天麦消渴片通过miRNA改善糖尿病大鼠血糖的机制

【摘要】 目的 本研究旨在探讨天麦消渴片对糖尿病大鼠体重、血糖、血脂和胰岛素等相关代谢指标的影响,并且利用miRNA表达谱芯片和实时定量RT-PCR探讨天麦消渴片降血糖的机制。 方法 SD大鼠通过高脂饮食/注射STZ法构建糖尿病大鼠模型。将SD大鼠分为小剂量天麦消渴片组（8只,给予50mg/kg/d的天麦消渴片粉末悬浊液）、大剂量天麦消渴片组（8只,给予100mg/kg/d的天麦消渴片粉末悬浊液）、糖尿病模型组（8只,给予等体积生理盐水）和正常对照组（8只,给予等体积生理盐水）,均连续灌胃8周。每2周测定SD大鼠空腹血糖(FBG)和体重。7周末进行口服糖耐量实验(OGTT),测空腹和葡萄糖负荷后血糖。8周末测定大鼠空腹血糖、血清胰岛素和血脂水平,观察天麦消渴片对糖尿病大鼠血糖和血脂的改善作用。取大鼠胰腺组织进行miRNA表达谱芯片实验,并运用实时定量RT-PCR验证芯片结果,以期探讨天麦消渴片对糖尿病大鼠降血糖的机制。 结果 干预后,大剂量天麦消渴片组大鼠较糖尿病模型组空腹血糖和OGTT曲线下面积（AUC）显著下降。干预8周后,大剂量天麦消渴片组空腹血清胰岛素(FINS)和胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)较糖尿病模型组显著降低 (P<0.01)。干预8周后,大剂量天麦消渴片组血总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)较糖尿病模型组显著降低(P<0.05)。大剂量天麦消渴片组胰腺较糖尿病模型组有18个miRNA上调,3个miRNA下调。实时定量RT-PCR结果显示证实的这一结果。miRNA靶基因预测和通路分析结果揭示,天麦消渴片能上调胰腺miR-375和miR-30d,从而改善胰腺功能。 结论 天麦消渴片不仅能有效降低糖尿病大鼠FBG,改善胰岛素敏感性,还能调节脂代谢。天麦消渴片可能是通过上调胰腺miR-375和miR-30d水平, 刺激胰岛β细胞增殖,抑制胰岛α细胞增殖,增加胰岛素基因表达;上调胰腺let-7b、let-7e、miR-142-5p和miR-375,抑制细胞因子及受体相互作用通路和MAPK通路的功能,从而改善糖尿病大鼠血糖和胰岛素抵抗状态。     

白背三七水提取物对2型糖尿病大鼠的降血糖作用及其机制

目的 研究白背三七水提取物对2型糖尿病模型大鼠的降血糖作用及其机制。方法 以白背三七水提取物ig 2型糖尿病模型大鼠，观察白背三七水提取物对血糖、血脂和血胰岛素水平及其他相关实验指标的影响。结果 白背三七水提取物可显著降低2型糖尿病模型大鼠的血糖，改善其脂代谢和高胰岛素血症，增加抗氧化酶活性，减轻脂质过氧化，保护血管内皮功能，促进胰岛β细胞的修复。结论 白背三七对实验性2型糖尿病有较明显的治疗作用，其机制可能与增强机体清除活性氧的能力、减轻氧自由基对胰岛β细胞的损伤、促进胰岛β细胞的修复等作用有关。     

石斛合剂对糖尿病大鼠模型血糖血脂代谢的影响

石斛合剂及其加减方不仅具有显著降低轻型及初发糖尿病患者的血糖水平,使血糖恢复正常,而且对重型及病程较长的患者,能配合西药降低患者的血糖和糖化血红蛋白水平[1].为了进一步探讨石斛合剂治疗糖尿病的机制,我们制作了糖尿病大鼠模型,观察石斛合剂对大鼠血糖、血脂代谢的影响,现将结果报道如下.     

复方降糖茶对STZ诱导的糖尿病大鼠的治疗作用及其可能机制

目的：探讨复方降糖茶对糖尿病大鼠的治疗作用及其可能的作用机制。方法：以链脲佐菌素（STZ）诱导Wistar大鼠制作糖尿病模型,观察复方降糖茶对糖尿病大鼠体重增长及胰岛细胞形态的影响,测定血糖、血脂、血清和肝肾超氧化物歧化酶（SOD）/丙二醛（MDA）活性以及胰岛素敏感性（ISI）。结果：复方降糖茶可抑制糖尿病大鼠体重减轻,差异有统计学意义（P〈0.05）,降低胰岛细胞的破坏;显著降低血糖浓度（P〈0.01）,ISI有所回升（P〈0.05）,同时血清及肝肾等组织SOD活性明显提高（P〈0.05或P〈0.01）,MDA水平显著降低（P〈0.05）。结论：复方降糖茶可以改善糖尿病大鼠血糖及血脂代谢紊乱,升高SOD活性,并降低MDA水平,对糖尿病大鼠的胰岛细胞也有保护作用,具有一定的治疗作用。     

初诊2型糖尿病患者应用地特胰岛素临床观察

目的:观察初诊2型糖尿病患者应用地特胰岛素治疗前后血糖控制水平、胰岛功能的改变.方法:20例初诊2型糖尿病患者应用地特胰岛素治疗,比较治疗前后血糖、血脂、胰岛功能等的不同水平、低血糖的发生.结果:地特胰岛素快速稳定的降低血糖、血脂、胰岛功能得到改善且无低血糖发生.结论:地特胰岛素有保护胰岛功能、稳定降低血糖、血脂的作用,低血糖发生率低.     

青钱柳多糖对糖尿病小鼠血糖水平和胰腺组织形态的影响

目的:研究青钱柳多糖(CP)对正常及糖尿病小鼠降血糖的作用及胰岛组织形态的影响.方法:通过尾静脉注射四氧嘧啶建立小鼠糖尿病模型,分别以300,450,600 mg/kg青钱柳多糖灌胃给药,连续14 d后,测定空腹12 h血糖,并观察各组小鼠胰脏组织结构.结果:CP不影响正常小鼠血糖,可降低糖尿病小鼠血糖(P<0.05)并对胰岛组织损伤有一定的保护作用.结论:青钱柳多糖具有降血糖作用并对胰岛组织有一定的保护作用.     

降糖三黄片对2型糖尿病大鼠胰腺β细胞BIP基因表达的影响

目的：观察降糖三黄片对2型糖尿病大鼠胰岛β细胞BIP基因表达的影响,探讨其干预内质网应激介导的β细胞凋亡的作用机制。方法：40只4周龄Wistar大鼠被随机分为正常组和2型糖尿病组。高脂＋蛋氨酸饲料喂养30只低周龄Wistar大鼠1个月,建立胰岛素抵抗模型,结合小剂量STZ腹腔注射,建立2型糖尿病大鼠模型,随机分为2型糖尿病模型组和降糖三黄片组,降糖三黄片组予以灌胃中成药降糖三黄片治疗2个月,测定血清胰岛素、血脂、血糖,进行治疗前后比较;免疫组化方法测定各组大鼠胰岛β细胞BIP基因的表达。结果 ：降糖三黄片可明显改善2型糖尿病大鼠血糖、血脂代谢紊乱,改善胰岛素抵抗,明显上调内质网应激特征性分子BIP基因的表达。结论：降糖三黄片通过上调2型糖尿病大鼠胰岛β细胞BIP基因的表达,维持胰岛β细胞内环境的稳定,保护胰岛β细胞,减少内质网应激介导的胰岛β细胞凋亡。     

改良保肾方Ⅱ号对大鼠糖尿病肾病的影响

目的探讨改良保肾方Ⅱ号对糖尿病肾病的影响及其作用机制。方法用链脲佐菌素(STZ)复制糖尿病肾病大鼠模型,观察改良保肾方Ⅱ号对其血糖、血脂、肾功能和肾脏形态学的影响。结果改良保肾方Ⅱ号组大鼠血糖、血脂、肾功指标均较模型组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05),病理学改变也较模型组为轻。结论改良保肾方Ⅱ号能降低糖尿病肾病大鼠血糖和血脂,改善肾功能。     

利拉鲁肽治疗初诊断2型糖尿病患者血清miR-375的表达及胰岛功能的相关分析

目的:探讨利拉鲁肽治疗初诊断2型糖尿病患者后血清miR-375表达水平的变化,并分析其与胰岛素抵抗和胰岛β细胞功能变化的相关性?方法:30例初诊2型糖尿病受试者使用利拉鲁肽治疗12周,分别测定治疗前后患者的口服葡萄糖耐量试验(oral glucose tolerance test,OGTT)?胰岛素?C肽?糖化血红蛋白(HbA1c)?体重?腰围?血压和血清miR-375表达水平?采用配对t检验及Wilcoxon配对符号秩检验进行数据分析?结果:利拉鲁肽治疗前后,患者血清中的miR-375表达量和HbA1c显著降低(P < 0.05),胰岛素0~30 min曲线下面积?胰岛素0~120 min曲线下面积明显增加(P < 0.05)?结论:利拉鲁肽治疗初诊断2型糖尿病后,胰岛β细胞功能的改善可能与血清中miR-375表达下调有关?     

枸杞多糖对糖尿病大鼠糖脂代谢的影响

目的研究枸杞多糖对2型糖尿病大鼠血糖、血脂的影响。方法用链脲佐菌素制备2型糖尿病大鼠模型,观察并检测枸杞多糖干预12周后,大鼠血糖、胰岛素、胰岛素敏感指数及血脂水平。结果糖尿病大鼠血糖、血脂增高,胰岛素敏感性下降,枸杞多糖250、1000 mg/(kg.d)均能使血糖降低,250 mg/(kg.d)枸杞多糖能显著增加胰岛素的敏感性,LBP剂量不同对甘油三酯影响不同。结论枸杞多糖可能通过保护胰岛β细胞及增加胰岛素敏感性双重作用起到降糖效果。     

健脾清化方对糖尿病大鼠血糖波动和胰岛分泌功能的影响

目的观察中药复方健脾清化方干预糖尿病模型大鼠血糖波动及改善胰岛细胞分泌功能的作用。方法小剂量链脲佐菌素联合高脂高糖饲料诱导Wistar大鼠糖尿病模型。随机分为健脾清化方组(JPQ组)、正常组(NOR组)和模型组(CON组)。分别给予生药含量1. 3 g/ml健脾清化方10 ml/kg和等剂量蒸馏水灌胃,干预4周。葡萄糖氧化酶法观察健脾清化方对模型大鼠糖代谢(IPGTT)、血糖波动水平[平均血糖波动幅度(Mean amplitude of glycemic excursions,MAGE)、葡萄糖曲线下面积(Area under curve of glucose,AUCg)]、Elisa法检测胰岛细胞功能[I/G、胰岛素原(Proinsulin,PI)、真胰岛素(True insulin,TI)、PI/TI]的影响,并行HE染色光镜下观察胰岛细胞形态变化。结果健脾清化方组大鼠的腹腔糖耐量血糖水平显著降低(P 0. 05),MAGE和AUCg降低(P 0. 05),健脾清化方组PI显著下降(P 0. 05),TI显著上升(P 0. 05),PI/TI显著下降(P 0. 05),I/G显著上升(P 0. 05)。HE染色光镜下可见健脾清化方组胰岛细胞数量增多,形态改善。结论健脾清化方能有效改善糖尿病模型大鼠的糖代谢和血糖波动,并对糖尿病模型大鼠的胰岛素分泌功能和胰岛细胞形态有一定的改善作用。     

梅连消渴胶囊联合二甲双胍对糖尿病大鼠胰岛细胞及血糖水平的影响

目的观察中药复方梅连消渴胶囊联合二甲双胍对实验性糖尿病大鼠血糖水平及胰岛细胞的保护作用。方法以高脂高
糖联合链脲佐菌素（STZ）复制大鼠Ⅱ型糖尿病模型,分别以低剂量二甲双胍和梅连消渴胶囊及二者联合用药灌胃给药4周,测
定实验性糖尿病大鼠血糖水平;以HE染色观察胰岛病理改变;以醛复红染色计算胰岛β细胞数量。结果大鼠分别给予低剂量
二甲双胍及梅连消渴胶囊2、4周后,空腹血糖水平及葡萄糖耐量无显著变化;二者联合给药2、4周后,大鼠血糖水平、糖化血红
蛋白水平显著降低,葡萄糖耐量显著改善。同时,胰岛β细胞数量增加,胰岛组织病理改变减轻。结论梅连消渴胶囊与二甲双
胍联合用药后,糖尿病大鼠血糖水平显著降低,对损伤的胰岛细胞有保护和修复作用。
     

性别差异对实验性链脲佐菌素糖尿病大鼠造模的影响

腺病理组织观察可见雄性模型大鼠胰岛细胞的肥大增生及空泡变性均较雌性严重.罗格列酮作用4周后,能降低雌性模型大鼠的血糖水平(P<0.05),埘雄性模型大鼠血糖无效.结论 25 mg/kg STZ加高脂膳食的方法可诱导雌性Wistar大鼠建立2型糖尿病模型,但南于STZ对雌性与雄性Wistar大鼠胰岛造成的损伤程度有差异,雄性大鼠更敏感,因此雄性Wistar大鼠利用25 mg/kg STZ加膳食诱导方法小能建立2型糖尿病模型.     

microRNA-32抑制小鼠2型糖尿病胰岛β细胞凋亡的机制研究

目的探讨2型糖尿病中microRNA-32(miR-32)对胰岛β细胞凋亡的影响及其机制。方法以70只C57BL/KsJ-db/db小鼠为研究对象,将其中40只小鼠按随机数字表法分为糖尿病组及阴性对照组,每组20只,以血糖浓度≥11.1mmol·L-1时判为建模成功,并测定体质量;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测糖尿病组及阴性对照组中胰腺组织miR-32的表达;脂质体法转染miR-32的模拟物(miR-32mimic)至胰岛β细胞,使其在细胞中呈过表达状态,进行TUNEL染色对比转染前后胰岛β细胞的凋亡情况;并利用蛋白质印迹技术(Western blot)检测miR-32过表达胰岛β细胞中Apaf-1和Caspase-3蛋白的表达。再选择30只C57BL/KsJ-db/db小鼠,按随机数字表法分为随机对照组(n=10)、NC组(n=10,建模成功后在小鼠体内注射miR-NC)和miR-32组(n=10,建模成功后在小鼠体内注射miR-32agomir),观察体内过表达miR-32对糖尿病小鼠空腹血糖的影响。结果糖尿病组小鼠胰腺组织中miR-32的表达量较阴性对照组明显减少(P<0.01);过表达miR-32的胰岛β细胞的细胞凋亡率明显下降(P<0.01);生物信息学预测显示Apaf-1为miR-32的下游靶基因,过表达miR-32后,Apaf-1显著下调。与随机对照组相比,NC组、miR-32组小鼠空腹血糖明显升高,NC组、miR-32组小鼠体内分别注射miR-NC和miR-32agomir后第4周,miR-32组小鼠空腹血糖较NC组明显降低(均P<0.01),提示miR-32可显著降低2型糖尿病小鼠的空腹血糖。结论 miR-32可以通过抑制Apaf-1的表达减少糖尿病小鼠中胰岛β细胞的凋亡,进而改善2型糖尿病的发生和发展进程。     

金丝桃苷调控miR-375/CXCL1轴影响脑缺血再灌注损伤研究

目的 研究金丝桃苷(Hyp)调控miR-375/C-X-C趋化因子配体1(CXCL1)轴对脑缺血再灌注损伤(I/R)的作用机制。方法 采用生物信息学分析影响I/R的潜在基因及miRNA,最终将CXCL1/miR-375纳入研究。收集I/R患者血浆用于检测miR-375/CXCL1的表达,对细胞进行氧葡萄糖剥夺/复氧(OGD/R)处理,建立体外I/R模型,检测细胞内miR-375/CXCL1的表达。采用CCK-8试剂盒分析细胞活力,流式细胞术分析细胞凋亡程度,双荧光素酶报告试验分析miR-375/CXCL1的调控关系。结果 CXCL1在I/R患者血浆与OGD/R细胞模型中的表达异常升高(P<0.05)。Hyp能抑制CXCL1在OGD/R细胞模型中的表达。Hyp能提高OGD/R细胞活力,抑制OGD/R诱导的细胞凋亡(P<0.05);过表达CXCL1能降低细胞增殖活力、增加凋亡(P<0.05)。CXCL1被证明是miR-375的下游靶点,miR-375在I/R患者血浆与OGD/R细胞模型中均表达降低(P<0.05)。抑制miR-375能部分逆转Hyp作用,敲减CXCL...     

黄芋胶囊对糖尿病模型大鼠的降血糖作用

目的研究黄芋胶囊对糖尿病大鼠降血糖作用及其可能机制。方法50只雄性Wistar大鼠,以55mg/kgip链脲菌佐素建立糖尿病大鼠模型;选择造模成功且血糖值相近的大鼠32只,随机分为4组(每组8只);模型组、优降糖组(80mg/kg)、黄芋胶囊(1.0、2.0g/kg)组;另设正常对照组。实验第2周时检测各组血糖、血脂、肝糖原及血液流变学各项指标并用放射免疫法测定血清胰岛素的量。结果黄芋胶囊连续ig14d对正常大鼠血糖、血液流变学指标及血清胰岛素量均无明显影响,但可显著降低糖尿病大鼠的血糖、血脂及血液流变学指标,并明显提高血清胰岛素及肝糖原的量。结论黄芋胶囊降血糖作用与改善胰岛β细胞功能并能刺激胰岛β细胞释放胰岛素有关。     

舒洛地特调控miR-27a介导自噬调控糖尿病肾病足细胞损伤机制研究

目的分析舒洛地特调控微小RNA-27a(miR-27a)介导自噬调控糖尿病肾病足细胞损伤的机制。方法选取45只中15只大鼠作为正常组不做任何处理,其余大鼠建立糖尿病肾病大鼠模型,随机分为模型组、舒洛地特组各15只。舒洛地特组大鼠给予舒洛地特肌内注射,正常组和模型组给予等体积生理盐水肌内注射。观察各组大鼠病理组织学变化,血糖、血脂和肾功能指标、足细胞自噬体情况、凋亡率,足细胞特异性蛋白Nephrin、Desmin、GPR124及miR-27a、AMPK-mTOR信号通路蛋白表达量。结果舒洛地特组血糖、血脂和肾功能指标、足细胞凋亡率、Desmin、miR-27a、AMPK-mTOR信号通路蛋白表达量均低于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。舒洛地特组足细胞自噬体数量、Nephrin、GPR124蛋白表达量均高于模型组,差异有统计学意义(P0.05)。结论舒洛地特可通过下调miR-27a介导AMPK、mTOR、Bax蛋白表达量降低,进而抑制AMPK-mTOR信号通路,促进糖尿病肾病足细胞自噬、抑制糖尿病肾病足细胞凋亡、减轻糖尿病肾病足细胞损伤。     

糖肝康对糖尿病脂肪肝大鼠肝脏Ghrelin表达的影响

目的观察以健脾益气、调肝解毒活血为治法组方的中药糖肝康对糖尿病脂肪肝模型大鼠血糖、血脂及肝脏中Ghrelin在免疫组化表达的影响。方法用腹腔注射STZ并给予12周高脂饮食后复制糖尿病脂肪肝大鼠模型,药物干预12周后,观察模型大鼠的血糖、血脂水平,及糖肝康对糖尿病脂肪肝大鼠血糖、血脂和肝脏中Ghrelin在免疫组化表达的影响。结果糖肝康可降低糖尿病脂肪肝模型大鼠的血糖血脂水平及肝脏中Ghrelin在免疫组化异常表达的水平。结论糖尿病脂肪肝的血糖、血脂水平可能与Ghrelin的表达水平相关,糖肝康可通过影响Ghrelin在免疫组化表达水平,在血糖、血脂水平等方面起到积极作用,值得进一步深入研究。     

鲨肝刺激物质对四氧嘧啶诱发的小鼠糖尿病的保护作用

目的：研究鲨肝刺激物质对四氧嘧啶诱发的小鼠糖尿病的保护作用。方法：尾静脉注射四氧嘧啶造小鼠糖尿病模型，观察鲨肝刺激物质对糖尿病小鼠糖代谢(空腹血糖，糖化血红蛋白)、脂代谢(甘油三酯，胆固醇，游离脂肪酸)、抗氧化(超氧化物歧化酶，丙二醛)及胰岛损伤程度的影响。结果：鲨肝刺激物质显著降低糖尿病小鼠空腹血糖、糖化血红蛋白、甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸和丙二醛含量，提高超氧化物歧化酶活性，减轻四氧嘧啶对胰岛β细胞的损伤。结论：鲨肝刺激物质对四氧嘧啶诱发的小鼠糖尿病具有显著的保护作用。     

生活方式干预对GDM患者产后IGR胰岛素抵抗及胰岛β细胞功能状态的影响

目的：探讨妊娠糖尿病（GDM）产后糖调节功能受损者（IGR）行生活方式干预前后血糖血脂、胰岛素水平、胰岛β细胞功能状态及胰岛抵抗作用的变化情况。方法：对在本院分娩的285例GDM患者于产后6～8周行糖耐量试验测试,将筛选出的65例空腹血糖调节受损（IFG）或糖耐量测试阳性者随机分为观察组33例以及对照组32例,其中观察组患者接受为期2年的生活干预,对照组患者发放糖尿病宣传资料,对比分析两组患者干预前后血糖血脂、胰岛素水平、胰岛β细胞功能状及胰岛抵抗作用的变化情况。结果：观察组干预后空腹血糖（FPG）、餐后2h血糖（2hFPG）、糖化血糖蛋白（HbA1c）、总胆固醇（TC）、甘油三脂（TG）、低密度蛋白（LDL—C）低于对照组,而高密度蛋白（HDL—C）高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。观察组治疗后稳态模型胰岛素抵抗指数（HoMA—IR）、空腹胰岛素（Fins）、餐后2h胰岛素（2h Fins）及B细胞功能指数高于对照组,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：对GDM产后1GR异常患者行生活方式干预能有效降低患者血糖血脂水平,改善患者胰岛B细胞功能状态及胰岛抵抗作用,增加胰岛素敏感性。