乙肝血清免疫标志物与HBV-DNA的关系探讨

探讨乙肝血清免疫标志物与ＨＢＶ－ＤＮＡ之间的关系。方法：用射免疫方法检测乙肝血清免疫标志物,并与用聚合酶链反应检测ＨＢＶ－ＤＮＡ相对照。结果：在ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ均阳性组,ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ均阳性组,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ均阳性,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ均阳性组,ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ均阳性组中,ＰＣ检出率分别为９４．３％、１００％、３０．６％、５５％、和９．１％。结     

聚合酶链反应在乙型肝炎病毒感染诊断中的意义

用ＰＣＲ法检测１６６例乙型肝炎病毒感染者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果显示：ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性，ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ、抗－ＨＢｃ阳性和ＨＥｂＡｇ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性率分别为９６．２％、２８．６％、９３．５％、ＨＢｓＡｇ单项阳性者中，检出ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性７８例（孕妇占１９．２％），阳性率８１．３％。另外，在２０例血清标志物全部阴性对照组中发现ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性１例，阳性率５．     

晚期原发性肝癌患者血清PCR－HBV DNA的意义

目的：为进一步研究ＨＢＶ感染与原发性肝细胞癌的关系．方法：ＥＬＩＳＡ法检测血清中ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ，抗－ＨＢｃ和抗－ＨＢｓ；ＰＣＲ检测血清ＨＢＶＤＮＡ．结果：３７例晚期原发性肝癌患者血清ＨＢ－ｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ，抗－ＨＢｅ和抗－ＨＢｃ阳性者分别为１７例（４５．９５％），４例（１０．８１％），１６例（４３．２４％）和９例（２４．３２％），而抗－ＨＢｓ全部阴性．聚合酶链式反应检测ＨＢＶＤＮＡ，１８例（４８．６９％）阳性，非常显著地高于ＨＢｅＡｇ检出率（Ｐ＜０．０１）．抗－ＨＢｅ阳性中有７例ＰＣＲ－ＨＢＶＤＮＡ阳性．ＨＢＶ总感染率８９．１９％．结论：提示原发性肝癌发生与ＨＢＶ感染有关．     

乙型肝炎病毒DNA和血清标志物与肝癌相关性检测分析

目的 为了解乙型肝炎病毒ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物与肝癌的关系。方法 对经影像及甲胎蛋白阳性诊断确诊的５８例肝癌患者，采用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ技术，分别进行了ＨＢＶ ＤＮＡ和血清标志物检测。结果 肝癌患者乙型肝炎标志物阳性为９４．８２％，标志物ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｇ、抗－ＨＢｃ阳性组占２２．４１５。ＨＢＶ ＤＮＡ检测８例全部阳性；ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｅ阳性组占５５．１７％，ＨＢＶ ＤＮＡ检测１５例，     

PCR与ELISA法检测乙肝血清标志物对比分析

用ＰＣＲ技术检测４８例肝病患者，５５例非肝病患者血清ＨＢＶＤＮＡ，ＥＬＩＳＡ法检测其血清五项标志物，肝病组ＰＣＲ阳性率为３１．３％，非肝病组ＰＣＡ阳性率为１１．４％。ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ１００％阳性；ＨＢｓＡｇ、ＨＢｃＡｂ阳性、ＨＢｅＡｂ阳性或阴性组ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性５０％；单项ＨＢｓＡｂ阳性组ＨＢＶＤＮＡ阳性２０％；五项标志物全阴ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性４．７％。结果表明，ＰＣＲ技术特异性强、敏感度高，但两种方法各有所长，不宜取代。     

乙型肝炎血清学指标阳性母亲母乳HBV—DNA检测

随机取５０例乙肝血清学指标阳性母亲产后２－３ｄ人的初乳，采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测初乳中ＨＢＶ－ＤＮＡ。结果：抗原阳性组乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮＡ）的检出率为５０％，抗体阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率为７．７％。抗原阳性组中，ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ及抗－ＨＢｃ３项阳性乾和ＨＢｓＡｇ，ＨＢｅＡｇ２基阳性者乳汁中ＨＢＶ－－ＤＮＡ检出率为１００％，说明该类乳汁具有极强传染性，抗体阳性组中单纯抗－ＨＢｓ     

乙肝病毒血清标志物与PCR检测HBV—DNA的关系

为了探讨ＰＣＲ技术在乙肝病毒感染诊断中的应用及ＨＢＶ－ＤＮＡ与ＨＢＶＭ间的关系，对５２４例乙肝病毒感染者的血清采用ＰＣＲ与ＥＬＩＡＳ进行检测。结果：ＨＢｓＡｇ、抗－ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ三项阳性组，ＨＢＶＭ全阴组，单项抗－ＨＢｓ阳性组，ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率分别为８０．１４％、４７．６２％、２６．４７％，提示三项阳性组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率是８组形式中的最高组，标志病毒复制活跃、传染性强、ＨＢＶＭ全阴组也     

聚合酶链反应检测HBV－DNA的意义探讨

对肝功能试验正常的１４９例ＨＢＶ感染者用ＰＣＲ技术检测血清ＨＢＶ─ＤＮＡ，结果ＨＢｓＡｇ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｃ均阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ全部阳性，ＨＢｓＡｓ、ＨＢｅＡｓ、抗ＨＢｅ、抗ＨＢｃ或抗ＨＢｓ单项或合并其它项阳性者，ＨＢＶ─ＤＮＡ阳性率分别为７９．４％、９４．６％、５０％、８１％和８．７％。这些结果与文献报告的相类似。     

乙肝患者血清HBV—DNA与e,c系统相关分析及临床意义

对３７４乙型肝患者血清用地高辛探针法检测ＨＢＶ－ＤＮＡ；用酶联法检测ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ、ＨＢｃＡｇ、抗ＨＢｃ－ＩｇＭ。结果：ＨＢＶ－ＤＮＡ与ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅＡｇ、抗ＨＢｅ无明显相关（Ｐ〉０．０５），与ＨＢｃＡｇ、抗ＨＢＣ－ＩｇＭ呈正相关关系（ｒ＝０．１８－０．２，Ｐ〈０．０１）；ＨＢｅＡｇ组与抗ＨＢｅ组ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率无明显差异（Ｐ〉０．０５），以ＨＢＶ－ＤＮＡ为标准评价ＨＢｅＡｇ、ＨＢ     

石蜡分隔的热启动PCR技术扩增血清HBV-DNA

将聚合酶链反应（ＰＣＲ）成份分两组。先加一组含ｄＮＴＰｓ、引物和ＭｇＣｌ２，并加１粒组织切片用石蜡凝固为盖层。再加另一组反应液含待扩增模板、ＴａｑＤＮＡ聚合酶和ＫＣｌ，以与第一组反应液分隔。ＰＣＲ循环时高温可使中隔蜡层融化，两组反应液相混，蜡油上浮作为防蒸发屏障。由此避免室温混合加样和预置导致引物聚体形成和错导非特异扩增，提高ＰＣＲ特异性和灵敏性。作者应用这一技术检测５３例单项抗ＨＢｃ阳性血清，检出ＨＢＶＤＮＡ１３例，检测６９例ＨＢｓＡｇ阳性和抗ＨＢｅ阳性血清，检出ＨＢＶＤＮＡ６１例。而同样样本用标准ＰＣＲ检测，ＨＢＶＤＮＡ阳性分别为１０例和５２例。两种方法对ＨＢｓＡｇ和抗ＨＢｃ双阳性血清的ＨＢＶＤＮＡ检出率差别有显著意义（Ｐ＜０．０５）。     

慢性乙肝患者血清HBVDNA含量与HBeAg/抗HBeAb的相关性分析及意义

目的:了解慢性乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量与血清中HBeAg/HBeAb之间的关系及其临床意义。方法:应用荧光定量PCR技术检测114例慢性乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量,同时采用微粒子发光反应法检测患者血清中乙型肝炎病毒(HVB)标志物,两者进行对比分析并探讨其临床意义。结果:HBeAg+/HBeAb-组的HBVDNA含量为6.70±1.62拷贝/mL,显著高于HBeAg-/HBeAb+组3.42±2.19拷贝/mL,两组相比P<0.01。而谷丙转氨酶(ALT)正常组与异常组的HBVDNA含量无显著性差异(P>0.05)。不同组别间ALT相比均无统计学差异(P>0.05)。结论:HBeAg与HBVDNA间有一定的相关性,但定量检测HBVDNA更能正确地反映HBV的复制程度;慢性乙肝患者血清中ALT的水平与HBVDNA的含量以及HBeAg/HBeAb的阳性与否无直接关系。     

乙型肝炎核心抗原检测及意义的探讨

目的 探讨HBcAg检测的意义。方法 对临床常规乙型肝炎两对半的ELISA方法检测的结果 与HBcAg的检测进行比较。结果 共检测120例标本,HBsAg、HBeAg、HBcAg均阳性时,HBcAg的阳性率为85％;HBsAg、HBeAg为阳性时,HBcAg的阳性率为100％。结论 开展HBcAg的检测可以更全面准确地反映HBV的感染程度及复制情况。     

PCR热启动及稀释法与常规法检测血清HBV—DNA的结果比较

采用常规ＰＣＲ、热启动ＰＣＲ、稀释后热泪动ＰＣＲ三种方法，对经ＥＬＩＳＡ检测为ＨＢｓＡｇ、抗ＨＢｃ、ＨＢｅＡｇ或抗ＨＢｅ阳性的血清标本，检测其乙型肝炎病毒ＵＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）。结果显示热启动ＰＣＲ、稀释后热启动ＰＣＲ能提高ＨＢＶ－ＤＮＡ的阳性检出率。     

乙型肝炎患者血清HBV DNA与HBV-M检测比较分析

目的：探讨不同免疫标志物的乙型肝炎（乙肝）患血清HBVDNA阳性率及其临床意义。方法：用PCR方法检测乙肝患血清HBVDNA，用ELISA方法检测乙肝五项标志物即HBsAg,HBsAb,HBeAg,HBeAb,HBcAb。结果：212例HBsAg,HBeAg,HBcAb均阳性的标本HBVDNA也全部阳性，阳性率为100%；158例HBsAg,HBeAb,HBcAb均阳性的标本，HBVDNA62例阳性，阳性率为39.2%,HBsAg,HBcAb阳性标本55例。其中30例HBVDNA阳性，阳性率为54.5%; 三抗体HBsAb,HBeAb,HBcAb阳性标本40例，其中5例HBVDNA阳性，阳性率为12.5%。结论：PCR方法更灵敏。只有检测HBVDNA才能确证HBV的真实感染和得制情况。     

实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用价值

目的: 探讨实时荧光定量PCR(F Q-PCR)检测乙型肝炎病毒DNA的临床应用价值。方法: 采用FQ-PCR方法检测196例患者血清中HBV-DNA。结果: 112例HBeAg(+)/HBeAb(-)标本中FQ-PCR均阳性,HBV-DNA拷贝数1.08×107/ml;68例HBeAg(-)/HBeAb(+)标本中,平均拷贝数6.12×105/ml,其阳性率为66.2%;16例HBeAg(-)/HBeAb(-)标本中,平均拷贝数为2.72×104/ml。结论: 实时FQ-PCR可以实现准确定量,是了解HBV在体内复制和判断疗效的有利手段。     

荧光定量PCR检测乙型肝炎患者血清中HBV DNA的临床意义

目的检测乙型肝炎患者血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的含量,了解其与免疫学指标的关系。方法采用荧光定量PCR技术和ELISA法,分别检测287例乙型肝炎患者血清中HBVDNA含量和免疫学指标。结果287例乙型肝炎患者血清中检出HBVDNA199例,阳性率为69.34%(199/287);144例HBsAg、HBeAg、抗HBc三项阳性的血清,其血清中HBVDNA也全部阳性;而HBsAg、抗HBe、抗HBc三项阳性和HBsAg、抗HBc二项阳性的标本,HBVDNA的检出率分别38.9%(42/108)和37.1%(13/35)。结论乙型肝炎患者血清中HBVDNA的拷贝数与HBeAg密切相关,但系统转换不能说明HBV停止复制,而只是复制水平的降低而已。     

HBV-DNA、HBVpreS1-Ag、HBeAg之间的相关性分析与临床意义

目的为了观察HBV-DNA、HBVpreS1-Ag、HBeAg之间的相关性与临床意义。方法对120例HBV感染者采用ELISA法检测HBVpreS1-Ag与HBeAg,PCR法检测HBV-DNA。结果84例HBV-DNA阳性患者中,PreS1-Ag与HbeAg的阳性率分别为83.33%(70/84)和79.76%(67/84),二者无显著差异(P>0.05);48例HBeAg阴性患者HBV-DNA和HBVpreS1-Ag的阳性率分别为35.42%(17/48)和31.25%(15/48),明显低于阳性患者(P<0.05)。结论HBV-DNA、HBVpreS1-Ag与HBeAg之间有密切的相关性,联合监测对更好的早期诊断HBV感染,了解病毒的复制情况,疗效观察和预后判断具有极其重要的意义。     

PCR与ELISA在检测乙型肝炎病毒标志物中的应用比较

目的：观察ＰＣＲ与ＥＬＩＳＡ法在检测乙肝病毒标志物中的差异。方法：用ＰＣＲ和ＥＬＩＳＡ法对８０３例疑似乙肝者做了ＨＢＶＤＮＡ和乙肝五项指标检查，并进行比较。结果：在ＨＢｓＡｇ（＋）的７３６例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率５８．７７％。ＨＢｅＡｇ（＋）的３５３例中ＨＢＤＮＡ阳性率为９６．３％。ＨＢｅＡｇ（－）的４０８例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率为２３．０％。ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ均（－）的２５例中ＨＢＶＤＮＡ阳性率     

Analysis of intrahepatic HBVDNA in serologic HBV markers-negative or HBsAg-negative patients with chronic hepatitis

Summary To explore HBV infection status in a group of serologic HBV markers-negative or HBsAg-negative patients with chronic hepatitis, in situ hybridization to hepatccellular HBVDNA was carried out in combination with detection of HBsAg and HBcAg in the liver tissues. It was found that prevalence of intrahepatic HBVDNA, HBsAg and HBcAg was 43 %, 39 % and 17 % respectively, and 15 out of 23 cases studied were sure to bear one or more positive marker (s) of intrahepatic HBVDNA, HBsAg and HBcAg. These findings suggest that more than half of the patients with chronic hepatitis were still undergoing HBV infection, despite serologic HBV markers or HBsAg negative. Furthermore, we found that hepatocytes containing HBV-DNA or surface or core antigen were often close to hepatic necrosis foci, indicating that HBV replication and its antigen(s) expression in hepatocytes could account for chronic, active and necrotic inflammation occurring in the liver of the patients mentioned above.     

肾组织中HBV的检出及其意义

目的：探讨HBsAg,HBcAg及HBV DNA在乙型肝炎病毒感染者肾脏组织中的表达情况及其意义。方法：对63例乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）患者、20例非乙型肝炎病毒相关性肾炎（NHBV-GN）患者、12例血清HBV标志阳性的其它肾病（肾结核、肾结石、肾细胞癌、肾萎缩等）患者用免疫组织化学方法检测肾穿刺活检组织HBsAg和HBcAg的表达;继而应用聚合酶链反应（PCR）技术对其阳性病例进一步检测肾组织HBV DNA。 结果： HBV-GN患者肾脏组织中均可检出HBsAg和HBcAg阳性颗粒,阳性率分别为76.2%(48/63),42.9%(27/63);20例NHBV-GN患者肾组织均未检出HBsAg和HBcAg,与HBV-GN患者相比有统计学意义(P<0.05);12例肾病患者肾组织HBsAg和HBcAg阳性率均为66.7%,与HBV-GN患者相比无统计学意义(P>0.05)。血清HBeAg 阳性与血清HBeAg阴性的HBV-GN患者相比,肾脏组织中HBsAg和HBcAg表达情况差异无显著性 (P>0.05)。17例免疫组织化学阳性的HBV-GN患者肾组织检出HBV DNA 13例,阳性率为76.5%,8例免疫组织化学阳性的其它肾病患者肾组织检出HBV DNA 2例,阳性率为25%,两者比较有统计学意义(P<0.05)。结论：HBV定位肾脏,不仅可引起肾脏损害,并对病毒的复制、保存及乙型肝炎的传播有一定作用。