TGF-β1、VEGF在兔角膜缝线后新生血管形成中的表达及意义

目的 探讨角膜组织中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、血管内皮细胞生长因子(vescular endothelium growth factor,VEGF)与角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)形成的相关性.方法 双侧角膜缝线制备兔角膜新生血管模型.33只兔随机分为正常对照组(3只)、实验组(15只)和实验对照组(15只);实验组兔行单纯角膜缝线,实验对照组兔术后隔日结膜下注射一定量地塞米松.术后每日观察CNV生长情况并记录,分别于术后1 d、4 d、7 d、14 d、21 d检测角膜组织中TGF-β1、VEGF阳性表达情况.结果 缝线后各时间点,实验对照组CNV面积、角膜组织炎症细胞浸润程度及TGF-β1、VEGF的表达情况与实验组相比明显受到抑制(P＜0.05).角膜组织中TGF-β1、VEGF的表达与CNV面积存在显著的相关性.结论 CNV的形成与炎症反应密切相关,TGF-β1、VEGF可能参与了CNV的形成过程,地塞米松可能通过抑制角膜炎症反应及TGF-β1、VEGF等细胞因子的表达进而抑制CNV的生长.     

兔角膜及房水中VEGF的表达与角膜新生血管形成的相关性

目的:探讨兔角膜与房水中VEGF的表达与角膜新生血管(corneal neovasucularization,CNV)形成的相关性。方法:兔33只,随机分为正常对照组、实验组和实验对照组,角膜缝线制备CNV模型,实验对照组自术后当日起隔日结膜下注射一定剂量地塞米松治疗。术后每日观察CNV生长情况并计算其面积。分别于术后1,4,7,14,21d检测角膜组织及房水中VEGF的表达情况。结果:实验对照组CNV生长情况及角膜组织炎症细胞浸润程度较实验组明显受到抑制(P<0.05)。角膜组织中VEGF主要定位于上皮细胞、基质纤维细胞、内皮细胞、浸润的炎症细胞及新生血管内皮细胞胞质中。实验组角膜组织内VEGF表达的阳性率随时间推移逐渐增高,且表达强度与CNV面积具有显著的相关性。角膜缝线后14,21d实验组VEGF表达阳性率显著高于实验对照组(P<0.05)。实验组房水中VEGF的含量随着时间的推移逐渐增长,各检测点均高于实验对照组,并且房水及角膜组织中VEGF的表达与CNV面积显著正相关。结论:CNV的形成与炎症细胞浸润密切相关,角膜及房水中的VEGF可能在CNV形成过程中发挥着重要的调控作用。地塞米松可能通过抑制炎症反应、下调VEGF等细胞因子的表达,进而抑制CNV的生长。     

血管内皮细胞生长因子应用于羟基磷灰石眶内植入物的研究

目的观察不同质量浓度的血管内皮生长因子（VEGF）对羟基磷灰石（HA）植入物纤维血管化的作用。方法将24只新西兰白兔随机分为A、B、C、D4组,每组6只。各组均采用自体深筋膜覆盖HA植入物植入兔眼眶。A组为对照组,B、C、D组将HA义眼台植入前分别浸泡于质量浓度为0．5、1．5、2．5g／LVEGF溶液中,术后分别点用上述不同质量浓度VEGF滴眼液,每日4次,连续28d。术后14、21、28d各组取出2个HA植入物行组织学病理学检查,比较植入物纤维血管化的情况。结果术后14d,各组间纤维血管长度的平均值差异无统计学意义（F＝34．12,P〉0．05）;术后21d,各组间纤维血管长度的平均值差异有统计学意义（F=4．21,P〈0．05）;术后28d,各组间纤维血管长度的平均值差异无统计学意义（F=27．67,P〉0．05）。术后14d,各组HA植入物纤维血管化程度级别差异无统计学意义（H=0．072,P〉0．05）;术后21d,各组HA植入物纤维血管化程度级别差异有统计学意义（H=3．684,P〈0．05）;术后28d,各组HA植入物纤维血管化程度级别差异有统计学意义（H=4．318,P〈0．05）。结论质量浓度为1．5g／L及2．5g/L的VEGF对HA植入物术后早期的纤维血管化具有促进作用。     

碱性成纤维细胞生长因子应用于羟基磷灰石眶内植入物的研究

目的 观察不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子（basic fibroblast growth factor,bFGF)对羟基磷灰石（hydroxyapatite,HA）植入物纤维血管化的作用。方法 将36只新西兰白兔随机分为A、B、C、D4组,每组9只,各组均采用HA植入物植入兔眼眶。A组为对照组,B、C、D组在HA球植入术前将植入物分别浸泡于浓度为0.5、1.5及5.0g/L国产重组bFGF溶液中,术后B、D、D组术眼分别滴用上述不同浓度bFGF的眼液。各组分别于术后14、28及42d摘取HA植入物行组织学检查,并比较各组不同时间的植入物纤维血管化的情况。结果 术后14d,纤维血管从HA植入物外周长植入物内距离,C、D与A、B组比较,差异有显著性（χ^2=9.0,P=0.029）。结论 1.5及5.0g/L浓度的bFGF液对HA植术物术后早期的纤维血管化具有促进作用。     

低功率半导体激光预防和治疗羟基磷灰石义眼座暴露的实验研究

目的探讨低功率半导体激光预防和治疗羟基磷灰石义眼座（HA）暴露的作用机理。方法24只新西兰白兔，随机分为2组，一组为实验照射组，另一组为对照组，每组又分为4个小组，每小组3只，分别对其右眼行眼球摘除术，将多孔羟基磷灰石（CHA）植入眼眶肌锥腔内，对缝眼外肌，间断缝合筋膜和球结膜，术后2d，对照组用复方新霉素滴眼液滴眼，每天4次，连续7d，实验照射组用JAM-Ⅱ型半导体激光器局部照射，每天1次，每次10min，7d为1个疗程。分别于术后1、2、4、8周处死动物，每组3只，取出CHA球体作病检。结果实验照射组在各个阶段的纤维血管长入CHA球体内的长度及血管化程度明显优于对照组，实验组未发生明显的炎症反应。结论低功率半导体激光对预防和治疗羟基磷灰石义眼座暴露有确切的疗效，其作用机制可能主要为促进CHA的纤维血管化和预防炎症反应。     

Avastin对大鼠角膜新生血管的抑制及超微结构的影响

目的:探讨Avastin对角膜新生血管形成及角膜内血管内皮生长因子(VEGF)的影响及其超微结构的影响。方法:Wistar大鼠96只随机分3组,采用碱烧伤的方法制备大鼠角膜新生血管模型;正常不烧伤组4只。烧伤后隔日球结膜下注射0.1mL生理盐水组32只,烧伤后隔日球结膜下注射Avastin0.1mL组32只,烧伤后隔日球结膜下注射地塞米松0.1mL组32只。碱烧伤术后在裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜混浊度;宏观测量新生血管长度;组织病理切片HE染色作微血管计数;透射电镜观察超微结构的改变;免疫组化检测角膜VEGF的蛋白表达情况;CD34标记新生血管,显微镜下微血管计数方法研究角膜新生血管形成及抑制情况。结果:治疗组在3,7,10,14d较对照组角膜混浊程度轻(P<0.05);14d形成的新生血管数量较对照组少(P<0.05)。实验组新生血管微血管数量减少,VEGF蛋白表达下降,具有统计学差异。VEGF主要表达在角膜受损区的感染细胞胞质内,其出现时间与位置与角膜新生血管一致。Avastin和地塞米松均可有效抑制角膜新生血管,减少角膜内VEGF表达,两者无统计学差异,结膜下注射Avastin和地塞米松后,大鼠角膜超微结构无除烧伤后其它显著改变。结论:Avastin和地塞米松可抑制角膜新生血管,减少角膜内VEGF表达,对角膜的超微结构均无显著毒性。     

兔眶内植入国产珊瑚羟基磷灰石的实验研究

目的：探讨国产珊瑚羟基磷灰石（ＨＡ）眶内植入物的生物相容性以及植入兔眶内后纤维血管化情况。方法：在１８只兔眶内植入国产珊瑚ＨＡ,于术后定期取出植入物作光镜与透射电镜检查,结果：１８例中有２例出现植入物暴露,无发生植入物暴露的组织学改变显示;术后６周时植入物已全部纤维血管化,公有少许为症细胞;发生植入物暴露的组织学改变显示;植入物外围少许纤维血管长进,内围大量炎症细胞浸润。结论：①国产珊瑚ＡＨ具有良     

血管抑素对角膜新生血管和VEGF表达的作用

目的:探讨血管抑素(angiostatin,AS)对鼠碱烧伤角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)及血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的作用,探讨 AS对CNV的作用及机制。方法:SD大鼠105只随机分为正常对照组(5只)、生理盐水组、地塞米松组、AS1组、AS2组(各25只),除正常组外,实验各组制作左眼碱烧伤CNV模型,分别予生理盐水、1g/L地塞米松液、10μg/mLAS液、20μg/mLAS液点眼,4次/d,于碱烧伤后1,3,7,14,21d运用裂隙灯、免疫组织化学方法观察新生血管长度及面积、VEGF的表达。结果:AS治疗组碱烧伤后第3d起各时间点CNV面积均明显小于盐水组(P<0.05)。碱烧伤后各时间点AS治疗组VEGF表达量均明显少于盐水组(P<0.05)。结论:AS能显著抑制碱烧伤CNV,可能与其抑制VEGF的表达有关。     

硷性成纤维细胞生长因子在义眼座植入中的应用

目的 观察硷性成纤维细胞生长因子(bFGF)对羟基磷灰石(HA)植入物作用及效果。方法 羟基磷灰石义眼座植入前用12000AU／5mL．bFGF滴眼液浸泡30nin，使HA微孔充满滴眼液，术后结膜内滴眼每日4次，连用15日。结果 本组118例中，102例Ⅰ期愈合，16例前部球结膜及眼球筋膜愈合不良，其中9例于15～40日内自行愈合，3例更换义眼座后愈合：结论 bFGF滴眼液对HA义眼座植入后早期的纤维血管化具有促进作用，预防HA植入物暴露的发生。     

瘦素和血管内皮生长因子在碱烧伤诱导的大鼠角膜新生血管模型中的表达

目的 观察碱烧伤后不同时期角膜的组织病理学变化,以及瘦素和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VFGF)的表达,探讨它们与角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)的关系.方法 使用碱烧伤诱导大鼠角膜新生血管模型,采用浸润1 mol·L-1 NaOH溶液、直径为3 mm的单片滤纸,准确置于大鼠右眼角膜中央30 s,制作CNV模型.25只SD大鼠右眼为实验眼,随机分成5组,每组5眼,左眼为正常对照眼.每天用裂隙灯显微镜观察角膜新生血管,分别计算新生血管长度和面积.并行HE染色和免疫组织化学检测.结果 碱烧伤后4 d、7 d、14 d、21 d,实验组CNV面积分别为:(2.55±0.15)m2、(4.15±0.36)mm2、(10.21±0.45)mm2、(8.56±0.06)mm2.免疫组织化学检测显示角膜碱烧伤后1 d,实验组瘦素、VEGF的表达开始增高,碱烧伤后14 d达高峰,14 d后瘦素、VEGF的表达下降,21 d后显著下降;其表达部位主要分布在形成的新生血管区域和上皮层;正常对照组瘦素可微弱表达于角膜上皮层和基质层,VEGF没有表达或仅在上皮基底膜有微弱表达.实验组角膜瘦素、VEGF阳性表达率较对照组明显增加(χ2=29.07,P=0.001;χ2=35.51,P=0.001),瘦素与VEGF的表达具有正相关性(r=0.95,P=0.001).结论 瘦素和VEGF表达水平与角膜新生血管的生成具有相关性,瘦素可能成为治疗CNV的靶点.     

增强核磁共振成像观察人眼羟基磷灰石义眼座的纤维血管化过程

目的:利用增强核磁共振(MRI)动态显像技术监测人眼羟基磷灰石(HA)义眼座完成纤维血管化的时间,对HA义眼座纤维血管化的MRI图像信息和量化数据进行研究,以证实MRI在评价义眼座纤维血管化程度方面的临床应用价值。方法:选择临床行眼内容物剜除术及一期HA义眼座植入术的患者15例15眼,自第1mo开始,每月1次,连续7次,每次均由放射科医师进行增强MRI的相关检查并计算MRI(VE/VHA)比值(VE为义眼座强化区体积,VHA为义眼座体积)。结果:人眼HA植入术后前6mo间依次比较MRI图像中VE/VHA比值显著增加,第6mo后不再增加。结论:核磁共振成像(MRI)可作为HA义眼座术后血管化程度监测的影像学依据。正常人眼眶内植入直径20mm的HA义眼座在6mo后完全纤维血管化。     

Fibrovascular ingrowth into hydroxyapatite and porous polyethylene orbital implants wrapped with acellular dermis

PURPOSE: Acellular dermis is a frequently used wrapping material for hydroxyapatite (HA) and porous polyethylene (PP) orbital implants. In an animal model, we determined by histology the extent of fibrovascular ingrowth within orbital implants wrapped in acellular dermis at 6 and 12 weeks after surgery. METHODS: Four Yucatan minipigs were used for the study. Two minipigs had HA implants and two had PP implants. Implants were harvested at 6 or 12 weeks after surgery and were examined histologically for fibrovascular ingrowth. RESULTS: There was complete fibrovascularization of HA implants harvested at both 6 and 12 weeks after surgery. The PP implant harvested at 6 weeks had incomplete fibrovascularization, whereas the PP implant harvested at 12 weeks had complete fibrovascular ingrowth. There was no histologic evidence of inflammation seen in any of the orbital implants. On gross and histologic examination, the wraps were found to persist on the surface of all orbital implants, with little histologic evidence of inflammation localized to the acellular dermis. CONCLUSIONS: Acellular dermis wraps support fibrovascularization of both HA and PP orbital implants. Additionally, acellular dermis does not incite significant inflammation in association with HA and PP orbital implants and can persist in situ for at least 12 weeks after surgery.     

Avastin和地塞米松在大鼠角膜新生血管中的作用

目的探讨眼表应用avastin、地塞米松及联合用药对SD大鼠角膜新生血管（CNV）的作用及机制。方法建立碱烧伤诱导大鼠CNV模型,分为4组：地塞米松组给予质量分数0.1%地塞米松局部点眼;avastin组给予5.0g/Lavastin;联合组给予5.0g/Lavastin＋0.1%地塞米松;对照组给予生理盐水。采用裂隙灯观察、免疫组织化学染色等方法观察各组CNV的面积和血管内皮生长因子（VEGF）的表达。结果第6天时,对照组CNV生长接近高峰,血管粗大、密集,交织成网状;地塞米松组和avastin组CNV较短,血管稀疏、细长;联合组CNV较短,血管较稀疏、细小。实验后3、6、12d,3个组CNV面积比较差异均有统计学意义（F=145.659,P=0.000;F=296.370,P=0.000;F=148.008,P=0.000）,组间多重比较显示avastin组、地塞米松组及联合组CNV面积均小于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.01）。Avastin组与地塞米松组间差异无统计学意义（P〉0.05）。第7天时,组织病理学检测显示对照组角膜可见大量炎性细胞浸润,基质层大量CNV,胶原纤维排列紊乱;地塞米松组、avastin组角膜基质排列趋于整齐,CNV明显减少,腔小且分布稀疏,未见大量炎性细胞浸润;联合组基质层胶原纤维排列规则,CNV显著减少,炎性细胞浸润较少。免疫组织化学检测提示对照组角膜全层VEGF表达明显增强,其表达部位主要分布在CNV区域和上皮全层。地塞米松组和avastin组CNV密度减低,角膜基质层CNV区域的VEGF表达减少;联合组CNV密度明显减低,VEGF表达微弱。结论 Avastin和地塞米松均能抑制CNV,二者联合用药具有协同作用,可降低CNV和炎性细胞浸润。     

A comparison of rates of fibrovascular ingrowth in wrapped versus unwrapped hydroxyapatite spheres in a rabbit model

PURPOSE: To compare the rate of fibrovascularization of wrapped versus unwrapped hydroxyapatite (HA) spheres in an animal model and to investigate how drilling small-diameter access holes at the time of implantation affects the rate of fibrovascular ingrowth in wrapped implants. METHODS: The right eyes of 20 New Zealand White rabbits were removed and a 12-mm HA sphere was implanted in each socket. The spheres were left bare in 8 of the animals. In the other 12, the implant was wrapped in an autologous sclera shell. In 4 animals from each group, a 1-mm diameter access hole was drilled into the spherical center of the implant at the sites of extraocular muscle insertion and at the posterior pole before implantation. All implants were explanted after 1 week. RESULTS: The mean depth of fibrovascularization in the bare group without access holes (n = 4) was 100% (SD = 0). The mean depth of fibrovascularization in the wrapped group without access holes (n = 8) was 30.1% (SD = 11.0). The difference between these two groups was statistically significant (P<0.001). The mean depth of fibrovascularization in the wrapped group with access holes (n = 4) was 91.5% (SD = 9.8). Compared with the wrapped group without access holes, the difference was statistically significant (P<0.001). The difference in the mean depth of fibrovascularization between the bare group without access holes and the wrapped group with access holes failed to reach statistical significance (P = 0.18). CONCLUSIONS: On the basis of this preliminary study, we conclude that whereas scleral wrapping does significantly slow the rate of fibrovascular ingrowth, the concomitant placement of access holes greatly improves the rate of fibrovascularization.     

增强核磁共振成像观察兔眼羟基磷灰石义眼座的纤维血管化过程研究

目的 应用增强核磁共振(MRI)动态显像技术监测兔眼羟基磷灰石(HA)义眼座完成纤维血管化的时间,以证实MRI在评价HA义眼座纤维血管化程度方面的临床应用价值.方法 健康清洁级新西兰大白兔30只,随机分为6组,均行单眼眼内容物剜出术及多孔巩膜壳内HA义眼座植入术,术后第1、2、3、4、5、6周进行增强MRI的相关检查并计算MRI图像中VE/VHA比值(VE为义眼座强化区体积,VHA为义眼座体积),于每周扫描完毕后处死1组兔,取出HA义眼座进行病理组织学的对照观察.结果 兔眼HA植入后前4周间依次比较MRI图像中VE/VHA比值显著增加,而第4周后不再增加;兔眼HA病理检查也发现术后第4周全部植入HA义眼座均完成纤维血管化,HE染色可见致密的胶原纤维形成,以及内含红细胞的新生血管,并且无明显炎症细胞浸润.结论 MRI可作为HA义眼座术后血管化程度监测的影像学依据.健康兔眼眶内植入直径12 mm的HA义眼座在4周后可达到完全纤维血管化.     

Hydroxyapatite implant wrapping materials: analysis of fibrovascular ingrowth in an animal model

PURPOSE: To compare the influence of seven currently available spherical orbital implant wraps on host fibrovascularization of a hydroxyapatite (HA) orbital implant. METHODS: Five groups of 3 (15 total) adult male New Zealand albino rabbits underwent enucleation with placement of a 12-mm HA implant wrapped in high-porosity expanded polytetrafluoroethylene (e-PTFE), processed bovine pericardium, or processed human pericardium, sclera, or fascia lata. Magnetic resonance imaging before and after the intravenous administration of gadolinium-diethylenetriamine pentaacetic acid (DTPA, 0.1 mol/kg) was performed immediately before exenteration. Five rabbits (one with each of the different implant wraps) were killed at 4, 8, and 12 weeks, and the operated socket was exenterated. Histopathologic sections of the implants were then compared with the results of our previous study using polyglactin 910 mesh and autologous sclera as HA orbital implant wraps. RESULTS: Complete fibrovascularization of all the implants occurred by 12 weeks; however, HA implants wrapped with sclera, polyglactin mesh, and e-PTFE appeared to undergo more rapid fibrovascularization than spheres wrapped with other materials. CONCLUSIONS: Although all of the implant wraps studied may be suitable substitutes for donor sclera, we prefer polyglactin mesh because it is readily available, inexpensive, and without risk of transmissible diseases.     

实验性脉络膜新生血管中环氧合酶-2、血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-2的表达

目的研究实验性脉络膜新生血管（CNV）大鼠中环氧合酶-2（COX-2）、血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达,并进一步探讨其在CNV中的作用机制及相互关系。方法应用氪红激光光凝视网膜的方法诱导制作BN大鼠的CNV模型,分别选取并制作无任何干预的对照组和实验组光凝后第3、7、14、21、30天的＂最大CNV膜＂切片,采用免疫组织化学技术检测COX-2、VEGF和MMP-2在视网膜和CNV膜中的表达。应用HPIAS-1000型高清晰度彩色病理图文分析系统测定COX-2、VEGF和MMP-2阳性染色的平均灰度值。结果 COX-2、VEGF和MMP-2在正常视网膜和脉络膜中呈弱表达,视网膜光凝后,COX-2、VEGF和MMP-2在视网膜和CNV膜中的表达在7～14 d逐渐增强,21 d时三者的表达强度均达到高峰,之后略减弱。视网膜光凝后7、14、21、30 d,实验组COX-2、VEGF和MMP-2的免疫组织化学染色平均灰度值与对照组相比差异均有统计学意义（P〈0.05）。COX-2的表达强度与VEGF和MMP-2的变化均呈正相关（r=0.967,P=0.007;r=0.966,P=0.007）。结论激光诱导的实验性CNV中COX-2、VEGF及MMP-2的表达随着时间的延长呈动态变化,CNV局部炎症诱导的COX-2表达可能是VEGF和MMP-2的上游调节因子。