三步序贯法对激素干预后哮喘模型大鼠肺组织IL-5 mRNA表达的影响

目的观察三步序贯法对激素干预后哮喘模型大鼠肺组织白细胞介素-5（IL-5）mRNA表达的影响。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组、三步序贯组、第一步方组、第二步方组、第三步方组、普米克令舒组。制备激素干预后哮喘模型大鼠,于第3周起开始撤减激素用量,按照每周地塞米松0．1mg／kg递减,直至第7周完全撤除。采用原位杂交技术检测各组大鼠肺组织中IL-5mRNA的表达变化。结果三步序贯组IL-5mRNA表达与哮喘模型组和激素干预组比较,在各个时段均明显降低（P〈0．01）。与普米克令舒组比较,在第2周末,差异无显著性（P〉0．05）;在第7、9周末,差异均有显著性（P〈0．01）。与第一、二、三步方组比较,三步序贯组IL-5mRNA表达在第2周末与第一步方组比较差异无显著性（P〉0．05）,与第二步方组比较差异有显著性（P〈0．05）,在其余各个时段比较差异均有显著性（P〈0．01）。在撤减激素的动态变化过程中,三步序贯组第7、9周末IL-5mRNA表达明显降低,与第2周末比较,差异有显著性（P〈0．05,P〈0．01）,但7、9周末两时间点比较差异无显著性（P〉0．05）。在第9周末,三步序贯组IL-5mRNA的表达降至最低点,与正常对照组比较,差异无显著性（P〉0．05）。结论三步序贯法对激素干预后哮喘模型大鼠肺组织IL-5mRNA表达具有明显抑制作用。     

三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型肺组织GR mRNA表达的影响

目的:观察三步序贯法对激素干预后哮喘大鼠模型肺组织GR mRNA表达的影响。方法:将SD大鼠随机分为正常对照组、哮喘模型组、激素干预组、三步序贯组和普米克令舒组。制备激素干预后哮喘大鼠模型,于第3周起开始撤减激素用量,按照每周地塞米松0.1mg/kg速度递减,直至第7周完全撤除。应用RT-PCR方法检测各组大鼠肺组织中GR mRNA的表达变化。结果:在撤减激素的动态变化过程中,三步序贯组具有上调GR mRNA表达的作用,于第9周末,GR mRNA表达达到最高峰。与第2周末比较,二者具有显著性差异(P<0.05);与激素干预组第9周末比较,二者具有极显著性差异(P<0.01);与哮喘模型组和普米克令舒组比较,二者之间均无统计学意义(P均>0.05)。结论:三步序贯法通过上调肺组织GR mRNA表达水平,提高GR的亲和力,增强糖皮质激素的生物效应,从而达到减少激素用量,减轻激素依赖的作用。     

淫羊藿女贞子对激素干预撤停阶段大鼠哮喘模型 HPA轴及骨代谢的影响

目的:探索淫羊藿女贞子配伍对哮喘模型大鼠激素撤停阶段下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴及骨代谢的影响。方法:比较各组血清皮质醇(COR),及骨钙素(BGP),血浆促肾上腺皮质激素(ACTH),下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量的差异。结果:与激素干预哮喘模型组比较,淫羊藿女贞子合激素干预Ⅰ,Ⅱ组血浆ACTH含量显著降低,下丘脑CRH含量无明显差异;淫羊藿女贞子合激素干预Ⅱ组血清BGP,COR含量显著升高。结论:淫羊藿女贞子对激素干预哮喘模型有改善糖皮质激素(GC)类药物对内源性GC的抑制作用,改善骨代谢。     

三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β1/Smad信号通路的影响

目的观察三步序贯法对哮喘模型大鼠激素撤减过程中TGF-β_1/Smad信号通路上转化生长因子β_1(TGF-β_1)、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达的影响。方法将150大鼠随机分为正常对照组、气道重塑组、地塞米松干预组、普米克令舒组及三步序贯组,每组30只。哮喘大鼠激素撤减模型建立方法:以卵蛋白加氢氧化铝致敏,卵蛋白激发,自激发之日开始,于激发前给予地塞米松0.5 mg/kg腹腔注射,连续2周,从第3周开始,按每周0.1 mg/kg速度递减地塞米松用量,至第7周地塞米松全部撤除。三步序贯组在地塞米松干预基础上,于实验第15~28天(撤减前期)给予第一步方颗粒灌胃,第29~63天(撤减中期)给予第二步方颗粒灌胃,第64~77天(撤减后期)给予第三步方颗粒灌胃。气道重塑组仅给予致敏和激发,普米克令舒组在致敏和激发基础上,给予普米克令舒雾化吸入,各组于实验第28、63、77天末次激发2 h后取左肺组织行免疫组化检测,比较各组TGF-β_1、Smad2、Smad3、Smad6、Smad7蛋白表达变化。结果与本组撤减前期比较,地塞米松组撤减中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达升高,Smad6、Smad7蛋白表达降低(P0.05,P0.01);普米克令舒组和三步序贯组撤减中、后期TGF-β_1、Smad3、Smad2蛋白表达降低,Smad6蛋白表达升高(P0.05,P0.01)。在撤减过程中,与正常对照组同期比较,气道重塑组撤减前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3蛋白表达均升高,Smad6、Smad7蛋白表达均降低(P0.01);与气道重塑组比较,地塞米松组、普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2、Smad3蛋白表达均降低,Smad6蛋白表达升高(P0.01),普米克令舒组、三步序贯组Smad7蛋白表达升高(P0.01),地塞米松组Smad7蛋白表达撤减前、后期升高(P0.05);与地塞米松组比较,普米克令舒组、三步序贯组前、中、后期TGF-β_1、Smad2及Smad3均降低,Smad6升高(P0.01),Smad7中、后期升高(P0.01)。Smad2与Smad3蛋白表达呈正相关(r=0.909,P0.01),Smad6与Smad7蛋白表达呈正相关(r=0.873,P0.01)。结论三步序贯法在哮喘模型大鼠激素撤减过程中能降低TGF-β_1、Smad2、Smad3,升高Smad6、Smad7其阻抑气道重塑的作用可能是通过调节TGF-β_1/Smad信号转导通路来实现的。     

地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠HPA轴影响的实验研究

目的:通过对MCAO模型大鼠缺血不同时点及地黄饮子灌胃后HPA轴水平的检测,观察其变化特点及地黄饮子的干预效应。方法:采用放射免疫分析法测定MCAO模型大鼠缺血后6h、48h和灌胃地黄饮子7d后的血浆HPA轴水平。结果:①脑缺血6h时模型组HPA轴水平低于正常组,其功能呈抑制状态;②脑缺血48h时,模型组ACTH、COR的含量较正常组明显升高,CRH含量进一步降低;③地黄饮子能够提高MCAO模型大鼠CRH、ACTH的血浆含量并降低COR的含量。结论:地黄饮子加减方能够提高MCAO模型大鼠CRH、ACTH的血浆含量并降低COR的含量,通过改善HPA轴功能的紊乱在脑缺血急性期发挥保护作用。     

三步序贯法对激素依赖型哮喘患者下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴功能及糖皮质激素受体的影响

目的:观察三步序贯法对激素依赖型哮喘患者下丘脑-垂体-肾上腺皮质(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴功能及糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GCR)的影响.方法:将入选病例按随机数字表分为治疗组29例和对照组26例.在逐渐撤减泼尼松量的过程中,对照组予普米克都保(布地奈德粉吸入剂,100μg/吸),每次400μg,每日2次吸入;治疗组予中药三步序贯方煎剂,每次100ml,每日2次口服,同时给予普米克都保200μg,每日2次吸入.两组疗程均12-14周.观察治疗前后血浆皮质醇(cortisol,COR),促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)以及外周血单个核细胞(Peripheral blood mononuclear cell,PBMC)GCR数目的变化.结果:两组患者血浆ACTH和COR浓度以及PBMC GCR水平较治疗前均明显升高,且两组之间比较差异均具有显著性(P均＜0.05).结论:三步序贯法能够恢复SDA患者被抑制的HPA轴功能,上调PBMC GCR水平,从而具有减轻全身性不良反应,增强糖皮质激素的敏感性,减轻激素依赖的作用.     

哮喘宁颗粒干预心理应激哮喘大鼠应激状态及肺通气功能作用机制研究

目的:探究哮喘宁颗粒对心理应激哮喘大鼠应激状态及肺通气功能的改善作用。方法:将大鼠随机分为正常组、应激哮喘组、普米克令舒组和哮喘宁组，每组8只。应激哮喘组予致敏及雾化激发14 d,并同时给予束缚制动，连续28 d;普米克令舒组及哮喘宁组在心理应激哮喘大鼠模型的基础上，从干预第15天开始每天激发前2 h分别给予普米克令舒雾化吸入及哮喘宁颗粒灌胃，连续14 d;正常组致敏和激发均予0.9%氯化钠溶液，但不做束缚刺激；观察各组大鼠行为学、应激状态、气道阻力及肺组织病理学的变化。结果:与应激哮喘组比较，哮喘宁组大鼠干预第21、28天饮食量明显增加，干预第28天体重明显增加(均P<0.05)。在干预第21、28天，哮喘宁组、普米克令舒组激发后较应激哮喘组呼吸频率明显降低(均P<0.05)。干预第22、28天，哮喘宁组、普米克令舒组大鼠糖水消耗量及糖水偏好程度明显增高(均P<0.05);干预第28天，哮喘宁组大鼠糖水偏嗜程度高于普米克令舒组(P<0.05)。在干预第28天，哮喘宁组大鼠与应激哮喘组比较，翻动次数明显增加，静止时间明显增加(均P<0.05)。旷野实验中，...     

四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴作用的实验研究

目的研究调和肝脾之四逆散对慢性应激大鼠下丘脑-垂体-肾上腺轴（HPA轴）的影响。方法实验设正常组、模型1组、模型2组、四逆散组。除正常组外其余各组用电刺激法制备慢性应激动物模型,并给予相应的处理。观察大鼠行为学指标的变化,测定血浆皮质酮（CORT）、下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）和血浆促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量,同时检测大鼠下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA含量变化。结果四逆散能改善大鼠行为表现,降低大鼠血浆ACTH、下丘脑CRH、血浆CORT的含量及下丘脑CRH mRNA和垂体ACTH mRNA的过度表达。结论四逆散可有效调整慢性应激大鼠HPA轴的异常。     

小青龙汤与表面激素吸入对哮喘大鼠气道结构重建作用的实验研究

目的：观察小青龙汤对哮喘大鼠气道结构重建作用的影响。方法：将大鼠40只，随机分为4组：模型组、小青龙汤组、普米克令舒组、正常组，每组10只。每组动物连续灌胃并雾化2月后留取病理组织，制作病理切片，采用计算机图像分析系统测定其气管和支气管平滑肌、黏膜、基底膜的厚度；并剥取其气管平滑肌，匀浆后，用ELISA法测定内皮素-1（ET-1）的水平。结果：各组气道壁厚度变化的比较，小青龙汤组、普米克令舒组、正常组与模型组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01）。小青龙汤组与正常组、普米克令舒组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。各组气管平滑肌ET-1水平比较，小青龙汤组、普米克令舒组、正常组与模型组比较，差异有非常显著性意义（P〈0．01）；小青龙汤组与正常组、普米克令舒组比较，差异无显著性意义（P〉0．05）。结论：小青龙汤与普米克令舒均可能通过抑制哮喘大鼠气管平滑肌细胞分泌ET-1，从而达到防治气道结构重建的作用。     

糖皮质激素对哮喘模型大鼠肾阴阳虚证候演变的影响

目的:观察地塞米松干预哮喘模型大鼠的不同阶段(撤停前、撤停中、撤停后)对阴阳虚证候及下丘脑-垂体-肾上腺皮质(hypothalamic-pituitary-adrenal,HPA)轴的影响。方法:通过雾化吸入1%卵清白蛋白建立大鼠慢性哮喘模型。腹腔注射地塞米松模拟激素干预过程,观察不同阶段大鼠的症状表现,根据阴虚、阳虚证计量标准,判断阴虚、阳虚证候属性;酶联免疫吸附测定法检测血清皮质酮(corticosterone,CORT)含量,放射免疫测定法检测血浆促肾上腺皮质激素(adrenocorticotropic hormone,ACTH)、下丘脑匀浆液促肾上腺皮质激素释放激素(corticotropin-releasing hormone,CRH)及血浆骨钙素(bone Gla-protein,BGP)含量。结果:激素干预组大鼠于激素撤停前阶段属阴虚证,撤停中阶段属阴亏、阳虚证,撤停后阶段属阴阳两虚证。激素撤停前阶段及撤停中阶段,对HPA轴(CORT、ACTH、CRH含量)有显著抑制作用,激素撤停后HPA轴的功能有所恢复;激素应用的各个阶段,均存在BGP的明显抑制。结论:激素干预哮喘模型大鼠在激素应用的不同阶段具有不同的证候特点,激素干预后动物呈现明显的肾虚表现。     

淫羊藿女贞子合用地塞米松抗哮喘大鼠的研究

目的:研究地塞米松合用淫羊藿女贞子治疗哮喘的协同抗炎作用及对激素不良反应的改善作用。方法:给予哮喘大鼠模型腹腔注射地塞米松2周,同时配合灌胃淫羊藿女贞子,观察支气管肺泡灌洗液(BALF)IL-4,INF-γ,IL-5含量;血清COR,血浆ACTH,下丘脑CRH含量;BALF中GCR蛋白表达。结果:淫羊藿女贞子合用地塞米松能显著下调哮喘模型大鼠BALF中IL-5,IL-4含量,上调IFN-γ表达,调节Th1/Th2失衡;降低血浆ACTH,CRH含量;上调BALF中GCR的蛋白含量及结合力。结论:淫羊藿合用地塞米松可以增强激素的抗炎作用,并对内源性糖皮质激素作用途径起到保护作用。     

地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血浆HPA轴及脑组织HSP70表达的干预效应研究

目的探讨地黄饮子加减方对大脑中动脉线栓(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型大鼠血浆下丘脑—垂体—肾上腺轴(HPA轴)含量及其脑组织热休克蛋白70(heatshock protein 70,HSP70)表达的干预效应。方法 MCAO法制作SD大鼠脑缺血模型,造模成功后第二天开始给予地黄饮子加减方浓缩煎剂灌胃,对照组灌胃等量的生理盐水,连续7天,于最后一次灌胃后1小时取材,放射免疫法检测血浆HPA轴含量,免疫组化法检测脑组织HSP70表达。结果经地黄饮子治疗后:MCAO模型大鼠血浆皮质醇(COR)含量明显低于正常组、模型组,差异有统计学意义(P0.01),促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量均明显高于模型组,差异有统计学意义(P0.05);地黄饮子组较模型组脑组织的HSP70表达更为明显,差异有统计学意义(P0.01);模型组COR含量与脑组织HSP70表达存在显著的正相关关系,CRH、ACTH含量则与HSP70表达无明显相关性,地黄饮子组HPA轴各指标与脑组织HSP70表达无明显相关性。结论地黄饮子加减方可能通过纠正HPA轴的紊乱状态、提高大鼠脑组织HSP70表达等途径在脑缺血急性期发挥神经保护作用。     

肾虚衰老模型的建立及其与D-半乳糖衰老模型的比较研究

目的:建立肾虚衰老模型,从抗氧化能力,HPAT(下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺)轴功能,骨代谢等方面对其进行评价,并与D-半乳糖衰老模型进行比较。方法:皮下注射D-半乳糖溶液模拟大鼠衰老模型,同时腹腔注射地塞米松溶液建立肾虚衰老模型,以血清丙二醛(MDA)含量,谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力及肝脏超氧化物歧化酶(SOD)活力,肾上腺、胸腺及脾脏脏器指数,外周全血CD4+,CD8+,血清皮质醇(COR),骨钙素(BGP)及血浆促肾上腺皮质激素(ACTH),促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量为指标,对模型进行评测。结果:与正常对照组比,衰老模型组、肾虚衰老模型组肝脏SOD活力极显著降低(均P<0.01),血清MDA含量极显著升高(均P<0.01),肾虚衰老模型组血浆ACTH含量显著升高(P<0.05)。与对照组和衰老模型组比,肾虚衰老模型组大鼠体重极显著降低(均P<0.01),血清GSH-Px活力表现为极显著降低和显著降低(P<0.01,P<0.05),肾上腺指数表现为显著降低和极显著降低(P<0.05,P<0.01),血清COR含量显著降低(均P<0.05),血浆CRH含量表现为显著升高和极显著升高(P<0.05,P<0.01),血清BGP含量极显著降低(均P<0.01),CD4+显著降低,CD8+极显著降低(P<0.05,P<0.01),CD4+/CD8+升高,但无显著性差异。结论:肾虚衰老模型抗氧化能力降低,HPAT轴功能紊乱,骨代谢异常。而D-半乳糖衰老模型仅在抗氧化能力方面表现出明显的差异。     

地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血清HPA轴及其脑组织细胞凋亡表达的干预效应研究

目的探讨地黄饮子加减方对MCAO模型大鼠血清HPA轴含量及其脑组织细胞凋亡表达的干预效应。方法MCAO法制作sD大鼠脑缺血模型,造模成功后第二天开始给予地黄饮子加减方浓缩煎剂灌胃,对照组灌胃等量的生理盐水,连续7天,于最后一次灌胃后1小时取材,放射免疫法检测血清HPA轴含量,TUNEL免疫组化法检测脑组织细胞凋亡表达。结果经地黄饮子治疗后：MCAO模型大鼠血清COR含量明显低于正常组、模型组,差异有显著统计学意义（P〈0．01）,ACTH、CRH含量均明显高于模型组,差异有显著统计学意义（P〈0．05）,缺血侧脑组织细胞凋亡表达较模型组明显减少,差异有显著统计学意义（P〈0．01）。结论地黄饮子加减方能够通过纠正HPA轴的紊乱状态、抑制脑组织细胞凋亡表达等作用机制在脑缺血急性期发挥减轻脑损伤、改善预后的作用。     

择时合用滋阴、益阳方对肾虚衰老模型HPAT轴的影响

目的:比较研究滋阴方六味地黄丸、益阳方金匮肾气丸单用及择时合用对肾虚衰老模型大鼠下丘脑-垂体-肾上腺-胸腺(HPAT)轴的影响。方法:大鼠随机分为6组,除正常组外,其余组采用5%D-半乳糖100 mg.kg-1颈背部皮下注射联合糖皮质激素地塞米松0.5 mg.kg-1腹腔注射共造模6周,造模两周后,实验第15天开始各给药组分别给予动物ig 1.16 g.kg-1六味地黄丸、金匮肾气丸、六味地黄丸(早服)合金匮肾气丸(晚服)、金匮肾气丸(早服)合六味地黄丸(晚服),给药4周。比较各组血清皮质醇(COR)、血浆促肾上腺皮质激素(ACTH)、促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)含量及外周全血CD4+,CD8+值。结果:与正常对照组相比,肾虚衰老模型组血清COR含量(6.35±1.65)μg.L-1显著降低(P<0.05),血浆ACTH(53.00±11.86)μg.L-1,CRH(7.04±1.37)μg.L-1含量显著升高(均P<0.05),CD8+水平(23.70±3.93)%显著降低(P<0.01),CD4+/CD8+(2.73±0.29)显著升高(P<0.01)。与肾虚衰老模型组相比,滋阴益阳组COR含量(10.76±2.09)μg.L-1显著上调(P<0.01),益阳组、益阳滋阴组ACTH(40.98±8.55),(39.55±14.67)μg.L-1含量显著下调(P<0.05),滋阴组、滋阴益阳组、益阳滋阴组CRH含量(5.39±1.00),(5.27±0.91),(5.61±1.08)μg.L-1均显著下调(P<0.05或P<0.01),各用药组CD8+水平,CD4+/CD8+无显著性差异,各组CD4+水平无显著性差异。结论:滋阴、益阳方单用及择时合用对肾虚衰老模型大鼠HPA轴的影响作用不同,其中以滋阴益阳方的作用较优,但未观察到对免疫功能紊乱的调节作用。     

黄芪对哮喘大鼠神经内分泌免疫网络相关指标的影响

目的 观察益气药黄芪对支气管哮喘（以下简称哮喘）反复发作模型大鼠神经内分泌免疫（NEI）网络相关指标的影响。方法 取健康清洁级雄性挪威大鼠54只,分为正常组、模型组、黄芪低、中、高剂量组。除正常组外,其他4组均行哮喘造模,黄芪不同剂量组分别灌胃给予相应剂量的黄芪,模型组给予等量生理盐水。用Realtime—PCR法检测下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素（CRH）mRNA的表达;放免法检测血浆中促肾上腺皮质激素（ACTH）的含量;酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清细胞因子（IL-4、IL-6、IFN-γ）和血清皮质酮（CORT）的含量;肺组织采用HE染色观察其病理变化。结果 各组大鼠下丘脑CRHmRNA表达和血清ACTH无明显变化,造模后各组大鼠血清CORT水平升高（P〈0．05）;黄芪低组大鼠血清CORT含量显著高于其他各组（P〈0．05或P〈0．01）;黄芪高组血清IL-4和IL-6含量显著下降（P〈0．01）,且有量效关系;IFN-γ各组间比较差异无显著性。各组大鼠肺组织病理变化比较差异无显著性。结论 哮喘大鼠存在NEI网络相关指标的紊乱;黄芪可以增强下丘脑-垂体-肾上腺皮质轴的功能,改善Th1和Th2型细胞因子的平衡,从而调节了NEI网络的紊乱。     

经前期综合征肝气郁证大鼠模型血清激素与行为变化

目的:复制经前期综合征肝气郁证大鼠模型并经过经前舒颗粒干预,探讨大鼠致郁机理及经前舒颗粒治疗该病证的作用机制。方法:采用束缚法造模并用经前舒颗粒干预,采用矿场法考察行为变化,用放射免疫法检测大鼠血清E2、FSH、LH、ACTH、COR、Ald的变化。结果:与空白组比较,造模组大鼠行为学打分显著降低,血清ACTH、COR含量显著上升,E2、Ald显著下降,造模给药组相关指标得到明显逆转和改善。结论:束缚法通过大鼠应激反应干扰大鼠激素调节形成一系列精神情志改变和内分泌紊乱,经前舒颗粒能够改善模型大鼠的症状,对内分泌激素有明显调节作用。     

不同补肾法对哮喘模型大鼠HPA轴的影响

为探讨哮喘大鼠HPA（下丘脑-腺垂体-肾上腺）轴变化及不同补肾法（阴阳双补、补肾阴、补肾阳）对该轴的影响。SD大鼠腹腔注射卵蛋白制成哮喘模型，分别予相应方法治疗，并与必可酮气雾剂比较。采用逆转录聚合酶链反应和图象分析法、放射免疫法，分别观察各组大鼠下丘脑CRHmRNA，血浆ACTH、CORT水平的变化。结果：模型大鼠下丘脑CRHmRNA，血浆ACTH、CORT水平均明显低于对照组，补肾三方均能不同程度提高哮喘大鼠下丘脑CRHmRNA表达，升高血浆ACTH、CORT水平，阴阳双补法作用最为显著，补肾阳法作用其次，补肾阴法作用不甚明显。结论：哮喘模型大鼠存在着下丘脑水平的HPA轴的抑制，阴阳双补法及补肾阳法能有效地改善哮喘大鼠HPA轴的抑制状态。     

中医分期序贯治疗对哮喘大鼠气道重构基质金属蛋白酶-9及其抑制剂表达影响的研究

目的：利用免疫组化、Western Blot和实时荧光定量PCR方法检测哮喘分期序贯治疗对哮喘大鼠气道重构时肺组织中基质金属蛋白酶MMP-9及其抑制剂TIMP-1表达的影响。方法：SD大鼠随机分成7组,即正常组（Z组）、哮喘组（X组）、序贯治疗1组（A1组）、序贯治疗2组（A2组）、序贯治疗3组（A3组）、孟鲁司特钠组（M组）、布地奈德组（B组）,除Z组外,其余各组均以卵蛋白（OVA）辅以氢氧化铝为佐剂,与第1、8、15天注射致敏,22天后隔天雾化吸入卵蛋白8周激发哮喘,建立哮喘模型。从实验第8天开始,A1组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期和稳定期胃饲生理盐水;A2组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期胃饲金水六君煎加减,稳定期胃饲生理盐水;A3组急性期麻杏二陈汤灌胃,缓解期胃饲金水六君煎加减方,稳定期胃饲六味地黄颗粒;M组激发后雾吸沙丁胺醇,缓解期和稳定期胃饲孟鲁司特钠;B组激发后雾吸沙丁胺醇,缓解期和稳定期雾吸布地奈德,X组以生理盐水胃饲代替,干预7周后分别运用免疫组化、Western Blot和实时荧光定量PCR方法对SD大鼠进行MMP-9、TIMP-1定位、定量表达的分析, 拟从分子水平、基因水平上探讨哮喘大鼠肺组织MMP-9、TIMP-1表达影响的生物学机制。结果：免疫组化法、Western Blot法和实时荧光定量PCR法结果均显示：①与正常组比较,哮喘组大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1表达含量明显增高;②与哮喘组比较,各治疗组对哮喘大鼠肺组织中MMP-9及TIMP-1的表达均有所降低。结论：①哮喘时,MMP-9及TIMP-1表达升高;②中药分期序贯治疗具有通过降低哮喘大鼠肺组织中MMP-9及其抑制剂的表达,调节两者比值,达到阻止气道重构的作用,这可能为其重要机制之一。