热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响

目的观察体外诱导热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响。方法18例健康者中性粒细胞每例随机分为三份。其中1份作为对照组,其余2份分别应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液共同孵育,并分别作为热休克组和氯化镉组。于热应激反应诱导后0、2、3、4、6 h,运用PCR技术和流式细胞仪分别测定各组中性粒细胞热休克蛋白(HSP70)的表达及呼吸爆发功能;于热应激反应后24 h,应用荧光染色法和流式细胞仪DNA倍体分析法观察、检测细胞凋亡情况。结果热休克组和氯化镉组热应激诱导后各时段中性粒细胞HSP70表达及24 h的细胞凋亡率均明显高于对照组(P<0.01);热休克组和氯化镉组热应激诱导后4 h和6 h时,中性粒细胞活性氧生成明显低于对照组(P<0.01)。结论热应激反应促进中性粒细胞凋亡并减少活性氧释放。提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制。     

热应激反应对中性粒细胞NADPH氧化酶活性及呼吸爆发功能的影响

目的：观察体外诱导热应激反应对中性粒细胞凋亡及呼吸爆发功能的影响。方法：将健康人中性粒细胞分成3份,1份作为对照组,其余2份应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液共同孵育,并分别作为热休克组、氯化镉组。各组（n=18）于热应激反应诱导后0、2、3、4、6h分别测定中性粒细胞热休克蛋白（HSP）70的表达、NADPH氧化酶活性及呼吸爆发功能。结果：热休克与氯化镉均可诱导热应激反应,细胞内HSP70表达增加;热应激反应抑制中性粒细胞NADPH氧化酶活性并降低其呼吸爆发功能。结论：热应激反应通过抑制中性粒细胞NADPH氧化酶活性减少O2^-释放,提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制。     

热应激反应对IL-6所致中性粒细胞凋亡障碍的影响

目的观察体外诱导热应激反应对IL-6所致中性粒细胞凋亡障碍的影响.方法将14例健康人的中性粒细胞分成6份,其中1份作为对照组,其余5份应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液或IL-6共同孵育,分为热休克组、氯化镉组、IL-6组、IL-6+热休克组及IL-6+氯化镉组.各组于热应激反应诱导后3、20 h分别测定中性粒细胞热休克蛋白(HSP70)的表达及凋亡率.结果热休克与氯化镉均可诱导热应激反应,细胞内HSP70表达增加;热应激反应促进凋亡,IL-6导致中性粒细胞凋亡抑制,IL-6不影响热应激反应对中性粒细胞的促凋亡作用.结论热应激反应促进凋亡并可逆转IL-6对其凋亡的抑制作用,提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制.     

热应激反应对IL-6所致中性粒细胞凋亡障碍的影响

目的观察体外诱导热应激反应对IL-6所致中性粒细胞凋亡障碍的影响。方法将14例健康人的中性粒细胞分成6份，其中1份作为对照组，其余5份应用热休克或氯化镉诱导热应激反应后与培养液或IL-6共同孵育，分为热休克组、氯化镉组、IL-6组、IL-6 热休克组及IL-6 氯化镉组。各组于热应激反应诱导后3、20h分别测定中性粒细胞热休克蛋白(HSP70)的表达及凋亡率。结果热休克与氯化镉均可诱导热应激反应，细胞内HSP70表达增加；热应激反应促进凋亡，IL-6导致中性粒细胞凋亡抑制，IL-6不影响热应激反应对中性粒细胞的促凋亡作用。结论热应激反应促进凋亡并可逆转IL-6对其凋亡的抑制作用，提示热应激反应可能参与机体的抗炎作用机制。     

JNK抑制剂对H2O2诱导心肌细胞凋亡的保护作用

目的 观察特异性JNK抑制剂对H2O2诱导凋亡的培养乳鼠心肌细胞的保护作用，探讨热休克蛋白70（HSPT0）对H2O2诱导心肌细胞凋亡的保护作用机制。方法 培养大鼠乳鼠心肌细胞，随机分为4组，即正常对照组、H2O2损伤组、热休克组和JNK抑制剂组。应用免疫组化技术检测HSP70的表达；用透射电镜观察心肌细胞超微结构变化；用流式细胞仪分析心肌细胞凋亡百分率。结果 热休克预处理后HSP70在细胞浆内大量表达。JNK抑制剂明显抑制心肌细胞的凋亡率。结论 热应激预适应和JNK抑制剂对心肌细胞都具有保护作用，其保护机制可能与热应激时HSP70在心肌细胞内大量表达从而抑制了JNK的信号转导有关。     

头孢地嗪对肺炎克雷伯杆菌诱导中性粒细胞功能的影响

目的：观察头孢地嗪(CDZ)对肺炎克雷伯杆菌(Kle.p)感染小鼠中性粒细胞释放活性氧以及细胞凋亡的影响。方法：用硝基四氮唑蓝还原实验检测中性粒细胞呼吸爆发释放活性氧的变化；透射电镜观察细胞凋亡情况以及CDZ对上述指标的影响。结果：CDZ处理加强了小鼠感染3h后的呼吸爆发，12h后降低其呼吸爆发强度，24h后几乎回落至感染前水平；CDZ对未感染小鼠的呼吸爆发无明显影响；CDZ处理可抑制小鼠感染Kle．p 3h后中性粒细胞的凋亡。结论：CDZ对Kle．p感染诱导的小鼠中性粒细胞呼吸爆发有调节作用，并抑制中性粒细胞凋亡。     

HSP70与热应激诱导胸腺细胞凋亡关系的研究

目的 :探讨体外热应激诱导胸腺细胞凋亡与细胞表达HSP 70的关系。方法 :用流式细胞术检测体外热应激后再培养的胸腺细胞不同时间的凋亡率及HSP 70表达阳性率。结果 :体外热应激后 ,胸腺细胞的凋亡率在 0h、6h、12h随时间延长而增高 ,但 2 4h后凋亡率不再增高 ;体外热应激胸腺细胞HSP 70表达阳性率比对照组明显增高 ,在 6h阳性率最高 ,12h、2 4h阳性率逐渐下降 ,至 2 4h ,已明显低于 6hHSP 70的阳性率 (P <0 .0 5 )。结论 :HSP 70是调节体外热应激诱导胸腺细胞凋亡的重要分子之一。     

腹腔镜胆囊切除术及开腹胆囊切除术对机体不同应激反应的研究

目的 探讨比较腹腔镜胆囊切除术(LC)与开腹胆囊切除术(OC)两种不同手术方式,对机体应激反应的影响.方法 前瞻性随机选择60例胆囊切除术患者,其中LC和OC均为30例.于手术当天清晨和术后24h分别抽取肘静脉血,测定中性粒细胞热休克蛋白70(HSP70)表达、血浆C-反应蛋白(CRP)和白细胞介素-6水平等进行了随机比较研究.结果 中性粒细胞HSP70,血浆CRP及IL-6等指标水平在OC、LC组术后均高于术前,LC组术后水平均明显低于OC组术后,且发现LC和OC术后中性粒细胞HSP70表达与术后肠功能恢复时间及术后住院天数间均呈显著正相关.结论 LC引发机体的急性期应激反应比OC所引发的机体急性期应激反应轻微.较轻的急性期应激反应可能是LC比OC术后恢复快的重要原因之一.     

热休克蛋白70反义寡核苷酸对肝癌细胞增殖及凋亡的影响

目的 探讨热休克蛋白70反义寡核苷酸(HSP70 ASODN)对肝癌细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制.方法 合成特异性靶向HSP70 ASODN,并将其转染SMMC-7721细胞;四甲基噻唑蓝(MTT)法检测HSP70 ASODN对SMMC-7721细胞增殖的影响,计算生长抑制率;荧光显微镜观察细胞凋亡形态;流式细胞仪分析细胞周期分布,计算细胞增殖指数;免疫细胞化学观察细胞内HSP70、Bcl-2、Bax的表达.结果 ASODN组细胞生长抑制率明显高于正义寡核苷酸(NSODN)组、转染试剂对照组及空白对照组(P＜0.05);形态学观察到典型瘤细胞凋亡特征;流式细胞仪分析证实HSP70 ASODN主要阻止瘤细胞进入S期,细胞增殖指数下降,出现明显的凋亡峰;免疫细胞化学显示可降低细胞内HSP70、Bcl-2水平(P＜0.05),提升Bax水平(P＜0.05).结论 HSP70 ASODN可抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,可能机制为中和了HSP70和细胞周期调节蛋白间的相互作用,导致细胞周期阻滞,打破了肿瘤细胞逃逸凋亡平衡,促使细胞发生凋亡.     

流式细胞术和微球技术分析应激细胞内HSP70表达

目的 建立检测细胞内HSP70的流式细胞分析技术,并应用其分析炎症、化疗药物(紫杉醇)和物理因素(热处理)对U937细胞、A549细胞和Hela细胞HSP70表达的影响.方法 培养U937、A549和Hela细胞,分别用细菌脂多糖(LPS)、紫杉醇(PTX)和热应激(42 ℃)上述细胞;采用流式细胞术检测细胞内活性氧、细胞周期和细胞凋亡;分别采用传统的免疫印迹技术和自制液相微球结合流式细胞术来分析HSP70的表达水平.结果 LPS诱导U937细胞后,其细胞内活性氧(ROS)增加并发生凋亡,PTX处理A549细胞后,细胞发生G2/M期阻滞和凋亡,热处理导致Hela细胞发生凋亡.采用自制液相微球结合流式细胞术以及传统的免疫印迹技术,均可发现细胞内HSP70随处理因素强度或时间延长而表达增加.结论 所建立的自制液相微球结合流式细胞术可用于细胞内蛋白表达量的分析.