Na+-K+-ATP酶活性的影响

[目的]观察黄芪注射液对高糖或糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)增殖和Na -K -ATP酶活性的影响。[方法]用含高糖或AGEs的培养液配制黄芪注射液、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后,四甲基氮唑盐(MTT)法考察GMC的增殖情况,试剂盒测试细胞悬液中细胞蛋白含量,再进行Na -K -ATP酶测定。[结果]葡萄糖或AGEs中GMC的吸收度值增大,Na -K -ATP酶活性显著降低,与正常培养液比较具有显著性差异。而加入黄芪注射液后,则表现为对抗高糖或AGEs对GMC的增殖作用,并能提高Na -K -ATP酶活性。[结论]黄芪注射液能抑制高糖或AGEs对GMC的过度增殖,修复高糖或AGEs致GMC的Na -K -ATP酶活性降低,起到保护细胞的作用。     

黄芪对肾小球系膜细胞产生IL-6的影响

黄芪是在慢性肾脏疾病治疗中应用最为广泛的药物之一，具有补气升阳，益卫固表，托疮生肌，利水消肿的功效。经众多医家临床研究发现是治疗慢性肾炎、肾病综合征、慢性肾功能衰竭等肾脏疾病的有效药物。我们以往的临床实践和实验研究证实以黄芪为主制成的通脉口服液不仅具有减少蛋白尿、调节机体免疫功能、提高机体抵抗力等作用，且可改善肾炎大     

肾康注射液对肾小球系膜细胞产生IL-1的影响

目的：探讨中药肾康注射液(SK)对肾小球系膜细胞产生IL-1的影响。方法：以腊多糖(LPS)刺激肾小球系膜细胞产生IL-1，采用胸腺细胞增殖法测定IL-1活性，以。H-TdR掺入法测定胸腺细胞的增殖。结果：不同肾康注射液剂量组的IL-1水平均明显低于LPS对照组。结论：肾康注射液可抑制系膜细胞产生IL-1，该抑制作用具有一定的量效关系，其最佳抑制浓度为25μg/ml。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞抑制作用的血清学研究

目的探讨肾康注射液与苯那普利对人肾小球系膜细胞(MC)增殖的不同抑制作用强度。方法采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法，观察具有降逆泄浊、益气活血作用的中药肾康注射液及苯那普利对MC增殖的影响。结果肾康注射液与苯那普利对MC增殖均具有抑制作用，但在等效剂量浓度下，肾康注射液对MC的抑制作用优于苯那普利。结论MC是肾康注射液发挥治疗作用的重要靶细胞，抑制MC增殖可能是该方延缓肾小球硬化的重要机制之一。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞抑制作用的血清学研究

目的：探讨肾康注射液与苯那普利对人肾小球系膜细胞（MC）增殖的不同抑制作用强度。方法：采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法,观察具有降逆泄浊,益气活血作用的中药肾康注射液及苯那普利对MC增殖的影响。结果：肾康注射液与苯那普利对MC增殖均具有抑制作用,但在等效剂量浓度下,肾康注射液对MC的抑制作用优于苯那普利,结论：MC是肾康注射液发挥治疗作用的重要靶细胞,抑制MC增殖可能是该方延缓肾小球硬化的重要机制之一。     

黄芪、水蛭、水蛭素及水蛭黄芪配方含药血清对大鼠肾小球系膜细胞生长周期及凋亡的影响

目的:比较黄芪、水蛭、水蛭素及水蛭黄芪配方对大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)生长周期、凋亡的影响及凋亡的形态学观察。方法:应用流式细胞仪检测GMCs生长周期与凋亡;用瑞氏染色,显微镜观察凋亡细胞的形态。结果:水蛭、水蛭素、黄芪、水蛭黄芪配方含药血清均能使大量GMCs处于G0/G1期,与对照组比较有显著性差异(P<0.01);均能提高GMCs凋亡率,水蛭、水蛭黄芪配方与对照组比较有显著性差异(P<0.01)。结论:水蛭、水蛭素、黄芪、水蛭黄芪配方含药血清均能阻止GMCs进入S期从而达到抑制增生的目的,且能提高GMCs的凋亡率,水蛭黄芪配方效果最优,水蛭次之。     

肾康注射液对肾小球系膜细胞增殖的影响

为了探讨中药肾康注射液（ＳＫ）对肾小球系膜细胞增殖的影响,笔者采用人的肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入率无明显低于对照组,提示肾康注射液可明显抑制人肾小球系膜细胞增殖。     

肾康注射液对脂多糖诱导肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨中药肾康注射液（SK）对脂多糖（LPS）诱导肾小球系膜细胞增殖的影响。方法：采用人肾小球系膜细胞进行体外培养,用氚标记的胸腺嘧啶核苷（^3H-TdR)掺入法观察其增殖情况。结果：不同肾康注射液剂量组^3H-TdR掺入率均明显低于对照组。结论：肾康注射液可明显抑制脂多糖诱导的人肾小球系膜细胞增殖。     

黄芪甲苷对肾小球系膜细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制

目的:研究黄芪甲苷(astragalosideⅣ,ASⅣ)对H2O2诱导肾小球系膜细胞(human mesangial cells,HMC)氧化应激损伤的保护作用,并进一步探讨其分子机制.方法:将培养的肾小球系膜细胞随机分为5组:正常对照组、H2O2模型组、AS Ⅳ(12.5,100 nmol·L-1)组、阳性药(Tempol,1×105nmol·L-1)组.采用MTT法观察细胞活力;Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;DHE染色检测胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生;流式细胞术检测细胞周期变化情况;Western blot方法测定细胞周期蛋白Cyclin D1,Cyclin A及磷酸化p38,T-p38的表达.结果:1×105,2×105,3×105,4×105nmol·L-1H2O2均能诱导肾小球系膜细胞发牛氧化应激损伤:细胞存活率明显降低,细胞活力与H2O2浓度及其作用的时间呈正相关下降趋势.100 nmol·L-1黄芪甲苷能够显著减轻H2O2(3×l05nmol·L-1)诱导的肾小球系膜细胞氧化应激损伤:提高细胞存活率及细胞活力,抑制细胞凋亡,降低胞内ROS产量;恢复细胞周期蛋白Cyclin D1表达及各细胞周期的百分比,恢复细胞的正常增殖;降低磷酸化p38的表达.结论:黄芪甲苷对H2O2诱导肾小球系膜细胞氧化应激损伤有一定的保护作用.其机制可能与抑制p38/MAPK信号通路,影响细胞周期蛋白Cyclin D1的表达及降低H2O2诱导的细胞内ROS氧化应激损伤有关.     

葛根素对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的：探讨葛根素对大鼠肾小球系膜细胞（GMCs）增殖的影响。方法：体外培养大鼠肾小球系膜细胞,分空白对照组和葛根素组。葛根素组采用MTT法,观察12h、24h、48h和72h后GMcs的增殖水平。结果：随着葛根素浓度的提高及作用时间的延长,GMCs细胞的生长抑制率呈现上升趋势。结论：葛根素能抑制GMCs增殖,并与药物的浓度和作用时间呈明显正相关。     

山茱萸环烯醚萜总苷对高糖或AGEs培养肾小球系膜细胞增殖和Na+,K+-ATP酶活性的影响

目的:研究山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对高糖或糖化终产物(AGEs)培养肾小球系膜细胞(GMC)增殖和Na ,K -ATP酶活性的影响。方法:用含AGEs或高糖的培养液配制ICO、氨基胍,同时设对照。GMC培养48h后MTT法考察GMC的增殖情况,试剂盒测试细胞悬液中细胞蛋白含量,再进行Na ,K -ATP酶测定。结果:于葡萄糖或AGEs中GMC的吸收度值增大,Na ,K -ATP酶活性显著降低,而加入ICO后,则表现为对抗高糖或AGEs对GMC的增殖作用,并能提高Na ,K -ATP酶活性。结论:ICO能抑制高糖或AGEs对GMC的过度增殖,修复高糖或AGEs致GMC的Na ,K -ATP酶活性降低。     

复方血尿停经肝微粒体代谢后对肾小球系膜细胞的影响

目的探讨复方血尿停治疗以系膜增生为主要病理改变的肾小球疾病的作用机制。方法将复方血尿停与大鼠肝微粒体共同孵育后加入到肾小球系膜细胞(GMC)体外培养体系中,MTT法观察细胞增殖情况,放射免疫法测定白细胞介素-6(IL-6)、内皮素-1(ET-1)水平,速率法检测乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果经肝微粒体代谢后,复方血尿停2、4、8mg/mL均抑制GMC的增殖及IL-6、ET-1的产生,且呈剂量依赖方式。结论复方血尿停能抑制IL-6、ET-1的分泌和GMC的增殖,此作用可能是其治疗系膜增生性肾小球疾病的作用机制之一。     

益肾蠲湿合剂对肾小球系膜细胞外基质影响的研究

目的观察中药复方益肾蠲湿合剂对肾小球系膜细胞(GMC)分泌细胞外基质的抑制作用。方法将含低、中、高剂量益肾蠲湿合剂的药物血清和10%血清-DMEM培养液共同培养GMC 24,48和72 h,分别收集细胞培养上清,用Elisa法检测培养上清中纤维连结蛋白(FN)、层黏连蛋白(LN)及Ⅳ型胶原(ColⅣ)含量。结果益肾蠲湿合剂的药物血清可抑制体外培养的GMC分泌FN、LN和ColⅣ,其抑制程度与药物浓度有一定的量效关系,即随药物浓度的增加对GMC分泌FN、LN和ColⅣ的抑制率也相应增加。结论中药复方益肾蠲湿合剂对体外培养的GMC分泌FN、LN和ColⅣ有明显的抑制作用,提示抑制GMC分泌细胞外基质是本复方治疗慢性肾炎的重要机制之一。     

黄芪注射液对荷瘤小鼠免疫功能的影响

目的：探讨黄芪注射液的免疫作用。方法：以黄芪注射液对小鼠S180进行抑瘤实验观察，同时对红细胞免疫功能和超氧化物歧化酶（SOD）的变化进行检测。结果：黄芪注射液能抑制瘤细胞生长，并对红细胞 红细胞SOD有良好增强作用，能增强红细胞免疫功能，提高SOD的活性。结论：黄芪注射液对荷瘤小鼠红细胞免疫和SOD活性均有增强作用。     

化纤方对肺纤维化模型大鼠肺组织匀浆中GSH-PX SOD活性及MDA含量的影响

目的：观察化纤方对肺纤维化模型大鼠肺组织匀浆中超氧化物歧化酶（Superoxide Dismutase,SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（Glutathione peroidase,GSH-PX）的活性及丙二醛（Maleic Dialdehyde,MDA）含量的影响,探讨化纤汤在大鼠肺纤维化过程中,对肺组织的保护作用的机理。方法：144只清洁级SD雄性大鼠,体重180-220g,随机分成正常对照组（A组）、博来霉素模型组（B组）、强的松干预组（C组）、化纤方大（D组）、中（E组）、小（F组）剂量干预组.每组各24只,除A组外,其余各组采用博来霉素复制大鼠肺纤维化模型,造模第2天起,D、E、F组每天分别用化纤方（浓度依次为2、1、0.5g/mL）灌胃,C组用醋酸强的松混悬液灌胃,A、B组用生理盐水灌胃,每组分别于7、14、28天随机处死8只大鼠,采集肺组织,制作匀浆,检测各组肺组织匀浆中SOD、GSH-PX的活性及MDA含量的变化.结果：化纤汤能提高肺组织匀浆中的GSH-PX和SOD活性,降低MDA的含量。结论：化纤方对肺纤维化大鼠的作用机制,可能是通过调节其体内自由基水平,减轻自由基对肺组织结构的氧化损伤,而且化纤汤大剂量组的作用优于中小剂量组,呈一定的量效关系。     

血尿停冲剂加S-9对肾小球系膜细胞凋亡及bax和bcl-2表达的影响

目的　探讨血尿停冲剂对肾小球系膜细胞凋亡及凋亡相关基因bax、bcl- 2表达的影响 ,以阐明其治疗系膜增生性肾病有效的作用机制 ,为临床利用该药治疗以系膜增生为核心病理环节的多种肾脏疾病提供实验理论依据。方法　采用肾小球系膜细胞培养方法进行体外研究 ,用不同剂量与S - 9共同孵育的血尿停冲剂刺激 4～ 6代系膜细胞 16h ,MTT法测定系膜细胞增殖指数 ;TUNEL法定量观察凋亡细胞 ;流式细胞术检测凋亡相关基因bax、bcl- 2的表达。结果　加入血尿停冲剂 (S - 9) 16h后 ,系膜细胞出现了典型的凋亡征象 ,诸如细胞内深棕色颗粒形成、核固缩、碎裂等 ;凋亡率显著高于对照组 (P <0 .0 1) ;同时血尿停各组bax、bcl- 2表达亦明显高于对照组 (P <0 .0 1或P<0 .0 5 )。 结论　血尿停冲剂可能通过调控bax和bcl - 2基因表达诱导系膜细胞凋亡 ,促进肾小球增殖性病变消散     

清热利湿中药对大鼠肾小球系膜细胞增殖的影响

目的探讨清热利湿中药利肾口服液防治肾小球疾病的机制。方法常规方法体外培养大鼠肾小球系膜细胞并加入白细胞介素-1(IL-1)及中药利肾口服液,采用3H-TdR掺入法检测系膜细胞增殖情况。结果利肾口服液可显著抑制体外培养的肾小球系膜细胞,并对IL-1刺激肾小球系膜细胞的增殖有显著的抑制作用,并呈一定的量效关系。结论利肾口服液防治肾小球疾病的机制与免疫调节、直接抑制和拮抗IL-1刺激肾小球系膜细胞的增殖等有关。     

氧化应激对大鼠肾脏系膜细胞增生的影响及迷迭香酸的干预作用

目的观察在大鼠肾小球系膜细胞增生过程中氧化与抗氧化系统的改变及迷迭香酸的干预作用。方法培养大鼠肾小球系膜细胞,以PDGF刺激系膜增生及迷迭香酸干预。实验设正常对照组、增生组、单纯迷迭香酸组和迷迭香酸干预组。利用分光法分别测定培养细胞中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果在培养的促有丝分裂刺激后肾小球系膜细胞中MDA含量升高,SOD减少;迷迭香酸的干预能降低MDA的产生,促进SOD的产生。结论氧自由基及其诱发的脂质过氧化参与了系膜细胞的增生,而迷迭香酸则能抑制系膜细胞的上述改变,具有抗氧化活性。     

黄芪注射液对雌激素受体的激活作用研究

目的构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,研究黄芪注射液对雌激素受体(ER)活性的影响。方法PCR扩增雌激素受体配体结合域,将配体结合域克隆到真核表达质粒pCMV-BD构建细胞杂交基因报告系统,研究黄芪注射液与雌激素受体的关系;MTT法检测黄芪注射液对细胞活力的影响。结果成功构建含有雌激素受体配体结合域的哺乳动物细胞杂交基因报告系统,黄芪注射液不能提高细胞活性,但对雌激素受体具有激活作用。结论黄芪注射液可能通过雌激素受体发挥疗效,细胞杂交基因报告系统是研究中药作用机理的手段之一。