青蒿琥酯选择性抗肺腺癌细胞的作用及其机制

目的研究青蒿琥酯抗肺腺癌细胞的选择性及其作用机制。方法利用流式细胞仪检测培养的胚肺成纤维细胞和肺腺癌细胞转铁蛋白受体的表达情况,利用四氮唑蓝比色法观察不同浓度青蒿琥酯对培养的两种细胞在应用或不用全铁转运蛋白预处理情况下48 h的生长抑制情况,并以顺铂作为阳性对照。结果胚肺成纤维细胞表面转铁蛋白受体荧光强度为0.11±0.04,肺腺癌细胞为0.54±0.06;48 h 200μg.ml-1青蒿琥酯对胚肺成纤维细胞的抑制率为(12.56±0.31%),用全铁转运蛋白处理后抑制率为(13.02±0.69)%;对肺腺癌细胞的抑制率为(74.30±0.32)%,用全铁转运蛋白处理后抑制率为(96.12±0.43)%;10μg.ml-1顺铂对胚肺成纤维细胞抑制率为(36.50±0.61)%,对肺腺癌细胞抑制率为(92.65±0.56)%。结论青蒿琥酯对肺腺癌细胞具有选择性细胞毒作用,这与肺腺癌细胞高表达转铁蛋白受体和对铁离子高需求有关。     

转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用研究

目的 研究转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性的增效作用,观察药物作用后细胞凋亡情况.方法 采用MTT法检测青蒿琥酯单用或与转铁蛋白合用对鼻咽癌CNE2细胞的增殖抑制作用,DAPI染色观察CNE2细胞凋亡,流式细胞术分析细胞凋亡率变化.结果 青蒿琥酯对CNE2细胞的IC50值为116 μg/mL,青蒿琥酯合用转铁蛋白后IC50值降为17.4μg/mL,DAPI染色显示青蒿琥酯合用转铁蛋白作用CNE2细胞24h后,细胞出现明显凋亡现象,流式细胞分析结果显示,与对照组相比,青蒿琥酯合用转铁蛋白组作用24h后,细胞出现明显凋亡现象,而平行进行的青蒿琥酯100μg/mL,组相同作用时间没有出现凋亡.结论 转铁蛋白对青蒿琥酯体外抗肿瘤活性有较强增效作用,转铁蛋白与青蒿琥酯合用加速了青蒿酯诱导的细胞凋亡,是转铁蛋白增强青蒿琥酯作用的重要机制之一.     

青蒿琥酯联合来那度胺对多发性骨髓瘤耐药细胞株的作用

目的 探讨青蒿琥酯联合来那度胺对多发性骨髓瘤耐药(MM.1R)细胞株增殖的影响并分析其作用机制.方法 实验设4组,空白对照组只加RPMI 1640培养液、来那度胺组加20μmol/L来那度胺、青蒿琥酯组加25μg/mL青蒿琥酯、来那度胺联合青蒿琥酯组加20μmol/L来那度胺浓度和25μg/mL青蒿琥酯浓度,终体积为200μL,分别对MM.1R细胞株处理24和48 h,MTT法检测细胞增殖;Western blot检测来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,MM.1R细胞株NF-κB P65蛋白,Bcl-2家族抗凋亡蛋白Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad,多药耐药基因MDR1蛋白表达产物P-gp的表达水平.结果 来那度胺、青蒿琥酯、来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,各组抑制率分别为15.16%、28.28%、45.98%和17.19%、34.53%、65.16%,与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01),来那度胺联合青蒿琥酯组抑制率高于单药处理组(P<0.05),两药联合有良好的协同效应,两药联合处理48 h抑制率高于24 h,抑制效应呈时间依赖性;来那度胺联合青蒿琥酯处理24和48 h,MM.1R细胞株P-gp、NF-κB P65、Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad表达量均低于对照组(P<0.05),两药联合处理48 h,MM.1R细胞株NF-κB P65、Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad蛋白表达量低于24 h(P<0.05),表现出时间依赖性.结论 青蒿琥酯、来那度胺可抑制耐药MM细胞增殖,两药联合有协同效应,时间依赖性下调NF-κB P65蛋白、Bcl-2家族抗凋亡蛋白Bcl-xl、Mcl-1、p-Bad的表达,降低P-gp表达水平可能为其逆转肿瘤细胞耐药的作用机制.     

青蒿琥酯影响L 929和Colon 26肿瘤细胞免疫抑制的体外研究

目的研究青蒿琥酯对L929和Colon26肿瘤细胞培养上清免疫抑制作用的影响。方法制备体外经青蒿琥酯作用后,彻底洗去青蒿琥酯,再以新鲜培养液培养L929及Colon26,收取再培养上清,同时以不经青蒿琥酯作用的L929及Colon26同步处理的相应上清作对照。实验研究这些上清对小鼠脾细胞MTT法测定的NK杀伤和ConA诱导转化,以及流式细胞计数分析的CD4 及CD8 表达的影响。结果与对照组上清相比,青蒿琥酯作用L929和Colon26后,其第一次(AL1、AC1)及第二次48h再培养上清(AL2、AC2)对ConA诱导小鼠脾细胞转化的抑制率均明显降低(分别为37.50%±6.58%,P<0.01;27.83%±5.50%,P<0.05;48.71%±3.52%,P<0.01;5.48%±1.22%,P<0.01);CD4 CD8-细胞表达百分率均明显升高(分别为15.30%±3.51%,P<0.01;27.68%±2.78%,P<0.05;10.69%±3.42%,P<0.01;28.02%±1.08%,P<0.01);AL1、AL2及AC1上清作用后,NK杀伤活性均明显升高(杀伤率分别为67.58%±4.83%,P<0.01;66.14%±4.10%,P<0.01;57.21%±3.38%,P<0.05),AC2对NK杀伤未产生明显改变(杀伤率为45.42%±8.98%,P>0.05)。结论青蒿琥酯可下调L929及Colon26肿瘤细胞培养上清的免疫抑制,下调肿瘤免疫抑制可能是青蒿琥酯的抗肿瘤新机制之一。     

青蒿琥酯增强顺铂对前列腺癌细胞杀伤活性及作用机制研究

目的观察体外联用青蒿琥酯对顺铂抗前列腺癌活性的影响并研究其机制。方法人前列腺癌细胞系LNCaP分为对照组、青蒿琥酯组、顺铂组、顺铂+青蒿琥酯组、顺铂+青蒿琥酯+MET质粒组。采用噻唑蓝(MTT)法检测前列腺癌细胞系LNCaP的细胞活力抑制率;流式细胞术检测LNCaP细胞的凋亡;Western blot实验检测LNCaP细胞Met表达水平,AKT和Bad磷酸化水平,caspase-9和caspase-3活化水平;免疫共沉淀法检测Bad与Bcl-xl及Bcl-2相互作用。结果顺铂+青蒿琥酯组LNCaP细胞活力抑制率(61.4±4.9)%和凋亡率(34.8±2.9)%均高于顺铂单处理组的细胞活力抑制率(14.7±1.1)%和凋亡率(12.5±1.0)%(P均0.05)。顺铂+青蒿琥酯组LNCaP细胞Met表达水平,AKT和Bad磷酸化水平均低于顺铂组,而顺铂+青蒿琥酯组LNCaP细胞Bad与Bcl-xl及Bcl-2结合水平,caspase-9和caspase-3活化水平均高于顺铂组(P均0.05)。青蒿琥酯发挥对顺铂的辅助治疗作用依赖于Met的抑制,顺铂+青蒿琥酯+Met质粒组LNCaP的细胞活力抑制率(20.3±1.4)%和凋亡率(15.5±1.2)%均低于顺铂+青蒿琥酯组的细胞活力抑制率(61.4±4.9)%和凋亡率(34.8±2.9)%(P均0.05)。结论青蒿琥酯可能通过Met/AKT/Bad途径增强顺铂对前列腺癌细胞的杀伤活性。     

青蒿琥酯联合硼替佐米对T细胞淋巴瘤细胞的抑制作用观察

[目的]观察青蒿琥酯联合硼替佐米对T细胞淋巴瘤细胞的增殖抑制作用.[方法]MTT法观察青蒿琥酯、硼替佐米对Jurkat细胞的增殖抑制效应及协同效应,瑞氏染色油镜下观察细胞形态变化.[结果]青蒿琥酯、硼替佐米都能够明显抑制Jurkat细胞增殖,表现出凋亡形态学改变.以远低于IC50剂量的青蒿琥酯(4μg·mL-1)联合10～320 ng·mL-1硼替佐米作用Jurkat细胞24h,硼替佐米的JC50从(137.64±6.82 )ng· mL-1降为( 17.72±2.75 )ng·mL-1,联合组生长抑制率均显著高于硼替佐米单药组(P＜0.01),药物联合作用均呈协同方式.[结论]青蒿琥酯能协同硼替佐米抑制Jurkat细胞,有望成为有前途的治疗T细胞淋巴瘤方案.     

青蒿琥酯对转化生长因子-β1诱导的原代肺成纤维细胞分化中Notch1信号通路的影响

目的 探讨青蒿琥酯在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的原代肺成纤维细胞分化过程中的作用及其可能机制.方法 采用酶消化法及组织贴块法提取原代肺成纤维细胞,免疫荧光检测Vimentin的表达鉴定细胞;CCK法检测青蒿琥酯半数抑制浓度(IC50),根据IC50选择药物干预浓度.无血清同步化培养细胞分为4组:对照组(无血清培养基);TGF-β1诱导组(TGF-β15 ng/mL);青蒿琥酯干预组(TGF-β1 5 ng/mL+青蒿琥酯8μg/mL);青蒿琥酯对照组(青蒿琥酯8μg/mL).培养24 h后,Masson染色检测细胞及胶原分泌情况,Western blot 检测各组Notch1、Jagged1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达情况.结果 青蒿琥酯作用于TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞24 h的IC50为8.56μg/mL;Masson染色示TGF-β1诱导组胶原的表达明显高于对照组,而青蒿琥酯干预组胶原的表达较TGF-β1诱导组明显减少.在TGF-β1诱导组,与对照组比较,Notch1、Jagged1、α-SMA的表达明显升高(P＜0.05);青蒿琥酯干预组Notch1、Jagged1、α-SMA表达较TGF-β1诱导组均明显减少(P＜0.05).结论 青蒿琥酯能抑制TGF-β1诱导的原代肺成纤维细胞分化过程,其机制可能为抑制Notch信号的表达.     

青蒿琥酯和TRAIL对前列腺癌细胞凋亡诱导作用的实验研究

目的探讨青蒿琥酯和肿瘤坏死因子相关的凋亡诱导配体(TRAIL)对前列腺癌细胞(PC-3、LNCaP)凋亡的诱导作用。方法培养前列腺癌PC-3、LNCaP细胞,分别加入不同浓度的青蒿琥酯和TRAIL,随机分为7个组:对照组、青蒿琥酯Ⅰ组(低剂量组)、青蒿琥酯Ⅱ组(高剂量组)、TRAILⅠ组(低剂量组)、TRAILⅡ组(高剂量组)、TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(1mmol/L)Ⅰ组及TRAIL(1 ng/mL)加青蒿琥酯(5 mmol/L)Ⅱ组。流式细胞仪检测青蒿琥酯和TRAIL诱导前列腺癌细胞凋亡的凋亡率。结果青蒿琥酯和TRAIL均可增加前列腺癌细胞凋亡的凋亡率,二者联合使用诱导的前列腺癌细胞的凋亡率明显高于两种药物单独使用。结论青蒿琥酯与TRAIL联合使用对前列腺癌存在诱导凋亡的协同作用。青蒿琥酯能诱导提高前列腺癌细胞对TRAIL的敏感性,加强TRAIL的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

青蒿琥酯对肺泡上皮细胞TGF-β1/MAPK通路的影响

目的探讨青蒿琥酯在转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的上皮细胞-间质细胞转分化(EMT)过程中的作用及其可能机制。方法体外培养大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测青蒿琥酯半数抑制浓度(IC50),根据IC50选择药物干预浓度。细胞分为6组,对照组,TGF-β13ng/mL组(TGF-β1组),TGF-β13ng/mL+青蒿琥酯1、2、4、8mg/L组(分别为TGF-β1联合1、2、3、4组)。培养24h后,在倒置显微镜下观察细胞形态;收集细胞,提取总蛋白进行Western blot检测各组p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、V-波形蛋白(Vim)的表达情况。结果青蒿琥酯作用于TGF-β1诱导的肺Ⅱ型上皮细胞24h的IC50为8.86mg/L;在TGF-β1作用下,与对照组比较,p38MAPK、α-SMA、Vim蛋白表达增加(P<0.05);在TGF-β1诱导细胞时给予青蒿琥酯作用,p38MAPK、α-SMA、Vim蛋白较TGF-β1组均表达明显减少(P<0.01),且呈浓度依赖性。结论青蒿琥酯能抑制TGF-β1诱导的EMT过程,且呈浓度依赖性。其机制可能为抑制p38MAPK的表达。     

萘酚喹治疗恶性疟与青蒿琥酯的随机比较

为评价萘酚喹治疗恶性疟的疗效,于 1997 年采用磷酸萘酚喹 1 d 疗程总量 1 000 mg 与青蒿琥酯片 5 d 疗程总量 600 mg 各治疗恶性疟 30 例进行随机比较.结果显示:萘酚喹组平均退热时间为(29.6±16.4)h,长于青蒿琥酯片组的(18.3±9.0)h(t=3.25,P＜0.01);平均原虫转阴时间萘酚喹组为(98.4±27.6)h,慢于青蒿琥酯片组(43.0±17.1)h(t=9.46,P＜0.01);追踪观察 28 d,萘酚喹组治愈率为 96.7%,原虫复燃率为 3.3%,分别高于青蒿琥酯片组治愈率的 73.3%,低于青蒿琥酯片组原虫复燃率的 26.7%(χ2=6.40,P＜0.01).两组病例除个别出现恶心外,未见其他副反应.结果表明,磷酸萘酚喹杀灭原虫、控制发热时间较青蒿琥酯慢,但治愈率高于青蒿琥酯.     

青蒿琥酯对胃癌细胞系 HGC27 细胞增殖、凋亡的影响及其机 制简

目的 探讨青蒿琥酯对大胃癌细胞系HGC27细胞增殖、凋亡的影响及其机制.方法 体外培养HGC27细胞,采用不同浓度青蒿琥酯处理24、48、72 h,MTT法测定其对HGC27细胞增殖的影响;倒置显微镜下观察细胞的形态学变化;青蒿琥酯（浓度分别为20、40、80 mg/L）处理HGC27细胞48 h后,分别采用流式细胞仪检测细胞凋亡、分光光度计检测Casepase-3、Caspase-9相对活性、Western blot法检RUNX-3蛋白表达情况.结果 青蒿琥酯（浓度10～100 mg/L）能抑制HGC27细胞的增殖,呈剂量和时间依赖性;倒置显微镜下可观察到典型的细胞凋亡形态.青蒿琥酯（浓度分别为20、40、80 mg/L）作用HGC27细胞48 h后,细胞凋亡率分别为11.5％、21.4％、36.6％,而对照组凋亡率仅为2.2％;处理后Casepase-3相对活性分别为（0.19±0.02）、（0.25±0.04）和（0.31±0.03）,对照组为（0.11±0.02）,Casepase-9相对活性分别为（0.18±0.02）、（0.23±0.03）和（0.30±0.04）,对照组为（0.10±0.02）,与对照组比较,青蒿琥酯处理组Casepase-3、Caspase-9相对活性显著增加,差异均有统计学意义（均P＜0.05）;RUNX-3蛋白表达上调,呈剂量依赖性.结论 青蒿琥酯能抑制HGC27细胞的增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能与增加细胞Casepase-3、Caspase-9活性、上调RUNX-3蛋白的表达有关.青蒿琥酯是一种前景广阔的抗肿瘤药物.     

青蒿琥酯诱导人白血病细胞K562胀亡和凋亡作用的研究

目的:探讨青蒿琥酯(Artesunate,ART)对人慢性粒细胞性白血病细胞株K562增殖抑制的影响.方法:采用MTT比色法检测青蒿琥酯对体外培养的K562细胞的生长抑制作用,光、电镜下观察青蒿琥酯作用后的K562细胞形态学变化特征,流式细胞仪检测在不同浓度、不同时间作用下青蒿琥酯诱导K562细胞的细胞胀亡率和凋亡率.结果:青蒿琥酯对K562细胞有明显的增殖抑制作用,24h、48h、72h的半数抑瘤浓度IC50(μg/ml)分别为65.17、31.63、10.51.青蒿琥酯主要引起K562细胞的胀亡和凋亡变化,但胀亡率与凋亡率尤明显差别.结论:青蒿琥酯主要通过胀亡和凋亡2种方式抑制K562细胞增殖,并呈明显量效时效关系.     

青蒿琥酯逆转K562/A02细胞对阿霉素耐药性机理的研究

目的:研究青蒿琥酯逆转K562/A02细胞对阿霉素的耐药性及其作用机制。方法:以对阿霉素敏感的K562细胞作为对照,用MTT法观察在有或无阿霉素存在条件下青蒿琥酯对培养的K562/A02细胞干预48 h后的生长抑制情况,流式细胞仪检测100μg.m l-1青蒿琥酯作用48 h前后K562/A02细胞P糖蛋白(P-gp)平均荧光强度(MFI)的强弱,生化方法检测100μg.m l-1青蒿琥酯作用48 h前后K562/A02细胞内谷胱甘肽(GSH)的含量。结果:(1)在不含阿霉素情况下,青蒿琥酯对K562及K562/A02细胞的IC50分别为13.80μg.m l-1和13.62μg.m l-1(P>0.05),在阿霉素存在情况下,青蒿琥酯对K562/A02细胞抑制作用明显增加(P<0.01);(2)与K562细胞P-gp的表达相比,K562/A02细胞P-gp高表达,青蒿琥酯处理前后K562/A02细胞的MFI无差别(P>0.05);(3)青蒿琥酯处理后K562/A02细胞内GSH含量较处理前明显下降(P<0.05)。结论:青蒿琥酯对K562及K562/A02细胞具有细胞毒作用,且可逆转K562/A02细胞对阿霉素的耐药,其机制可能是通过干扰细胞内GSH-GSH-s-转移酶系统功能的发挥,而非对P-gp表达的影响。     

青蒿琥酯对K562细胞和脐血CD34+造血干/祖细胞的选择性作用

目的 探讨青蒿琥酯(artesunate, AST)对K562细胞和正常造血干/祖细胞是否具有选择性作用.方法 选用K562细胞及脐血CD34 造血干/祖细胞,加入不同浓度AST.MTT法检测药物对上述两种细胞增殖的影响;甲基纤维素半固体培养法考察AST对其体外扩增和多向分化能力的影响;以流式细胞术Annexin V-FITC-PI双染定量检测细胞凋亡率;Western blot方法检测BCR-ABL融合蛋白的表达.结果 青蒿琥酯对K562细胞有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用(P＜0.01),并存在时效和量效关系,对集落抑制作用明显(P＜0.01).青蒿琥酯在12.5～25 μg/ml作用48 h对脐血CD34 造血干/祖细胞增殖抑制作用和诱导凋亡作用不明显(P＞0.05),对集落生成亦无明显抑制作用(P＞0.05).经青蒿琥酯作用48 h,K562细胞BCR-ABL蛋白以剂量依赖方式被降解(P＜0.01). 结论 青蒿琥酯在一定浓度范围内对K562细胞具有选择性抑制增殖和诱导凋亡的作用,对脐血CD34 造血干/祖细胞影响较小.     

青蒿琥酯协同5-氟尿嘧啶杀伤胰腺癌细胞及机制研究

目的 探讨中药活性成分青蒿琥酯对胰腺癌5-氟尿嘧啶化疗的辅助治疗作用并研究其机制。方法: MTT法检测青蒿琥酯和5-氟尿嘧啶对胰腺癌细胞系Capan-2的杀伤活性。Western blot实验检测Capan-2细胞中survivin的表达水平和细胞色素c、凋亡诱导因子从线粒体中的释放水平。流式细胞术检测Capan-2细胞的线粒体膜电位和凋亡率。结果: 青蒿琥酯对5-氟尿嘧啶有协同作用,青蒿琥酯联合5-氟尿嘧啶组Capan-2的细胞活力抑制率(68.5±5.9)%和凋亡率(37.9±3.2)%显著高于5-氟尿嘧啶单处理组Capan-2的细胞活力抑制率(20.7±2.1)%(P<0.05)和凋亡率(11.3±1.5)%(P<0.05)。青蒿琥酯处理显著抑制Capan-2细胞中survivin的表达。青蒿琥酯联合5-氟尿嘧啶组Capan-2细胞的线粒体膜电位明显低于5-氟尿嘧啶单处理组。青蒿琥酯联合5-氟尿嘧啶组Capan-2细胞的细胞色素和凋亡诱导因子释放水平均明显高于5-氟尿嘧啶单处理组。青蒿琥酯发挥对5-氟尿嘧啶的协同作用依赖于survivin的抑制,青蒿琥酯+5-氟尿嘧啶+survivin质粒组Capan-2的细胞活力抑制率(26.8±2.5)%和凋亡率(14.5±1.7)%显著低于青蒿琥酯+5-氟尿嘧啶组Capan-2的细胞活力抑制率(68.5±5.9)%(P<0.05)和凋亡率(37.9±3.2)%(P<0.05)。结论: 青蒿琥酯抑制survivin的表达发挥对5-氟尿嘧啶的协同抗胰腺癌活性。     

青蒿琥酯对体外瘢痕疙瘩成纤维细胞的抑制作用

目的:探讨青蒿琥酯对瘢痕疙瘩(Keloid)成纤维细胞(Fibroblast,fb)的增殖抑制作用及其作用机制.方法:将60mg/L的青蒿琥酯作用于体外培养的瘢痕疙瘩成纤维细胞24 h,MTT法检测细胞生长抑制率,免疫细胞化学和western blotting法检测分化抑制因子1(Inhibitor of differentiation 1,Id1)的表达情况.结果:在青蒿琥酯的作用下,成纤维细胞的Id1表达降低.结论:青蒿琥酯抑制成纤维细胞的机制可能与抑制Id1的表达有关.     

青蒿琥酯对IgA肾病模型大鼠肾组织MCP-1及其mRNA表达的影响

目的 观察青蒿琥酯对IgA肾病模型大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)及其mRNA表达的影响.方法 40只大鼠随机分为4组,其中一组为正常对照组,另外三组在建立IgA肾病模型后分别为模型对照组、青蒿琥酯小剂量组、青蒿琥酯大剂量组.采用免疫组化和实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测MCP-1的表达.结果 模型对照组的MCP-1 mRNA表达(0.4726±0.086)与正常对照组比较(0.1445±0.095)明显增加(P<0.05),但与模型对照组比较,青蒿琥酯小剂量组(0.2844±0.065)和青蒿琥酯大剂量组(0.2184±0.058)受到抑制(P均<0.05).IgA肾病模型大鼠的血尿、蛋白尿及肾组织病理改变在青蒿琥酯组都有显著改善.结论 青蒿琥酯能够下调肾组织MCP-1的表达,这可能是青蒿琥酯治疗IgA肾病的作用机制之一.     

青蒿琥酯对骨髓瘤 RPMI 8226 细胞增殖、凋亡及对 Survivin、Caspase-3、Caspase-7 的影响

目的 探讨青蒿琥酯对体外培养的人多发性骨髓瘤细胞株 RPMI8226 的增殖、凋亡及对凋亡相关基因 survivin 及 caspase-3、caspase-7 表达的影响。方法 采用 MTT 法检测青蒿琥酯对 RPMI8226 细胞增殖的抑制作用,光镜下观察细胞形态学变化,流式细胞仪分析细胞凋亡率,荧光定量 PCR (FQ-PCR) 检测 survivin 和 caspase-3、caspase-7 mRNA 表达水平变化,Western blotting 检验 Survivin蛋白表达变化,应用 Caspase-3/7 试剂盒检测 Caspase-3、Caspase-7 蛋白活性。结果 青蒿琥酯质量浓度从 2.5 μg/mL 增加至 50 μg/mL 时,青蒿琥酯体外对 RPMI8226 细胞的抑制率由 33.55% 增加到 74.71%。细胞凋亡率呈剂量依赖性增加,50 μg/mL 青蒿琥酯诱导 RPMI8226 细胞最大凋亡率达 (68.1±5.9)%。不同质量浓度青蒿琥酯干预 48 h 后 Survivin mRNA 及蛋白表达水平明显降低,Caspase-3、Caspase-7 mRNA 及蛋白活性明显升高 (P＜0.01)。结论 青蒿琥酯对 RPMI8226 细胞有生长抑制和诱导凋亡作用,其机制可能与增强 Caspase-3、Caspase-7 活性,抑制抗凋亡分子 survivin 表达有关。     

青蒿琥酯对人结肠癌细胞HCT116和HT29的增殖与凋亡

目的:观察青蒿琥酯对人结肠癌细胞HCT116和HT29细胞增殖和凋亡的影响。方法:采用不同浓度青蒿琥酯处理HCT116和HT29细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测青蒿琥酯对人结肠癌细胞的增殖抑制效应,采用流式细胞术检测细胞凋亡的情况。结果:不同浓度青蒿琥酯(7.5、15、30、60、120μg/m L)处理两种人结肠癌细胞48 h后,抑制率随浓度增加呈上升趋势(HCT116:19.42%、24.59%、44.84%、74.15%、92.87%;HT29:11.77%、17.63%、34.23%、48.51%、70.59%)。不同浓度青蒿琥酯(0、60、120μg/m L)处理两种人结肠癌细胞24 h后凋亡率随浓度增加逐渐上升(HCT116:2.46%、51.36%、64.10%;HT29:1.14%、35.95%、43.45%)。结论:青蒿琥酯对人结肠癌CHT116和HT29细胞具有生长抑制和诱导凋亡作用。     

青蒿琥酯对佐剂性关节炎大鼠血清TNF-α及IL-1β含量的影响

目的 观察青蒿琥酯对大鼠佐剂性关节炎(ajuvant arthritis,AA)的治疗作用及其对 AA 大鼠血清 TNF-α、IL-1β含量的影响.方法 选择体重150～180 g 的雄性 Wistar 大鼠,测量双侧足爪容积后,右后足跖部皮内注射完全弗氏佐剂(0.1 mL/只)建立 AA 模型,于造模后第19天,将出现二次反应的大鼠随机分成模型组、青蒿琥酯治疗组80 mg/(kg·d)、雷公藤多苷组8 mg/(kg·d),每组8只;并随机取8只正常 Wistar 大鼠为空白对照组.治疗各组连续灌胃给药14 d.于给药第15天测量各组大鼠足爪容积后采血,放射免疫分析法测量大鼠血清中 TNF-α及 IL-1β含量.结果 (1)青蒿琥酯对大鼠 AA 有显著的治疗作用.给药第15天各组造模侧足爪平均肿胀率(%)分别为:模型组177.00±37.5、青蒿琥酯组68.81±28.19、雷公藤多苷组66.00±30.78、空白对照组27.25±4.20;青蒿琥酯组抑制率为61.1%,雷公藤多苷抑制率为63%.在抑制 AA 大鼠造模侧足爪肿胀方面,青蒿琥酯、雷公藤多苷组和空白对照组与模型组比较差异有统计学意义 (P＜0.05);青蒿琥酯和雷公藤多苷组比较差异无统计学意义(P＞0.05).各组非造模侧平均肿胀度(%)分别为: 模型组83.25±21.47、青蒿琥酯组34.50±10.23、雷公藤多苷组35.97±10.82、空白对照组28.00±7.76,青蒿琥酯组抑制率为58.6%,雷公藤多苷的抑制率为56.8%.在抑制 AA 大鼠非造模侧足爪肿胀方面,青蒿琥酯、雷公藤多苷和空白对照组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05);青蒿琥酯和雷公藤多苷组比较差异无统计学意义(P＞0.05).(2)放射免疫分析法检测大鼠血清 TNF-α、IL-1β含量((x-)±s,ng/mL)分别为: 模型组8.76±2.34、0.10±0.03,空白对照组5.40±1.15、0.05±0.01,青蒿琥酯组5.79±1.56、0.06±0.01,雷公藤多苷组6.16±0.94、0.06±0.02.青蒿琥酯、雷公藤多苷和空白对照组与模型组比较差异有统计学意义(P＜0.05);青蒿琥酯组与雷公多苷组比较差异无统计学意义(P＞0.05),且该两组与空白对照组比较亦差异无统计学意义 (P＞0.05).结论 青蒿琥酯对大鼠 AA 具有良好治疗作用,作用机制与其下调 AA 大鼠外周血 TNF- α、IL-1β水平有关.