马拉色菌分子生物学研究方法与应用

马拉色菌作为一种嗜脂性的条件致病真菌,目前至少可分为14个菌种,然而传统的表型鉴定方法对生理生化特征不典型的马拉色菌菌株难以鉴定,近年来对马拉色菌分子生物学方面的研究为马拉色菌属的分类及流行病学研究提供了更为准确的方法。本文就马拉色菌的相关分子生物学鉴定进展做一综述。     

深部真菌感染组织病理学方法研究进展

组织病理学是深部真菌感染的重要诊断方法，组织中真菌的鉴定标志着病原学诊断水平。免疫组织化学根据真菌抗原性不同将真菌分类，而原位杂交则根据真菌核酸序列不同将真菌分类，它们为在病变组织中特异性鉴定真菌菌种提供了新方法。     

致病性真菌DNA提取方法的实验研究

聚合酶链反应(PCR)技术可用于真菌感染的早期诊断和菌株分型^[1]。为保证PCR技术及其相关技术的顺利开展,要求提取的真菌DNA完整,纯度高,不含TaqDNA聚合酶抑制剂,并且快速,简便,费用低。为探讨提取真菌DNA的最佳方法,本研究对3种提取真菌DNA的方法进行了比较,结果显示用尿素裂解法提取的真菌DNA完整性好,纯度高,操作步骤简便,缩短了工作时间,所需费用低,适用于多种真菌DNA的提取,现报道如下。     

常见致病真菌生物膜研究进展

近年来,真菌生物膜日益受到研究人员的关注。生物膜已被证实与临床植入物的真菌感染有关,认识真菌生物膜及其形成的影响因素和耐药机制对于防治临床真菌感染有着重大意义。本文从常见致病真菌生物膜的形成过程及结构、真菌生物膜形成的影响因素、生物膜形成对真菌药物敏感性的影响及可能机制、真菌生物膜的防治方法及可能的药物靶点等几个方面综述了目前对致病真菌生物膜的研究进展。     

红色毛癣菌随机扩增DNA多态性分型研究

红色毛癣菌(Trichophyton rubrum)是皮肤癣菌中最常见的病原菌,我国大多数地区的检出率在30%以上^[1],传统的表型分型法将其分为五型,但是,由于红色毛癣菌大多数为不典型株,而且传代过程中表型特征可发生转变或丧失,因此,表型分型的不稳定性导致它不能准确反映红色毛癣菌的遗传特征。我们应用随机扩增DNA多态性(RAPD)分析法对46株分别从广州、香港、雅加达(印尼)3个城市浅部真菌感染患者获得的红色毛癣菌进行DNA分型,对三地红色毛癣菌的表型特征与基因型别关系进行了初步探讨。     

PCR法和传统方法对体液标本中致病真菌的检测比较

目的评价PCR方法诊断深部真菌感染的敏感性和特异性。方法应用真菌通用引物ITS4和ITS86对83例临床体液标本中的致病真菌进行PCR法快速检定,并与传统方法检验的结果进行比较。结果直接PCR扩增的阳性率与传统方法差异无统计学意义。结论采用ITS通用引物PCR法可准确、特异、快速、敏感地检测深部致病真菌。     

纳米金基因芯片技术快速鉴定常见浅部致病真菌

浅部真菌病是临床常见的感染性疾病,能简便快速鉴定出致病真菌对疾病的治疗至关重要。传统的鉴定方法主要依据真菌的形态、细胞生理和生化特征,这些方法阳性率低,操作复杂费时。一些免疫学和分子生物学技术如PCR,以及以PCR为基础的限制性片段长度多态性PCR（PCR-RFLP）、随机扩增多态性DNA PCR（PCR-RAPD）、单链构象多态性PCR（PCR-SSCP）等也应用于真菌病的诊断,但这些技术也存在操作复杂、实验设备要求高等缺陷［1］。因此,我们尝试建立一种可目视化、快速简便、准确鉴定常见浅部致病真菌的方法……     

在艾滋病患者中少见的侵袭性真菌性病原体

作者综合了十多年来艾滋病患者中发生真菌感染的病例，重点列出了已造成２４例以上真菌感染的少见真菌。这对于在艾滋病患者及免疫功能受损者中发生条件致病真菌感染的诊断、治疗都有一定的参考价值。     

深部真菌感染组织病理学方法研究进展

组织病理学是深部真菌感染的重要诊断方法 ,组织中真菌的鉴定标志着病原学诊断水平。免疫组织化学根据真菌抗原性不同将真菌分类 ,而原位杂交则根据真菌核酸序列不同将真菌分类 ,它们为在病变组织中特异性鉴定真菌菌种提供了新方法。     

几种常见皮肤癣菌的随机扩增多态性DNA分型

随机扩增多态性DNA(RAPD)分析技术在真菌分类鉴定和分子流行病学研究方面具有一定优势,近年的一些研究也证实了其在此方面的应用价值^[1-4].本实验采用该方法对临床分离的几种常见皮肤癣菌进行了基因鉴定,同时对30株红色毛癣菌进行了种内基因分型,探讨DNA型别与感染来源、传播及感染部位之间的关系.     

真菌病的研究展望

近20年来深部真菌感染率逐年上升,增加约40倍,而且病死率高,占住院患者病死率的29%(无真菌感染者仅17%).这与大量应用免疫抑制剂、广谱抗生素、普遍开展导管、插管,广泛进行放疗、化疗、器官移植,免疫抑制患者尤其是艾滋病患者的不断增加等因素密切相关。真菌病已成为影响人类生活质量、威胁生命健康的重要疾病之一。国内外对其研究主要集中于真菌病流行病学调查、真菌分类研究、致病机制尤其是致病真菌基因组研究、新的诊断方法和治疗手段的探索以及新型抗真菌药物的开发等。     

加强对新现临床真菌感染的认识

临床上真菌感染是一个日益严峻的问题,致病真菌种类不断变化,新现临床真菌感染不断增多,类型主要包括：由新识别的菌种引起的真菌感染,如新认识的着色霉中的Fonsecaea monophora和Fonsecaea nubica引起的着色芽生菌病等。目前真菌分类学从表型分类向基因型分类转变,使得对已知的疾病病原体有了新的认识,如我国孢子丝菌病的主要病原菌为球形孢子丝菌而非申克孢子丝菌;已知病原菌引起的新感染形式,如葡萄状维朗那霉（Veronaea botryosa）引起的着色芽生菌病;病原菌在新的地方流行,国际人员交流的增多使一些地区流行性真菌感染如球孢子菌病等逐渐变成全球性疾病。为了加强临床医务人员对日益增多的机会性真菌感染防范意识,我们在评价我国近年来新现和疑难真菌病的诊疗状况及面临的挑战基础上［1］,就近5年我国新现的机会性真菌感染进行回顾……     

PCR结合基因扫描分析技术对几种深部真菌病致病菌的快速检测及鉴定

目的 用PCR法快速鉴定22种(23株)深部真菌病致病菌种。方法 应用荧光标记的真菌通用引物ITS4与ITS86对22种(23株)深部真菌病致病菌种的菌悬液进行PCR扩增，扩增产物经ABI PRISM^TM377测序仪及基因扫描分析软件精确测定片段大小，与对照组——相应菌种采用传统方法抽提DNA后扩增片段的扫描分析结果相对照。结果 ①17种致病菌种菌悬液经ITS4、ITS86扩增出单一的片段(除了构巢曲霉和黑曲霉、白念珠菌和类星形念珠菌、裴氏着色真菌和皮炎外瓶霉片段长度相同)。②菌悬液扩增片段的扫描分析结果与其DNA扩增结果相近，差异无显著性。③整个检定过程仅需6h。结论 采用ITS通用引物及菌悬液PCR检测法，结合基因扫描分析技术可准确、特异、快速、敏感地检测并鉴定出22种深部真菌病致病菌种，这将有望成为快速诊断深部真菌病的一种方法。     

利用RapID检测系统在5小时内鉴定出304株临床酵母菌

酵母菌和酵母样真菌所引起的系统性真菌感染日益增多,但由于不同真菌对于抗真菌药物的敏感性不同,所以对其作出快速、准确地鉴定是至关重要的。RapID酵母菌检测系统使用常规显色基质对医学重要酵母菌和酵母样真菌进行鉴定,此系统在5小时内可较准确地鉴定出包括念珠菌属的真菌、新生隐球菌、酿酒酵母、白吉利丝孢酵母等304株酵母菌或酵母样真菌,其中有286株(94.1％)可准确地鉴定到     

全国首届真菌感染与宿主免疫研讨会征文通知

由中国微生物学会真菌专业委员会与《中国真菌学杂志》共同举办的全国首届真菌感染与宿主免疫研讨会定于2014年10月17—19日在江苏省常州市召开。会议的目的是通过研讨各种致病真菌与宿主的相互作用，例如：念珠菌与皮肤黏膜的黏附机制、隐球菌与血脑屏障的相互作用及曲霉和其他致病真菌感染人体机制，进一步揭示各种致病真菌感染的发病机制，促进我国在真菌病发病机制方面的研究，为开发新的治疗手段并提高我国真菌感染诊治水平提供理论基础。     

细胞外囊泡在真菌与宿主相互作用中的研究进展

真菌感染一直是严重的全球健康问题,随着发病率的逐年增加和耐药菌株的不断出现,对其致病机制和耐药机制的研究亟待深入。但人们对真菌如何在感染过程中与宿主相互作用,甚至对宿主进行操纵知之甚少。近年来,细胞外囊泡的功能研究成为热点。囊泡内运输的物质除保证其生存必需,可通过激活/抑制宿主细胞免疫应答,或其他作用于宿主细胞影响其内部微环境的方式改变感染进程和结果。该文对真菌细胞外囊泡的分类、形成、功能及其与宿主间相互作用加以综述,以期了解真菌如何利用细胞外囊泡改变宿主的免疫和非免疫反应,从而提高对真菌细胞间通讯的理解,有助于解析真菌与宿主之间相互交流的复杂性,从而针对性开发出对抗真菌感染的治疗策略。     

甲真菌病病甲形态学特征与致病真菌种类关系的研究

目的 研究甲真菌病病甲的形态学特征与致病真菌类型或菌种之间的关系。为临床快速推断致病真菌建立依据。方法 ３６０例门诊甲真菌病患者,观察临床分型和特征,牙钻机取材,镜检和培养确定致病真菌。结果 经培养确定致病真菌感染者１６５例,其中皮肤癣菌占８０．０％,酵母菌１３．９％,霉菌２．４％,混合感染３．６％。结论 根据甲真菌病病甲的形态学特征,可以大致推断致病菌的种类。     

随机扩增多态性DNA在医学真菌鉴定与分子流行病学研究中的应用

随机扩增多态性DNA是新近建立的一种以单个随机寡核苷酸为引物、聚合酶链反应为基础的扩增技术,特别适用于分子生物学研究甚少、未知基因组DNA序列的靶细胞的扩增。文中介绍了随机扩增多态性DNA用于医学真菌分类鉴定的优点和实例、用于真菌病流行病学调查的研究概况,并对该技术在医学真菌领域中的应用前景作了初步介绍。     

在艾滋病患者中少见的侵袭性真菌性病原体

作者综合了十多年来在艾滋病患者中发生真菌感染的病例,重点列出了已造成24例以上真菌感染的少见真菌。这对于在艾滋病患者及免疫功能受损者中发生条件致病真菌感染的诊断、治疗都有一定的参考价值。     

117株临床分离念珠菌的鉴定及药敏试验分析

近年来,随着抗肿瘤药物、免疫抑制剂及高效广谱抗生素等的广泛应用,机会致病真菌、特别是深部真菌感染呈上升趋势。而且临床上抗真菌药物的大量应用及应用时间延长,导致耐药菌株不断出现、增加,同时耐药菌株亦可出现多药耐药的现象。我们对2005年4月至2006年4月间临床分离的117株念珠菌进行了鉴定和药物敏感性试验。