HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中的生物碱含量

用HPLC法测定4 种不同工艺制备的黄连解毒汤提取物粉末及2 种日本汉方颗粒剂黄连解毒汤中的小檗碱和巴马汀含量.结果表明此方法简便、快速、精密度高、回收率较好.采用此法比较了上述6 种黄连解毒汤的生物碱含量.结果是新工艺制备的提取物中生物碱含量最高,其中小檗碱含量分别是东洋、津村黄连解毒汤的6 倍和13.8 倍,是传统水煎提取物的3 倍.     

基于一测多评法研究配伍比例及pH值环境对黄连-大黄配伍后4种生物碱成分溶出的变化规律

目的研究配伍比例及p H值环境对黄连-大黄配伍后4种生物碱成分溶出的变化规律。方法在一测多评法的基础上,采用HPLC法测定小檗碱、巴马汀、黄连碱及表小檗碱的量。结果黄连-大黄合煎组及分煎合并组中4种生物碱的量及相对溶出率随着大黄比例增加均有相似的降低趋势,2组黄连与大黄配伍比例为1∶2时,4种生物碱的量及相对溶出率均达到最大值;且配伍比例与4种生物碱的量及相对溶出率无效应关系;盐酸溶液单煎黄连组p H值为5.2时,4种生物碱的量及相对溶出率达到最大值,p H值与4种生物碱的量及相对溶出率无效应关系。结论 p H值环境对黄连-大黄配伍后4种生物碱成分的量有影响,且不同比例黄连-大黄配伍后形成的p H值环境与用盐酸调配的p H值环境对生物碱成分的溶出产生的影响不一致。     

HPLC法比较不同工艺制备的黄连解毒汤及日本汉方黄连解毒汤中的生物碱含量

用ＨＰＬＣ法测定４种不同工艺制备的黄连解毒汤撮物粉末及２种日本汉方颗粒剂黄连解毒汤中的小檗碱和巴马汀含量。结果表明此方法简便、快速、必度高、回收率较地。采用此法比较了上述６种黄连解毒汤的生物碱含量。结果是新工艺制备的提取物中生物碱含量最高,其中小檗碱含量分别是东洋、津村黄连解毒汤的６倍和１３．８倍,是传统水煎提取物的３倍。     

不同煎煮条件下黄连解毒汤有效成分分析

目的以黄连解毒汤为例说明不同煎煮条件对中药汤剂有效成分的影响。方法首先建立黄连解毒汤中多种有效成分的分析方法,对不同煎煮条件下(时间、煎煮次数)中药汤剂中有效成分进行动态分析。结果水溶性苷类成分(黄芩苷、栀子苷)煎煮20min溶出基本达到平衡,溶出率分别达到82%和60%左右;水溶性生物碱类(小檗碱、巴马汀碱)煎煮30min溶出基本达到平衡,溶出率为45%左右;脂溶性汉黄芩素的溶出较慢,煎煮60min其溶出率仅为31%;西红花苷-Ⅰ煎煮20min含量达到最大,继续煎煮则含量降低。煎煮次数对水溶性成分溶出影响不大,而对脂溶性成分的溶出影响较大。结论煎煮条件对黄连解毒汤中各有效成分的溶出率及稳定性具有不同程度的影响。     

黄连-厚朴不同配伍对生物碱成分溶出的影响

目的 探讨黄连-厚朴酸碱药对不同配伍剂量对小檗碱类生物碱成分煎出率的影响.方法 采用高效液相色谱法测定黄连-厚朴药对煎煮液中盐酸小檗碱的含量.结果 小檗碱和总生物碱的煎出率随着药对中黄连配伍剂量增大而升高,并且当黄连配伍剂量开始大于厚朴剂量时,生物碱煎出率升高趋势减缓.结论 黄连-厚朴配伍时,黄连:厚朴≥1:1时有利于黄连生物碱成分的溶出.     

黄连配伍吴茱萸后生物碱类成分的含量变化

目的:考察黄连与吴茱萸不同配伍比例对小檗碱、巴马汀、药根碱、吴茱萸碱和吴茱萸次碱含量的影响。方法:在优化的RP-HPLC条件下进行分析,比较色谱图。结果:左金丸中吴茱萸碱的溶出率比反左金丸及吴茱萸单煎时均显著升高,吴茱萸次碱在水提物中不能检出;黄连生物碱的相对峰面积随吴茱萸比例的增加呈线性下降。结论:吴茱萸可使黄连中生物碱的溶出率下降;左金丸配伍(黄连∶吴茱萸=6∶1)有利于吴茱萸碱的溶出。     

黄连-苦参不同配比中特征性成分的量-质变化相关性研究

目的 分析不同配比“黄连-苦参”药对的特征性成分量-质变化相关性,为该药对的量-效相关性及临床应用提供合理的用量比例参考。方法 采用HPLC法,建立不同配比9批“黄连-苦参”药对（5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3、1∶4、1∶5）,建立药对HPLC特征指纹图谱及其特征性成分含量测定方法,分析9组样品成分的差异性与相关性。结果 9种配比的黄连-苦参药对共确定16个共有峰,指认苦参碱、槐定碱、氧化苦参碱、木兰花碱、非洲防己碱、表小檗碱、药根碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱共10个共有峰。含量测定结果显示,黄连-苦参配对后相比黄连药材及苦参药材,特征性成分均有显著性差异。黄连-苦参（5∶1）时苦参碱、槐定碱、木兰花碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异;黄连-苦参（4∶1）时,非洲防己碱、表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量为各比例最高,相比单药材提取具有显著性差异,且黄连总生物碱溶出最高;黄连-苦参（1∶1）时苦参总生物碱含量最高,且药根碱含量为各比例最高;黄连-苦参（1∶3）时氧化苦参碱含量为各比例最高。结论 黄连-苦参不同配比时,以特征性成分个数与含量为标示的“质”与配伍用“量”之间的相关差异性较明显,显示出一定的成分相互促溶作用。苦参中3种成分的溶出量随黄连比例的降低呈现“U”型分布,而黄连中7种成分溶出量随黄连比例的降低整体呈现降低趋势。与黄连、苦参各药材单提相比,各比例下苦参中总生物碱类成分的溶出均有不同程度的提升,黄连中总生物碱类成分在黄连-苦参（5∶1）及（4∶1）比例下溶出表现为提升,其他比例表现为降低。药对中生物碱类成分的溶出规律与临床验方中药对的使用配比成正相关。为进一步开展该药对的量-效关联性分析确定了物质基础,也为临床潜方时确定适宜用量提供参考。     

RP-HPLC法同时测定黄连中四种原小檗碱型生物碱的含量

目的：建立用RP—HPLC技术同时测定黄连中小檗碱、巴马亭、黄连碱及药根碱等4种原小檗碱型生物碱含量的方法。方法：采用高效液相色谱法。测定黄连药材中上述4种原小檗型生物碱的含量。结果：4种原小檗碱型生物碱的平均含量分别为：5．74％（RSD=1．7％）（n=9），1．33％（RSD=1．3％）（n=9），3．67％（RSD=2．8％）（n=9），0．95％（RSD=5．2％）（n=9）。结论：该方法可用于同时测定黄连中4种原小檗碱型生物碱的含量。且简便、准确、可靠、快速，并具重现性。     

黄连解毒汤中盐酸小檗碱的含量

黄连解毒汤出自《外台秘要》，由黄连9g，黄芩6g，黄柏6g。栀子9g组成，具有抑菌、降压作用。黄连为君药，黄柏为佐药，两者主要成分都是盐酸小檗碱，其含量测定对于黄连解毒汤质量控制具有十分重要的意义，采用RP—HPLC法测定黄连解毒汤中盐酸小檗碱的含量。     

基于高分辨质谱数据库的黄连炮制前后生物碱变化规律

目的 构建黄连Coptis chinensis生物碱类成分的高分辨质谱数据库(HR-MS-Database),研究不同炮制方法炮制前后黄连生物碱类化学成分的变化。方法 采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联用(UPLC/Q-TOF-MS)技术手段,借助SCIEX公司LibraryView数据库平台,建立黄连生物碱类成分高分辨质谱数据库,并对不同黄连炮制品中炮制前后的生物碱类成分含量进行测定和差异分析。结果 建立黄连生物碱类成分高分辨质谱数据库,包含黄连生物碱类成分31种;对姜黄连、酒黄连、萸黄连及黄连生品4种样品测定结果显示,黄连炮制前后生物碱成分差异明显。黄连经姜炙后,药根碱、表小檗碱、非洲防己碱含量略有上升,黄连碱、小檗碱含量略有下降,巴马汀含量未见改变;萸黄连中药根碱、表小檗碱、小檗碱含量下降,黄连碱、巴马汀及非洲防己碱含量未见变化;而酒黄连中所测定的6种生物碱含量均显著提高(P<0.05)。结论 建立了一种黄连炮制前后生物碱类成分变化规律的快速识别方法,并定量了在黄连炮制前后含量变化显著的6种生物碱,为黄连炮制品的药效物质基础与质量控制标准研究提供参考。     

黄连解毒汤的HPLC指纹图谱测定条件初探

目的：试图建立一个可将黄连解毒汤中三大有效部分：生物碱类、黄酮类和环烯醚萜类的主要成分分开并表现出来的HPLC指纹图谱测定条件。方法：HPLC法，采用二元或三元梯度供液；C18V反相色谱柱；同时测定各色谱峰的UV光谱。结果：本文介绍条件所测指纹图谱可初步将三大有效部分的主要成分分开，表现出本复方的三大有效部分。结论：由于一些复方中药的有效部分成分的理化性质差别较大，故复方中药的指纹图谱与单味中药或单味植物药的标准提取物相比较更需要进行深入工作。     

影响厚朴三物汤厚朴酚含量因素的初步研究

目的：研究影响厚朴三物汤中主要有效成分之一-厚朴酚煎出率的诸因素。方法：采用HPLC法测定厚朴三物汤不同配伍及合煎、分煎组浸膏及药材残渣中厚朴酚含量,并用正交设计法考察大黄、枳实用量及煎煮时间、提取次数等因素对厚朴酚含量的影响。结果：厚朴三物汤合煎组厚朴酚溶出率高于分煎组1倍以上,随着枳实用量及提取次数的增加,厚朴三物汤中厚朴酚的溶出率升高。结论：枳实及提取次数为影响厚朴三物汤中厚朴酚含量的主要因素。     

LC-MS-MS测定黄连解毒汤中3种生物碱在大鼠血清的含量及其药代动力学研究

目的:建立灵敏、特异、准确、可靠的药根碱、巴马汀、小檗碱在大鼠血清中液质联用(LC-MS-MS)分析方法,用于黄连解毒汤中3种生物碱在正常大鼠体内药代动力学研究.方法:优化药根碱、巴马汀、小檗碱及内标延胡索乙素质谱检测条件,确定相关条件并开展方法学考察.正常大鼠灌胃给予黄连解毒汤,经时取血,样品经处理后将该方法用于3种成分的测定.DAS药代动力学软件拟合房室模型,计算药动参数.结果:在ESI(+)离子化条件下采用MRM工作模式,用,m/z 338～322,351.9～308,336-319.8来分别检测药根碱、巴马汀、小檗碱,同时以m/z 356.1～192.1来检测内标延胡索乙素.药根碱在0.2～25μg·L~(-1)、巴马汀、小檗碱在O.4～50μg·L~(-1)呈良好线性关系.3种生物碱在高、中、低3个浓度的准确度、精密度、稳定性等均符合要求.药根碱、巴马汀、小檗碱在正常大鼠体内药动学过程符合一室开放模型.结论:应用LC-Ms-s技术建立了测定药根碱、巴马汀、小檗碱血药浓度的方法,并成功应用于黄连解毒汤正常大鼠体内这3个成分的药动学研究,为中药复方药动学研究提供了可以借鉴的分析方法.     

黄连与茱萸配伍比例对黄连生物碱含量的影响

目的　探讨黄连与吴茱萸配伍后黄连生物碱含量的变化规律。方法　黄连、吴茱萸分别按１：１、１：２、１：４、１：８、１：１６、１：３２比例配伍,水煎制得水提液,用柱层析－紫外分光光度法测定配伍方剂水提液中黄连生物碱的含量,实验数据进行配伍比例与黄连生物碱含量的变化之间的相关分析。结果　黄连配伍吴茱萸可引起其生物碱含量的减少,其损失率与吴茱萸的配伍剂量线性相关,经统计学检验 Ｐ ＜０．０１。结论　在现代制药工艺设计中应考虑黄连、吴茱萸的配伍对黄连生物碱的影响。     

半夏泻心汤及不同配伍组对黄连生物碱大鼠体外肝代谢的影响

目的研究大鼠肝微粒体温孵育体系中黄连生物碱成分的代谢动力学,比较半夏泻心汤全方及不同配伍组对其肝微粒体代谢的影响。方法超高效液相色谱法(UPLC)测定大鼠肝微粒体温孵体系中黄连生物碱成分(小檗碱、黄连碱、巴马汀、药根碱)质量浓度。采用在体诱导-体外肝微粒体温孵方法,考察半夏泻心汤全方,辛温开痞组、苦寒降逆组及甘滋补益组对黄连生物碱成分在大鼠肝微粒体系中的代谢变化影响。结果温孵时间小檗碱在0～40 min内,黄连碱在0～20 min内,巴马汀和药根碱均在0～60 min内呈线性消除;各生物碱成分在空白肝微粒体中代谢速率顺序为黄连碱>小檗碱>药根碱>巴马汀;与空白组相比,除辛温开痞组对巴马汀的代谢无抑制作用外,其余配伍组对黄连生物碱成分均呈抑制作用,全方的抑制作用最为显著。结论半夏泻心汤全方对生物碱的代谢主要起抑制作用(P<0.01),且苦寒降逆组的抑制作用较其他配伍组显著。     

温脾汤附子先煎、大黄后下的研究

目的 探讨温脾汤先煎后下的条件。方法 采用HPCE法测定了温脾汤中乌头碱及大黄游离蒽醌的含量。结果 附子先煎30min，乌头碱的含量能达到安全限量；大黄先浸泡30min并于汤剂煎好前10min加入，大黄游离蒽醌的含量最高。结论 温脾汤中附子应先煎，而大黄宜后下。     

六味地黄汤对生精障碍模型大鼠精子及其血清NO的影响

目的:观察六味地黄汤对生精障碍模型大鼠促进生精的作用及其对大鼠血清一氧化氮(NO)的影响。方法:用醋酸棉酚建造Wistar雄性大鼠生精障碍模型后,用分煎和合煎的六味地黄汤灌胃给药治疗,以市售六味地黄丸和甲基睾酮为对照,计数各组精子数量,观察各组精子的活力,测定大鼠血清NO水平。结果:模型组大鼠的精子数量与六味地黄汤分煎组、六味地黄汤合煎组、市售六味地黄丸对照组、西药对照组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01);各治疗组、对照组的精子活力也显著优于模型组。模型组大鼠血清NO水平与各组比较,差异有非常显著性意义(P<0.01);血清NO水平和精子数量、精子质量基本成正相关。结论:六味地黄汤对生精障碍大鼠有显著的促生精作用,同时可升高大鼠血清NO水平,显著提高大鼠精子的质量。     

六味地黄汤对家兔体外血小板聚集率的影响

目的：研究六味地黄汤及其配伍对血小板聚集率的影响。方法：本实验采用体外血小板聚集法，利用不同的诱导剂，观察了六味地黄汤及其拆方对血小板聚集率的抑制作用。结果：六味地黄汤全方和三补、三泻方均能抑制腺嘌呤核苷二磷酸（ADP）诱导的体外血小板聚集，对花生四烯酸（AA）诱导的血小板聚集也有抑制作用，但用药剂量较大，其中以全方药效最强，三补方次之，三泻方最弱，药物血清也呈现相似的结果。结论：六味地黄汤具有良好的抑制血小板聚集的作用，三味补药是其作用的主要成分，三补与三泻配伍具有协同和增效作用。     

四逆汤煎煮过程中乌头类生物碱的溶出和水解平衡

目的 研究四逆汤中乌头类生物碱的溶出平衡和水解平衡。方法 利用电喷雾质谱分析，比较了制附子、四逆汤、四逆汤药渣和含有3种双酯型生物碱的混合对照品体系中的乌头碱类二萜生物碱。结果 在煎煮过程中双酯型生物碱溶解并发生水解反应，而脂类生物碱则难溶于水。乌头碱、中乌头碱、次乌头碱水溶性相近，但是次乌头碱在水中的热稳定性更高，C19二萜骨架上C3取代基(—OH或—H)的变化影响生物碱的稳定性。结论四逆汤中的乌头碱类生物碱的种类及含量由其溶解性和化学稳定性共同决定。     

海藻玉壶汤加减方及方中相关药物碘含量的测定

目的:研究海藻玉壶汤加减方及方中相关药物碘含量的测定及碘在复方药物提取中的变化情况。方法:在弱酸性条件下,采用重铬酸钾氧化I-为I2,氯仿定量萃取比色,测定波长为510nm。结果:总碘含量(按一个处方药物配伍比例计算)的高低依次为海藻药材海藻药材提取液海藻玉壶汤加减方及不同药物组合提取液海藻醇处理上清液海藻玉壶汤加减方中相关药材及其提取液。结论:海藻玉壶汤加减方及方中相关药物碘含量的测定结果可为制剂工艺的优选、药效研究及甲状腺疾病分型治疗提供参考依据。