HPLC法测定东北红豆杉枝叶中10-脱乙酰巴卡亭的含量

目的测定东北红豆杉枝叶中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deacetylbaccatin Ⅲ,10-DABⅢ)的含量.方法采用RP-HPLC法.C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),甲醇-乙腈-水(203050)作为流动相,检测波长为233.9nm.结果 10-DABⅢ在0.004 75～0.038 μg与峰面积线性关系良好(r=0.999 0),平均回收率为100.5%,RSD为2.0%.结论方法操作简便、灵敏度高、专属性强,可用于红豆枝叶中10-DABⅢ的质量控制.     

南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭III(10-DAB)的测定

目的：测定南方红豆杉枝叶中10-脱乙酰巴卡亭III（10-deacetylbaccatin III,10-DAB III）的含量。方法：采用RP—HPLC法。C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）乙腈-水系统（乙腈：水=30：70）为流动相,检测波长232nm,流速1．0ml／min。结果：10-DAB III在进样0．3～6μg之间有良好的线性关系（R=0．9999）,平均回收率=97．3％,RSD=2．14％（n=6）。结论：该法简单、精确、快速、重复性好,可以满足其原料和制剂的质量控制要求。     

南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DAB)的测定

目的:测定南方红豆杉枝叶中10-脱乙酰巴卡亭III(10-deacetylbaccatin III,10-DAB III )的含量.方法:采用RP-HPLC法.C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)乙腈-水系统(乙腈∶水=30∶70)为流动相,检测波长232 nm,流速1.0 ml/ min.结果:10-DABⅢ在进样0.3～6 μg之间有良好的线性关系(R=0.999 9),平均回收率=97.3%,RSD=2.14%(n=6).结论:该法简单、精确、快速、重复性好 ,可以满足其原料和制剂的质量控制要求.     

云南红豆杉生长过程中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量变化

目的 研究云南红豆杉生长过程中不同部位10-去乙酰巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatinⅢ)的含量变化.方法 采用色谱柱Agilent C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-乙腈-水(42∶13∶45),流速1.0 ml·min-1,柱温32℃,检测波长234 nm,测定云南红豆杉生长过程中不同部位10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量.结果 回归方程 Y = 15.290 29X -4.059 76 (r = 0.999 0),线性范围5.50～550 μg·ml-1;加样回收率(n=6)98.6%,RSD为2.4%.在云南红豆杉生长期树皮中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量高于枝叶,是枝叶中最高含量的1.498倍;休眠芽分化期和休眠期是10-去乙酰巴卡亭Ⅲ积累的关键时期,在枝叶中的含量显著高于树皮,最高含量达0.115 0%是树皮中最高含量的1.769倍,二年生枝叶中含量略高于一年生枝叶.结论 该方法简便、准确度高,可用于云南红豆杉枝叶的质量控制.     

云南红豆杉中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ含量的固相萃取-高效液相色谱法测定

目的 建立以固相萃取-高效液相色谱(HPLC)法测定云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量.方法 固相萃取柱:Agilent ODS C18 500 mg/3 ml;色谱柱:Agilent zorbax SB-C18( 250 mm×4.6 mm,5 μm),流动相:甲醇-水-乙腈(35∶55∶10),流速1.0 ml·min-1,检测波长227 nm,柱温30℃.结果 10-去乙酰巴卡亭Ⅲ在 1.6～8.0 μg·ml-1范围内,进样量与色谱峰面积呈良好的线性关系,r=0.999 9,平均回收率为96.8%,RSD为 4.8 %(n= 6).结论 该方法可用于云南红豆杉枝叶中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的含量测定,方法稳定,结果准确、可靠.     

美丽红豆杉枝叶中抗肿瘤活性成分的提取与分离

以美丽红豆杉的枝叶为原料,采用一种新的方法提取和分离用以合成高效抗癌药紫杉醇所需的前体———10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ),并对10-DABⅢ的提取、分离、纯化条件进行了优化筛选。采用该工艺方法得到的10-DABⅢ晶体纯度可达91%,得率也在70%以上,从而证实了该工艺路线在生产上是可行的。     

培养基成分对云南红豆杉细胞生长和产生乙酰巴卡亭Ⅲ的影响

目的 研究B5培养基主要成分对云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞生长和产生10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的影响.方法 利用植物组织培养技术结合HPLC分析手段,通过改变B5培养基中CaCl2、NaH2PO4、(NH4)2SO4和KNO3的质量浓度,研究其对云南红豆杉细胞生长及10-去乙酰巴卡亭Ⅲ量的影响.结果 试验组与对照品相比,B5培养基中高质量浓度的NaH2PO4能够显著促进云南红豆杉细胞生长,CaCl2、(NH4)2SO4和KNO3浓度对细胞生长无显著影响;B5培养基中低质量浓度的CaCl2、NaH2PO4、(NH4)2SO4和KNO3能够显著促进10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放.结论 B5培养基中NaH2PO4为300 mg/L时,能够显著促进云南红豆杉细胞生长,细胞生长最是对照的1.2倍,CaCl2、(NH4)2SO4和KNO3分别在75～300、134～268和2 500～5 000 mg/L对细胞生长无显著影响;B5培养基中CaCl2、NaH2PO4、(NH4)2SO4和KNO3的质量浓度分别为75、75、33.5、625 mg/L时,能够显著促进细胞中10-去乙酰巴卡亭Ⅲ合成与释放,10-去乙酰巴卡亭Ⅲ的量分别是对照的1.5、1.4、2.4倍.     

紫杉醇前体化合物10-去乙酰baccatin Ⅲ和baccatin Ⅲ在东北红豆杉中的含量

报道了不同生长年限、不同生长形态和不同生长部位的东北红豆杉样品中紫杉醇的前体化合物baccatinⅢ和10-去乙酰baccatinⅢ的含量测定结果。通过相同样品中紫杉醇含量及云南红豆杉中两个化合物含量的比较，对利用价值进行了讨论。     

东北红豆杉茎皮化学成分研究

将东北红豆杉茎皮粉碎后用95％EtOH提取,再用CH_2Cl_2萃取,经柱层析分离,鉴定了3个化合物,分别为1-羟基巴卡亭I(baccatin I I-hydroxy)、2-去乙酰氧基红豆杉J(taxinine J 2-deacetoxy)和β-谷甾醇(β-sitosterol)。其中1-羟基巴卡亭I为首次从该植物中分得。     

东北红豆杉枝叶HPLC指纹图谱研究

目的研究东北红豆杉枝叶中HPLC指纹图谱,以便完整地反映东北红豆杉枝叶内在化学信息,全面评价东北红豆杉内在质量。方法采用高效液相色谱法分析东北红豆杉枝叶乙醇提取物。结果建立了东北红豆杉指纹图谱,对10批不同采收时间的东北红豆杉枝叶进行了指纹图谱分析,得出主要共有峰相对保留时间,相对峰面积作为东北红豆杉枝叶指纹谱相关技术参数。结论东北红豆杉枝叶指纹图谱可用于评价其药材质量。     

HPLC法测定云南红豆杉细胞悬浮培养中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ

目的 测定经寡聚半乳糖醛酸(oligogalacturonic acid,OGA)诱导的云南红豆杉Taxus yunnanensis细胞悬浮培养物中10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetyl baccatin Ⅲ,10-DAB Ⅲ)的量.方法 采用不同质量浓度的OGA处理云南红豆杉悬浮培养细胞,通过RP-HPLC法测定细胞和培养液中的10-DAB Ⅲ的量,甲醇-乙腈-水(2∶3∶8)为流动相,检测波长为232 nm.结果 10-DAB Ⅲ在0.05～2.06 μg与峰面积线性关系良好,回归方程为y=89.146X 27.067(R2=0.999 6),细胞内、外样品平均回收率分别为94.96%、100.72%,RSD分别为0.44%、0.81%.OGA(40 μg/mL)可显著提高云南红豆杉细胞中10-DAB Ⅲ的量.结论 10-DAB Ⅲ的RP-HPLC方法 可靠简便、重现性好、灵敏度高,具有较高的实用价值,可用于对红豆杉细胞诱导培养研究中的分析,OGA是10-DAB Ⅲ细胞生产的有效诱导子.     

HPLC法测定曼地亚红豆杉中紫杉醇的含量

目的:建立曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇含量的HPLC测定方法。方法:采用C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),以甲醇-乙腈-水(34∶32∶34)为流动相,流速为1.0mL·min-1,检测波长227nm,柱温30℃,进样量10μL。结果:紫杉醇质量浓度在4.2～42mg·mL-1内线性关系良好(r=0.9996);平均加样回收率为98.6%,RSD为1.2%(n=6);精密度RSD为0.7%(n=6)。结论:该方法简便、准确、重现性好,为曼地亚红豆杉枝叶中紫杉醇的含量测定提供了一种可靠的检测方法。     

HPLC法测定蒙成药塔斯音-10中胡椒碱的含量

目的:建立蒙成药塔斯音-10中胡椒碱含量测定的方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法,色谱柱为 InertSustain AQ C18(250 mm ×4.6 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(77∶23),流速为 1.0 mL·min-1,检测波长343 nm,柱温30℃,进样量为10μL.结果:胡椒碱在0.0...     

红豆杉属植物中紫杉烷化合物含量比较与分析

目的 分析和比较5种红豆杉中6种紫杉烷类化合物含量的差异.方法 利用乙醇超声浸提后得到样品溶液;通过高效液相色谱法测定和相关性分析、回归分析和聚类分析比较紫杉醇、巴卡亭Ⅲ、10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ(10-deacetylbaccatinⅢ,10-DAB)、10-去乙酰基紫杉醇(10-deacetyltaxol,10-DA...     

不同产地及生长年限曼地亚红豆杉中10-脱乙酰基巴卡亭III、三尖杉宁碱、紫杉醇量的比较分析

目的 分析和比较5个不同产地、不同生长年限曼地亚红豆杉中3种紫杉烷类活性成分量的差异。方法 利用甲醇和三氯甲烷混合液超声浸提后再用甲醇溶解得到样品溶液;通过高效液相色谱法测定和比较10-脱乙酰基巴卡亭Ⅲ（10-DAB Ⅲ）、三尖杉宁碱和紫杉醇量及3者总量。结果 不同产地、不同生长年限的曼地亚红豆杉中3种紫杉烷类及其总量间存在极显著性差异（P < 0.01）;10-DAB Ⅲ、三尖杉宁碱、紫杉醇和3种紫杉烷类总量相对较高的3个产地及生长年限分别依次为HK4 > SM3 > SM2、ZL3 > HK4 > ZL4、ZL3 > SM2 > HK4、HK4 > ZL3 > ZL6。除10-DAB Ⅲ与三尖杉宁碱量间不存在显著的相关性外,其余各成分间均存在极显著的正相关关系（P < 0.01）;不同产地及生长年限间紫杉醇与3种紫杉烷类总量间呈现出同升同降的趋势;聚类分析表明福建福州产区紫杉醇量具有一定的特殊性,而河南开封3种紫杉烷类总量有别于其他产区。结论 产地和生长年限对曼地亚红豆杉中3种紫杉烷类量的变化具有明显的影响,可以通过对生物合成途径进行调控,继而达到获得更多紫杉醇原料药的目的。     

细胞破碎-回流提取红豆杉中紫杉醇含量

目的 以东北红豆杉侧枝及叶为原料,采用细胞破碎与回流提取相结合的方法提取紫杉醇并测定其含量.方法 通过对细胞破碎-回流提取法的破碎时间、破碎功率、乙醇浓度等单因素实验确定最佳单因素水平并通过正交实验,确定了以乙醇为提取剂提取红豆杉中紫杉醇类化合物的最佳工艺条件.然后采用高效液相色谱法测定紫杉醇含量.结果 最佳提取条件:细胞破碎-回流提取破碎功率为70 W,乙醇浓度为95%,细胞破碎时间为40 min.高效液相色谱法测定紫杉醇回收率为86.22%～99.07%,精密度RSD为3.45%,重现性RSD为3.41%,红豆杉叶中紫杉醇含量为0.173 3 mg/g,红豆杉侧枝中紫杉醇含量为0.171 8 mg/g.结论 采用细胞破碎-回流提取方法提取红豆杉中紫杉醇可较大提高提取效率;用高效液相色谱法测定紫杉醇含量方法准确、可行.     

HPLC、UPLC测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ的含量

目的:对高效液相色谱法(HPLC)和超高效液相色谱法(UPLC)测定的南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ(10-DABⅢ)含量进行比较。方法:分别建立HPLC和UPLC测定南方红豆杉中10-脱乙酰巴卡亭Ⅲ含量的方法。HPLC法为Inertsil ODS-SP(4.6×250 mm,5μm)色谱柱,以甲醇:水(53∶47)为流动相,流速为1.0 mL·min~(-1),检测波长227 nm,柱温30℃;UPLC法为ACQUITY UPLC BEH C_(18)(2.1×100 mm,1.7μm)色谱柱,以甲醇∶水(53∶47)为流动相,流速分别为0.3 mL·min~(-1),检测波长227 nm,柱温15℃。结果:超高效液相色谱仅6.8 min即可完成测试,测定时间远低于高效液相色谱法,2种方法所得结果一致结论:UPLC法较HPLC法具有速度更快、灵敏度更高,且节省溶剂的优势。UPLC法可以成功代替HPLC法,应用于南方红豆杉药材的质量控制。     

HPLC法测定蒙药浩道墩-10丸中胡椒碱的含量

目的建立高效液相色谱法测定蒙药浩道墩-10丸中胡椒碱含量的方法。方法采用Shim—pack VP—ODS（150mm&#215;4．6mm，5μm）为色谱柱，流动相为水-甲醇（23-77）；检测波长为343nm；流速为0．8mL／min；柱温为室温。结果胡椒碱在0．5～5．0μg范围内具有良好的线性关系，r=0．9998；加样回收率为98．1％，RSD为1．76％（n=5）。结论该方法简便、快速、重复性良好，结果准确可靠，可作为浩道墩-10的质量控制方法之一。     

HPLC比较乳香炮制前后11-羰基-β-乙酰乳香酸含量

目的:比较乳香炮制前后11-羰基-β-乙酰乳香酸含量变化。方法:高效液相色谱法。结果:不同批次乳香炮制前后11-羰基-β-乙酰乳香酸含量不同,090325批次中生品3.79%、清炒品4.07%、醋炙品4.08%,090917批次中生品3.24%、清炒品3.32%、醋炙品3.71%,100413批次中生品4.02%、清炒品4.07%、醋炙品4.08%。结论:炮制后乳香中11-羰基-β-乙酰乳香酸含量有升高的趋势。     

HPLC法测定乳香中乙酰乳香酸类成分的含量

目的:建立乳香中3种乙酰乳香酸类成分的HPLC含量测定方法,为全面评价乳香药材质量提供依据。方法:采用HPLC方法测定,Diamonsil(钻石)C8色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);乙腈-0.1%磷酸(A:80:20;B:70∶30)为流动相;检测波长210nm,250nm;柱温35℃。结果:α-乙酰乳香酸、β-乙酰乳香酸、11-羰基-β-乙酰乳香酸分别在0.099～9.9μg(0.999 9)、0.097 6～9.76μg(0.999 9)、0.099 7～9.97μg(0.999 9)范围内呈线性,平均回收率分别为98.6%、101.9%、98.25%,RSD分别为1.38%、1.49%、1.86%(n=6);乳香药材供试品中3种乙酰乳香酸的百分含量分别在0.23%～2.41%、0.45%～4.27%、0.35%～5.27%范围。结论:本方法简便,稳定,可用于乙酰乳香酸类成分的定量分析。