三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型肺功能的影响

激素依赖型哮喘(steroid-dependent asthma,SDA)属于难治性哮喘范畴,是临床医师面临的一大难题。减少激素用量,减轻药物不良反应,维持肺功能接近于正常水平,提高生活质量,是SDA患者长期管理的目标所在。近年来,我们根据SDA在撤减激素过程中的病机演变规律及证候学特点,采用中药三步序贯法治疗,取得了较好临床疗效。本实验模拟临床SDA患者撤减激素过程中的病情变化特征[1],建立激素干预后哮喘大鼠模型,观察三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型肺功能的影响。1材料与方法1.1动物北京维通利华实验动物中心提供清洁级SD系雄性健康大鼠240…     

三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型肺组织GR mRNA表达的影响

目的:观察三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型肺组织GR mRNA表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组、三步序贯组和普米克令舒组。制备激素干预后哮喘大鼠模型,于第3周起开始撤减激素用量,按照每周地塞米松0.1mg/kg速度递减,直至第7周完全撤除。应用RT-PCR方法检测各组大鼠肺组织中GR mRNA的表达变化。结果:在撤减激素的动态变化过程中,三步序贯组具有上调GR mRNA表达的作用,于第9周末,GR mRNA表达达到最高峰。与第2周末比较,二者具有显著性差异(P<0.05);与激素干预组第9周末比较,二者具有极显著性差异(P<0.01);与哮喘模型组和普米克令舒组比较,二者之间均无统计学意义(P均>0.05)。结论:三步序贯法通过上调肺组织GR mRNA表达水平,提高GR的亲和力,增强糖皮质激素的生物效应,从而达到减少激素用量,减轻激素依赖的作用。     

三步序贯法对激素依赖型哮喘患者下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能及糖皮质激素受体的影响

目的:观察三步序贯法对激素依赖型哮喘患者下丘脑-垂体-肾上腺皮质(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴功能及糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GCR)的影响.方法:将入选病例按随机数字表分为治疗组29例和对照组26例.在逐渐撤减泼尼松量的过程中,对照组予普米克都保(布地奈德粉吸入剂,100μg/吸),每次400μg,每日2次吸入;治疗组予中药三步序贯方煎剂,每次100ml,每日2次口服,同时给予普米克都保200μg,每日2次吸入.两组疗程均12-14周.观察治疗前后血浆皮质醇(cortisol,COR),促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)以及外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)GCR数目的变化.结果:两组患者血浆ACTH和COR浓度以及PBMC GCR水平较治疗前均明显升高,且两组之间比较差异均具有显著性(P均＜0.05).结论:三步序贯法能够恢复SDA患者被抑制的HPA轴功能,上调PBMC GCR水平,从而具有减轻全身性不良反应,增强糖皮质激素的敏感性,减轻激素依赖的作用.     

三步序贯法对激素干预后哮喘模型大鼠肺组织IL-5 mRNA表达的影响

目的观察三步序贯法对激素干预后哮喘模型大鼠肺组织白细胞介素-5（IL-5）mRNA表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组、三步序贯组、第一步方组、第二步方组、第三步方组、普米克令舒组。制备激素干预后哮喘模型大鼠,于第3周起开始撤减激素用量,按照每周地塞米松0．1mg／kg递减,直至第7周完全撤除。采用原位杂交技术检测各组大鼠肺组织中IL-5mRNA的表达变化。结果三步序贯组IL-5mRNA表达与哮喘模型组和激素干预组比较,在各个时段均明显降低（P〈0．01）。与普米克令舒组比较,在第2周末,差异无显著性（P〉0．05）;在第7、9周末,差异均有显著性（P〈0．01）。与第一、二、三步方组比较,三步序贯组IL-5mRNA表达在第2周末与第一步方组比较差异无显著性（P〉0．05）,与第二步方组比较差异有显著性（P〈0．05）,在其余各个时段比较差异均有显著性（P〈0．01）。在撤减激素的动态变化过程中,三步序贯组第7、9周末IL-5mRNA表达明显降低,与第2周末比较,差异有显著性（P〈0．05,P〈0．01）,但7、9周末两时间点比较差异无显著性（P〉0．05）。在第9周末,三步序贯组IL-5mRNA的表达降至最低点,与正常对照组比较,差异无显著性（P〉0．05）。结论三步序贯法对激素干预后哮喘模型大鼠肺组织IL-5mRNA表达具有明显抑制作用。     

三步序贯法对激素依赖型哮喘患者T辅助细胞亚群的影响

目的 揭示三步序贯法治疗激素依赖型哮喘（steroid—dependent asthma,SDA）的疗效机制。方法 将40例患者随机分为两组,每组各20例,对照组予普米克都保（布地奈德粉吸入剂,Pulmicort Turbuhaler,100μg／吸,AstraZeneca AB,瑞典）,每次400μg,每日两次吸入;治疗组予中药三步序贯方煎剂,每次100ml,每日2次口服,同时给予普米克都保200μg,每日两次吸入。两组疗程均12～14周。观察治疗前后哮喘症状积分、口服激素用量以及肺功能变化;流式细胞仪技术检测治疗前后外周血CD4^＋胞内细胞因子IL-4和IFN-γ的阳性细胞表达率（即Th1％和Th2％）。结果 两组患者治疗前后哮喘症状积分、口服激素用量以及肺功能比较,差异均有显著性（P〈0．01）;两组治疗后Th2表达率均显著降低（P〈0．01,P〈0．05）,Th1／Th2比值均显著升高（P〈0．01）;上述两组之间比较差异均有显著性（P〈0．01）;Th1表达率在治疗前后及组间比较差异均无显著性（P〉0．05）。结论 三步序贯法能够有效调节Th细胞亚群失衡,抑制炎性细胞因子的产生,减轻气道高反应性,从而改善了肺通气功能,减轻了哮喘症状,减少了患者对激素的依赖。     

三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的观察三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β_1/Smad信号通路上转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达的影响。方法将150大鼠随机分为正常对照组、气道重塑组、地塞米松干预组、普米克令舒组及三步序贯组,每组30只。哮喘大鼠激素撤减模型建立方法:以卵蛋白加氢氧化铝致敏,卵蛋白激发,自激发之日开始,于激发前给予地塞米松0.5 mg/kg腹腔注射,连续2周,从第3周开始,按每周0.1 mg/kg速度递减地塞米松用量,至第7周地塞米松全部撤除。三步序贯组在地塞米松干预基础上,于实验第15~28天(撤减前期)给予第一步方颗粒灌胃,第29~63天(撤减中期)给予第二步方颗粒灌胃,第64~77天(撤减后期)给予第三步方颗粒灌胃。气道重塑组仅给予致敏和激发,普米克令舒组在致敏和激发基础上,给予普米克令舒雾化吸入,各组于实验第28、63、77天末次激发2 h后取左肺组织行免疫组化检测,比较各组TGF-β_1、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达变化。结果与本组撤减前期比较,地塞米松组撤减中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达升高,Smad6、Smad7蛋白表达降低(P0.05,P0.01);普米克令舒组和三步序贯组撤减中、后期TGF-β_1、Smad3、Smad2蛋白表达降低,Smad6蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。在撤减过程中,与正常对照组同期比较,气道重塑组撤减前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3蛋白表达均升高,Smad6、Smad7蛋白表达均降低(P0.01);与气道重塑组比较,地塞米松组、普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达均降低,Smad6蛋白表达升高(P0.01),普米克令舒组、三步序贯组Smad7蛋白表达升高(P0.01),地塞米松组Smad7蛋白表达撤减前、后期升高(P0.05);与地塞米松组比较,普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3均降低,Smad6升高(P0.01),Smad7中、后期升高(P0.01)。Smad2与Smad3蛋白表达呈正相关(r=0.909,P0.01),Smad6与Smad7蛋白表达呈正相关(r=0.873,P0.01)。结论三步序贯法在哮喘模型大鼠激素撤减过程中能降低TGF-β_1、Smad2、Smad3,升高Smad6、Smad7其阻抑气道重塑的作用可能是通过调节TGF-β_1/Smad信号转导通路来实现的。     

三步序贯法对激素依赖型哮喘患者血清IL-4、IL-5、IFN-y的影响

激素依赖型哮喘（steroid-dependent asthma，SDA）属于难治性哮喘范畴，是临床医师面临的一大难题。近年来，我们根据SDA在撤减激素过程中的病机演变规律及证候学特点，采用中药三步序贯法治疗。取得了较好临床疗效。本研究通过观察三步序贯法对SDA患者血清IL-4、IL-5、IFN-y等细胞因子的影响，探讨三步序贯法治疗SDA的疗效机制及作用环节。     

三步序贯法对激素依赖型哮喘患者血清IL-4、IL-5、IFN-γ的影响

激素依赖型哮喘(steroid-dependent asthma,SDA)属于难治性哮喘范畴,是临床医师面临的一大难题.近年来,我们根据SDA在撤减激素过程中的病机演变规律及证候学特点,采用中药三步序贯法治疗,取得了较好临床疗效.本研究通过观察三步序贯法对SDA患者血清IL-4、IL-5、IFN-γ等细胞因子的影响,探讨三步序贯法治疗SDA的疗效机制及作用环节.     

不同补肾法对哮喘模型大鼠HPA轴的影响

为探讨哮喘大鼠HPA（下丘脑-腺垂体-肾上腺）轴变化及不同补肾法（阴阳双补、补肾阴、补肾阳）对该轴的影响。SD大鼠腹腔注射卵蛋白制成哮喘模型，分别予相应方法治疗，并与必可酮气雾剂比较。采用逆转录聚合酶链反应和图象分析法、放射免疫法，分别观察各组大鼠下丘脑CRHmRNA，血浆ACTH、CORT水平的变化。结果：模型大鼠下丘脑CRHmRNA，血浆ACTH、CORT水平均明显低于对照组，补肾三方均能不同程度提高哮喘大鼠下丘脑CRHmRNA表达，升高血浆ACTH、CORT水平，阴阳双补法作用最为显著，补肾阳法作用其次，补肾阴法作用不甚明显。结论：哮喘模型大鼠存在着下丘脑水平的HPA轴的抑制，阴阳双补法及补肾阳法能有效地改善哮喘大鼠HPA轴的抑制状态。     

激素依赖型哮喘撤减激素过程中的证候学：变化及三步序贯法临床疗效观察

目的 观察激素依赖型哮喘(SDA)患者撤减激素过程中的证候学变化及三步序贯法临床疗效.方法 将入选病例按随机数字表分为治疗组和对照组各40例,对照组予普米克都保,每次400μg,每日两次吸入;治疗组按证型不同分别给予相应方剂口服,每次100ml,每日两次,同时给予普米克都保200μg,每日两次吸入.两组疗程均12周.观察SDA患者撤减激素过程中的证候学变化和两组阴虚火旺证患者治疗前后激素撤减情况、万托林使用频率、肺功能的改变以及哮喘生活质量各方面积分的变化.结果 在撤减激素过程中,两组患者均存在着由阴虚火旺(撤前)→阴阳两虚(撤中)→肾阳亏虚(撤后)的证候学演变规律.治疗组在万托林使用频率、哮喘患者生活质量等方面明显优于对照组(P<0.05).结论 SDA患者在撤减激素过程中存在着由阴虚火旺(撤前)→阴阳两虚(撤中)→肾阳亏虚(撤后)的证候学演变规律,三步序贯法能够有效撤减SDA患者口服激素用量,减少支气管舒张剂使用频率,改善肺通气功能,提高哮喘患者生活质量.     

穴位埋线对慢性制动应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的:探讨穴位埋线对慢性制动应激模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)的调节作用。方法:采用制动应激方式作用于SD大鼠21天,制成慢性应激模型,在“百会”、“内关”、“三阴交”、“太冲”穴进行穴位埋线,每5天1次,共埋线4次。运用放射免疫法(RIA)检测血清Cor和血浆CRH的含量,并与对照组、模型组做比较。结果:与对照组相比,模型组大鼠血清Cor和血浆CRH含量明显高于正常组(P<0.05);穴位埋线组血清中Cor和血浆CRH含量明显低于模型组(P<0.01),与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:慢性应激引起大鼠HPA轴亢进,穴位埋线可能通过调整Cor和CRH的过度分泌,从而纠正HPA轴亢进,进而防治慢性应激引起神经内分泌紊乱。     

蜂针对类风湿性关节炎患者HPA轴的影响

目的:观察蜂针对类风湿性关节炎患者下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)的影响.方法:将100例确诊为类风湿性关节炎的患者按简单随机法分为蜂针组、电针组和西药组,其中蜂针组40例,电针组30例,西药组30例.蜂针组采用活蜂直刺法,电针组采用体针结合电针仪的方法,西药组采用甲氨蝶呤口服.结果:患者治疗前后血沉(ESR)、C-反应蛋白(CRP)、细胞因子及皮质醇的水平比较显示,各指标在蜂针、电针及西药治疗后均有不同程度的改善.结论:蜂针与西药甲氨蝶呤对RA患者的治疗作用优于电针疗法,蜂针与西药甲氨蝶呤治疗RA的疗效相当.同时,蜂针无甲氨蝶呤口服带来的副作用,因此值得在临床进一步推广应用.     

理气调补汤对运动性疲劳大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的: 探讨理气调补汤对运动性疲劳大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的调节作用。 方法: 30只健康雄性SD大鼠随机分为3组。采用大鼠游泳运动训练方式,观察大鼠最后1次力竭游泳的力竭时间、血清皮质酮、睾酮、血清和下丘脑β内啡肽含量等指标。 结果: 理气调补汤可以延长大鼠游泳力竭的时间(P<0.01),提高血清睾酮含量;降低血清β内啡肽含量。 结论: 理气调补汤可以改善运动性疲劳大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴的功能,从而起到预防运动性疲劳的作用。     

柴越汤对抑郁症大鼠HPA轴的调节作用

目的:探讨柴越汤对慢性应激抑郁模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴的作用及可能的机制,为临床用药提供理论依据。方法:将筛选合格的60只雄性Wistar大鼠适应性饲养1周后,随机分成正常组、抑郁模型组、阳性组、中药治疗组(包括柴越汤组、小柴胡汤组和越鞠丸组)。除正常组外,其余各组接受孤养结合慢性轻度不可预见性不同应激源的刺激21d制备抑郁模型。造模后按临床等效剂量给予药物干预,持续给药21 d,给药期间,各造模组大鼠均继续给与刺激。通过体重变化、糖水消耗和敞箱实验进行行为学评价,海马组织形态学变化、大鼠血浆促肾上腺皮质激素(ACTH),皮质酮(CORT)的变化,脑内海马糖皮质激素受体(GR)和盐皮质激素受体(MR)蛋白表达的变化,探讨柴越汤的抗抑郁作用机制。结果:与模型组比较,各给药组均可显著提高大鼠体重、增加大鼠糖水消耗比率和行为学得分(P0.05),逆转抑郁模型大鼠过高的血浆ACTH和CORT水平,上调大鼠的海马GR蛋白的表达,而对MR蛋白无影响,在中药组中以柴越汤效果更好。结论:柴越汤对抑郁症具有良好的疗效,拆方后小柴胡汤组、越鞠丸治疗抑郁症疗效较柴越汤略有下降。其作用机制可能通过增强海马GR蛋白的表达,降低血浆ACTH含量和血清CORT含量而起到抗抑郁作用。     

补肾益气药调节哮喘大鼠下丘脑—垂体—肾上腺轴及白细胞介素-6功能紊乱的实验研究

目的 观察补肾益气药对支气管哮喘（以下简称哮喘）大鼠模型神经内分泌免疫（neuro endocrine immune,NEI）网络若干组分的影响。方法 取健康清洁级雄性挪威（Brown Norway,BN）大鼠40只,大鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘模型组、复方低剂量组（0.25 g/mL）、复方中剂量组（0.5 g/mL）和复方高剂量组（0.75 g/mL）,以卵白蛋白（OVA）致敏并长期吸入激发制备大鼠反复发作哮喘模型。采用放射免疫法测定血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）含量;采用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测血清中白细胞介素-6（IL-6）、皮质酮（CORT）水平;采用实时定量 聚合酶链反应（Realtime PCR）法测定下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）mRNA 表达水平。结果 哮喘模型组病理学显示呈嗜酸性粒细胞性炎症。哮喘反复发作时,大鼠下丘脑—垂体—肾上腺（hypothalamic pituitary adrenal,HPA）轴多水平紊乱,补肾益气药可使ACTH、下丘脑CRHmRNA水平明显升高,与哮喘模型组比较差异有统计学意义（P<0.05）;CORT有升高倾向;哮喘时IL-6升高,且与ACTH呈显著负相关（r=－0.325,P=0.043）,而用补肾益气药治疗后IL-6水平有所下降。结论 补肾益气药可以改善大鼠HPA 轴功能,这种作用不依赖IL 6,提示补肾益气药的上述作用靶点在神经内分泌轴,可能是下丘脑。     

雷公藤对下丘脑—垂体—肾上腺轴的影响

目的:探讨了雷公藤(TW)对下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPA 轴)的作用以及有关雷公藤的耐受性问题。方法:实验大鼠随机分为4组,分别为正常组、TW Ⅰ组、TWⅡ组、TWⅢ组。正常组不作任何处理,余下3组给予 TW 灌胃,剂量为每次20mg/kg,每天2次。给药时间分别为1个月、2个月、3个月。检测血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮水平、肾上腺重量以及肾上腺病理学改变。结果:TW Ⅰ、TWⅡ组血浆 ACTH、皮质酮水平以及肾上腺重量均显著高于正常(P<0.01,P<0.05);TW Ⅲ组血浆 ACTH、皮质酮水平以及肾上腺重量与正常组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:实验结果表明 TW 对 HPA 轴有促进作用;大鼠能对此作用产生耐受性。     

补肾解郁清心方对围绝经期抑郁症模型大鼠行为学及下丘脑-垂体-肾上腺轴的影响

目的探讨补肾解郁清心方对围绝经期抑郁症模型大鼠行为学的影响和对下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA轴)的调节作用.方法采用雌性SD大鼠双侧卵巢摘除.孤养与慢性轻度不可预见应激二步法制作围绝经期抑郁症动物模型.将40只大鼠分为正常对照组、模型组、西药组、中药组.西药组予百忧解(2.4 mg·kg-1)与苯甲酸雌二醇(0.1mg·kg),中药组予补肾解郁清心方(40g·kg-1,相当于临床成人剂量的10倍).对大鼠进行Open-field行为学评分,糖水消耗实验,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)、促肾上腺皮质激素(ACTH)、皮质酮(CORT)含量.结果西药组和中药组Open-field水平积分、垂直积分及糖水消耗量均高于模型组(P＜0.01);西药组和中药组血清CRH,CORT含量均低于模型组(P＜0.05),ACTH含量有下降趋势.结论补肾解郁清心方能够改善围绝经期抑郁症模型大鼠行为,调节HPA轴功能.