防感颗粒抑制甲型流感病毒作用的实验研究

目的：观察防感颗粒抑制甲型流感病毒作用，并进行了防感冲剂的最大给药量测定，综合评估防感颗粒对流感的防治作用，为将其研发为中药新药提供实验基础。方法：①最大给药量实验：取小鼠20只，一日内最大浓度、最大量给予防感冲剂，观察其急性毒性反应。②抑制甲型流感病毒实验：采用甲型流感病毒鼠肺适应株A／PR／8／34(HINI)感染的小鼠肺炎模型，观察防感冲剂对流感病毒肺炎小鼠的死亡保护、肺指数和肺指数抑制率作用。结果：①防感冲剂一日内小鼠灌胃给药最大量为100ml／kg，相当于生药量为250g/kg，未见中毒症状及死亡。②防感冲剂对流感病毒感染导致的小鼠死亡有很好的保护作用，明显延长流感病毒感染小鼠的平均存活时间，降低流感病毒肺炎小鼠的肺指数，提高肺指数抑制率。结论：防感冲剂无明显的毒副作用，口服安全。防感冲剂具有明显的抑制甲型流感病毒作用。     

清解防感颗粒对流感病毒A/PR/8/H1N1感染小鼠的死亡保护及肺脏保护作用

目的:研究清解防感颗粒抗流感病毒的作用。方法:采用亚洲甲型鼠肺适应株(A/PR8/H1N1)滴鼻感染小鼠制作小鼠病毒性肺炎模型,观察药物延长感染小鼠生命的作用以及光学显微镜下观察小鼠肺组织的病变程度并评分,计算小鼠肺指数,比较组间肺指数的变化趋势及评分差异。结果:清解防感颗粒8g/kg、4g/kg剂量组可显著延长感染小鼠生命、降低死亡率,降低感染小鼠的肺指数,明显增加体重并降低小鼠肺部病变指数。结论:清解防感颗粒对小鼠感染流感病毒PR8有明显的死亡保护及肺脏保护作用。     

银花平感颗粒和三拗汤体内体外结合对甲型流感病毒的影响

目的通过银花平感颗粒和三拗汤两方药体内外对甲型H1N1流感病毒影响的实验研究,探讨不同方剂配伍对流感病毒的抑制作用。方法体内实验:采用滴鼻感染建立小鼠流感病毒肺炎模型,按体重分层随机分为正常对照组、病毒模型组、达菲组[21. 63 mg/(kg·d)]、银花平感颗粒组[12 g/(kg·d)]和三拗汤组[9 g/(kg·d)],灌胃给予相应药物,每天1次,连续5天。灌胃结束后,摘取肺、脾及胸腺组织,分别称重,计算各组小鼠肺指数、肺组织抑制率及免疫脏器指数;采用实时荧光定量PCR法检测各组小鼠肺组织病毒载量表达,苏木精-伊红(HE)染色法检测各组小鼠肺组织的病理改变。体外实验:将银花平感颗粒和三拗汤两方药作用于感染甲型H1N1流感病毒的犬肾细胞(MDCK),采用MTT法检测两方药对甲型H1N1流感病毒的抗病毒有效率及显微镜观察其引起的细胞病变效应(CPE)。结果体内实验中,与正常对照组比较,病毒模型组小鼠肺指数升高,脾指数、胸腺指数均降低,多处肺实变,炎症细胞浸润,肺组织内病毒载量高表达(P 0. 01),与病毒模型组比较,银花平感颗粒和三拗汤均降低流感病毒感染小鼠肺指数(P 0. 01),升高脾指数、胸腺指数(P 0. 05,P 0. 01),并明显减轻流感病毒肺炎小鼠肺组织病理变化,降低肺组织病毒载量(P 0. 05,P 0. 01);体外实验中,银花平感颗粒和三拗汤可以明显抑制流感病毒引起的CPE,对病毒感染也有明显的保护作用。结论银花平感颗粒和三拗汤两方药在体内外均有良好的病毒抑制作用,其抗病毒作用可能与抑制流感病毒复制、保护免疫器官、减轻肺部炎症损伤及抑制病毒引起的CPE有关,且在体内外对流感病毒的抑制方面,银花平感颗粒比三拗汤配伍更全面,疗效更好。     

银荆感冒颗粒抗甲型流感病毒的药效学研究

目的:研究银荆感冒颗粒对甲型流感病毒的抑制作用。方法:体外接种甲型流感病毒鼠肺适应株于狗肾细胞(MDCK),观察银荆感冒颗粒体外抗病毒作用;体内实验(1):以甲型流感病毒鼠肺适应株滴鼻感染小鼠,观察14天,计算小鼠存活率及存活天数;体内实验(2):以甲型流感病毒鼠肺适应株滴鼻感染小鼠,观察肺指数,病理改变等。结果:银荆感冒颗粒体外抗甲型流感毒EC50为3.24mg/mL。银荆感冒颗粒10g/kg和20g/kg剂量组可明显延长甲型流感病毒感染小鼠存活天数,降低死亡率;银荆感冒颗粒10g/kg和20g/kg剂量组可明显抑制肺指数值,抑制率分别为31.4%和29.1%。结论:银荆感冒颗粒对甲型流感病毒有一定的抑制作用。     

防风解热合剂抗菌、抗病毒的实验研究

目的:探讨防风解热合剂在小鼠体内抗菌、抗病毒的药理作用,为其临床合理用药提供实验依据。方法:通过检测金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌的最低致死量,作为其抗菌实验的感染菌量;通过检测防风解热合剂对金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌感染小鼠的死亡保护率,观察其抗菌作用。通过检测甲型流感病毒致小鼠100%死亡的病毒感染浓度,作为其抗病毒实验的感染病毒量;通过检测防风解热合剂对甲型流感病毒感染小鼠的死亡保护率、平均存活天数、肺指数及其抑制率、肺组织病毒血凝滴度及支气管组织、肺组织的病理变化,观察其抗病毒作用。结果:抗菌实验中,金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌致感染小鼠100%死亡的最低浓度分别为4×10~5、4×10~7 cfu/mL;与模型组比较,高、中、低剂量防风解热合剂均能显著提高金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌感染小鼠的死亡保护率(P0.05)。抗病毒实验中,甲型流感病毒致感染小鼠100%死亡的最低稀释度为10~(-5.32)倍病毒原液;与模型组比较,各剂量防风解热合剂均能显著提高甲型流感病毒感染小鼠的死亡保护率、平均存活天数,显著降低感染小鼠的肺指数、肺指数抑制率、肺组织血凝病毒滴度(P0.05),并能改善感染小鼠的支气管和肺组织病理损伤。结论:防风解热合剂具有良好的抗菌、抗病毒作用,这可能是其治疗小儿急性支气管炎及慢性支气管炎急性发作的基础。     

病炎清颗粒对流感病毒感染小鼠治疗作用的实验研究

目的:观察病炎清颗粒对流感病毒FM1感染小鼠的治疗作用。方法:用流感病毒FM1感染小鼠,将实验小鼠随机分为正常组、模型组、西药组、中药组;分组给药5天,观察小鼠肺指数、抑制率及感染后小鼠肺组织IFN-γ含量及血清Ig M含量的变化。结果:病炎清颗粒组能明显降低流感病毒感染小鼠的肺指数及抑制率,提高病毒感染小鼠肺组织IFN-γ表达及血清Ig M含量。结论:病炎清颗粒对流感病毒FM1感染小鼠具有治疗作用,增强免疫功能是其部分作用机制。     

喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠肺炎的影响

目的:观察喘可治注射液对甲型H1N1流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型的预防和治疗作用。方法:采用腹腔注射环磷酰胺联合甲型H1N1流感病毒FM1株滴鼻感染ICR小鼠造成免疫低下小鼠肺炎模型,分别经治疗性给药4 d和预防性给药5 d后,取各组小鼠肺组织称重,计算肺指数、肺指数抑制率, RT-PCR法检测各组小鼠肺组织中相对病毒载量。结果:采用甲型H1N1流感病毒FM1株感染免疫低下小鼠后,肺指数明显增高,脾、胸腺指数降低,三者与环磷酰胺对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01)。治疗性给予喘可治注射液4d后,小鼠肺指数有所降低,与模型对照组比较差异无统计学意义(P0.05);脾指数和胸腺指数均升高,其中脾指数与模型对照组比较,差异有统计学意义(P0.05)。预防性给予喘可治注射液5 d,肺指数明显降低,与模型对照组比较差异有显著统计学意义(P0.01);小鼠肺组织中FM1株流感病毒病毒载量也明显降低,与模型对照组比较差异有统计学意义(P0.05),病毒载量抑制率可达58.68%。结论:喘可治注射液对流感病毒感染免疫低下小鼠肺炎模型有较好的防治作用。     

菘蓝有效成分抗流感病毒作用的实验研究

目的研究菘蓝有效成分在体内外抗甲型流感病毒的作用。方法体外用MTT法检测菘蓝有效成分对传代狗肾细胞(MDCK)的毒性浓度,观察菘蓝有效成分抑制甲型流感病毒的致细胞病变作用(CPE),MTT法检测菘蓝有效成分对流感病毒的抑制率;建立在体流感病毒感染小鼠肺炎模型,通过观察小鼠肺病变程度指标,测定肺组织内流感病毒血凝滴度判定菘蓝有效成分对小鼠肺炎的治疗作用。结果菘蓝有效成分在体外主要抑制甲型流感病毒在细胞内的复制,其对病毒的半数抑制率浓度为64μg.mL-1,治疗指数达28.88;口服菘蓝有效成分能明显减轻小鼠肺组织病变程度,对肺组织内病毒的增殖有明显抑制作用。结论菘蓝有效成分具有较好的抗甲型流感病毒的作用,且呈剂量效应关系。     

天山堇菜提取物体内外抗流感病毒作用的初步研究

目的 观察天山堇菜提取物体内、外的抗流感病毒作用.方法 体外以MDCK细胞为宿主,采用MTT法和病毒致细胞病变(CPE)法测定样品抑制甲型流感病毒济防90-15、A/PR/8/34的半数抑制浓度(IC50),并计算选择指数(SI).体内抗病毒实验用流感病毒鼠肺适应株(PR8)滴鼻感染小鼠建立流感病毒性肺炎模型,以死亡保护率、生命延长率和肺指数等为指标,评价样品的保护作用.结果 天山堇菜提取物对甲型流感病毒济防90-15、A/PR/8/34致MDCK细胞病变的IC50分别为32.90,28.75μg.ml-1,SI分别为7.86、9.00;天山堇菜提取物500 mg·kg-1可明显延长小鼠流感病毒性肺炎模型的平均存活天数,其生命延长率为38.5％、死亡保护率为54.5％;天山堇菜提取物500,250 mg·kg-1均对流感病毒性肺炎小鼠肺指数有明显的抑制作用,抑制率分别为28.3％,14.5％.结论 天山堇菜提取物具有一定的抗流感病毒作用.     

连翘体外、体内抗甲型流感病毒的实验研究

目的:观察连翘体外、体内抗甲型流感病毒的作用。方法:采用血凝实验方法,将不同浓度流感病毒接种鸡胚尿囊腔制造甲型流感病毒感染鸡胚模型,观察不同浓度连翘提取物对造模后鸡胚的预防和治疗作用。采用鼻腔接种甲型流感病毒FM1株诱导幼龄昆明种小鼠肺炎,将不同浓度连翘提取物以灌胃给药途径治疗小鼠流感病毒性肺炎,观察各组小鼠一般状态、肺指数、肺组织形态学及对IV RNA表达的影响。结果:中药连翘可预防流感病毒在鸡胚内增殖,其预防作用随药物浓度降低而减弱,但各浓度之间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘对感染IV鸡胚具有治疗作用,其治疗作用随浓度降低而减弱,但各浓度间差异无统计学意义(P0.05)。中药连翘可改善流感病毒肺炎小鼠一般状态,可减轻流感病毒肺炎小鼠肺组织病变,并抑制流感病毒在小鼠肺组织中复制。结论:中药连翘提取物具有体外抗流感病毒作用及对流感病毒肺炎小鼠的治疗作用。