IgA肾病中补体甘露糖结合凝集素途径相关分子研究进展

IgA肾病(IgA nephropathy, IgAN)是一种自身免疫性疾病,发病机制复杂,学界广泛认为补体异常活化在IgAN的发生、发展中起重要作用。近年越来越多的研究证实,补体甘露糖结合凝集素(mannose-binding lectin, MBL)途径参与了IgAN的发生、发展。MBL、MBL相关丝氨酸蛋白酶(MBL-associated serine protease, MASP)等是MBL途径中的特征分子,该文对MBL、MASP等在肾脏组织、血液循环及尿液中的表达情况及意义进行综述,深入探究补体MBL途径相关分子在IgAN中的作用,以期拓宽IgAN疾病监测、预后判断及治疗的思路。     

补体活化的凝集素途径在IgA肾病发病中的作用

目的探讨补体活化的凝集素途径在IgA肾病发病中的作用。方法用ELISA方法检测20例IgAN患儿和正常儿童血清的MBL水平,免疫组化检测53例IgA肾病、23例非IgA沉积肾小球疾病患儿肾组织甘露聚糖结合凝集素(MBL)、MBL相关的丝氨酸蛋白酶(MASP-1)、C3、C1q、IgA和C5b-9的表达,了解有无MBL-MASP-1途径补体活化参与IgAN发病;回顾性分析MBL-MASP-1沉积阳性组和MBL-MASP-1沉积阴性组患儿不同临床表现的差异;分析IgAN的MBL沉积强度与病理分级的相关性,了解不同程度补体活化与IgAN病理损害的关系。结果 22例IgAN患儿肾小球有MBL、MASP-1、C3和C5b-9沉积,23例非IgA沉积肾脏疾病患儿均无MBL和MASP-1沉积;IgA肾病患儿血清MBL水平和对照组统计学无明显的差异;系膜区MBL沉积强度与IgA沉积强度之间存在正相关关系(rs=0.865),但与IgAN病理分级无关;MBL-MASP沉积阳性组患儿蛋白尿水平显著高于MBL-MASP沉积阴性组,肉眼血尿更为多见。结论局部凝集素途径的补体活化在IgAN发病中有重要作用;MBL-MASP沉积阳性的IgAN患儿蛋白尿水平更高,肉眼血尿更为多见。     

甘露糖结合蛋白的结构与功能

甘露糖结合蛋白是C型动物凝集素家族一员,由肝脏分泌,存在于肝脏及血液中,其蛋白质结构类似于补体C1q。它能识别并结合某些细菌、真菌、病毒、寄生虫、肿瘤的表面糖类结构,并能激活补体系统的经典与旁路途径,在免疫防御及免疫监视中有重要意义。     

旋毛虫钙网蛋白表达纯化及其与补体C1q互作位点的初探

旋毛虫钙网蛋白(Trichinella spiralis calreticulin, Ts-CRT)可以通过与宿主补体C1q互作后,帮助虫体逃避宿主补体系统介导的免疫杀伤。为研究Ts-CRT与C1q相互作用的分子结构基础,本研究首先通过分子克隆和亲和层析等方法获得了高纯度的重组蛋白Ts-CRT³⁸⁰;其次通过微量热涌动(microscale thermophoresis, MST)实验测定Ts-CRT³⁸⁰与C1q相互作用能力;然后利用Discovery Studio软件模拟Ts-CRT与C1q的分子对接,分析Ts-CRT上参与互作的关键位点,并与4种蠕虫CRT相应位点进行序列比对,分析其保守性。结果显示,Ts-CRT³⁸⁰与C1q解离常数K_d值为149μmol/L,证明二者存在中等强度的相互作用,Ts-CRT通过K145、W323、F77和K47等17个氨基酸残基与人源C1q互作,序列比对证实这17个氨基酸位点在5种蠕虫CRT中高度保守。本研究结合MST实验与生物信息学分析,获得了Ts-CRT与人...     

甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2的研究进展

甘露糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白酶2(MASP-2)是补体凝集素途径关键酶,位于染色体1p36上,约20 kb,由686个氨基酸残基构成。通过病原相关分子模式识别病原体,与凝集素结合,以酶原形式存在的MASP-2活化,继而激活后续级联反应,致使入侵的病原体被机体清除破坏。MASP-2基因多态性普遍存在,过高或过低的MASP-2水平都不利于免疫系统正常运行,影响着多种疾病的易感性及发展进程。MASP-2血清浓度在不同疾病及同一疾病不同阶段的不尽相同。MASP-2与肿瘤、感染性疾病以及自身免疫性疾病的发生发展密切相关。     

人甘露糖结合凝集素（MBL）的纯化与兔抗人MBL抗血清的制备

甘露糖结合凝集素ｍａｎｎｏｓｅ－ｂｉｎｄｉｎｇｌｅｃｔｉｎＭＢＬ是哺乳动物Ｃ型凝集素超家族的成员,在机体抗感染免疫反应中处于第一线１。ＭＢＬ能特异性地识别多种病原微生物表面的多糖结构,进而激活补体系统和调理吞噬杀灭病原２３。同时,它也参与多种免疫性疾病的发生４。目前,有关其与疾病的关系,以及其在疾病治疗和预防中作用的研究正方兴未艾,因而获取有活性的ＭＢＬ蛋白,并制备其特异性抗体,已成为这些研究必不可少的工具。１材料和方法１．１材料混合人冰冻血浆由西京医院血库提供。Ｄ－甘露糖和…     

风雨花甘露糖结合凝集素基因克隆与序列分析

单子叶甘露糖结合凝集素具有抑制人类免疫缺陷病毒的活性。风雨花 (Zephyranthes grandiflora)球茎中含有亚基分子量为 12 KD的甘露糖结合凝集素 (ZGA)。运用同源克隆的方法设计简并引物 ,通过 3'和 5 'RACE技术 ,从风雨花总 RNA中克隆了编码此凝集素的全长 c DNA序列 ,其开放阅读框长 4 92 bp,编码 16 4个氨基酸 ,包含信号肽序列、成熟蛋白序列和 C-末端剪切序列的前体蛋白。成熟蛋白由 10 6个氨基酸残基组成 ,分子量为 11.6KD。成熟蛋白在氨基酸水平上与石蒜凝集素、雪花莲凝集素、水仙凝集素和君子兰凝集素分别有 71.8%、81%、81.8%和 84 .5 %的同源性 ;在 Blocks数据库中检索 ZGA蛋白氨基酸序列的结构域 ,发现有 3个凝集素功能结构域 ,并具有 3个典型的甘露糖专一结合位点盒 (QDNY)     

单纯性热性惊厥患儿血浆甘露糖结合凝集素水平分析

了解单纯性热性惊厥患儿血浆甘露糖结合凝集素(MBL)水平。对2010年8月至2011年7月住院的61例单纯性热性惊厥患儿,采集急性期与恢复期全血标本各一份,同时收集来院参加入托体检的健康儿全血标本90份,应用ELISA法检测血浆MBL浓度。统计分析采用SPSS软件11.0版。结果显示,疾病组急性期和恢复期血浆MBL浓度分别为(610.4±549.6)ng/ml和(591.5±442.1)ng/ml,二者无显著性差异(Z=0.16,P=0.87),但疾病组急性期(Z=2.23,P=0.03)和恢复期(Z=2.03,P=0.04)血浆MBL浓度均显著低于对照组(765.9±559.9)ng/ml,疾病组血浆MBL浓度低于200ng/ml的个体显著多于对照组(χ2=10.84,P<0.01)。CRP与MBL值间无明显相关性。提示,血浆MBL水平低下导致机体易患呼吸道感染可能是本组大部分患儿发生热性惊厥的潜在诱因。     

甘露糖结合凝集素缺失与自身免疫病

甘露糖结合凝集素又称甘露糖结合蛋白 (MBP) ,是Ca2 + 依赖型 (C 型 )动物凝集素家族一员。MBL可通过不同机制激活补体参与补体系统的经典与替代途径 ,又称凝集素途径。本文综述了近年来MBL结构与功能、MBL缺失等的研究进展 ,重点阐述了MBL缺失与自身免疫病的关系     

肺结核患者治疗前后血清甘露糖结合凝集素、巨噬细胞炎症蛋白-1α及C反应蛋白水平变化及其临床意义

目的分析肺结核(TB)患者治疗前后血清甘露糖结合凝集素(MBL)、巨噬细胞炎症蛋白-1α(MIP-1α)、C反应蛋白(CRP)水平变化及意义。方法收集2018年5月至12月医院收治的活动性TB患者140例(活动性TB组),选取同期收治的非活动性TB患者70例作为非活动性TB组,酶联免疫吸附法测定TB患者治疗前后血MBL、MIP-1α水平,放射免疫法法测定CRP水平,分析三者表达在TB病情变化过程中的变化及其相关关系。结果活动性TB患者治疗前血MBL、MIP-1α、CRP高于非活动性TB(P<0.05),治疗后,活动性TB患者血MBL、MIP-1α、CRP均低于同组治疗前(P<0.05);MBL鉴别活动性与非活动性TB AUC为0.871,SE为0.031,95%CI为0.818~0.913,cutoff值为2445.58 ng/mL时,诊断灵敏度为99.29%,特异性为72.86%,约登指数为0.721;MIP-1α鉴别两者AUC为0.884,SE为0.022,95%CI为0.832~0.924,cutoff值为30.19 pmol/L时,灵敏度为81.43%,特异性为87.14%,约登指数为0.685;CRP鉴别两者AUC为0.737,SE为0.038,95%CI为0.672~0.795,cutoff值为22.30 mg/L时,诊断灵敏度为87.14%,特异性为54.29%,约登指数为0.414;MBL与MIP-1α、CRP均呈正相关(r=0.455、0.403,P均<0.001),MIP-1α与CRP呈正相关(r=0.375,P<0.05)。结论活动性TB患者血清MBL、MIP-1α、CRP均呈异常高表达,与机体免疫活动密切相关,活动性TB高于非活动性TB,抗结核治疗后,活动性TB MBL、MIP-1α、CRP降低,三者表达呈正相关关系,有望作为TB病情进展及疗效预测的依据。     

128甘露糖结合凝集素缺失与自身免疫病

甘露糖结合凝集素又称甘露糖结合蛋白(MBP),是Ca2+依赖型(C-型)动物凝集素家族一员.MBL可通过不同机制激活补体参与补体系统的经典与替代途径,又称凝集素途径.本文综述了近年来MBL结构与功能、MBL缺失等的研究进展,重点阐述了MBL缺失与自身免疫病的关系.     

甘露糖结合凝集素基因多态性与结核病易感性关系的研究

目的 了解甘露糖结合凝集素基因多态性与新疆喀什地区结核病易感性的关系。方法 选取2015年12月~2017年12月在新疆喀什地区收集肺结核患者193例血液样本,收集同时期健康体检人员142例血液样本,采用试剂盒法提取全血基因组DNA,采用英国LGC公司生产的基于竞争性等位基因特异性PCR（KASP）技术的SNPline基因分型平台对选定的MBL基因SNP位点rs7096206进行分型,获得该位点的基因型频率和等位基因频率。结果 MBL基因rs7096206位点的三个基因型CC、GC、GG在结核患者组和对照组中的分布,差异无统计学意义（P＞0.05）,但从等位基因在两组间的分布上看,突变型碱基G在结核患者组中的频率高于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 MBL基因rs7096206多态性位点与新疆结核病易感性存在关联,携带G碱基比携带C碱基具有更高的结核病发病风险。     

甘露糖结合蛋白基因突变与乙型肝炎的相关性研究

目的 探讨甘露糖结合蛋白(mannose binding protein,MBP)基因变异与慢性及重型乙型肝炎的相关性.方法 采用基冈扩增和DNA测序方法检测了64名健康人和52例慢性乙肝及62例重型乙肝患者MBP基凶第1外显子的DNA序列,然后与GenBank中参照序列进行比较分析.结果 3组人群中MBP基因仅存在密码子54突变,而无密码子52、57的突变.健康人、慢性乙肝和重型乙肝组密码子54突变率分别为14.1%(9/64)、15.4%(8/52)和35.5%(22/62),前两组间比较差异无统计学意义(P＞0.05),而重型乙肝组密码子54突变率则分别显著高于前两组(X2=7,79,P＜0.01;x2=5.89,P＜0.05).结论 该地区乙肝人群MBP基因仅存在密码子54突变,突变与乙肝慢性化无明显关系,而与重型肝炎的发生有显著相关性.故监测MBP基因突变可作为重型肝炎判断预后的一个可行性指标.     

幼年特发性关节炎患儿甘露糖结合凝集素基因启动子区SNP研究

目的探讨甘露糖结合凝集素(MBL)基因启动子区单核苷酸多态性(SNP)与幼年特发性关节炎(JIA)易感性的关系。方法对50例JIA患儿和48名正常健康儿童MBL基因启动子区SNP位点-550(G/C,称H/L等位基因)和-221(G/C,称X/Y等位基因)采用等位基因特异性PCR法(PCR-SSP)检测,并分析其单元型及基因型频率。结果共检出HY、LY和LX三种单元型,在JIA患儿中的频率依次为0.540、0.270和0.190,而在正常儿童中频率分别为0.594、0.292和0.114;两组间各单元型比较均无显著性差异。结论MBL基因启动子区单核苷酸多态性与JIA无相关性。     

钙网蛋白与心血管疾病

钙网蛋白是内质网中主要的Ca2 结合分子伴侣,具有调控细胞钙稳态、蛋白质合成与修饰等作用,在生物体内钙网蛋白具有调节细胞凋亡、应激、心血管炎症反应等多种生理和病理生理过程的功能。钙网蛋白在心脏发育、心肌肥大、缺血再灌注和血管生成等过程中的作用是心血管领域的研究热点问题之一。     

EV71感染手足口病患儿临床表现与甘露糖结合凝集素表达及基因多态性相关性研究

目的 探讨EV71感染的普通手足口病患儿和重症患儿的临床表现差异与甘露糖结合凝集素(MBL)血清水平、基因多态性的相关性.方法 2009年6月至2011年7月在无锡市儿童医院门诊及住院EV71感染的手足口病患儿作为研究对象,用ELISA方法测定普通病例组、重症病例组的急重期和恢复期、对照组的血清MBL水平,同时对各组作MBL2基因测序,对比分析各组血清MBL,水平和MBL2基因6个常见位点变异频率.结果 重症循环肺衰竭组MBL的血清水平在危重急重期时较普通病例、重症病例脑炎组、对照组有显著升高(P＜0.05);而在恢复期时,重症病例循环肺衰竭组血清MBI.水平较急重期低约40％,有显著降低(P＜0.05).普通病例组、重症病例组、对照组的MBL2基因启动子区-550位点H/H野生型、+4P野生型、+230位点B/B纯合变异型的变异频率有显著不同(P值分别为0.006、0.043、0.028).缺少型基因的LYPB/LYPB和充足型基因的HYPA/HYPA频率在3组间差异有统计学意义(x2=7.17,P=0.028;x2 =8.55,P=0.014).重症病例组的缺少型基因LYPB/LYPB频率较对照组、普通病例组有显著升高,而充足型基因HYPA/HYPA频率较对照组、普通病例组有显著降低.结论 MBL2基因多态性导致的血清MBL蛋白水平低下与感染EV71的手足口病患儿病情轻重相关,可以作为患儿免疫状况和手足口病危险因素评估依据之一.     

湖北汉族人群甘露糖结合凝集素基因外显子1多态性与SLE关联性的研究

目的：分析湖北汉族人群甘露糖结合凝集素(Mannose-Binding LectionL或Mannose-Binding Protein,MBL或MBP)基因外显子1多态性，探讨其与系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)的易感性关系。方法：采用异源双链杂交技术对111例健康正常人和41例SLE患者的MBL基因外显子1多态性进行分析。结果：①共检测出两种等位基因：野生型A和变异型B(在54位密码子由GGC→GAC)，未检出变异型C、D等位基因。②正常对照中A等位基因及B等位基因的基因频率分别为0．910和0．090，符合Hardy-Wernberg定律；与此前在日本人中报道的A及B等位基因频率0．767和0．233相比，变异型B的等位基因频率明显低于后者(P＜0．05)。③SLE病人组中B等位基因频率为0．146，高于正常对照组，但差异无显著性意义。结论：在湖北汉族人群中MBL基因外显子1具有遗传多态性，而且与已知其他人群的分布频率有一定差异。MBL基因外显子1的遗传多态性并不与系统性红斑狼疮相关联。     

钙结合蛋白研究进展

本文阐述了钙吸收，钙结合蛋白（ＣａＢＰ）和维生素Ｄ三者之间的关系以及钙结合蛋白的基因结构及功能，对随年龄增长的钙吸收与ＣａＢＰ的平行下降和一些影响因素的作用，也作了简介。     

湖北省汉族人群甘露糖结合凝集素基因启动子区多态性与SLE关联性的研究

甘露糖结合凝集素 (mannose bindinglectin ,MBL)是一种由肝脏合成和分泌的急性期蛋白 ,可激活补体 ,溶解病原菌〔1〕,并具有调理吞噬作用。是参与非特异性免疫防御的重要分子。MBL基因启动子区具有两个多态性位点 :H L( 5 5 0bp ,G C)和X Y( 2 2 1bp ,C G) ,可影响MBL基因的转录 ,降低血清中MBL的浓度。已证明启动子的单元型HY、LY、LX分别与血清中高、中、低水平的MBL相关〔2〕。系统性红斑狼疮 (SLE)的发病与抗原 抗体复合物的清除缺陷有关。由于MBL基因启动子区的多态性可影响MBL的基因转录及其在血清中的浓度 ,从而影…     

免疫细胞中钙结合蛋白的研究

家兔阑尾(B细胞)、肠系膜淋巴结(T、B细胞)、脾脏(T、B细胞)和中性粒细胞胞浆中,分别含12、4、15和7种钙结合蛋白(CaBP),且均含120.2和40.5KD CaBP。被检免疫细胞富含小分子CaBP。钙调素(CaM)的含量是:阑尾B细胞>淋巴结淋巴细胞>脾脏淋巴细胞>中性粒细胞。