麻杏石甘汤对哮喘模型小鼠气道重塑及肺组织MMP-9和TIMP-1表达的影响

目的:观察麻杏石甘汤对哮喘模型小鼠气道重塑及肺组织基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶组织抑制物1(TIMP-1)表达的影响,探讨其治疗哮喘的可能机制。方法:将72只健康雌性BALB/c小鼠随机分为:空白对照组,模型组,麻杏石甘汤低剂量组、中剂量组和高剂量组,阳性对照组。采用卵清蛋白致敏激发建立小鼠哮喘模型。空白对照组和模型组于激发前30 min以生理盐水灌胃;麻杏石甘汤低剂量组、中剂量组和高剂量组分别于激发前30 min以麻杏石甘汤按5.0 g/kg、10.0 g/kg和20.0 g/kg剂量灌胃;阳性对照组于激发前30 min以地塞米松按0.005 g/kg剂量灌胃。连续给药7 d后,观察气道反应性、支气管肺泡冲洗液(BALF)中嗜酸性粒细胞(EOS)计数、杯状细胞百分比和胶原沉积的变化;ELISA法检测MMP-9和TIMP-1水平;Western blot法检测MMP-9和TIMP-1的蛋白表达;RT-qPCR法分析检测MMP-9和TIMP-1的mRNA表达。结果:与空白对照组比较,模型组的气道反应性、杯状细胞百分比、胶原沉积、BALF中EOS计数及肺组织MMP-9和TIMP-1的mRNA和蛋白水平均显著升高(P 0.01);与模型组比较,麻杏石甘汤低剂量组、中剂量组和高剂量组及阳性对照组上述指标则明显降低(P 0.05或P 0.01)。结论:麻杏石甘汤可能通过降低MMP-9和TIMP-1的表达改善哮喘模型小鼠气道重塑状态。     

CpG ODN和地塞米松对哮喘气道的重塑及MMP-9、TIMP-1表达的影响

目的： 探讨非甲基化胞嘧啶-鸟嘌呤的寡核苷酸(CpG ODN)和糖皮质激素对哮喘气道重塑和肺内MMP-9及TIMP-1表达的影响。方法： 以卵蛋白致敏激发的慢性哮喘小鼠模型为对象，测定正常对照组、哮喘组、地塞米松组及CpG ODN组小鼠支气管上皮黏膜层面积(WAmuc)、平滑肌面积(WAmus)、气管内壁面积(WAi),并用支气管基底膜周径(Pbm)标准化。天狼猩红染色测定气道Ⅰ、Ⅲ型胶原的面积。免疫组化方法测定气道基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及其抑制剂TIMP-1，行免疫组化图像分析。结果： (1) CpG ODN组和地塞米松组的WAmuc/Pbm、WAmus/Pbm、WAi/Pbm显著大于对照组而显著小于哮喘组（P<0.05），而CpG ODN组和地塞米松组间则无显著差异（P>0.05）;(2) CpG ODN组和地塞米松组Ⅰ、Ⅲ型胶原面积较大于对照组而明显低于哮喘组(P<0.05)；(3) CpG ODN组和地塞米松组MMP-9、 TIMP-1表达明显高于对照组而显著小于哮喘组(P<0.05)，而CpG ODN组和地塞米松组间则无显著差异（P>0.05）。结论： 慢性哮喘小鼠气道壁明显增厚，而早期行CpG ODN和地塞米松干预则可通过抑制肺内MMP-9、TIMP-1的表达而减轻气道重塑。     

垂体腺瘤中MMP-9及TIMP-1表达与肿瘤生物学行为的关系

目的　探讨MMP 9及其抑制因子TIMP 1在垂体腺瘤中表达与肿瘤生物学行为的关系。方法　应用免疫组化S P法检测上述基因蛋白在 2 3例侵袭性和 2 4例非侵袭性垂体腺瘤组织中的表达。结果　侵袭性垂体腺瘤组中MMP 9的表达和MMP 9表达超过TIMP 1的比例高于非侵袭性腺瘤组 (P <0 0 5 ) ;TIMP 1在侵袭性垂体腺瘤组的表达有降低的趋势 ,但无统计学意义 (P >0 0 5 ) ;MMP 9与TIMP 1表达呈正相关 (P <0 0 5 )。结论　MMP 9表达上调导致其和TIMP 1的表达失衡与垂体腺瘤侵袭性有关 ,MMP 9可作为评估垂体腺瘤侵袭性的分子生物学指标     

基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2在子宫内膜异位症血清中的表达及临床意义

目的探讨基质金属蛋白酶MMP-2、MMP-9及其抑制因子TIMP-1、TIMP-2在子宫内膜异位症（EMs）血清中的表达及临床意义。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测55例EMs患者和30例对照组血清中删P-2,MMP-9、TIMP-1和TIMP-2水平。结果BMs组血清中MMP-2和MMP-9水平显著高于对照组,TIMP-1和TIMP-2水平显著低于时照组（P〈0．05）。Ⅲ-Ⅳ期血清MMP-2和MMP-9水平显著高于Ⅰ-Ⅱ期和对照组,TIMP-1和TIMP-2水平显著低于Ⅰ-Ⅱ期和对照组（P〈0．05）。结论MMP-2、MMP-9与Elds发生和发展相关,TIMP-1、TIMP-2对MMP-2、MMP-9水平调节有重要作用。     

哮喘豚鼠MMP-9、TIMP-1免疫反应的变化及与气道重塑的关系

目的　观察实验性哮喘豚鼠气道平滑肌基质金属蛋白酶 9(MMP 9)及其抑制剂 (TIMP 1)的表达以及气道平滑肌厚度的变化。方法　用免疫组织化学结合显微图像分析测定气道平滑肌MMP 9、TIMP 1免疫反应的变化及气道平滑肌厚度。结果　MMP 9、TIMP 1广泛分布于气道平滑肌。哮喘组MMP 9平均灰度值(10 5 94± 6 0 9)明显低于对照组 (12 0 2 5± 3 6 6 ) (P <0 0 1) ;哮喘组TIMP 1平均灰度值 (99 36± 5 71)明显低于对照组 (12 3 4 5 7) (P <0 0 1) ;哮喘组气道平滑肌厚度 (6 45± 1 83μm2 / μm)明显高于对照组 (3 17± 0 85 )(P <0 0 5 )。结论　MMP 9、TIMP 1可能参与哮喘时气道重塑。     

HIE患儿血清MMP-9及TIMP-1水平变化及临床意义

目的探讨MMP-9、TIMP-1在HIE患儿血清中表达的临床意义。方法采集正常新生儿和30例HIE患儿（按病情分为轻度、中度、重度3组）发病后1、3、7d血液,采用ELISA法检测MMP-9,透射比浊法检测TIMP-1浓度,并与正常组进行比较分析。结果轻、中、重度3组HIE患儿血清MMP-9与TIMP-1水平于发病后1、3、7d与对照组比较均升高,差异有统计学意义（P〈0.05）;3组患儿中尤以重度组增高显著（P〈0.01）,且发病第3天MMP-9与TIMP-1均达峰值。结论 MMP-9、TIMP-1参与了HIE的发病,检测其血清水平对疾病严重程度及预后有一定的提示作用。     

蜕膜组织MMP-9/TIMP-3水平与自然流产关系

目的研究蜕膜组织中MMP-9／TIMP-3之间的平衡与自然流产发生的关系。方法用免疫组化S-P法测定30例自然流产患者与20例正常妊娠者蜕膜组织中MMP-9／TIMP-3的表达。结果研究组蜕膜细胞MMP-9表达阳性率为76．7％，高于对照组(55．0％，P-0．02)，两组蜕膜细胞TIMP-3的表达差异无显著性。结论自然流产患者蜕膜组织中MMP-9的表达增高，TIMP-3表达正常所导致的MMP-9／TIMP-3比例升高，在自然流产的发生中起重要作用。     

佐剂性关节炎大鼠心功能及心肌MMP-9、TIMP-1变化

目的:观察佐剂性关节炎(Adjuvant Arthritis,AA)大鼠心功能、MMP-9及TIMP-1蛋白在心肌中表达。方法:将24只大鼠随机分为正常对照组(Normal Control,NC)、模型对照组(Model Control,MC),每组12只,分别向模型对照组动物右后足跖皮内注射弗氏完全佐剂(Freund’s Adjuvant Complete,CFA)致炎,致炎48天后,观察两组大鼠足跖肿胀度及关节炎指数(Arthritis Index,AI),分别通过小动物多道生理记录仪和超声心动图检测心功能,HE染色观察心脏组织病理学改变,免疫组化染色法检测基质金属蛋白酶9(Matrix Metallo Proteinase 9,MMP-9)、基质金属蛋白酶抑制因子-1(Tissue Inhibitor of MetalloProteinase-1,TIMP-1)的蛋白表达情况,ELISA法测定血清细胞因子的变化,流式细胞仪测定调节性T细胞(Regulation T cell,Treg)的表达。结果:①与NC组比较,MC组大鼠致炎12天体重出现下降,于致炎48天体重下降至最高峰;致炎18天足跖肿胀度达最高峰。②与NC组比较,MC组的舒张早期血流峰值速度(early diastolic peak flow velocity,E)、E/A、短轴缩短分数(left ventricular fraction shortening,FS%)显著降低(P<0.05或P<0.01),舒张晚期血流峰值速度(late diastolic peak flow ve-locity,A)显著升高(P<0.01)。与NC组比较,MC组心率(heart rate,HR)、心脏质量指数(heart index,HI)、左室收缩末压(Left Ventricular Systolic Pressure,LVSP)、左室舒张末压(Left Ventricular End-diastolic Pressure,LVEDP)显著升高(P<0.05),左室内压上升/下降最大速率(Maximum Rate of Ventricular Pressure of development or decline,±dp/dtmax)显著降低(P<0.05)。③与NC组比较,MC组TNF-α、BNP、IL-17显著升高(P<0.05或P<0.01),IL-10、CD4+Treg、CD4+CD25+Treg显著降低(P<0.01)。④与NC组比较,MC横截面心肌细胞横径值(TDM/μm)显著升高(P<0.05),MMP-9表达量在MC组大鼠心肌细胞显著升高(P<0.01);TIMP-1的表达量则显著降低(P<0.01)。⑤Spearman相关性分析显示:心功能参数E峰与TIMP-1蛋白染色指数呈正相关;A峰与TIMP-1蛋白染色指数呈正相关,与MMP-9呈负相关;心脏质量指数(HI)与关节炎指数(AI)呈正相关;+dp/dtmax与IL-17呈显著负相关,与TIMP-1蛋白染色指数呈正相关;-dp/dtmax与IL-10呈负相关(P<0.05)。结论:AA大鼠存在心功能下降。其机制可能是大鼠在致炎后对抗原刺激呈高敏反应状态,免疫调节功能紊乱,释放大量细胞因子和炎症介质,导致局部关节的病变的同时,心肌细胞及细胞外基质亦发生损害,从而发生AA心功能降低。     

早期妊娠的丢失与MMP-2、MMP-9及TIMP-1、TIMP-2的研究进展

基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinases,MMPs）是参与细胞外基质（extracellular matrix,ECM）降解和重塑正常组织的重要酶类,基质金属蛋白酶的组织抑制物（tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMPs）是MMPs活性的特异性抑制剂,在正常情况下MMPs和TIMPs维持着一个动态平衡。     

MMP-9及TIMP-1在恶性外周神经鞘膜瘤中的表达及意义

目的探讨恶性外周神经鞘膜瘤(malignant peripheral nerve sheath tumours,MPNST)中基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metalloproteinase-1,TIMP-1)的表达与病理分级、转移及预后的关系。方法采用免疫组化S-P法检测MPNST中MMP-9及TIMP-1表达。结果共检测了58例MPNST,其中MMP-9阳性表达率为89.7%(52/58),TIMP-1阳性表达率是60.3%(35/58)。MMP-9蛋白酶的表达与病理学分级、转移率呈正相关,与术后生存率呈负相关;而TIMP-1则相反。结论MMP-9、TIMP-1与MPNST病理学分级、转移及术后生存期有关,可作为判断恶性外周神经鞘膜瘤恶性程度及预后的可靠指标,为其治疗提供参考价值。     

阿托伐他汀对肺纤维化大鼠MMP-9和TIMP-1表达的影响

有文献表明,他汀类药物可通过抑制基质金属蛋白酶、干预成纤维细胞增殖、胶原合成、参与调节细胞外基质(ex-tracelluar matrix,ECM)的降解,可能具有抗纤维化作用[1],但目前直接进行体内观察其抗肺纤维化作用的研究并不多.我们已证实阿托伐他汀可抑制博莱霉素所致的大鼠肺纤维化[2].     

家兔慢性冬眠心肌MMP-2、MMP-9和TIMP-2表达与胶原重构

目的观察家兔慢性冬眠心肌(CHM)心肌间质胶原纤维变化及基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2、MMP-9)及其抑制剂(TIMP-2)的表达。方法27只家兔随机分为模型组(CHM,n=15)及假手术组(SHAM,n=12)。观察心肌间质胶原容积百分比(ICVF)、Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维比例、计算Ⅰ/Ⅲ型胶原纤维比例记分(CRS);免疫组化染色及Western blot观察MMP-2、MMP-9及TIMP-2表达。结果与SHAM组相比,CHM组ICVF显著增加(P<0.01);Ⅰ/Ⅲ胶原比例增高;CRS显著增加(P<0.01);MMP-2及MMP-9的表达明显增多(P<0.01),TIMP-2的表达明显减少(P<0.01)。结论在CHM过程中,MMPs/TIMPs比例失平衡,可能是CHM间质胶原重构的机制之一。     

骨髓间充质干细胞移植对心衰大鼠心肌组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-1的影响

 目的：探讨骨髓间充质干细胞（BMSCs）移植对心衰大鼠心肌组织中基质金属蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9和金属蛋白酶组织抑制剂1（TIMP-1）的影响及机制。方法：采用异丙肾上腺素(ISO)皮下注射的方法建立大鼠的心力衰竭模型,随机分成3组,每组8只,心肌内分别注射BMSCs（BMSCs组）、BMSCs条件培养液（BMSCs-CM组）及生理盐水（NS组）。RT-PCR检测3组心肌组织MMP-2、MMP-9和TIMP-1 mRNA的表达,Western blotting检测心肌组织MMP-2、MMP-9和TIMP-1蛋白,胞浆和胞核内核因子κB（NF-κB）的p65和p50,以及总蛋白中NF-κB抑制物（I-κB）和磷酸化NF-κB抑制物（p-IκB）蛋白表达水平。结果：和NS组比较,BMSCs组和BMSCs-CM组MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达明显减弱（P<0.05）,TIMP-1 mRNA和蛋白表达明显增强（P<0.05）;而与BMSCs-CM组比较,BMSCs组MMP-2和MMP-9 mRNA和蛋白表达明显减弱（P<0.05）,TIMP-1 mRNA和蛋白表达明显增强（P<0.05）。胞核中p65和p50蛋白表达,NS组明显多于BMSCs组和BMSCs-CM组(P<0.05);而胞浆中p65和p50蛋白表达,NS组明显少于BMSCs组和BMSCs-CM组(P<0.05)。和BMSCs-CM组比较,BMSCs组胞核中p65和p50蛋白表达明显升高(P<0.05);而胞浆中p65和p50蛋白表达,BMSCs组明显少于BMSCs-CM组(P<0.05)。NS组心肌组织总蛋白中p-IκB/IκB最高,明显多于BMSCs组和BMSCs-CM组(P<0.05),BMSCs组最低(P<0.05)。结论：BMSCs及其在缺氧条件下的培养液均可通过改变NF-κB的抑制蛋白IκB的活性,从而改变心衰心肌细胞胞核中NF-κB含量,影响有关基因的转录,使得MMPs水平升高和TIMPs水平降低。     

阿托伐他汀对哮喘大鼠过氧化物酶体增殖因子活化受体γ的作用及气道重塑的影响

目的 观察羟甲基戊二酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶抑制剂阿托伐他汀对大鼠哮喘模型气道重建的影响.方法 将80只SD雄性大鼠随机分为4组:空白对照组、哮喘组、地塞米松组、阿托伐他汀组.以10g/L卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏并长期吸入,激发制备慢性哮喘模型.用免疫组织化学方法检测各组大鼠肺组织中过氧化物酶体增殖因子活...     

MMP-9/TIMP -1在子宫内膜细胞中的多因素调节

目的通过体外实验研究E2、MPA、HB-EGF对Ishikawa细胞中MMP-9/TIMP-1 mRNA表达的调节,探讨其在胚胎种植中的意义.方法体外培养Ishikawa细胞,分别加入E2、MPA、E2 MPA、E2 MPA RU486、HB-EGF刺激48h后,采用原位杂交、RT-PCR测定各种条件下MMP-9、TIMP-1 mRNA的表达.结果雌、孕激素单独或联合作用均可以显著降低TIMP-1 mRNA的表达(P<0.05),同时加RU486后TIMP-1 mRNA的下降趋势减弱.相反HB-EGF 使TIMP-1 mRNA的表达增高(P<0.05).Ishikawa细胞中MMP-9 mRNA均没有阳性表达.结论 (1)雌、孕激素对TIMP-1 mRNA具有下调作用,RU486可以抑制孕激素的作用.(2)HB-EGF对TIMP-1 mRNA的表达具有上调作用.(3)MMP-9 mRNA在Ishikawa细胞中没有表达.     

MMP-7、MMP-10和TIMP-4在心力衰竭心室重构中的表达

目的:应用细胞因子抗体芯片技术筛选与心力衰竭心室重构关系密切的基质蛋白酶。方法:从本院的心脏病组织库中挑选6例病理诊断明确和各方面资料比较齐全的致心律失常性右室心肌病引起心力衰竭的心脏病标本(来源于心脏移植的受体),与年龄、性别和种族等因素相匹配的正常对照心脏组织(来源于心脏移植的供体)进行细胞因子抗体芯片分析,筛选在致心律失常性右室心肌病引起的心力衰竭中差异表达的基质蛋白酶,并应用酶联免疫分析和免疫组织化学的方法加以验证。结果:在所筛选的17种基质金属蛋白酶中,只有MMP-7和MMP-10在致心律失常性右室心肌病引起心力衰竭中高表达,而在4种基质金属蛋白酶内源性组织抑制剂中,只有TIMP-4 低表达。经酶联免疫分析和免疫组织化学的方法证实,不仅在致心律失常性右室心肌病引起心力衰竭的心肌,在缺血性心肌病和扩张性心肌病引起的心力衰竭心肌中也发现MMP-7和MMP-10 的高表达及TIMP-4的低表达。结论:心肌组织中MMP-7和MMP-10的高表达及TIMP-4的低表达在不同心肌病引起的心力衰竭心室重构分子机制中可能发挥重要的作用。