涂片免疫组化法及流式细胞术观察性激素对子宫内膜脱落细胞PCNA的影响

目的探索反映子宫内膜增殖状态的细胞学检测方法,评价其在激素替代治疗(HRT)时子宫内膜监测中的可行性。方法对象为正常月经周期妇女(增殖中晚期组10例,分泌中晚期组9例)、绝经期组妇女(13例)、绝经后短期序贯使用17-β雌二醇和安宫黄体酮妇女(HRT组10例)。内膜吸管获取宫腔收集液制成细胞悬液,经流式细胞术(FCM)测定增殖细胞核抗原(PCNA),以及制成涂片进行免疫组化染色测定PCNA。比较两种方法所反映的性激素对子宫内膜PCNA的影响与传统的内膜组织免疫组化法所反映的性激素对子宫内膜PCNA的影响是否一致。结果三种方法显示一致的变化趋势:月经周期增殖中晚期组PCNA指数高于月经周期分泌中晚期组及绝经期组(P<0.01);月经周期分泌中晚期组PCNA指数最低,与绝经期组接近(P>0.05);HRT组PCNA指数介于绝经期组和月经周期增殖中晚期组之间。结论经内膜吸管获取宫腔收集液,用涂片免疫组化法及FCM测定子宫内膜脱落细胞的PCNA,均可反映性激素对子宫内膜增殖状态的影响,在HRT时子宫内膜监测中是可行的。     

增殖细胞核抗原指数监测激素替代治疗子宫内膜的变化

目的：了解核分裂率与增殖细胞核抗原（PCNA）指数两项指标在监测子宫内膜变化中的作用。方法：选择正常月经周期内增殖期,分泌期,绝经后子宫内膜;观察接受周期性激素替代治疗后子宫内膜中两项指标的变化。结果：显示PCNA指数可敏感,可靠的反映月经周期内子宫内膜的变化。同时也能够反映激素替代治疗中,加用孕激素不同时间子宫内膜的增殖与抑制变化。结论：（1）PCNA指数可反映子宫内膜的增殖与抑制情况。（2）PCNA指数可用于激素替代治疗中对子宫内膜的监测。     

雌孕激素对子宫内膜细胞增殖凋亡的影响

目的探讨雌、孕激素对卵巢摘除大鼠子宫内膜凋亡和增殖的影响。方法SD雌性大鼠分为5组:假手术组(Sham)、卵巢摘除组(OVX)、卵巢摘除加肌注苯甲酸雌二醇组(OVX BE2)、卵巢摘除加肌注黄体酮组(OVX P)、卵巢摘除同时加肌注BE2和P组(OVX BE2 P),实验组分别在激素作用5、10周后取材。流式细胞术(FCM)及TUNEL法分别检测内膜细胞凋亡与增殖情况,SP法检测子宫内膜PCNA的活性表达。结果OVX BE2组的增殖率明显升高;OVX P组、OVX BE2组、OVX BE2 P组凋亡率均显著减少。结论雌、孕激素影响子宫内膜上皮细胞的增殖与凋亡,是激素调控内膜的机制之一。     

PCNA在子宫内膜癌的表达及意义

为了探讨增殖细胞核抗原蛋白在子宫内膜癌的表达及意义,应用免疫组化链酶菌－抗生物素过氧化物酶染色法,检测５０例子宫内膜癌石蜡包埋标本中的ＰＣＮＡ蛋白的表达。结果：所有切片中均可见到ＰＣＮＡ阳性表达。     

正常与异位子宫内膜Bcl-2与PCNA的表达

目的：探讨B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)蛋白和增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白与正常及异位子宫内膜的关系。 方法：应用免疫组化法检测46例正常月经周期子宫内膜和15例卵巢子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜中的Bcl-2蛋白和PCNA蛋白。 结果：Bcl-2蛋白和PCNA蛋白在正常月经周期子宫内膜增生期升高(两组均为61.5%),分泌期低落(22.2%和5.5%),月经期消失(0和33.3%);在异位内膜中的表达(均为100%)高于增生期（P<0.05）。 结论：正常月经周期子宫内膜中Bcl-2蛋白和PCNA蛋白表达有周期性变化,且与异位子宫内膜中的表达不同,异位子宫内膜通过多种方式获得生存优势。     

Bcl—2,PCNA在子宫内膜增生及腺癌中的表达

目的 探讨Ｂｃｌ－２、增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）与子宫内膜良性及内膜腺癌的关系。方法 应用免疫组化ＳＰ法对５９例子宫内膜良性病变及内膜腺癌进行Ｂｃｌ－２、ＰＣＮＡ检测。结果 增生过长的上皮细胞ＰＮＣＡ染色强度明显低于高分化子宫内膜腺癌，但病例阐染色强度的交叉性提示此指标不具有诊断价值。Ｂｃｌ－２表达；增生中期及腺囊型增生过长患者表达为１００％，腺瘤型增生过长表达为７５％，子宫内膜腺瘤为５２％。结论     

小鼠动情周期和妊娠期子宫内膜中PCNA标记细胞分布及数量…

应用免疫组织化学法进行动情周期和妊娠期ＢＤＦ１雌性小鼠子宫内膜增殖细胞核抗拓的染色反应。根据对不同时期子宫内膜各部位细胞增殖情况的观察，发现在动情期ＰＣＮＡ标记细胞数量最多，约占子宫内膜细胞总数的２１．８％，并主要分布在子宫表面上皮中，约占表面上皮总数的６０％。动情间期可见ＰＣＮＡ标记细胞的再次轻度增高约占子宫内膜总的９．４％，也主要分布在子宫表面上皮中，约占２６％。妊娠期ＰＣＮＡ村记细胞主要以蜕     

子宫内膜癌组织中Survivin和PCNA的表达

目的:探讨子宫内膜癌(EMC)组织中Survivin表达与细胞增殖活性和临床病理特性、预后的关系。方法:采用免疫组织化学SP法检测10例正常子宫内膜、20例子宫内膜增生过长及33例EMC组织中Survivin及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况。结果:EMC及子宫内膜增生过长组织中Survivin的阳性率分别为78.8%和55.0%,明显高于正常子宫内膜组织(20.0%),差异有统计学意义(P<0.05);子宫内膜癌组织中Survivin表达且与PCNA呈正相关(r=0.446,P=0.005)。结论:Survivin阳性表达率与肿瘤的恶性程度及细胞增殖活性明显相关,可用来鉴别肿瘤恶性程度、预测预后。     

尼尔雌醇对子宫内膜细胞核分裂和增殖细胞核抗原的影响

目的探讨周期性服用尼尔雌醇对绝经后妇女子宫内膜的影响.方法短期周期性服用尼尔雌醇9例,长期周期性服用尼尔雌醇6例,子宫内膜不典型增生和子宫内膜癌各5例,运用免疫组化分别测定其子宫内膜细胞核分裂率及增殖细胞核抗原(PCNA)表达;以23例短期绝经和6例长期绝经未服药者作为对照.结果短期与长期绝经(以5年为界限)二对照组的核分裂率与PCNA指数无显著差异,均为老年性萎缩内膜;短期绝经对照组与短期尼尔雌醇组,长期绝经对照组与长期尼尔雌醇组,以及短期与长期尼尔雌醇组的核分裂率与PCNA指数均无显著差异;短期与长期尼尔雌醇组的核分裂率与PCNA指数均显著低于内膜病变者(P<0.001).结论尼尔雌醇对子宫内膜的增殖刺激较弱,长期使用尼尔雌醇对子宫内膜也是安全的.     

激素替代疗法对不同绝经年龄妇女子宫内膜及乳腺的影响

目的对不同绝经年龄妇女采用激素替代疗法并观察子宫内膜、乳腺腺体的变化,为合理规范用药提供理论根据.方法将身体健康,子宫内膜小于5 mm,无乳腺增生的绝经妇女120例根据绝经年限分为2组,即A组（0～5年）、B组（6～10）年.每组随机抽取30例作为对照组C、D;A、B两组服用激素,C、D两组服用维生素C,服用前后通过阴道B超,高频B超和钼靶监测子宫内膜、乳腺腺体的变化.结果A组用药后子宫内膜显著增厚,有些病例有出血现象;乳腺增生明显;B组用药后子宫内膜有增厚,乳腺腺体回声变化不明显.C组用药后子宫内膜变薄,乳腺腺体萎缩.D组用药前后子宫内膜及乳腺腺体变化不明显.无一例子宫内膜癌或乳腺癌发生.结论激素替代疗法能够使绝经年限短的妇女子宫内膜增厚、乳腺增生,对绝经时间较长的妇女子宫内膜及乳腺影响不大.     

流式细胞术和微球技术分析应激细胞内HSP70表达

目的 建立检测细胞内HSP70的流式细胞分析技术,并应用其分析炎症、化疗药物(紫杉醇)和物理因素(热处理)对U937细胞、A549细胞和Hela细胞HSP70表达的影响.方法 培养U937、A549和Hela细胞,分别用细菌脂多糖(LPS)、紫杉醇(PTX)和热应激(42 ℃)上述细胞;采用流式细胞术检测细胞内活性氧、细胞周期和细胞凋亡;分别采用传统的免疫印迹技术和自制液相微球结合流式细胞术来分析HSP70的表达水平.结果 LPS诱导U937细胞后,其细胞内活性氧(ROS)增加并发生凋亡,PTX处理A549细胞后,细胞发生G2/M期阻滞和凋亡,热处理导致Hela细胞发生凋亡.采用自制液相微球结合流式细胞术以及传统的免疫印迹技术,均可发现细胞内HSP70随处理因素强度或时间延长而表达增加.结论 所建立的自制液相微球结合流式细胞术可用于细胞内蛋白表达量的分析.     

流式细胞术分析阿霉素抑制白血病细胞的效应

目的 观察不同浓度阿霉素对小鼠T淋巴细胞白血病YAC-1细胞增殖及凋亡的影响,探讨给药后阿霉素在白血病细胞中相对含量变化.方法 培养YAC-1细胞,加入分别加入不同浓度(0.3125、0.625、1.25、2.5 h和5μmol∕L)的阿霉素,继续培养24 h,显微镜下观察细胞形态,采用流式细胞术检测细胞周期、细胞凋亡和阿霉素红色荧光,红色荧光强度可指示细胞内药物含量.不同浓度阿霉素处理细胞72 h,台盼蓝染色法计数细胞并计算细胞增殖抑制率.结果 高浓度阿霉素(2.5和5μmol∕L)导致细胞肿胀、胞浆内空泡增加;阿霉素以浓度依赖的方式抑制YAC-1细胞增殖;凋亡及坏死百分率以及细胞内阿霉素含量呈现剂量依赖性增加.结论 YAC-1细胞对阿霉素敏感,采用流式细胞术可实现对细胞内药物含量和抗肿瘤效应的定量分析.     

胸水脱落细胞增殖细胞核抗原检测在肺癌诊断中的应用价值

目的探讨胸水脱落细胞增殖细胞核抗原（PCNA）检测在肺癌诊断中的应用价值。方法收集48例肺癌、40例良性胸水疾病患者,采用S—P法检测胸水脱落细胞PCNA蛋白的表达,并与细胞学检查结果比较。结果PCNA蛋白检测诊断肺癌的特异性为71．20％,低于胸水脱落细胞学检测的91．34％（P〈0．05）,敏感性为100％,高于胸水脱落细胞学检测的82．20％（P〈0．05）。肺癌及良性胸水脱落细胞PCNA表达阳性率分别为78．26％和32．34％。肺癌及良性胸水患者间脱落细胞PCNA表达差异有统计学意义（P〈0．05）。胸水脱落细胞PCNA表达强度随肺癌分级增加而升高（P〈0．05）,与肺癌组织类型及分化程度无关。结论胸水脱落细胞PCNA蛋白检测在肺癌早期诊断、常规筛查以及术后复发监测中具有潜在的应用价值。     

流式细胞术在子宫内膜疾病DNA分析中的应用

目的:探讨流式细胞术在子宫内膜疾病DNA分析中的临床应用价值。方法:应用流式细胞术对不同病变程度的石蜡包埋及新鲜的子宫内膜细胞DNA倍体含量和细胞周期时相进行分析。结果:子宫内膜增殖症组的异倍体率与正常对照组间的差异无统计学意义(P>0.05);与高分化子宫内膜癌组和低分化子宫内膜癌组间的差异均有统计学意义(P<0.05);DI、SPF介于正常对照组与高分化子宫内膜癌组之间,且与各组之间的差异均有统计学意义(P<0.05),各组细胞的DI、SPF值彼此有交叉现象;各组石蜡包埋的子宫内膜组织与新鲜子宫内膜组织之间的异倍体率和SPF差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:流式细胞术DNA测定在子宫内膜病变诊断和评估预后中具有重要价值,而新鲜的子宫内膜流式细胞术分析操作更加简便、快速。     

子宫内膜癌PCNA表达和雌孕激素受体的研究

目的 :探讨子宫内膜癌 (endometrialcarcinoma ,EMC)增殖活性以及雌、孕激素受体的表达与临床病理特性、预后的关系。方法 :采用免疫组织化学方法检测 74例子宫内膜癌增殖细胞核抗原 (proliferatingcellnucleusantigen ,PCNA)、雌激素受体 (estrogenreceptor ,ER)、孕激素受体 (progesteronereceptor ,PR)含量。结果 :PCNA在对照组和EMC中的阳性率分别为 30 .0 %和 82 .4% ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;在不同分化程度的EMC中PCNA阳性表达率差异无显著性 ,但PCNA阳性指数 (PI)评分 ,WD明显低于MD ,LD ,差异有显著性 (P <0 .0 0 1) ,且与EMC分化程度呈负相关(r = 0 .5 2 ,P <0 .0 1) ;PCNAPI评分与EMC临床期别之间呈正相关 (r =0 .5 5 ,P <0 .0 1)。EMC中ER ,PR阳性例数分别为 49例 (6 6 .2 % )和 5 6例 (75 .7% ) ,PCNA表达与ER ,PR受体之间呈负相关 ,r值分别为 - 0 .42 (P <0 .0 5 )和 - 0 .5 1(P <0 .0 5 )。结论 :ER和PR阳性、PCNAPI评分较低的子宫内膜癌 ,肿瘤细胞异型性小 ;反之 ,表现为侵犯邻近组织、扩散、转移等恶性生物学行为。ER ,PR和PCNA表达之间有明显互补性。PCNA表达结合ER ,PR检测具有方法简单、组织无需特殊处理等特点 ,适于对常规病理切片作回顾性研究 ,对鉴别肿瘤性质、预测预后均有     

应用流式细胞仪检测白血病 MDR1的表达

目的：探讨白血病 Ｍ Ｄ Ｒ１表达的意义,建立 Ｍ Ｄ Ｒ１检测的简便快速方法。方法：用流式细胞术和经 Ｆ Ｉ Ｔ Ｃ 标记 Ｍ Ｄ Ｒ１单克隆抗体检测白血病外周血有核细胞 Ｍ Ｄ Ｒ１的表达。结果：２４例急性白血病 Ｍ Ｄ Ｒ１表达为８９８±７４７,３例慢性白血病 Ｍ Ｄ Ｒ１表达为３６０±１３０,两组间差异有高度显著性（ Ｐ＜ ００１）。在急性非淋巴细胞白血病各亚型中, Ｍ ３的 Ｍ Ｄ Ｒ１表达最低,依次增高为 Ｍ ２、 Ｍ ４ ,３组间差异显著（ Ｐ＜ ００１）。结论：本方法简便、快速,可作为白血病临床治疗的评价指标。     

子宫内膜癌PCNA表达和雌孕激素受体的研究

目的：探讨子宫内膜癌（endometrial carcinoma,EMC)增殖活性以及雌、孕激素受体的表达与临床病理特性、预后的关系。方法：采用免疫组织化学方法检测74例子宫内膜癌增殖细胞核抗原（proliferating cell nucleus antigen,PCNA)、雌激素受体（estrogen receptor ,ER)、孕激素受体（progesterone receptor,PR)含量。结果：PCNA在对照组和EMC中的阳性率分别为30.0%和82.4%,差异有显著性（P＜0.01);在不同分化程度的EMC中PCNA阳性表达率差异无显著性,但PCNA阳性指数（PI）评分,WD明显低于MD,LD,差异有显著性（P＜0.001),且与EMC分化程度呈负相关（r=-0.52,P＜0.01);PCNA PI评分与EMC临床期别之间呈正相关（r=0.55,P＜0.01)。EMC中ER,PR阳性例数分别为49例（66.2%)和56例（75.7%),PCNA表达与ER,PR受体之间呈负相关,r值分别为-0.42(P＜0.05)和-0.51(P＜0.05)。结论：ER和PR阳性、PCNA PI评分较低的子宫内膜癌,肿瘤细胞异型性小;反之,表现为侵犯邻近组织、扩散、转移等恶性生物学行为。ER,PR和PCNA表达之间有明显互补性。PCNA表达结合ER,PR检测具有方法简单、组织无需特殊处理等特点,适于对常规病理切片作回顾性研究,对鉴别肿瘤性质、预测预后均一定实用价值。     

Effects of PDTC on the Proliferation and PCNA Expression of Human Retinal Pigment Epithelial Cells

Proliferative vitreoretinopathy (PVR) is oneof the most common eye diseases that couldlead tosevere vision i mpairment and tend to cause blind-ness .It has beenfound that the abnormal prolifer-ation of retinal pigment epithelium(RPE) plays akey role in the onset and development of PVR.Under pathologic status ,such as rhegmatogenousdetachment of retina and severe ocular trauma ,RPE cells may migrate and proliferate because ofthe sti mulations of cytokines or chemokines ,thusmay lead to path…     

亚砷酸对肝癌细胞增殖及PCNA,c-Myc蛋白表达的影响

目的:探讨亚砷酸对人肝癌BEL-7402细胞增殖及增殖细胞核抗原(PCNA),c-Myc蛋白表达的影响.方法:应用四氮唑盐(MTT)比色法、细胞群体倍增时间(TD)、细胞集落形成试验观察亚砷酸对BEL-7402细胞增殖的影响,免疫组织化学法观察亚砷酸对BEL-7402细胞PCNA,c-Myc蛋白表达的影响.结果:亚砷酸处理后BEL-7402细胞生长抑制率上升(2.0,4.0,8.0 μmol/L的亚砷酸作用24,48,72 h后抑制率分别为27.13%,42.65%,47.74%;35.52%,53.24%,60.41%;50.61%,65.88%,70.81%;与对照组比较P＜0.05),TD逐渐延长[2.0,4.0,8.0 μmol/L的亚砷酸作用48h后TD分别为(24.68±3.99);(32.42±4.46);(36.95±8.91);与对照组比较P＜0.05及P＜0.01],集落形成率下降(0,8.0 μmol/L的亚砷酸作用7d后集落形成率分别为46.00%,18.80%;P＜0.05),免疫组化结果显示亚砷酸处理后的BEL-7402细胞PCNA,c-Myc蛋白的表达明显减弱.结论:亚砷酸能抑制BEL-7402细胞增殖,其机制可能与PCNA,c-Myc蛋白的表达下调有关.