刺激型抗人血小板McAb对人血小板细胞骨架蛋白的影响

本实验观察到HIP_2、APT_4和HI1173种刺激型McAb均能使PRP中血小板细胞骨架蛋白的主要成分肌动蛋白(actin)含量增加,而钙调蛋白抑制剂(EBB)则能显著抑制HIP_2和APT_4引起的肌动蛋白增加,抑制率分别为76.3％和48.95％,但不抑制HI117引起的肌动蛋白增加。此外,EBB能完全抑制APT_4引起的血小板聚集,部分抑制HIP_2引起的血小板聚集,不抑制HI117引起的血小板聚集。将3种刺激型McAb加入经0.3mmol/L EDTA溶液洗涤过3次的血小板悬液中,无透光度改变,也没有肌动蛋白动员,提示此3种McAb引起的血小板聚集及肌动蛋白动员除与Ca~(2+)有关外,还与血浆中某种(些)因子有关,Ca~(2+)—钙调蛋白系统在HIP_2,APT_4引起的血小板聚集及肌动蛋白动员中起着重要的作用。     

三羟异黄酮对小鼠辐射损伤后造血功能的影响

目的 探讨三羟异黄酮(genistein, GEN)对辐射损伤造血功能的影响.方法 6.0 Gy γ射线一次全身照射BALB/c雄性小鼠复制出造血损伤模型.照射前24 h给予GEN灌胃(160 mg/kg体质量),分别观察照射后1、3、7、14、21、30 d不同时相点小鼠血清对粒单系集落形成单位(colony-forming unit-granulocyte/macrophage, CFU-GM)和红系集落形成单位(colony forming unit-erythroid, CFU-E)的支持或抑制活性.结果 辐射前24 h给予GEN,辐射后该组小鼠血清造血刺激活性显著增加,使正常小鼠骨髓有核细胞CFU-GM、CFU-E形成数量明显增多,而且对CFU-GM的刺激活性较CFU-E强.同时,该组小鼠照后血清对CFU-GM、CFU-E的抑制活性明显降低,但对CFU-E和CFU-GM的抑制活性差异不明显.结论 提高辐射损伤后小鼠血清刺激活性可能是GEN防护放射性造血损伤、促进受损造血系统重建的分子机制之一.     

刺激型血小板McAb对人血小板胞浆内钙离子浓度的影响

McAb APt_4、HIP_2、HI117和SJ-9A_4的结合位点分别在血小板膜GPⅡb/Ⅲa、GPⅡb和CD9抗原上,其均能引起血小板聚集,但其作用机理尚不清楚.据报道许多血小板诱聚剂可使血小板胞浆内Ca~(2+)浓度升高,本实验观察这4种McAb对人血小板胞浆内Ca~(2+)浓度的影响。 取正常人全血,ACD抗凝,分离血小板,与Ca~(2+)荧光指示剂fura2-AM共同温育45min,使fura2载入血小板,然后用Hepes液洗3遍.采用单激发光源的日立F-3010型荧光分光光度计测量载有fura2     

国产红细胞生成素对人体胎肝细胞形成红系集落的刺激作用

国产红细胞生成素(EPO)刺激妊娠4～5个月的胎肝红系祖细胞(BFU-E、CFU-E)形成集落,CFU-E集落的峰值出现于培养后48小时,BFU-E在7～10天借助于血红蛋白的特征可直接观察。CFU-E的产率与种入的细胞数呈线性关系,并与EPO浓度密切相关,100mu/ml培养物时集落计数最高。     

不同部位的巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

目的:探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对小鼠早期红系造血祖细胞[用红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[用晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]发生的影响.方法:采用造血祖细胞体外培养技术观察3种不同部位的巨噬细胞培养上清液对BFU-E和CFU-E集落数的影响.结果与结论:3种培养上清液均能促进BFU-E和CFU-E的分化与增殖,而肺泡巨噬细胞培养上清液的上述作用更明显.     

rhIL-6,rhGM-CSF和rhEPO对造血干细胞的作用

据《中华内科杂志》1994年33卷第5期报道 北京医科大学第三医院血液科,用三种细胞因子对人正常造血干细胞进行了体外观察。 结果表明:重组人白细胞介素(rhIL-6)和重组人-单细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)与正常人造血干细胞培养1周后,IL-6组细胞数增至4.3±0.6倍;CM-CSF组细胞数增至9.4±0.9倍,IL-6 CM-CSF组细胞数增至13.7±1.0倍,明显高于对照组(P<0.01)。CFU-E集落分析结果:IL-6单独应用未见CFU-E集落形成,仅有CFU-GM集落形成;IL-6 EPO(促红细胞生成素)组则CFU-E集落数明显高于EPO组(P<0.01)。CFU-Mix     

商陆素－脾细胞条件培养基对小鼠骨髓造血祖细胞作用的研究

目的研究商陆素-脾细胞条件培养基(PWM-SCM)对小白鼠骨髓造血祖细胞的作用.方法用micro-ELISA方法测定PWM-SCM中IL-2、IL-3、IL-4和IL-6的含量,在CFU-GM和CFU-E培养体系中加入PWM-SCM,观察其对造血祖细胞的作用.结果PWM-SCM中4种细胞因子的含量IL-2为72.5±1.1 pg/ml,IL-3为433.3±11.6 pg/ml,IL-4为28.9±0.4pg/ml,IL-6为143.3pg/ml,其测定值均高于对照组RPMI-1640完全培养基中测定的含量(P＜0.05～0.01).骨髓造血祖细胞培养显示,PWM-SCM对CFU-GM无影响,但CFU-E的集落数由6.2±1.4增加到34.0±2.5,有非常显著性差异(P＜0.001).结论PWM-SCM中含有多种细胞因子,对小白鼠骨髓造血祖细胞有集落刺激活性,对CFU-E的形成有协同促进作用.     

牛膝多糖促进骨髓细胞粒细胞集落形成

目的探讨中药牛膝来源的多糖刺激粒细胞集落形成的能力.方法使用软琼脂培养体系,培养骨髓造血干细胞,设置粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、牛膝多糖(APP)、G-CSF和APP联合作用实验组以及对照组(0.1ng/ml G-CSF),分别检测有效集落数.结果 G-CSF联合APP能有效促进粒系集落形成单位(CFU-G)的形成,与G-CSF单独作用相比差异显著(P＜0.05).0.8mg/ml APP对CFU-G的刺激形成作用与1ng/ml的G-CSF相似.结论 APP具有刺激粒细胞集落形成的能力,并与G-CSF有明显的协同作用,有望成为一种有效的粒细胞刺激因子.     

牛膝多糖促进骨髓细胞粒细胞集落形成

目的探讨中药牛膝来源的多糖刺激粒细胞集落形成的能力.方法使用软琼脂培养体系,培养骨髓造血干细胞,设置粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、牛膝多糖(APP)、G-CSF和APP联合作用实验组以及对照组(0.1ng/ml G-CSF),分别检测有效集落数.结果 G-CSF联合APP能有效促进粒系集落形成单位(CFU-G)的形成,与G-CSF单独作用相比差异显著(P＜0.05).0.8mg/ml APP对CFU-G的刺激形成作用与1ng/ml的G-CSF相似.结论 APP具有刺激粒细胞集落形成的能力,并与G-CSF有明显的协同作用,有望成为一种有效的粒细胞刺激因子.     

川芎嗪对辐射致血虚证小鼠骨髓细胞蛋白质表达的影响

目的:观察川芎嗪对辐射致血虚证小鼠骨髓细胞蛋白质表达的影响,探讨川芎嗪补血作用的分子机制。方法:采用3.5 Gy60Coγ射线全身1次性照射,制备小鼠血虚证模型;骨髓集落细胞培养,观察并计数粒系-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)、爆增型红细胞集落生成单位(BFU-E)、红细胞集落生成单位(CFU-E)、混合集落生成单位(CFU-mix)集落数;利用蛋白质组学寻找差异表达蛋白质。结果:辐射后小鼠骨髓CFU-GM、BFU-E、CFU-E、CFU-mix集落数明显减少,川芎嗪能使其显著回升并部分逆转辐射后蛋白质表达的变化,使小鼠骨髓细胞5种蛋白质表达回升,5种回落。结论:川芎嗪可促进辐射致血虚证小鼠骨髓造血祖细胞增殖,调节多种骨髓细胞蛋白质的表达,后者可能是川芎嗪促进造血细胞生长和增殖的重要机制之一。     

rhGM-CSF/IL-3融合蛋白对小鼠造血功能的影响

目的:观察重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素-3(rhGM-CSF/IL-3)融合蛋白对小鼠造血功能的影响.方法:利用环磷酰胺(CTX)抑制骨髓及辐照致骨髓损伤造模,检测rhGM-CSF/IL-3对CTX所致骨髓抑制小鼠外周血WBC、RBC、血小板、脾重、骨髓有核细胞(BMC)的影响及对脾集落形成单位(CFU-S)的影响和对小鼠生存的保护作用.结果:rhGM-CSF/IL-3对CTX骨髓抑制小鼠外周血WBC、R13C、血小板及BMC均有明显提升作用(P＜0.01),并显著提高生存率(P＜0.05)和CFU-S数(P＜0.01),而对脾重影响差异无显著性(P＞0.05).结论:rhGM-CSF/IL-3有减轻骨髓损伤和促进造血干/祖细胞增殖和分化的作用.     

重组人白细胞介素-1β对人红系、粒系造血祖细胞集落形成的影响

为探讨重组人白细胞介素-1β(rhIL-1β)对人红系、粒系造血祖细胞的作用,采用96孔板微量培养法在体外进行培养。在培养中加入不同浓度的rhIL-β1(0～5ug/mL)后,观察BFU-E、CFU-E及CFU-GM的集落形成。结果加入不同浓度的IL-1β后,BFU-E、CFU-E的集落形成均受到抑制,且呈剂量依赖性,在IL-1β剂量为0.1和0.5μg/mL时,抑制作用更明显(JP<0.005,0.05),而IL-1β对CFU-GM的集落形成无明显影响。结果表明,IL-1β对红系造血祖细胞(BFU-E和CFU-E)影响的研究有助于解释某些慢性疾病性贫血(如类风湿性关节炎伴贫血等)的发生机制,提示IL-1β单克隆抗体有可能用于治疗慢性疾病性贫血。     

再生障碍性贫血发病机制的初步研究

目的:探讨再生障碍性贫血(再障)的发病机制.方法:采用甲基纤维素半固体培养法及胶原半固体培养法对56例再障患者的骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK进行培养;采用APAAP法及双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)对再障患者外周血T细胞亚群、血清sIL-2R进行检测.结果:再障患者CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK集落数均明显低于对照组(P＜0.01),且严重型再障CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK集落数减少程度较慢性再障更明显;再障患者CD3亚群细胞无变化,CD4亚群细胞减低,CD8亚群细胞增高,CD4/CD8降低,重型再障患者血清sIL-2R中水平明显高于对照组(均P＜0.01). 结论:骨髓造血祖细胞数量减少是再障发病的重要因素,其减少程度与再障的病情有关;细胞免疫功能异常及造血负调控因子可能在再障发病中起一定的作用.     

单克隆抗体分析单纯疱疹病毒的抗原性

用15种抗HSV型共同性McAb相2种分别抗HSV-1和HSV-2的型特异性McAb,分析了43株HSV临床株的抗原性。间接免疫荧光试验和改良ELISA的分机结果表明,从宫颈炎患者分离出的15株HSV中,1株为HSV-1,14株为HSV-2;从口唇和眼部感染病变中分离出的28株HSV均为HSV-1.用15种型共同性McAb对HSV的抗原性分析表明43株HSV分离株中,22株(51.2％)可与所有型共同性McAb反应,21株(48.8％)仅与部分McAb反应。结果表明,HSV临床分离株间及不同的HSV参考株间在抗原性上有明显差异,其原因有待进一步研究。     

骨髓基质细胞体外扩增能力及支持造血的研究

目的 :观察成纤维细胞集落形成单位 (CFU- F)贴壁层的形成、体外传代培养、扩增的情况 ,研究各阶段 (CFU- F)对粒 -单核细胞集落形成单位 (CFU- GM)和红细胞集落形成单位 (CFU- E)生长及细胞因子对造血的支持作用 ,并测定骨髓有核细胞对基质细胞的粘附能力。方法 :利用改进的液体培养法 ,培养骨髓基质细胞并传代 ,利用甲基纤维素半固体培养法 ,培养人骨髓细胞 ,观察 CFU- GM、CFU- E集落数。结果 :人骨髓基质细胞在体外可以传代培养 4代并能扩增 2 8倍 ,其中 F3代对 CFU- GM和 CFU-E的促进增殖作用最强 ,且对骨髓有核细胞的粘附能力最强。结论 :人骨髓基质细胞可体外传代扩增并支持造血细胞生长     

重组人白介素11对豚鼠血小板减少的治疗作用

应用抗血小板血清造成豚鼠血小板减少症动物模型 ,观察人重组白细胞介素 11(rHuIL 11)对豚鼠血小板减少症的治疗作用 ,结果显示rHuIL 112 0 0 ,10 0 ,5 0 μg·kg-1均可明显升高豚鼠的血小板计数 ,增加骨髓巨核细胞集落生成单位 (CFU Meg)细胞集落数 ,与生理盐水对照组比较有明显差异。说明rHuIL 11对豚鼠血小板减少症有明显的治疗作用     

重组人类促红细胞生成素对尿毒症透析患者骨髓红系集落形成单位的影响(附11例病例分析)

分析11例重组人类促红细胞生成素对尿毒症透析患者骨髓有核红细胞和红系集落形成单位(CFU-E)的影响。结果表明,用药前CFU-E比正常对照明显下降(p<0.01),用药40～65d后CFU-E较用药前明显升高(p<0.05),同时骨髓有核红细胞数较用药前亦有所增多。认为重组人类促红细胞生成素能升高尿毒症透析者骨髓CFU-E水平,促进其增殖分化,从而改善肾性贫血。     

小鼠腹腔巨噬细胞对红系祖细胞增殖的影响

应用造血祖细胞体外培养技术,观察了小鼠腹腔巨噬细胞对早期红系祖细胞(BFU-E)及晚期红系祖细胞(CFU-E)增殖的影响。结果表明,小鼠腹腔贴壁巨噬细胞对CFU-E表现为刺激作用;对BFU-E增殖依培养体系条件不同而表现为刺激和抑制双重作用。巨噬细胞培养上清液也表现相似的作用。提示巨噬细胞具有促红细胞生成素(EPO)和爆式集落促进活性(BPA)样活性。     

转化生长因子α转化作用异同及 GM-CSF的协同作用

通过集落形成法检测两型TGFα对小鼠肾上皮细胞(NRK)促转化作用以及粒细胞/巨噬细胞集体刺激因子(GM-CSF)对其转化效应的协同作用.结果发现两型TGFα均可促进NRK细胞一定程度的转化(P＜0.0D,在GM-CSF存在下,两型TGFα促进NRK集落形成能力明显增强(P＜0.01),且与剂量呈正相关;但GM-CSF对S-TGFα促进转化的协同作用比TM-TGFα的作用强2～3倍(P＜0.01).提示过量的TGh表达,加之GM-CSF的协同作用,可能是导致增殖细胞恶性转化,从而引起肿瘤的发生和发展的重要原因.     

昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响

目的 研究昆布多糖对大鼠骨髓巨噬细胞生物活性的影响.方法 制备并体外培养大鼠骨髓造血干/祖细胞、巨噬细胞;制备昆布多糖作用后的骨髓巨噬细胞条件培养液,测定培养液中造血生长因子促红细胞生成素(EPO)、粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-3(IL-3)表达及活性;测定昆布多糖条件培养液作用后造血祖细胞的集落产率.结果 经昆布多糖诱导的骨髓巨噬细胞培养上清液可显著提高骨髓造血祖细胞的集落产率;经昆布多糖诱导后,骨髓巨噬细胞的EPO、GM-CSF和IL-3的表达增高.结论 昆布多糖可刺激骨髓巨噬细胞造血因子表达增高,从而促进髓系多向性造血祖细胞(CFU-Mix)、红系祖细胞(CFU-E)、粒一单系造血祖细胞(CFU-GM)的增殖分化.