原发性肝癌雌激素受体表达及内分泌治疗

目的研究原发性肝癌雌激素受体（ＥＲ）的表达及内分泌治疗的临床价值．方法应用Ｌｅｅ氏荧光配体细胞化学法检测４１例手术病理确诊的原发性肝癌ＥＲ的表达．本组男３８例，女３例，年龄２５岁～７２岁．同时检测肝癌的组织类型、分化程度、肿瘤大小、血清ＡＦＰ及ＣＥＡ．６例ＥＲ阳性者采用他莫昔芬治疗（每次２０ｍｇ，２次／ｄ，长期服用）并观察疗效．结果肝癌组织ＥＲ阳性２０／４１例，阳性率４８８％．ＥＲ阳性率与患者年龄、性别、ＡＦＰ、ＣＥＡ含量及组织类型（梁状型ＥＲ阳性４５０％，腺样型３３３％，实体型７１４％，硬化型６６７％，透明细胞型２５０％；Ｐ＞００５）无明显关系，与肿瘤体积（≥１０ｃｍ，ＥＲ阳性率７５０％；＜１０ｃｍ，ＥＲ阳性２３８％；Ｐ＜００１）和分化程度（分化好２６例，ＥＲ阳性３４６％；分化差１５例，ＥＲ阳性７３３％；Ｐ＜００５）有显著关系．本组ＥＲ阳性病例中６例经他莫昔芬内分泌治疗有效５／６（８３３％），其中４例ＡＦＰ下降．结论ＥＲ阳性肝细胞癌患者进行内分泌治疗有一定疗效     

原发性肝癌组织P16蛋白的缺失与HBV感染

目的研究Ｐ１６蛋白缺失与原发性肝癌发生发展的关系以及ＨＢＶ感染与Ｐ１６蛋白缺失的相关性．方法用免疫组化技术（ＬＳＡＢ法）检测７０例原发性肝癌组织标本中的Ｐ１６蛋白和ＨＢｓＡｇ．结果有６０６％（４０／６６）的肝细胞癌（ＨＣＣ）和７５０％（１／４）的胆管细胞癌（ＣＣＣ）Ｐ１６蛋白缺失；Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ和Ⅳ级（按Ｅｄｍｏｎｄｓｏｎ标准）ＨＣＣＰ１６蛋白缺失率分别为００％（０／１），４４１％（１５／３４），８２１％（２３／２８）和６６７％（３／４），组间差异显著（Ｐ＜００５）．在有癌旁肝组织的４８例标本中，癌组织Ｐ１６蛋白阴性率（７２６％）明显高于癌旁肝组织（４１２％，Ｐ＜００５）．有６２５％（３０／４８）的ＨＣＣ癌旁肝组织ＨＢｓＡｇ阳性．ＨＢｓＡｇ阳性病例与阴性病例的Ｐ１６阴性率分别为７３３％（２２／３０）和６６７％（１２／１８），差异无显著性（Ｐ＞００５）．结论Ｐ１６蛋白缺失与原发性肝癌相关，与肝癌的恶性发展关系密切，可能对预后有重要影响．ＨＢＶ感染与Ｐ１６蛋白缺失无明显相关性．     

原发性肝癌血清性激素及组织性激素受体的研究

目的研究人体性激素水平变化与原发性肝细胞癌的关系．方法应用放免法测定肝癌组（２０例），肝硬变组（１６例）及正常对照组（２０例）血清雌二醇（Ｅ２）及睾酮（ＴＴＴ）含量，并用放免组化法（ＰＡＰ法）检测肝癌组织及肝硬变组织的雌二醇受体（ＥＲ）及睾酮受体（ＡＲ）含量．结果肝癌组血清Ｅ２含量（４４５５±９３１ｎｇ／Ｌ）明显高于正常对照组（７６６ｎｇ／Ｌ±１７０ｎｇ／Ｌ）而低于肝硬变组（６４９６ｎｇ／Ｌ±１７６ｎｇ／Ｌ）（Ｐ＜００１）；前者ＴＴＴ含量（２５３３００ｎｇ／Ｌ±５６５６０ｎｇ／Ｌ）明显低于后二者（４５８５８０ｎｇ／Ｌ±３４９６０ｎｇ／Ｌ）（Ｐ＜００１）．肝癌组织ＥＲ（８０％）较肝硬变时（４４％）明显增加（Ｐ＜００２５），且与血清Ｅ２含量有明显负相关关系（ｒ＝－０８４７３，Ｐ＜０００１）．ＡＲ阳性百分率在两者无明显差别（ｒ＝－０３１３５，Ｐ＞００５）．结论血清ＴＴＴ含量改变及肝组织ＡＲ浓度改变与肝癌无明显关系，而血清Ｅ２含量改变及肝组织ＥＲ浓度改变与肝癌的发生、发展有密切关系．提示原发性肝细胞癌是一雌激素依赖性肿瘤．     

丙型肝炎病毒核心抗原转位表达抑制肝(癌)细胞

目的探讨丙型肝炎病毒核心抗原的转位表达与肝（癌）细胞凋亡的关系及其意义．方法采用免疫组织化学方法检测ＨＣＶ核心区抗原Ｃ２２在肝硬变（ＬＣ）、肝细胞肝癌（ＨＣＣ）组织中的分布;同时对连续切片进行原位凋亡检测并计算凋亡指数．结果ＨＣＶ核心区抗原定位于肝细胞或肝癌细胞的胞质或胞核中,在ＬＣ组织中,Ｃ２２呈弥漫或灶状分布于肝细胞胞质,偶见胞核阳性的肝细胞,阳性率为６０７％;Ｃ２２抗原在ＨＣＣ细胞中以核阳性分布为主,阳性率为３７６％,癌旁肝组织以胞质阳性为多见．ＨＣＣ中ＨＣＶ核心抗原的核阳性率（７５０％,１５例／２０例）和阳性细胞数明显高于其在ＬＣ（１７７％,６例／３４例）及癌旁肝组织（１１８％,２例／１７例）中的阳性率（Ｐ＜００５）和阳性细胞数．在ＨＣＣ中,ＨＣＶ核心抗原核转位表达的癌组织的ＡＰＯＰＬＩ凋亡指数值（０１７４±００９３）显著低于胞质阳性的癌组织（０５１２±０１１３,Ｐ＜００１）．结论ＨＣＶ感染与我国ＬＣ,ＨＣＣ的发生关系密切,ＨＣＶ核心抗原在肝癌组织中常发生核转位表达,这种核转位表达使肿瘤细胞凋亡受到抑制,从而促进肿瘤组织的恶性生长．     

福建肝癌细胞EBV感染与HBV及P53蛋白表达的关系

目的探讨肝细胞癌（ＨＣＣ）中ＥＢＶ与ＨＢＶ感染的相关性及ＥＢＶ与Ｐ５３蛋白表达的关系．方法采用原位杂交技术以地高辛标记的单链ｃＤＮＡ探针、生物素标记的双链ｃＤＮＡ探针及免疫组化ＳＰ法检测ＨＣＣ５９例（含癌旁肝组织）和９例肝硬变组织中高拷贝数ＥＢＥＲ１（ＥＢＶ编码的小ＲＮＡ）、ＨＢＶＤＮＡ和Ｐ５３蛋白．结果肝癌细胞核内ＥＢＥＲ１阳性率为２０３％,显著高于癌旁肝组织（Ｐ＜００１）．肝癌组织内ＨＢＶＤＮＡ阳性率为５９３％,ＥＢＶ存在与ＨＢＶ感染无明显相关性（Ｐ＞００５）．肝癌组织内Ｐ５３蛋白表达率为３３９％,Ｐ５３表达与ＥＢＥＲ１无显著关系（Ｐ＞００５）．结论肝癌细胞内ＥＢＶ感染与ＨＢＶ存在无明显关系,肝癌中Ｐ５３表达与ＥＢＥＲ１无关     

雄激素受体与肝细胞肝癌预后的关系

目的　探讨雄激素受体（ＡＲ） 与肝细胞肝癌（ ＨＣＣ） 的关系。方法　用葡聚糖包裹活性炭饱和吸附法检测４７例ＨＣＣ 癌组织和癌旁肝组织中ＡＲ 的含量。对４３ 例病人进行术后随访９ ～６０ 个月。结果　３３ 例ＡＲ 阳性（３－０ ～１００ｆｍｏｌ／ｍｇ 蛋白） ,１４ 例ＡＲ 阴性。ＡＲ 阳性病人与ＡＲ 阴性病人的一、五年存活率没有统计学差别（ Ｐ＞ ０－０５） ,三年存活率ＡＲ 阳性者（３５－５ ％ ） 显著低于ＡＲ 阴性者（６６－７ ％ ）（ Ｐ＜ ０－０５） 。复发时间ＡＲ 阳性者（２１－４ ±１５－２ 月） 与ＡＲ 阴性者（３３－９±１３－９ 月） 有显著差异（ Ｐ＜ ０－０５） 。结论　雄激素能促进ＨＣＣ 的增长及对周围组织的侵袭,部分ＨＣＣ 具有雄激素依赖性,ＡＲ 可作为ＨＣＣ 的预后指标之一     

肝细胞癌mdr1基因编码的P-糖蛋白的表达意义

目的探讨ｍｄｒ１基因编码的Ｐ糖蛋白（Ｐｇｐ）在肝细胞癌（ＨＣＣ）及癌周正常肝组织中的表达及其临床意义．方法用免疫组化ＳＡＢＣ法，检测３９例ＨＣＣ及３０例癌周肝组织中Ｐｇｐ表达，分析ＨＣＣ中Ｐｇｐ表达程度和肿瘤主要临床病理特征间的关系．结果Ｐｇｐ表达主要位于肝、肝癌及胆管上皮细胞膜上，少量位于胞质内；肝组织中平均Ｐｇｐ阳性率（５６４％）明显高于癌组织（２６０％，ｕ＝２６５，Ｐ＜００１）；经治病例癌组织Ｐｇｐ表达均在５０％以上；癌组织Ｐｇｐ表达仅和细胞分化有关（χ２＝５８６，Ｐ＜００５）．结论肝脏是内源性耐药器官；经治后肝癌耐药性增强；化疗应选择合理方案     

乙型肝炎及原发性肝癌患者sIL-2R的变化

目的探讨ｓＩＬ２Ｒ水平与乙型肝炎病情的关系及其在原发性肝癌早期诊断中的价值．方法以ＥＬＩＳＡ法动态检测１１３例乙型肝炎及６例原发性肝癌患者ｓＩＬ２Ｒ水平，另选３１例健康体检者作对照组．结果以ｑ检验、ｔ检验进行统计学处理（微机处理，ＰＯＭＳ２００版）．结果各型乙型肝炎ｓＩＬ２Ｒ水平均显著高于正常对照（ＮＣ）组（Ｐ＜００１），其顺序依次为：ＨＣＣ＞ＣＳＨ＞ＣＨ（ＩＩ）＞ＬＣ＞ＣＨ（ＩＩ）＞ＡＨ＞ＣＨ（Ｉ）＞ＮＣ．ＨＣＣ组ｓＩＬ２Ｒ均值达正常值的２倍以上，且与ＣＨ（Ｉ），ＣＨ（Ｉ），ＡＨ间存在显著性差异（Ｐ＜００１，＜００５及＜００５）；ＣＨ（ＩＩ）组显著高于ＣＨ（Ｉ）组（Ｐ＜００１）．ＨＢｅＡｇ阳性组及ＨＢＶＤＮＡ阳性组ｓＩＬ２Ｒ水平显著高于阴性组．结论ｓＩＬ２Ｒ是监测乙型肝炎病情、ＨＢＶ复制及诊断早期原发性肝癌的一项敏感标志．     

肝细胞性肝癌AFP-mRNA检测外周血癌细胞的价值

目的通过对原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）外周血中癌细胞的检测，为临床建立诊断肝癌转移的常规方法．．方法以甲胎蛋白（ＡＦＰ）ｍＲＮＡ为ＨＣＣ的标记物，应用ｎｅｓｔｅｄＲＴＰＣＲ对３０例ＨＣＣ外周静脉全血标本及不同细胞株进行检测及分析．结果ＨＣＣ患者３０例外周血癌细胞阳性检出率为５６７％，并与肝内静脉癌栓形成（１１／１３，８４６％ｖｓ６／１７，３５３％）、肝内转移（１６／２３，６９６％ｖｓ１／７，１４３％）和细胞分化密切相关（Ｐ＜００５）；最低检出浓度为全血肝癌细胞２×１０４／Ｌ．对照组中结肠癌、鼻咽癌等肝转移癌以及胆囊结石患者的外周血中均未发现ＡＦＰｍＲＮＡ．结论ＮｅｓｔｅｄＲＴＰＣＲ对ＨＣＣ的检测具有较强的特异性和较高的灵敏度，对于ＨＣＣ诊断、判断转移可能具有较为重要的临床应用价值     

乙型和丙型肝炎病毒感染与肝细胞癌

为探讨乙型和丙型肝炎病毒（ＨＢＶ和ＨＣＶ）感染与肝细胞癌（肝癌）发生的关系，采用ＥＬＩＳＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ）对沈阳地区１１７例肝癌、１０７例肝硬化和４５例血液透析患者血清进行了ＨＢＶ和ＨＣＶ血清标志及ＨＢＶＤＮＡ和ＨＣＶＲＮＡ检测，并采用限制性片段长度多态性对其中７３例ＨＣＶＲＮＡ阳性血清进行了ＨＣＶ基因分型。结果，肝癌组ＨＢＶ感染率（６０７％）显著高于ＨＣＶ感染率（３３３％，Ｐ＜００１），肝硬化组ＨＢＶ感染率（４３９％）明显高于ＨＣＶ感染率（２９０％，Ｐ＜００５）；血液透析组ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染率（２６７％）明显高于肝硬化组（１０３％，Ｐ＜００５）；各组均以ＨＣＶⅡ型为主（６５２％～８００％），ＨＣＶⅢ型次之（２００％～３１４％）。结果提示：沈阳地区肝癌的诱发因素仍以ＨＢＶ为主，血液透析患者ＨＢＶ和ＨＣＶ重叠感染的机会更大，ＨＣＶⅡ型感染在本地区ＨＣＶ相关性肝癌和肝硬化的发生中可能起主要作用。     

大肠癌患者外周血CD44表达的变化

目的探讨大肠癌患者外周血ＣＤ４４表达变化的意义．方法以流式细胞仪对２６例大肠癌患者外周血ＣＤ４４表达进行免疫荧光检测，通过自身对照分析术前、术后变化，并与正常人（ｎ＝２０）及大肠良性肿瘤患者（ｎ＝１７）进行对比研究，ｔ检验处理数据．结果大肠癌患者外周血ＣＤ４４细胞（２０５％±４５％）明显高于正常人（１８％±１１％）及大肠良性肿瘤患者（２４％±１４％，Ｐ＜００１），后二者差别不明显（Ｐ＞００５），已发生转移的大肠癌患者外周血ＣＤ４４含量（２２９％±４８％）较无转移者（１６１％±３３％）明显增高（Ｐ＜００１），无转移组根治手术后外周血ＣＤ４４含量迅速下降（２９％±１８％）至正常人水平，已有转移者变化不明显（Ｐ＞００５）．结论ＣＤ４４水平可作为大肠恶性肿瘤负荷及转移的指标．     

结肠癌患者血清可溶性sIL-2R含量的变化

目的探讨结肠癌患者手术前血清可溶性白介素２受体（ｓｏｌｕｂｌｅｉｎｔｅｒｌｕｋｉｎ２ｒｅｃｅｐｔｏｒ，ｓＩＬ２Ｒ）含量改变与疾病的诊断、分期、预后判断等的关系．方法采用ＥＬＩＳＡ法对２７例结肠癌患者（ＤｕｋｅｓＡ，Ｂ期１９例），Ｃ，Ｄ期８例）及４２例对照组（正常３２例及肠易激综合征１０例）分别测定血清ｓＩＬ２Ｒ含量．同时使用间接荧光染色法对各组进行血ＣＤ３，ＣＤ４，ＣＤ８及ＣＤ４／ＣＤ８的测定．结果结肠癌患者ＤｕｋｅｓＡ，Ｂ期组血清ｓＩＬ２Ｒ含量（８３５ｐｍｏｌ／Ｌ±２１８ｐｍｏｌ／Ｌ）与对照组（６９２ｐｍｏｌ／Ｌ±２７９ｐｍｏｌ／Ｌ及７６２ｐｍｏｌ／Ｌ±２４６ｐｍｏｌ／Ｌ）无明显差异，而有淋巴结转移的ＤｕｋｅｓＣ，Ｄ期患者（３２１６ｐｍｏｌ／Ｌ±２３４４ｐｍｏｌ／Ｌ）则明显高于ＤｕｋｅｓＡ，Ｂ期患者，且ＣＤ４／ＣＤ８值明显下降（１０６±０４９比１５８±０３６）；另外，血清ｓＩＬ２Ｒ含量还与肿瘤细胞分化程度密切关联．结论结肠癌术前血清ｓＩＬ２Ｒ含量与疾病分期及预后有关．     

胃癌细胞DNA含量肿瘤相关抗原及其异质性

目的探讨胃癌异质性标志物之间的关系．方法应用显微分光光度计和抗ＳＳＥＡ１，抗胃癌单抗ＭＧ７的免疫组织化学染色对３５例胃癌和１０例正常胃粘膜进行了ＤＮＡ含量和ＳＳＥＡ１，ＭＧ７抗原表达的研究．结果正常胃粘膜细胞和管状腺癌，低分化腺癌，粘液腺癌，印戒细胞癌及未分化癌的ＤＮＡ相对含量分别为１１６０±０２０７，２１７６±０７０３，２２１４±０６６３，２２０６±０６０２，１１９６±０２７９和１６６５±０４９１，其中正常胃粘膜９５８％细胞为２Ｃ细胞，而胃癌常见＞８Ｃ，＞１２Ｃ细胞，在直方图上分布弥散；同一类型的不同病例间，同一病例切片的不同部位呈明显的异质性，但印戒细胞癌的ＤＮＡ含量接近正常．大部分胃癌标本中可检出ＳＳＥＡ１和ＭＧ７Ａｇ，但分布及染色程度呈明显的不均质性．ＳＳＥＡ１，ＭＧ７Ａｇ的表达与ＤＮＡ含量无明显关系．结论ＤＮＡ含量和ＳＳＥＡ１，ＭＧ７的表达是互相独立的，均与肿瘤的行为有关．     

MTT比色法检测肝细胞再生刺激因子的生物活性

目的建立一种简便、快速安全可靠的肝细胞再生刺激因子生物活性的检测方法。方法参照Ｍｏｓｍａｎｎ的ＭＴＴ比色法，加以改进，用体外培养的肝癌细胞株作靶细胞，二甲亚砜为终止反应剂，用ＢＩＯ＿ＴＥＫＥＬ３１２酶标仪检测ＯＤ５７０＿６３０值，来测试肝细胞再生刺激因子（ＨＳＳ）的生物活性，并与〔３Ｈ〕ＴｄＲ掺入法作比较。结果ＭＴＴ比色法可灵敏地反映出细胞数量上的变化，在一定ＨＳＳ剂量范围内，细胞增殖与ＨＳＳ呈量效依赖关系。同传统的〔３Ｈ〕ＴｄＲ掺入法作比较，有良好的可比性。结论ＭＴＴ比色法鉴定细胞存活和细胞生长，可在一般无菌室内操作，具有特异性高、快速、灵敏、方便等特点。     

自体与异体LAK细胞治疗慢性肝炎130例

目的对ＬＡＫ细胞治疗慢性肝炎作客观估价．方法治疗与对照组均口服维生素，肌注肝炎灵．治疗Ａ组加回输自体ＬＡＫ细胞，每周２次，６周为１个疗程；Ｂ组每周输注异体ＬＡＫ细胞悬液１次，５次为１疗程．结果ＬＡＫ细胞治疗慢性肝炎能使部分患者ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶＤＮＡ阴转．治疗结束时ＨＢｅＡｇ阴转率Ａ组为４７５％，Ｂ组为５８０％；而对照组Ｃ为１５０％（Ｐ＜００５）．ＨＢＶＤＮＡ阴转率Ａ组为４５０％，Ｂ组为６６０％，而对照组Ｃ为１１８％，（Ｐ＜００５％）．结论ＬＡＫ细胞治疗对ＨＢＶ复制有明显抑制作用．异体ＬＡＫ组的ＨＢｅＡｇ及ＨＢＶＤＮＡ阴转率高于自体ＬＡＫ组．     

血清肿瘤标志物联合检测对消化系恶性肿瘤的诊断价值

目的探讨多项肿瘤标志物联合检测对诊断消化系恶性肿瘤的实用价值．方法选择经临床确诊的消化系恶性肿瘤１１９例，其中原发性肝癌２５例，胰腺癌２１例，胃癌２９例，大肠癌２７例，其他消化系恶性肿瘤１７例，以及同期良性消化系疾病５６例，应用ＲＩＡ或ＥＬＩＳＡ法检测血清ＣＥＡ，ＡＦＰ，ＳＦ，β２ＭＧ，ＣＡ１９９及ＣＡ５０水平．由实验室参考药盒厂家提供的正常值及实验室所做的正常人群均值，确立各项检测正常上限值，样品超过界值为阳性，反之为阴性．结果肝癌组以ＡＦＰ敏感度最高（６８０％），联合ＳＦ和ＣＡ１９９可提高至９２０％．胰腺癌组ＣＡ１９９最敏感（７６２％）．应用ＣＡ１９９，ＳＦ和ＣＡ５０联合检测，敏感度可达８５７％和９５２％．对胃癌和大肠癌，即使６项联合也不足８０％．结论联合检测对肝癌和胰腺癌可明显提高阳性率，但对胃癌及大肠癌仅起部分辅助作用．联合检测既提高灵敏度，也降低特异度．     

肝癌及癌旁组织HBV DNA定点PCR研究

目的采用定点ＰＣＲ技术，研究ＨＢＶ的Ｓ和Ｃ基因在肝癌与癌旁组织的存在状态，探讨癌旁ＨＢｓＡｇ表达与Ｓ基因的关系。方法福尔马林固定，石蜡包埋肝癌及癌旁组织２８例，ＨＢｓＡｇ免疫组化后的切片分别切割癌组织、癌旁ＨＢｓＡｇ强阳性区（Ｐ２）及癌旁ＨＢｓＡｇ阴性区（Ｐ１）各１个低倍视野，作Ｓ及Ｃ基因ＰＣＲ。结果癌组织Ｓ基因较Ｃ基因检出率高（１８／２８ｖｓ１０／２８，Ｐ＜０．０５），癌旁二者无差异；癌旁中Ｐ１与Ｐ２的Ｓ及Ｃ基因检出率无显著性差异；高分化肝癌Ｓ和／或Ｃ基因检出率较中分化者低（２／５ｖｓ２０／２８，Ｐ＜０．０５）。结论癌组织中整合的ＨＢＶＤＮＡ为残缺不全的，ＨＢｓＡｇ强阳性与阴性区的Ｓ基因检出无显著性差异。     

爪蟾卵母细胞表达的老年大鼠脑递质受体电流的观察

目的揭示脑老化神经递质受体变化的性质，受体蛋白质遗传信息的改变与受体变化的关系。方法采用异硫氰酸胍－苯酚－氯仿法和美国Ｐｒｏｍｅｇａ新磁珠技术，自大鼠脑组织中提取多聚嘌呤ｍＲＮＡ〔Ｐｏｌｙ（Ａ）＋ｍＲＮＡ〕，注入非洲爪蟾卵母细胞内，用电压箝位法检测表达到卵母细胞上的递质受体的电学反应。结果注射老年大鼠脑ｍＲＮＡ的卵母细胞对４种递质——乙酰胆碱、谷氨酸、多巴胺和γ－氨基丁酸诱发的电流幅度下降，分别为成年对照组的４３％、５８％、４１％和４５％，与成年对照组比较差异均有显著性。乙酰胆碱受体电流的逆转电位约－２０ｍＶ，Ｃｌ－是该电流的主要载流离子。结论老年大鼠脑各类型的递质受体功能均呈减弱趋势，其原因可能是受体蛋白遗传信息发生了改变