产ESBLs肺炎克雷伯菌的整合子介导耐药的研究

目的研究产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性、整合子的分布以及ESBLs的基因表型，探讨整合子介导的耐药机制在产ESBLs菌耐药性中的作用。方法对368株产EsBLs肺炎克雷伯菌进行PCR检测，分析其整合子结构基因以及ESBLs基因（blaT旷bla…和6肠CTXM）。结果I类整合子、6肠sH。、6f口T旷6f口cTx_M的检测率分别为54．35％、40．93％、42．75％、44．82％，未检测到II、III类整合子阳性菌；携带6肠。。基因的菌株检测到I类整合子的比例显著高于携带6肠。~NSDbtaCTXM基因的菌株（P〈O．01）；环丙沙星、头孢吡肟、左旋氧氟沙星和哌拉西林外，整合子阳性和整合子阴性产ESBLs肺炎克雷伯菌株对其他8种抗生素的耐药率不同（P〈O．05）。结论我院产ESBLs肺炎克雷伯菌中整合子以I类整合子为主，II类和III类整合子较少；我院ESBLs肺炎克雷伯菌b／a…．．比例略高；I类整合子参与产ESBLs肺炎克雷伯菌耐药性的形成。     

儿童志贺菌Ⅰ类整合子及与产超广谱β-内酰胺酶基因关系的研究

目的：研究儿童志贺菌Ⅰ类整合子表达及其与产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）基因的相关性。方法：采用PCR方法检测60株产ESBLs志贺菌基因分型以及检测60株产ESBLs与60株非ESBLs志贺菌Ⅰ类整合酶基因,以分析Ⅰ类整合子与细菌耐药性的关系以及与ESBLs基因的关系。结果：儿童临床产ESBLs志贺菌耐药基因分型以CTX-M型最多见（85.0%）,其次为TEM-1型（50.0%）。产ESBL菌株基因分型分布情况以CTX-M型最多见（56.7%）,其次为TEM-1+CTX-M型（20.0%）和TEM-1型（20.0%）。产ESBLs和非产ESBLs菌株中Ⅰ类整合酶扩增阳性例数分别是55例（91.7%）和15例（25.0%）,两组整合子阳性率比较差异有统计学意义（P<0.01）,同时Ⅰ类整合子表达与ESBLs具有相关性（R=0.67,P<0.01）;Ⅰ类整合子阳性的菌株耐药性明显高于Ⅰ类整合子阴性的菌株,整合子阳性株对环丙沙星、左氧氟沙星以及复方磺胺甲噁唑耐药率较高,依次为84.3%、58.6%和90.0%。结论：儿童产ESBLs志贺菌中Ⅰ类整合子携带率明显高于ESBLs阴性菌株,显示儿童志贺菌Ⅰ类整合子与ESBLs基因之间存在密切相关性。     

肺炎克雷伯菌临床分离株产广谱和超广谱β-内酰胺酶的基因型研究

目的 了解产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及其基因型分布特征,指导临床进行抗感染治疗,更好地控制耐药菌株的播散.方法 对38株经双纸片试验确认为ESBLs表型阳性的肺炎克雷伯菌采用纸片扩散法进行药物敏感性试验;采用PCR法对ESBLs阳性株进行TEM型、SHV型、CTX-M型、VEB型和PER型ESBL基因检测,对PCR阳性产物进行测序确定基因型别;同时采用PCR法检测整合酶基因,对PCR产物进行测序确定整合酶类别.结果 38株产ESBLs的肺炎克雷伯菌对青霉素类和头孢菌素类耐药性十分严重,对庆大霉素和复方磺胺甲嚼唑的耐药率也均＞90%,未检测到耐亚胺培南和美罗培南的菌株.38株ESBLs阳性菌株检测到3种ESBLs型,分别为TEM型、SHV型和CTX-M型,VEB型和PER型没有被检出.CTX-M型、TEM型和SHV型阳性率分别为92.1%(35/38)、84.2%(32/38)、76.3%(29/38).整合酶基因阳性率为94.7%(36/38).经测序,所有TEM型均为TEM-1广谱β内酰酶.29株SHV型阳性的PCR产物经测序证实,SHV-12有19株,SHV-11有4株,SHV-2有3株,SHV-28有2株及SHV-1有1株.35株CTX-M型中,CTX-M-14有22株,CTX-M-15有13株.同时检测到3种基因的有22株(57.9%),同时检测到2种基因的有14株(36.8%).整合酶基因PCR产物经测序为Ⅰ类整合子.结论 产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性及多重耐药性严重,Ⅰ类整合子是其多重耐药和耐药性传播的主要原因;CTX-M-14及SHV-12为肺炎克雷伯菌产ESBLs的主要基因型.     

肺炎克雷伯菌Ⅰ型整合子的检测与鉴定

目的研究Ⅰ型整合子参与肺炎克雷伯菌耐药的分子机制。方法收集2007年至2010年某院临床分离的297株肺炎克雷伯菌,应用K-B纸片扩散法检测耐药性,采用聚合酶链式反应进行I类整合子整合酶基因的检测;整合子可变区扩增、克隆测序,分析I类整合子基因结构。结果 297株肺炎克雷伯菌中,除MEM、IPM外,对其余11种抗菌素,Ⅰ类整合酶基因阳性菌株的耐药率明显高于Ⅰ类整合酶基因阴性菌株。57.91%(172/297)的菌株I类整合子整合酶基因阳性,共检测出10种不同基因盒。可变区编码耐药基因有aadA2、aadA1、aadA5、aadA3C、aacA4,介导氨基糖苷类抗菌素耐药;dhfrhI、dfrA12、dfrA14、dfrA17、dfrA1、dfrA25、dhfrhI,介导磺胺类抗菌素的耐药;aar-2,介导利福平耐药。结论Ⅰ类整合子在本院临床分离肺炎克雷伯菌中分布较广泛,主要介导氨基糖苷类和磺胺类抗菌素耐药。整合子与肺炎克雷伯菌的耐药有关,在肺炎克雷伯菌耐药性的形成和播散中具有重要作用。     

产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药基因研究

目的研究产ESBLs肺炎克雷伯菌临床分离株的耐药性以及ESBLs的基因表型.方法对500株产ESBLs肺炎克雷伯菌的可疑临床分离株进行ESBLs确证,并采用琼脂稀释法进行药敏试验;采用聚合酶链（PCR）反应分析368株产ESBLs肺炎克雷伯菌株的ESBLs基因（blaTEM、blaSHV和blaCTX-M）,分析产ESBLs肺炎克雷伯菌的耐药性及ESBLs的基因表型情况.结果产ESBLs肺炎克雷伯菌筛选试验初步筛出500株,通过进一步确认试验368 （77.2％）株确认为出产ESBLs菌;368株产ESBLs肺炎克雷伯菌株中有158株（40.93％）检测到blasHv,165株（42.75％）检测到blaTEM,173株（44.82％）检测到blacTX-M;除阿米卡星、加替沙星、环丙沙星、左旋氧氟沙星外,产ESBLs肺炎克雷伯菌株和不产ESBLs肺炎克雷伯菌株对其他8种抗生素的耐药率不同（P＜ 0.01）;结论产ESBLs肺炎克雷伯菌其耐药性高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌;我院ESBLs肺炎克雷伯菌blaCTX-M比例略高.     

多重耐药肺炎克雷伯菌的分析

目的 了解某地区多重耐药肺炎克雷伯茵的特点,为临床治疗及控制医院感染提供理论依据.方法 用K-B法进行常规药敏试验,筛选出多重耐药肺炎克雷伯菌,用确认试验检测超广谱B-内酰胺酶(ES-BLs),同时以头孢西丁三相试验检测以上菌株产AmpC酶情况.结果 107株多重耐药肺炎克雷伯菌中单一检出产ESBLs 53株(49.5%),产AmpC酶30株(28.0%),同时产ESBLs和AmpC酶24株(22.4%).它们对氨基苷类、喹诺酮类及头孢菌素类药物表现出较高的耐药性.结论 某地区多重耐药肺炎克雷伯菌产酶率较高,主要产ESBLs和AmpC酶,应加强其耐药性监测,合理选用抗生素,减缓多重耐药菌株的产生.     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测和耐药性研究

目的 研究汕头地区革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）情况及其耐药特性,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 收集汕头地区革兰阴性杆菌共1 445株（大肠埃希菌895株和肺炎克雷伯菌550株）,采用Vitek-2全自动细菌鉴定和药敏分析仪进行ESBL检测和药敏实验.结果 69.4%大肠埃希菌和33.6%肺炎克雷伯菌产ESBLs.产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类和单环类抗生素的耐药率极高 产ESBLs菌株存在多重耐药性,而且对多种抗生素的耐药率明显比不产ESBLs菌株高 产ESBLs菌株和不产ESBLs菌株对亚胺培南均未出现耐药.结论 汕头地区革兰阴性杆菌中ESBLs菌株检出率高 产ESBLs菌株耐药性比不产ESBLs菌株高,且耐药表型多样性 亚胺培南是临床治疗产ESBLs菌株感染的首选药物.     

某三级甲等医院肺炎克雷伯菌耐药性及耐药基因分析

目的:分析某三级甲等医院连续4年肺炎克雷伯菌的耐药性及耐药基因分布,了解耐药性变化趋势,指导临床合理用药。方法:使用VITEK-32全自动微生物分析仪进行细菌鉴定,用纸片法和最低抑菌浓度(MIC)试验进行药敏分析,用聚合酶链式反应(PCR)对产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)菌株可能携带的主要β-内酰胺酶耐药基因进行检测。结果:在182株临床分离的肺炎克雷伯菌中,痰和咽拭子标本分离率占首位(78.6%);对检测的13种抗菌药物耐药谱分析显示,该菌对哌拉西林耐药率最高,对亚胺培南和美罗培南敏感;产ESBLs菌株的检出率约30%;51%以上的产ESBLs菌株携带至少1种所检测的耐药基因,以blaTEM为主。结论:该院肺炎克雷伯菌分离株耐药范围广、产ESBLs菌检出率高,应引起重视。     

产超广谱β-内酰胺酶革兰阴性杆菌的检测和耐药性研究

目的 研究汕头地区革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)情况及其耐药特性,为临床合理使用抗生素提供依据.方法 收集汕头地区革兰阴性杆菌共1 445株(大肠埃希菌895株和肺炎克雷伯菌550株),采用Vitek-2全自动细菌鉴定和药敏分析仪进行ESBL检测和药敏实验.结果 69.4%大肠埃希菌和33.6%肺炎克雷伯菌产ESBLs.产ESBLs菌株对青霉素类、头孢菌素类和单环类抗生素的耐药率极高;产ESBLs菌株存在多重耐药性,而且对多种抗生素的耐药率明显比不产ESBLs菌株高;产ESBLs菌株和不产ESBLs菌株对亚胺培南均未出现耐药.结论 汕头地区革兰阴性杆菌中ESBLs菌株检出率高;产ESBLs菌株耐药性比不产ESBLs菌株高,且耐药表型多样性;亚胺培南是临床治疗产ESBLs菌株感染的首选药物.     

慢性阻塞性肺疾病患者下呼吸道肺炎克雷伯菌感染的耐药性分析

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者下呼吸道肺炎克雷伯菌感染的耐药性分析。方法选择COPD患者下呼吸道标本分离的肺炎克雷伯菌105株,采用改良的酶提取物三维试验法测定ESBLs,并检测其对13种常用抗生素的耐药性。结果从115株肺炎克雷伯菌中检出产ESBLs菌株47株,检出率高达40.9%。除亚胺培南外,产ESBLs菌株对13种常用抗生素的耐药性均高于非产ESBLs菌株(P<0.01)。结论 COPD下呼吸道肺炎克雷伯菌感染产生耐药性的主要原因是产生ESBLs,临床经验用药首选β-内酰胺类/β-内酰胺酶抑制剂和头霉类抗生素,对重症感染首选碳青霉烯类抗生素。