全反式维甲酸对血管平滑肌细胞增殖和转化生长因子-β mRNA表达的影响

目的：研究全反式维甲酸对血管平滑肌细胞增殖，ＤＮＡ合成和转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）基因表达的影响。方法：采用血管平滑肌细胞培养，细胞计数，３Ｈ－ＴｄＲ参入，斑点杂交和图像分析方法。结果：全反式维甲酸（Ａ－ＴＲＡ，０．０１，０．１，１μｍｏｌ·Ｌ－１）明显抑制胎牛血清（ＦＣＳ）促进的血管平滑肌细胞增殖和ＤＮＡ合成，其最大抑制率分别是２２．４％和８７．１％；全反式维甲酸明显抑制ＦＣＳ促进的血管平滑肌细胞ＴＧＦ－βｍＲＮＡ表达。结论：ＡＴＲＡ具有抗血管平滑肌细胞增殖作用，其机制与抑制ＴＧＦ－β基因表达有关。     

Effect of antisense mitogen-activated protein kinase oligonucleotides on rat vascular smooth muscle cell proliferation induced by EGF in vitro

目的：探讨丝裂素活化的蛋白激酶（ＭＡＰＫ）反义寡核苷酸（ＯＤＮ）对表皮生长因子（ＥＧＦ）诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞增生的抑制作用．方法：用脂质体将ｐ４２和ｐ４４ＭＡＰＫＯＤＮ０．２μｍｏｌ·Ｌ－１转染入大鼠血管平滑肌细胞，设正义及随机ＯＤＮ为对照，用ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ法结合Ｐ８１滤纸法以髓磷脂碱性蛋白为底物测定ＭＡＰＫ活性．［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷酸掺入测定平滑肌细胞ＤＮＡ合成．结果：ＭＡＰＫ０ＤＮ能明显抑制ＥＧＦ诱导的ＭＡＰＫ蛋白表达及ＭＡＰＫ活性，并明显抑制血管平滑肌细胞的［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷酸掺入．结论：针对ｐ４２和ｐ４４ＭＡＰＫ起始部位设计的１７ｍｅｒＯＤＮ能有效抑制ＥＧＦ诱导的血管平滑肌细胞的增生．     

丝裂素活化的蛋白激酶反义寡核苷酸抑制表皮生长因子诱导体外 …

目的：探讨丝裂素活化的蛋白激酶（ＮＡＰＫ）反义寡核苷（ＯＤＮ）对表皮生长因子（ＥＧＦ）诱导的培养大鼠血管平滑肌细胞增生的抑制作用。方法：用脂质体将Ｐ４２－和Ｐ４４－ＭＡＰＫ ＯＤＮ０．２μｍｏｌˉＬ＾－１转染入大鼠血管平滑肌细胞，设正义及随机ＯＤＮ为对照，用Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ法结合Ｐ－８１滤纸法以髓磷脂碱性蛋白为底物测定ＭＡＰＫ活性。［＾３Ｈ］胸腺嘧啶核苷酸掺入测定平滑肌细胞ＤＮＡ合成。结果     

Inhibitory effects of nifedipine on DNA and protein synthesis in cultured cardiac nonmyocytes of neonatal rats

观察硝苯地平（Ｎｉｆｅｄｉｐｉｎｅ，Ｎｉｆ）对非心肌细胞生长和增殖的抑制作用．方法：以培养乳鼠非心肌细胞作为模型，用［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷结合及［３Ｈ］亮氨酸结合的方法．结果：在血管紧张素Ⅱ存在的情况下，Ｎｉｆ１μｍｏｌ·Ｌ－１作用细胞７２ｈ，细胞的总蛋白及细胞数目明显减少．测得血管紧张素Ⅱ１，１０，１００，１０００ｎｍｏｌ·Ｌ－１在４８ｈ内，增加ＤＮＡ合成及蛋白合成．Ｎｉｆ１－１０μｍｏｌ·Ｌ－１均能够减少１００ｎｍｏｌ·Ｌ－１血管紧张素Ⅱ诱导的细胞ＤＮＡ合成及蛋白合成．结论：Ｎｉｆ可以直接抑制非心肌细胞的生长，该种作用与其抑制心肌肥厚有关．     

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对内皮素促血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用内皮素－１（ＥＴ－１０．１μｍｏｌ·Ｌ－１）建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型，用［３Ｈ］胸腺嘧啶核苷（［３Ｈ］ＴｄＲ）参入法，流式细胞术，免疫细胞化学及Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ方法，观察了１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ０．１μｍｏｌ·Ｌ－１）对血管平滑肌细胞增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响．结果发现：ＤＤＰＨ能逆转ＥＴ－１所致［３Ｈ］ＴｄＲ参入量增多，阻止血管平滑肌细胞由静止期（Ｇ０／Ｇ１期）进入ＤＮＡ合成期（Ｓ期）和有丝分裂期（Ｇ２／Ｍ期），并能逆转ＥＴ－１引起的ｃ－ｆｏｓ，ｃ－ｍｙｃ，ｃ－ｓｉｓ原癌基因相关抗原及ｍＲＮＡ表达增强，Ｐ５３抑癌基因相关抗原及ｍＲＮＡ表达减弱．提示ＤＤＰＨ能抑制血管平滑肌细胞增殖，与癌基因调控的分子生物学机理有关．     

Effect of manoalide on apoptosis induced by deprivation of growth factors in vascular endothelial cells

研究ｍａｎｏａｌｉｄｅ对除去生长因子（ａＦＧＦ和血清）而诱导的血管内皮细胞凋亡的影响．方法：通过细胞形态观察,ＤＮＡ凝胶电泳及荧光显微术等方法确定ｍａｎｏａｌｉｄｅ对细胞凋亡的抑制或促进作用．结果：向去除ａＦＧＦ和血清的培养液中加低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（１－４μｍｏｌ·Ｌ－１）,培养细胞４８ｈ,细胞的脱壁和ＤＮＡ片断化受到抑制;ｍａｎｏａｌｉｄｅ浓度为７μｍｏｌ·Ｌ－１时,促进细胞脱壁和ＤＮＡ片断化．结论：低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（２μｍｏｌ·Ｌ－１）抑制血管内皮细胞凋亡,而较高浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（７μｍｏｌ·Ｌ－１）促进该细胞凋亡．     

Inhibitory effect of antisense basic fibroblast growth factor oligonucleotides on proliferation of cultured aortic smooth muscle cells induced by angiotensin Ⅱ in SHR rats

目的：研究转染反义碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）寡核苷酸（ＯＤＮ）对培养的自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）生长的影响．方法：用脂质体介导法将反义ｂＦＧＦＯＤＮ转入ＳＭＣ内，用Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交检测ｂＦＧＦ基因表达，并测定［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入和细胞计数．结果：转染反义ｂＦＧＦＯＤＮ（５μｍｏｌ·Ｌ－１）几乎完全抑制血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ，１μｍｏｌ·Ｌ－１）诱导增高的ｂＦＧＦｍＲＮＡ表达和明显抑制ＳＭＣ增殖，在基础状态和ＡｎｇⅡ刺激条件下，［３Ｈ］ｔｈｙｍｉｄｉｎｅ掺入分别被抑制２６５％（Ｐ＜００１）和４２０％（Ｐ＜００１），细胞数分别被抑制１７３％（Ｐ＜００１）和２２２％（Ｐ＜００１）．结论：反义ｂＦＧＦＯＤＮ能有效抑制ＡｎｇⅡ诱导的ｂＦＧＦ基因表达和ＳＭＣ增殖．     

α-Anordrin- induced apoptosis of leukemia K562 cells is not prevented by cicloheximide

研究蛋白质合成抑制剂环己米特（ｃｉｃｌｏｈｅｘｉｍｉｄｅ，Ｃｉｃ）对α双炔失碳酯（αａｎｏｒｄｒｉｎ，Ａｎｏ）诱导的白血病Ｋ５６２细胞凋亡的影响．方法：荧光显微镜观察形态学变化；流式细胞仪检测ＤＮＡ含量；琼脂糖凝胶电泳分析ＤＮＡ断裂．结果：Ａｎｏ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理Ｋ５６２细胞２４小时诱导细胞凋亡．Ｃｉｃ１μｍｏｌ·Ｌ－１共同处理不能减弱或延缓Ａｎｏ的这一作用．相反，Ｃｉｃ明显增强Ａｎｏ诱导的细胞凋亡．Ｃｉｃ１００μｍｏｌ·Ｌ－１本身诱导２５％Ｋ５６２细胞凋亡．结论：Ａｎｏ诱导的Ｋ５６２细胞凋亡不依赖于新的蛋白质合成．     

镉对LLC─P_1细胞增殖与DNA合成的影响及硒的保护效应

观察了镉（Ｃｄ）对猪肾近曲小管上皮细胞（ＬＬＣ－ＰＫ１）增殖和ＤＮＡ合成代谢的影响，及亚硒酸钠和硒代蛋氨酸的保护作用。结果表明，Ｃｄ对ＬＬＣ－ＰＫ１细胞增殖有明显的抑制作用；低浓度Ｃｄ（３μｍｏｌ／Ｌ）与细胞作用３小时，对ＤＮＡ合成有一定的促进作用；当Ｃｄ浓度达到１６μｍｏｌ／Ｌ时ＤＮＡ合成受到明显的抑制；Ｃｄ与细胞作用１２小时，对ＲＮＡ及蛋白质合成也具有明显的抑制作用。结果还显示，Ｎａ２ＳｅＯ３对Ｃｄ抑制的ＤＮＡ合成作用无任何保护作用，而Ｄ，Ｌ－ＳｅＭｅｔ在一定程度上能减轻Ｃｄ对ＬＬＣ－ＰＫ１细胞ＤＮＡ合成的抑制作用；Ｄ，Ｌ－ＳｅＭｅｔ提前或与Ｃｄ同时加入的两种给药方式，其保护作用没有明显差异。     

放线菌素D不能抑制α-双炔失碳酯诱导的白血病K562细胞凋亡

目的：研究放线菌素Ｄ（ＡｃｔＤ）对α－双炔失碳酯（α－ａｎｏｒｄｒｉｎ，ＡＮＯ）诱导的人白血病Ｋ５６２细胞凋亡的影响。方法：用光学显微镜观察细胞形态学变化；用流式细胞仪、琼脂糖凝胶电泳分别检测ＤＮＡ含量和ＤＮＡ断裂。结果：ＡＮＯ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理人白血病Ｋ５６２细胞２４ｈ引起大约１０％Ｋ５６２细胞产生凋亡。同时加入ＲＮＡ合成抑制剂ＡｃｔＤ０．００５μｍｏｌ·Ｌ－１不能抑制ＡＮＯ诱导的凋亡，相反地，ＡｃｔＤ加强ＡＮＯ的这一作用，使凋亡细胞从１０％上升到２０％。ＡｃｔＤ０．５μｍｏｌ·Ｌ－１本身可诱导约３２％的Ｋ５６２细胞凋亡。Ｓ期细胞对ＡＮＯ诱导的凋亡较敏感，而ＡｃｔＤ则较易诱导Ｓ期和Ｇ２－Ｍ期细胞凋亡。结论：ＡＮＯ诱导的Ｋ５６２细胞凋亡不依赖于新的ＲＮＡ合成。     

Basic fibroblast growth factor enhanced LAK cell cytotoxicities against human bladder neoplasm cells 1

目的：探讨白细胞介素Ⅱ（ＩＬ２）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对膀胱癌患者淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）的作用．方法：用细胞计数观察不同浓度ｂＦＧＦ对ＬＡＫ细胞增殖的影响．以膀胱癌细胞系ＥＪ及新鲜分离患者自体肿瘤细胞（ＢＴＣ）为靶细胞,用ＭＴＴ法测定ＬＡＫ细胞对膀胱癌细胞的细胞毒作用．结果：虽然外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）的增殖可被ｂＦＧＦ５μｇ·Ｌ－１所抑制,ＩＬ２所诱导的ＬＡＫ细胞的增殖却不受ｂＦＧＦ的影响,ｂＦＧＦ明显加强ＬＡＫ对ＥＪ细胞和ＢＴＣ的细胞毒作用．结论：虽然ｂＦＧＦ抑制ＰＢＭＣ的增殖,但ｂＦＧＦ又增强膀胱癌患者ＬＡＫ细胞对肿瘤细胞的细胞毒性．     

Oxidized low-density lipoproteins induce apoptosis in aortic and endocardial endothelial cells

目的：研究氧化型低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）诱导血管和心内膜内皮细胞凋亡．方法：用超速离心法分离健康人血浆低密度脂蛋白（ＬＤＬ），以ＣｕＳＯ４１０μｍｏｌ·Ｌ－１氧化．观察ｏｘＬＤＬ对培养新生小牛主动脉内皮细胞及心内膜细胞的损伤作用．琼脂糖凝胶电泳和Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光密度法定性与定量分析ＤＮＡ降解．结果：ｏｘＬＤＬ诱导血管内皮细胞及心内膜细胞典型凋亡形态学改变，ＤＮＡ降解呈时间和剂量依赖性．环己米特和硫酸葡聚糖对此作用无影响．ＢＨＴ２０μｍｏｌ·Ｌ－１可取消ＤＮＡ降解．溶血性磷脂酰胆碱５０μｍｏｌ·Ｌ－１无诱导凋亡作用．ｏｘＬＤＬ诱导的ＤＮＡ降解可被依他酸取消．结论：ｏｘＬＤＬ诱导血管内皮细胞及心内膜细胞凋亡．     

镉对LLC—PK1细胞增殖与DNA合成的影响及硒的保护效应

观察了镉对猪肾近曲小管上皮细胞增殖和ＤＮＡ合成代谢的影响，及亚硒酸钠和硒代蛋氨酸的保护作用。结果表明，Ｃｄ对ＬＬＣ－ＰＫ１细胞增殖有明显的抑制作用；低浓度与细胞作用３小时，对ＤＮＡ合成有一定的促进作用；当Ｃｄ浓度达到１６μｍｏｌ／Ｌ时ＤＮＡ合成受到明显的抑制；Ｃｄ与细胞作用１２小时，对ＲＮＡ及蛋白质合成也具有明显的抑制作用。结果还显示：Ｎａ２ＳｅＯ３对Ｃｄ抑制的ＤＮＡ合成作用无任何保护作用，而Ｄ，     

Oxidized low-density lipoproteins induce apoptosis in vascular smooth muscle cells

目的：研究氧化型低密度脂蛋白（ｏｘＬＤＬ）诱导血管平滑肌细胞凋亡．方法：梯度超速离心分离血浆ＬＤＬ，以ＣｕＳＯ４１０μｍｏｌ·Ｌ－１氧化，观察ｏｘＬＤＬ对培养兔胸主动脉平滑肌细胞的损伤作用．Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８荧光染色观察形态学改变，抽提细胞ＤＮＡ进行琼脂糖凝胶电泳．结果：ｏｘＬＤＬ３００ｍｇ·Ｌ－１与ＶＳＭＣ共温育２４ｈ诱导典型的凋亡形态学变化和ＤＮＡ降解，但天然低密度脂蛋白无此作用．当ｏｘＬＤＬ为４００ｍｇ·Ｌ－１或温育时间延至４８ｈ，上述变化更加明显．硫酸葡聚糖２０ｍｇ·Ｌ－１和ＢＨＴ５０μｍｏｌ·Ｌ－１对此作用无影响．ＬＰＣ１２５μｍｏｌ·Ｌ－１无诱导凋亡作用．结论：ｏｘＬＤＬ诱导血管平滑肌细胞凋亡，氧自由基和ＬＰＣ不参与这一过程．     

α－双炔失碳酯诱导人白血病K562细胞凋亡

目的：研究α双炔失碳酯（Ａｎｏ）的抗肿瘤作用．方法：形态学研究分别应用光学显微镜和电子显微镜．细胞膜完整性检测用台盼蓝排除法．用流式细胞仪及琼脂糖凝胶电泳检测ＤＮＡ断裂．结果：Ａｎｏ２５－５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理Ｋ５６２细胞４８ｈ，细胞生长被明显抑制，５０μｍｏｌ·Ｌ－１时抑制率达６７％．细胞主要阻滞在Ｇ１期．处理后的细胞染色质凝缩，核断裂，体积缩小，呈典型的凋亡改变．Ｋ５６２细胞经Ａｎｏ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理２４－４８ｈ后，提取细胞ＤＮＡ进行电泳，呈现典型的“ｌａｄｄｅｒ”带型．流式细胞仪检测约有７０％细胞发生凋亡，Ｓ期细胞比较敏感．此时，虽然发生广泛的ＤＮＡ断裂，但细胞膜仍然完整，排除台盼蓝．Ａｎｏ５０μｍｏｌ·Ｌ－１处理Ｋ５６２细胞８ｈ即能诱导部分细胞发生凋亡．结论：Ａｎｏ能诱导Ｋ５６２细胞凋亡．     

碱性成纤维细胞生长因子增强淋巴因子激活的杀伤细胞对人膀胱 …

目的 探讨白细胞介素Ⅱ（ＩＬ－２）和碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）对膀胱癌患者淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）的作用。方法 用细胞计数观察不同浓度ｂＦＧＦ对ＬＡＫ细胞增殖的影响,以膀胱癌细胞系ＥＪ及新鲜分离患者自体肿瘤细胞（ＢＴＣ）为靶细胞,用ＭＴＴ法测定ＬＡＫ细胞对膀胱癌细胞的细胞毒作用,结果 虽然外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）的增殖可被ｂＦＧＦ５μｇ．Ｌ＾－１所抑制,ＩＬ－２所诱导的ＬＡＫ     

Manoalide对除生长因子诱导的血管内皮细胞凋亡的影响

目的：研究ｍａｎｏａｌｉｄｅ对除去生长因子（ａＦＧＦ和血清）而诱导的血管内皮细胞凋亡的影响。方法；通过细胞形态观察，ＤＮＡ凝胶电泳及荧光显微术通过细胞形态观察，ＤＮＡ凝胶电泳及荧光显微术等方法确定ｍａｎｏａｌｉｄｅ对细胞凋亡的抑制或促进作用。结果：去向除ａＦＧＦ和血清的培养液中加低浓度的ｍａｎｏａｌｉｄｅ（１－４μｍｏｌ．Ｌ＾－１）培养细胞４８ｈ，细胞的脱壁和ＤＮＡ片断化受到抑制，ｍａｎｏａｌｉｄ     

Elemene induces apoptosis and regulates expression of bcl 2 protein in human leukemia K562 cells 1

目的：研究榄香烯的抗肿瘤作用机制．方法：抑制细胞增殖采用ＭＴＴ法;用荧光显微镜观察细胞的形态学变化;ＤＮＡ电泳、流式细胞仪技术检测ＤＮＡ断裂;用流式细胞仪检测ｂｃｌ２蛋白的表达．结果：榄香烯６５－５２０μｍｏｌ·Ｌ－１明显抑制Ｋ５６２细胞增殖,ＩＣ５０（９５％可信区间）为２２０（１５２－３１９）μｍｏｌ·Ｌ－１,电泳可见ＤＮＡ断裂形成的阶梯状条带,形态学上表现为染色体聚集,核固缩、断裂,而ｂｃｌ２蛋白的水平明显下降．结论：榄香烯诱导人白血病Ｋ５６２细胞凋亡,这与ｂｃｌ２蛋白表达的下降有关     

卡维地洛对血管平滑肌细胞DNA合成的影响

目的 :探讨卡维地洛对血管平滑肌细胞(VSMC)增殖的影响及其可能机制。方法 :通过贴壁细胞培养法建立豚鼠主动脉血管平滑肌细胞模型 ,应用 [3 H]TDR掺入试验研究卡维地洛对反应性氧族 (reactiveoxygenspecies ,ROS)、血管紧张肽Ⅱ(angiotensinⅡ ,AngⅡ )及胎牛血清 (fetalcalfserum ,FCS)诱导的血管平滑肌细胞增殖的影响。结果 :卡维地洛呈剂量依赖性地抑制ROS ,AngⅡ及FCS诱导的血管平滑肌细胞DNA合成 ,最大抑制率分别为 (48± 15 ) % ,(42± 7) %和 (44± 14) %。结论 :卡维地洛对ROS及AngⅡ诱导的血管平滑肌细胞DNA合成呈剂量相关性的抑制作用 ,提示卡维地洛可能通过抗氧化的途径抑制血管平滑肌细胞增殖     

前胡丙素对牛主动脉平滑肌细胞增殖的抑制作用

目的:探讨前胡丙素(pra-C)对牛主动脉平滑肌细胞(SMC)增殖的影响 方法:细胞DNA的合成量由~3H-胸腺嘧啶核苷[~3H]TdR)掺入试验测定,应用流式细胞术测定细胞周期,用乳酸脱氢酶活性测定观察药物的毒性.结果:无论有无血管紧张素Ⅱ(AngⅡ),在0.01μmol/L到10μmol/L浓度范围内,pra-C均可呈浓度依赖性地抑制SMC的增殖,抑制作用主要与阻止细胞进入有丝分裂期有关,而与细胞毒性无关.结论:pra-C能够完全阻断Aug Ⅱ诱导SMC的增殖效应,部分阻止小牛血清诱导的细胞分裂,这对于血管增生性疾病的防治有重要意义.