核转录因子-κB的研究进展

核转录因子-κB存在于体内多种细胞内,活化后与特定的靶基因启动子结合,从而启动基因转录,参与多种疾病的发病过程。本文综述了NF-κB在各种疾病中的作用及研究进展。     

呼吸道合胞病毒诱导A549细胞凋亡的机制研究

目的:通过呼吸道合胞病毒(RSV)感染人肺Ⅱ型腺上皮癌细胞(A549)及人肺成纤维细胞(IMR-90)后核转录因子(NF-κB)变化,探讨RSV诱导肿瘤细胞凋亡机制,为临床肿瘤治疗提供新方向。方法:RSV以感染复数(MOI)3感染A549及IMR-90细胞,观察感染后24,48,72h细胞形态变化、细胞存活率及细胞内病毒滴度,Western-blot方法检测Caspase-3,8,9蛋白表达变化,并在RSV感染A549细胞后2,4,8,24,36h,采用Western-blot方法检测NF-κB蛋白表达变化。结果:RSV感染A549及IMR-90细胞后,A549细胞存活率较IMR-90低,细胞内病毒滴度较IMR-90高,差异有统计学意义(P<0.05),细胞呈现明显凋亡改变。Caspase-3,8,9呈时间依赖性增强,以Caspase-3,9表达为主。A549细胞内NF-κB表达8h内先增高并达高峰,24h开始下降,36h表达明显下调,与未感染RSV细胞相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论:RSV可通过内源性及外源性途径引起A549细胞凋亡,以NF-κB介导的内源性途径为主。     

氧化型低密度脂蛋白对平滑肌细胞核因子-κB激活的影响

目的:观察氧化型低密度脂蛋白对人平滑肌细胞核因子κB激活的影响,探讨氧化型低密度脂蛋白致动脉粥样硬化机制。方法:以体外培养的人脐动脉平滑肌细胞为对象,采用免疫细胞化学法测定氧化型低密度脂蛋白与核因子κB亚单位p65核移位的时间效应与浓度效应关系。结果:在氧化型低密度脂蛋白刺激下,平滑肌细胞中0.5h即出现核因子κB核移位,2h达高峰,4h仍持续可见。不同浓度(12.5,25,50及100mg/L)氧化型低密度脂蛋白均可诱导平滑肌细胞中核因子κB核移位,在一定剂量范围内,氧化型低密度脂蛋白的浓度越大,核因子κB核移位越明显,尤以50mg/L的氧化型低密度脂蛋白作用最明显。结论:氧化型低密度脂蛋白可刺激平滑肌细胞中核因子κB的激活,进一步提示氧化型低密度脂蛋白/核因子κB信号途径在促进动脉粥样硬化发病机制中起重要作用。     

PKC在LPS激活大鼠肺巨噬细胞核转录因子-κB中的作用

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)在LPS激活肺巨噬细胞核转录因子-κB信号传导通路中的作用。方法 采用夹心ELISA的方法检测巨噬细胞NF-κB的核内浓度；免疫组化染色观察LPS作用前后NF-κB的位置改变。结果 LPS刺激可诱导巨噬细胞NF-κB活化，二者之间存在时效与量效的依赖关系；免疫组化染色显示LPS作用后，NF-κB发生核内移位，由胞浆进入细胞核内；而特异性PKC抑制剂(Cal C)和NF-κB阻断剂(PDTC)均能在不同程度上抑制LPS的作用。结论 PKC作为NF-κB活化的上游信使，参与了LPS激活NF-κB的信号传导通路。     

靶向NF-κB信号通路的胰腺癌治疗研究进展

胰腺癌是一种胰腺原发恶性肿瘤疾病。由于其早期的症状较少,患者确诊时往往病情已较为严重,并且预后较差,1年及5年生存率都较低,是威胁人类健康的重大疾病。NF-κB(核因子κB)是广泛表达于各类动物细胞中的转录因子,在免疫应激中扮演重要角色,其异常表达可导致免疫系统异常疾病及肿瘤的发生。本文对NF-κB信号在胰腺肿瘤治疗中的应用与前景作一综述。     

厄贝沙坦对单核-巨噬细胞核因子-κB活性和表达的影响研究

目的研究血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)1型受体(AT1)拮抗剂厄贝沙坦对单核-巨噬细胞核因子-κB(NF-κB)活性和表达的影响,探讨厄贝沙坦抗动脉粥样硬化(AS)的作用机制。方法用不同浓度的厄贝沙坦预作用已诱导分化的单核-巨噬细胞2 h,再加入1×10-6mol/L的AngⅡ24 h后,用细胞免疫荧光染色检测单核-巨噬细胞表达NF-κB P65的阳性细胞率,采用电泳迁移率改变分析检测NF-κB的活性。结果单核-巨噬细胞NF-κBP65阳性表达率,AngⅡ组(65.2±7.2)%>0.01μmol/L厄贝沙坦组(47.2±5.8)%>0.1μmol/L厄贝沙坦组(32.7±3.6)%>1μmol/L厄贝沙坦组(15.2±4.1)%>空白对照组(8.1±3.0)%,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);NF-κB的活性,AngⅡ组>各浓度厄贝沙坦组>空白对照组(P<0.05),0.01μmol/L厄贝沙坦组、0.1μmol/L厄贝沙坦组均>1μmol/L厄贝沙坦组(P<0.05),0.01μmol/L厄贝沙坦组与0.1μmol/L厄贝沙坦组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论厄贝沙坦可浓度依赖性地抑制AngⅡ诱导的单核-巨噬细胞NF-κB的活性和表达,其可能通过此作用抑制AS的启动环节,从而发挥抗AS作用。     

核转录因子NF-κB/p65在重症胰腺炎中的作用及其机制

目的通过对NF-κB/p65在重症胰腺炎中的表达进行研究,初步探讨它们在重症胰腺炎中的作用。方法无菌提取重症胰腺炎患者及健康对照组外周血单核细胞,利用Western blot检测p65的磷酸化表达,应用酶联免疫方法检测IL-1的浓度。通过十二指肠乳头逆行注射牛磺胆酸钠构建重症胰腺炎大鼠模型,应用JSH-23进行NF-κB/p65阻断,检测大鼠血清及尿液中淀粉酶及IL-1的浓度,同时对大鼠的存活率进行检测。结果重症胰腺炎患者外周单核细胞p65及磷酸化p65的表达水平明显高于健康对照组(P<0.05),重症胰腺炎患者IL-1的浓度水平达到(127.46±23.45)pg/ml,显著高于健康对照的(25.65±8.25)pg/ml(P<0.05)。造模大鼠NF-κB/p65阻断后,血清及尿液淀粉酶较空白及阴性对照组没有明显变化,但IL-1浓度明显低于空白及阴性对照组(P<0.05),且大鼠的存活率也明显增加(P<0.05)。结论 NF-κB/p65在重症胰腺炎表达明显增强,并且可以调控炎性因子IL-1的表达,从而在疾病的发生及发展过程中发挥重要作用。     

7-酮胆固醇诱导巨噬细胞凋亡与NF-κB

目的：探讨7-酮胆固醇（7KC）诱导的巨噬细胞凋亡与核因子κB（NF-κB）的关系。方法：7KC刺激体外培养的巨噬细胞J774A.1。H-E染色观察细胞形态,应用MTT法、流式细胞术检测在有无NF-κB抑制剂PDTC参与下的细胞凋亡情况。结果：7KC抑制J774A.1细胞增殖,诱导巨噬细胞凋亡甚至死亡,PDTC减弱7KC诱导的凋亡作用。结论：7KC诱导巨噬细胞凋亡。活化的NF-κB介导7KC诱导巨噬细胞凋亡。     

褪黑素对ox-LDL所致巨噬细胞TNF-α释放及核因子κB活性的影响

目的探讨褪黑素对氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）所致的巨噬细胞肿瘤坏死因子α（TNF-α）释放及核因子κB活性的影响。方法以ox-LDL、ox-LDL加不同浓度的褪黑素处理RAW264.7小鼠巨噬细胞,采用酶联免疫吸附测定细胞上清液中TNF-α的浓度,免疫印迹法检测p65/核因子κB的核移位,凝胶电泳迁移率分析核因子κB与DNA的结合活性。结果褪黑素能够显著减少ox-LDL所致的巨噬细胞TNF-α的释放,且p65/核因子κB的核移位减少,核因子κB与DNA的结合活性降低。结论褪黑素减少ox-LDL所致的巨噬细胞TNF-α的释放与其调节核因子κB的活性有关。     

核转录因子-κB与脑缺血再灌注损伤和白藜芦醇甙的保护机制

脑缺血再灌注损伤是一种多因素参与的病理过程。核转录因子-κB(NF-κB)能调节多种炎症因子的表达和细胞的凋亡。在脑缺血再灌注损伤中起着重要的作用。中药作用成分多。能有效的保护缺血再灌注损伤脑组织。其中自藜芦醇甙具有多种生物学作用。毒副作用低，能下调NF-κB的表达。具有神经保护作用。     

重组人生长激素对内毒素诱导的巨噬细胞凋亡和NF-κB的影响

目的 观察内毒素(LPS)对巨噬细胞的凋亡作用以及重组人生长激素(rhGH)的干预效果.方法 巨噬细胞系U937细胞经传代培养24 h后,换用舍LPS(40μg/mL)和LPS+rhGH(4u/L)新鲜培养液继续培养16 h,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫细胞化学法检测巨噬细胞内NF-κB的活化程度.结果 U937细胞经LPS和LPS+rhGH作用16 h后,rhGH明显降低LPS诱导U937细胞的细胞凋亡率,并可抑制NF-κB的活化.结论 rhGH能抑制LPS诱导的U937细胞凋亡,并对NF-κB的活化有一定的抑制作用.     

戊四氮点燃癫痫大鼠海马核转录因子-κB的动态表达

目的 通过研究戊四氮点燃癫痫大鼠海马核转录因子-κB(nuclear factor-kappaB,NF-κB)表达的变化,以探讨癫痫的发病机制.方法64只大鼠随机分为癫痫持续状态组(SE组,56只)和对照组(8只)戊四氮腹腔注射诱导大鼠癫痫持续状态(status epilepticus,SE),观察大鼠行为学改变,分别选取1、6、24、72 h 4个时间点(每组4只)运用免疫组化和反转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法 检测SE大鼠和对照组海马NF-κB 的表达.结果 N F-κB P65阳性细胞数各组依次为(7.3±2.9)、(12.3±3.9)、(17.9±7.1)、(43.1±6.2)、(33.3.±7.60);NF-κB mRNA表达对照组和SE 1～72 h组依次为(0.17±0.07)、(0.15±0.04)、(0.23±0.16)、(0.34±0.16)、(0.20±0.06).SE1 h组N F-κB P65 阳性表达细胞和NF-κB mRNA 的表达与对照组比较差异有统计学意义(P＞0.05),余SE组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),SE24 h组与SE其他组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 NF-κB核移位即海马神经元活化是戊四氮点燃大鼠癫痫形成的重要机制,参与癫痫发病.     

核因子-κB介导非对称性二甲基精氨酸上调大鼠主动脉氧化低密度脂蛋白受体1的表达

目的 探讨非对称性二甲基精氨酸(ADMA)上调大鼠主动脉氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)的表达是否是由NF-κB调控.方法 Wistar大鼠50只随机分为4组:①正常对照组(n=10):标准饲料喂养.②H组(n=12):高脂饲料喂养.③A+H组(n=14):高脂饲料喂养,ADMA[0.2mg/(kg·d)]灌胃,每日1次.④P+A+H组(n=14):高脂饲料喂养,吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)[40 mg/(kg·d)]腹腔注射、ADMA[0.2mg/(kg·d)]灌胃,均为每日1次.18周后麻醉大鼠、取主动脉.以实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测LOX-1 mRNA和蛋白表达,以电泳迁移率变动分析(EMsA)和增强化学发光法(ECL)检测NF-κB活性.结果 ①A+H组LOX-1 mRNA和蛋白表达量较正常对照组和H组升高(P＜0.05),P+A+H组较A+H组LOX-1 mRNA和蛋白表达量降低(P＜0.05).②A+H组NF-K B活性较正常对照组和H组均显著升高(P＜0.05),P+A+H组NF-K B活性较A+H组明显降低(P＜o.05).(③相关分析:NF-K B活性与LOX-1 mRNA和蛋白表达量均呈正相关(相关系数f分别为0.79,0.81;P＜0.05).结论 ADMA可能通过NF-κB途径上调LOX-1表达而促进动脉粥样硬化的发生发展.     

核转录因子-κB与甲状腺癌的关系研究进展

1 核转录因子-κB（nuclear factor kappa-B,NF-κB）的概述1.1 NF-κB家族的组成NF-κB家族是由Rel蛋白家族成员组成的同源或异源二聚体蛋白.在哺乳动物细胞中有5种NF-κB/Rel家族成员：RelA（P65）、RelB、c-Rel、NF-κB1（P50/P105,P105是P50的前体）和NF-κB2（P52/P100,P100是P52的前体）,该家族N端均含有一个高度保守的约300个氨基酸组成的Rel同源结构域（rel homology domain,RHD）,内含DNA结合功能区、蛋白质二聚化区和核定位信号（nuclear localization signal,NLS）.RelA（P65）、RelB、c-Rel还包含一个反式激活结构域,通过与靶结构相互作用调节转录水平.     

核转录因子NF-κB与肾脏缺血-再灌注损伤

核转录因子κB（NF-κB）普遍存在于真核生物细胞内,在免疫反应、炎症反应、细胞凋亡、缺血-再灌注损伤等病理生理改变过程中起着重要的调控作用。NF-κB在肾脏缺血-灌注损伤中的起着重要作用,本文就这方面的研究进展进行综述。     

凉膈散药物血清对脂多糖诱导体外培养巨噬细胞核转录因子-κB的影响

目的观察凉膈散药物血清对脂多糖(LPS)诱导的体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞核转录因子-κB(NF-κB)变化的影响．探讨凉膈散解毒作用的细胞信号转导调控机制。方法制备凉膈散药物血清；提取并体外培养小鼠腹腔巨噬细胞；以凉膈散药物血清及LPS共同刺激已培养细胞，免疫荧光法检测巨噬细胞NF-κB亚基p65，用激光扫描共聚焦显微镜观察并测定各组小鼠腹腔巨噬细胞核的p65的荧光表达情况。结果小鼠巨噬细胞经LPS刺激1h后，其核内的荧光强度(代表p65的表达量)显增强。与LPS刺激组相比：抑制剂TLCK组、凉膈散药物血清不同剂量组的荧光强度值均较低．有显性差异，以TLCK及凉膈散大剂量组强度值最低，中、小剂量组次之；空白血清不同剂量组则均无显差异。药物血清不同剂量组之间有显差异，呈剂量依赖性关系；空白血清不同剂量组之间无显性差异。结论不同剂量凉膈散药物血清均能抑制LPS所致的细胞核内p65升高，且呈剂量依赖性，这可能是凉膈散解毒作用的细胞信号转导机制之一。     

大鼠颅脑损伤中肿瘤坏死因子-α及核转录因子-κB的变化及其意义

目的:通过观察肿瘤坏死因子(TNF-α)以及核转录因子κB(NF-κB)在颅脑损伤后脑组织中的表达变化,初步探讨两者在颅脑损伤后继发性脑损伤中的意义。方法:健康成年雄性SD大鼠64只,体重230-310g,随机分成对照组8只和颅脑损伤组56只,颅脑损伤组在外伤后1h、3h、6h、12h、24h、3d、7d处死,每组处死8只。取损伤灶周围的脑组织进行含水量以及超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)的测定,并进行病理切片观察其病理变化,最后用免疫组化法检测脑组织中TNF-α和NF-κB的含量。结果:1成功构建大鼠颅脑损伤的模型,颅脑损伤后的各时间点神经功能评分差异无统计学意义(P>0.05);2颅脑损伤组大鼠的脑组织含水量较对照组显著升高,并且在3d达到高峰,7d时逐渐下降,但仍高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3大鼠颅脑损伤后切片表现为有大量的炎症细胞积聚,并有不同程度的脑细胞水肿,随着时间的推移逐渐加重,在第7d时,水肿较之前减轻,但仍有大量的炎性细胞浸润以及少量的纤维组织增生;4大鼠颅脑损伤后1h开始,损伤灶周围的脑组织中MDA的含量显著升高,且在之后的时间内持续升高,在3d时达到高峰,随后下降,7d时表达仍然高于对照组,而损伤组的SOD活性及GSH的活力明显降低,在7d时仍低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);5TNF-α以及NF-κB在颅脑损伤组中含量显著高于对照组,且在颅脑损伤后1h开始升高,在3d左右达到高峰,7d时稍有降低,但仍高于对照组,为高表达状态。结论:颅脑损伤后TNF-α以及NF-κB的变化趋势与继发性脑损伤的临床表现一致,参与了继发性脑损伤的病理过程。     

硫化氢对急性肺损伤大鼠肺组织核转录因子κB及细胞间黏附分子1表达的影响

目的 探讨硫化氢(H2S)对油酸诱导的急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织核转录因子κB(NF-κB)与细胞间黏附分子1(ICAM-1)表达的影响.方法 雄性SD大鼠42只,采用随机数方法分为对照组(6只)、油酸组及油酸+硫氢化钠(NaHS)组,后2组大鼠分别在2、4、6h3个时间点进行观察,每个时间点大鼠为6只.复制大鼠ALI模型,对照组大鼠经过尾静脉注射0.1 ml/kg生理盐水;油酸组大鼠通过尾静脉注射油酸0.1 ml/kg;油酸+NaHS组大鼠先腹腔注射NaHS 56 μmol/kg(溶于0.5 ml生理盐水),30 min后经大鼠尾静脉注射油酸0.1 ml/kg.对支气管肺泡灌洗液沉渣行瑞士染色进行白细胞分类计数;对大鼠肺组织病变进行半定量肺损伤评分;测定肺组织中H2S的含量;应用免疫组织化学法对肺泡上皮细胞中ICAM-1表达进行定位及半定量分析,并对NF-κB核转位进行半定量分析.结果 油酸组大鼠2、4、6h支气管肺泡灌洗液多形核白细胞(PMN)比例[(74.5±3.0)％、(80.2±2.0)％和(87.2±2.7)％]及肺损伤评分(5.2±0.8、6.4±0.6和6.8±0.8)均明显高于对照组[(3.1±1.6)％和0.4±0.6,均P＜0.01];肺组织中H2S含量均明显低于对照组[ (21.20 ±0.38) μmol/g、( 20.80±0.53)μmol/g、(18.92±0.75)μmol/g比(26.81±0.65)μmol/g,均P＜0.01];肺泡上皮细胞中NF-κB核表达和ICAM-1胞膜表达则均明显高于对照组(均P＜0.05).油酸+NaHS组支气管肺泡灌洗液PMN比例及肺损伤评分在2、4和6h3个时间点均明显低于油酸组(均P＜0.05);肺组织中H2S含量在4和6h明显高于油酸组(均P＜0.05);肺泡上皮细胞中NF-κB核表达和ICAM-1胞膜表达在4和6h则明显低于油酸组相应时间点(均P＜0.05).结论 H2S可能通过抑制ALI大鼠肺部炎症反应发挥保护效应,其抗炎效应与其抑制大鼠肺泡上皮细胞NF-κB的表达有关.