戴氏虫草对人喉鳞癌细胞生长抑制与凋亡诱导作用

目的:研究戴氏虫草中生物活性物质对人喉鳞癌细胞(H ep-2)生长抑制与凋亡诱导作用,以及对半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)活性的影响。方法:采用四氮甲基唑蓝(MTT)和流氏细胞光度术(FCM)研究戴氏虫草中生物活性物质对人喉鳞癌细胞生长抑制与凋亡诱导作用,采用比色法观察Caspase-3活性的变化。结果:戴氏虫草中生物活性物质在所试浓度下对Hep-2细胞有极显著的抑制作用;戴氏虫草中生物活性物质能诱导H ep-2发生细胞凋亡作用。结论:戴氏虫草中生物活性物质能抑制Hep-2细胞的生长,诱导其细胞凋亡,同时可引起Caspase-3活性的改变。     

生存素在肿瘤研究中的进展

survivin是一种新发现的凋亡抑制蛋白(inh ib iorapoptosisipro-te in,IAP),它主要通过抑制半胱天冬蛋白酶3(caspase 3)和半胱天冬蛋白酶7(caspase 7)的活性而抑制细胞凋亡。目前,对survivin的分子生物学,组织分布特点,凋亡抑制机制与细胞周期关系及其与肿瘤的发生发展、诊断、     

光甘草定对结直肠癌细胞RKO增殖和凋亡的影响

目的 研究光甘草定(Gla)对人结直肠癌细胞株RKO增殖和凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制.方法 选取RKO细胞为研究对象,采用MTT比色法测定Gla对RKO细胞增殖的影响,通过Hoechst 33258染色检测RKO细胞凋亡情况;Western blot法检测RKO细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路蛋白以及B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)、半胱天冬氨酸蛋白酶-8(Caspase-8)、半胱天冬氨酸蛋白酶-9前体(Procaspase-9)、半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)表达水平.结果 Gla抑制RKO细胞的增殖,并呈浓度与时间依赖性(P<0.05);Gla能调节MAPK信号通路JNK1/2,p38磷酸化的水平;Gla可诱导RKO细胞凋亡,下调抗凋亡蛋白Bcl-2、Procaspase-9的表达水平(P<0.05),上调Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),而Caspase-8蛋白水平在各组变化均不明显.结论 Gla能抑制结直肠癌RKO细胞的增殖,并通过下调Bcl-2/Bax的比值诱导凋亡,其可能与MAPK信号通路的激活有关.     

卵巢癌细胞凋亡中核因子κB、半胱酰氨天冬氨酸特异性蛋白酶3、survivin的调控

核因子κB是一种多极性转录因子,参与免疫反应、细胞凋亡、肿瘤发生和转移等多种生理病理过程;参与多种基因的表达与调控。半胱酰氨天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)-3是凋亡效应蛋白酶家族中主要的效应蛋白,在细胞凋亡过程中发挥极其关键的作用。Survivin是凋亡抑制蛋白家族中较活跃的一员,具有抑制细胞凋亡的作用。本文主要综述核因子κB、caspase-3、survivin在凋亡中的作用,以及三者在卵巢癌的表达和影响。     

卵巢癌细胞凋亡中核因子кB、半胱酰氨天冬氨酸特异性蛋白酶3、survivin的调控

核因子кB是一种多极性转录因子,参与免疫反应、细胞凋亡、肿瘤发生和转移等多种生理病理过程;参与多种基因的表达与调控.半胱酰氨天冬氨酸特异性蛋白酶(caspase)-3是凋亡效应蛋白酶家族中主要的效应蛋白,在细胞凋亡过程中发挥极其关键的作用.Survivin是凋亡抑制蛋白家族中较活跃的一员,具有抑制细胞凋亡的作用.本文主要综述核因子кB、caspase-3、survivin在凋亡中的作用,以及三者在卵巢癌的表达和影响.     

肝微粒体甘油三酯转运蛋白与丙型肝炎肝脏脂肪变性有关

背景与目的:慢性丙型肝炎常发生肝脏脂肪变性,这可能涉及几种发生机制,包括代谢协同因子和直接病毒效应对细胞内脂质代谢通路的影响。一个转基因小鼠模型研究显示,丙型肝炎病毒(H CV)可以抑制微粒体甘油三酯转运蛋白(M TP)活性,而后者对于肝脏脂蛋白组配和分泌是必需的。在H CV感染患者中尚无肝脏M TP活性的资料报道。因此在感染主要H CV基因型并呈现不同程度肝脏脂肪变性的未治疗病例中研究肝脏M TP基因表达及其脂质转运活性。方法:在58例H CV阳性患者的肝脏活检标本中,应用实时PCR技术测定M TPm RNA水平,应用荧光分析法测定M…     

胱天蛋白酶3及其在脓毒症致急性肾损伤中的相关作用研究

胱天蛋白酶3属于天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶家族,在多种生物细胞凋亡等过程中起关键作用,在脓毒症致急性肾损伤(AKI)的发病过程中也起重要作用。脓毒症是重症监护病房的严重疾病,疾病进展过程中常伴有多器官功能衰竭,肾功能损伤发生最早且后果最为严重。脓毒症致AKI发病过程中,急性肾小管坏死的炎症反应轻微,但肾小管细胞凋亡十分显著,其细胞凋亡过程主要由死亡受体途径和线粒体途径引起,而细胞凋亡的发生由胱天蛋白酶3激活,胱天蛋白酶3的重要作用为脓毒症致AKI提供了新的研究方向。     

Caspase3在哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡中的作用

目的 探讨哇巴因诱导Jurkat细胞凋亡的机制。方法 四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察哇巴因对Jurkat细胞生长的抑制作用；应用DNA片段分析、流式细胞术观察细胞凋亡；半定量逆转录PCR(RT-PCR)检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase3)基因表达水平；应用westernblot测定caspase3的活性亚单位；比色法检测caspase3活性。结果 哇巴因能诱导Jurkat细胞凋亡，在细胞凋亡过程中，caspase3活性明显升高。结论 caspase3活化参与了哇巴因诱导Jurkat细胞的凋亡过程。     

针灸通督法对缺血性脑卒中患者Caspase-3、Caspase-9水平影响的临床研究

[目的]通过观察针灸通督、常规针刺、药物三种疗法对缺血性脑卒中患者细胞凋亡相关指标Caspase-3（半胱天冬氨酸蛋白酶-3）、Caspase-9（半胱天冬氨酸蛋白酶-9）水平的影响和临床疗效的差异,探讨针灸通督疗法治疗缺血性脑卒中的作用机制.[方法]将120例缺血性脑卒中患者随机分为针灸通督组（A组）、常规针刺组（B组）、药物对照组（C组）,各组患者在治疗前后均进行Caspase-3、Caspase-9、神经功能缺损、ADL（日常生活活动能力）检测,并将其结果进行对比分析.[结果]三种疗法均有不同程度的降低Caspase-3、Caspase-9活性、改善神经功能缺损及ADL的作用,有显著性差异（P＜0.05）,且灸通督组各观察指标改善明显,与常规针刺组、药物对照组相比,有显著或非常显著性差异（P＜0.05或P＜0.01）.[结论]针灸通督疗法具有抑制细胞凋亡、促进患者神经功能恢复和改善患者日常生活活动能力的作用,其作用机制可能与减少患者脑神经元凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-9的表达有关.     

当归提取液对HaCaT细胞凋亡的影响及其机制

目的研究当归提取液在体外诱导人角质形成细胞株HaCaT细胞凋亡的作用及其可能的机制.方法采用MTT法检测不同浓度当归提取液对HaCaT细胞增殖的影响,流式细胞仪FITC-Annexin V/PI双染法检测细胞凋亡情况,分光光度法检测细胞内半胱天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)活性的改变情况.结果浓度≥10mg/ml的当归提取液处理后HaCaT细胞增殖受到抑制,早期凋亡率显著增高(均P<0.01),细胞内Caspase-9活性明显增加(P<0.05),均呈浓度依赖性.结论在一定浓度范围内,当归提取液可抑制诱导HaCaT细胞凋亡,Caspase-9活性增加可能是其诱导凋亡的机制之一.     

胱天蛋白酶和肿瘤放射治疗

放射治疗（radiotheraphy）是治疗肿瘤的重要手段之一，放射线诱导肿瘤细胞凋亡（apoptosis）的机制虽不甚清楚，但近年的研究清楚地表明其和胱天蛋白酶（caspase）激活密切相关。胱天蛋白酶，全称天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶（cysteinyl aspartate-specific protease），该系列酶与细胞凋亡、多种自身免疫性疾病、炎症、肿瘤、神经退行性变及组织损伤等均有一定的关系。在放射治疗诱导肿瘤凋亡的过程中，放射可经过多种分子途径激活胱天蛋白酶，并有多个细胞因子参与和调控胱天蛋白酶的激活。研究放射线诱导肿瘤凋亡分子机制和调控，探讨胱天蛋白酶分子激活的机理对肿瘤放射治疗有重要的意义。     

子痫前期血清诱发血管内皮细胞凋亡机制的实验研究

目的：探讨子痫前期患者血清对体外生长血管内皮细胞凋亡情况的影响及发生机制.方法：对血管内皮细胞进行体外培养,分别加入正常孕妇血清和重度子痫前期患者血清,采用流式细胞术检测血管内皮细胞凋亡率、半胱天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）活性,并在培养体系中加入阳离子染料JC-1后检测血管内皮细胞线粒体跨膜电位变化.结果：①子痫前期血清组诱导血管内皮细胞早期凋亡阳性率与晚期细胞凋亡阳性率分别为（10.8±3.2）％与（6.8±1.8）％,明显高于正常孕妇血清组的早期凋亡阳性率与晚期细胞凋亡阳性率（4.2±1.7）％与（3.3±1.1）％（P＜0.05）;②子痫前期血清组诱导血管内皮细胞Caspase-3阳性率为（8.3±1.2）％,明显高于正常孕妇血清组诱导血管内皮细胞Caspase-3阳性率（3.6±1.1）％（P＜0.05）：③子痫前期血清组诱导血管内皮细胞其线粒体损伤率为（8.9±2.1）％,明显高于正常孕妇血清组诱导血管内皮细胞的线粒体损伤率（3.0±0.8）％（P＜0.05）.结论：子痫前期患者血清可促进体外生长血管内皮细胞的凋亡,Caspase-3和线粒体凋亡在子痫前期患者血清促血管内皮细胞凋亡中可能起重要作用.     

脂联素及其受体在慢性丙型肝炎中的作用

背景与目的:体重超重及其相关的代谢因素对肝脏影响的研究日益广泛。在非酒精性脂肪性肝炎患者中,低水平的脂联素与高度的肝细胞脂肪变和坏死性炎症程度有关,提示该脂肪因子在肝脏疾病中发挥病理生理作用。方法:作者研究了连续194例未经治疗的慢性H CV患者,评价脂联素及其受体与肝脏脂肪变性、纤维化和炎症的关系。结果:血清脂联素与男性、体重指数、血清胰岛素水平呈显著负相关,而与纤维化的分期无关,并且低水平的血清脂联素仅在男性中与脂肪变性有关。相反,随着炎症的加重则血清脂联素水平与肝脏脂联素的免疫活性显著升高。肝脏脂联素受…     

胰岛素抵抗与非糖尿病慢性丙型肝炎患者的肝纤维化有关

肝脂肪变性是丙型肝炎患者的一个常见病理改变。已有研究表明脂肪变性和纤维化的进展速度之间存在相关性,但是脂肪浸润和胶原沉积之间发病机制的联系尚不明确。本研究测定了221例非糖尿病丙型肝炎患者胰岛素抵抗(H OM A评分)和血清瘦素水平,利用多变量Logistic回归评估相对于其他因素,其胰岛素抵抗和瘦素水平对肝脏脂肪变性和纤维化的影响。从整个221例患者来看,脂肪变性与酒精过度摄入、基因型型及血清H CV RNA水平相关,而纤维化与H OM A评分和年龄相关。在152例非基因型3型病毒感染的患者中,脂肪变性与酗酒和H CV R NA水平相关,…     

银杏叶提取物对星形胶质细胞氧化损伤的保护作用

目的 研究银杏叶提取物（EGb761）对H2O2所致星形胶质细胞氧化损伤的保护作用。方法 用不同浓度的EGb761预处理细胞，再加入H2O2，通过噻唑蓝（MTT）实验、线粒体跨膜电位（△ψm）及细胞色素C释放实验、DNA损伤实验及半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶-3（Caspase-3）活性测定，观察ECb761对细胞存活率、线粒体膜通透性、DNA氧化损伤及Caspase-3活性的影响。结果 EGb761能明显降低H2O2对星形胶质细胞的氧化损伤，提高细胞的存活率；维持线粒体膜的完整性，抑制跨膜电位的耗散和细胞色素C的释放；抑制Caspase-3的活化和DNA的降解。结论 EGb761具有清除活性氧，减轻H2O2所致星形胶质细胞的氧化损伤，对星形胶质细胞有保护作用。     

半胱天冬酶与肿瘤的研究进展

1半胱天冬酶 半胱天冬酶（Caspase）是一个半胱氨酸蛋白酶家族,这个家族的所有成员在它们的活性位点均有半胱氨酸,并且切割靶蛋白也均在特异性的天门冬氨酸位点后,因此称半胱天冬酶^[1]。它们在细胞凋亡的过程中起着关键性作用。目前,该家族有14个成员被克隆出^[2],在氨基酸序列、结构及酶的特性上均相似。     

survivin反义寡核苷酸诱导人肝癌细胞凋亡的相关信号转导途径

目的 利用人肝癌细胞株SMMC-7721细胞,探讨survivin基因诱导肝癌细胞凋亡的相关信号转导途径。方法 采用脂质体介导survivin反义寡核苷酸转染人肝癌细胞株SMMC-7721细胞。采用Western印迹及原位杂交检测细胞内survivin蛋白及mRNA的表达。采用流式细胞仪及TUNEL染色检测细胞凋亡的变化。采用western印迹,免疫沉淀,逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及激酶活性检测方法测定细胞内丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)及半胱氨蛋白水解酶3表达及活性的变化,观察p38MAPK与半胱氨蛋白水解酶3活性变化之间的关系。结果 脂质体介导转染survivin反义寡核苷酸后,SMMC-7721肝癌细胞内survivin蛋白及mRNA表达可分别被下调84.6%及69.7%。凋亡细胞比率由转染前的0.70%增加至31.51%。转染后细胞内p38MAPK及半胱氨蛋白水解酶3表达无明显变化。但其活性显著升高,其中p38MAPK活性升高发生于半胱氨蛋白水解酶3活性升高之前。结论 转染survivin反义寡核苷酸可以有效诱导肝癌细胞发生凋亡,其诱导肝癌细胞凋亡的信号通过顺序激活p38MAPK-半胱氨蛋白水解酶3信号途径传导。     

NLRP3炎症小体在心肌梗死中作用的研究进展

NLRP3炎症小体是固有免疫系统中模式识别受体家族的重要组成部分。NLRP3炎症小体一旦被激活,将募集适配器凋亡相关微粒蛋白(apoptosis-associated speck-like protein containing CARD,ASC),并与之相互作用,从而招募并结合半胱天冬氨酸蛋白酶-1前体(procaspase-1),使其自身裂解活化为半胱天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1),最终使IL-1β前体(pro-IL-1β)和IL-18前体(pro-IL-18)成熟活化为有活性的促炎性细胞因子(IL-1β和IL-18),并启动焦亡性细胞死亡(pyroptosis)。NLRP3炎症小体与多种疾病的发病机理有着密切的关系。近年来研究报道,NLRP3炎症小体识别非微生物危险信号引起的无菌性炎性反应在心肌梗死的发展过程中发挥着重要作用。本文就NLRP3在心肌梗死中的相关研究作一综述。     

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶在脑缺血再灌注损伤神经元凋亡中的作用

半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶,属于白细胞介素1β转换酶家族,是导致细胞凋亡的蛋白酶系统,在细胞凋亡的执行期发挥关键作用。在脑缺血再灌注损伤的病理过程中,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶发挥了重要的作用。     

过氧亚硝基阴离子诱导大鼠气道上皮细胞凋亡及其机制探讨

目的 观察过氧亚硝基阴离子(peroxynitrite,ONOO-)对大鼠气道上皮(rat tracheal epithelial,RTE)细胞凋亡的影响并探讨其作用机制.方法 体外培养RTE细胞,外源性给予不同浓度ONOO-(0.25、0.50、1.00 mmol/L),培养1、6、12 h后,用流式细胞仪检测ONOO-对RTE细胞凋亡百分率的影响、透射电镜观察细胞形态学变化、琼脂糖凝胶电泳观察DNA裂解情况.结果 不同浓度ONOO-均以时间依赖方式引起RTE 细胞凋亡;透射电镜观察到染色质浓缩并凝集成块,核固缩以及凋亡小体形成等;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯状条带出现.半胱天冬氨酸蛋白酶-3(caspase-3)抑制剂Ac-DEVD-CHO可明显抑制ONOO-诱导的RTE细胞凋亡.结论 ONOO-以时间依赖方式引起培养的RTE 细胞发生凋亡.caspase-3活化在ONOO-诱导RTE细胞凋亡中起着重要作用.