肝移植术后HBV再感染患者HBV X区基因变异研究

目的 分析肝移植术后HBV再感染患者血清乙型肝炎病毒(hepatitis B viral,HBV)DNA X区基因的变异情况.方法 选择2002年6月至2003年12月期间因乙肝相关终末期肝病在本院行肝移植手术的320例患者,移植术后患者血清采用聚合酶链反应(PCR)法扩增HBV DNA X区,并做直接测序分析.术后随访1.5～3年.结果 本组11例患者肝移植前、后HBV X区基因序列都有程度不等的点突变(5～39),有6例术前与术后同时具有nt1762(A→T)、ntl764(C→A)变异,11例患者同时存在ntl636～nt1741多处位点变异.结论 HBV DNA X区核苷酸nt1762、nt1764双位点变异在肝移植术后HBV再感染患者中是常见现象,免疫抑制剂不能改变该双位点变异.     

恩替卡韦治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎的疗效观察

目的 探讨恩替卡韦（ETV）治疗不同内生肌酐清除率（Ccr）的乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）患者的疗效及安全性.方法 连续收集2006年7月至2012年1月无锡市第五人民医院的108例HBV-GN患者.根据Ccr将患者分成A组32例（≥80 mL/min）,B组31例（50～＜80 mL/min）,C组25例（30 ～ ＜50 mL/min）,D组20例（＜30 mL/min）.4组均在常规治疗的基础上分别加用ETV 0.5,0.5,0.25和0.15 mg/d治疗,疗程均为52周.采用x2检验或确切概率法比较治疗52周后4组间生化学、病毒学和血清学应答率以及肾功能、Ccr和24 h尿蛋白定量改善情况.结果 治疗52周时,4组患者ALT和HBV DNA水平均较治疗前明显下降（P＜0.05）,且4组间ALT复常率、HBV DNA ＜500拷贝/mL患者的比例,以及HBeAg转阴或血清学转换率比较差异无统计学意义（x2=0.654,1.644和0.094,P＞0.05）.治疗52周时,B、C、D组患者尿素氮（BUN）改善比例分别为32.3％,8.0％和5.0％,血肌酐（Scr）改善比例分别为25.8％,4.0％和0,Ccr改善比例分别为25.8％,4.0％和0,B组与C组、D组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;4组24 h尿蛋白定量较治疗前下降的比例分别为53.1％,41.9％,8.0％和0,A组、B组与C组、D组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.4组患者均未见与服用ETV相关的严重不良反应.结论 ETV治疗可有效改善HBV-GN患者的肝功能,且病毒学和血清学应答情况良好,其中Ccr≥50 mL/min的患者肾功能及24 h尿蛋白定量水平也可获得部分改善.     

乙型肝炎病毒相关性肾炎的中西医结合治疗

乙型肝炎病毒相关性肾炎(HBV-GN)的研究已40余年。其发病机制仍不十分明确,可能与病毒介导的免疫反应有关。HBV－GN诊断标准为：(1)血清HBV抗原阳性;(2)确诊为肾小球肾炎;(3)肾组织中找到HBV抗原,其中(2),(3)为必要条件。在诊断HBV-GN时应注意排除肾组织HBV标志物假阳性;排除HBV肾组织沉积伴发原发性肾炎;注意与狼疮肾炎的鉴别。HBV-GN的肾脏病理以膜性肾病及膜增生性肾炎常见。HBV-GN以肾病综合征及轻微的血尿为主要临床表现。儿童HBV-GN患者的病程多呈自限性,而成人HBV-GN则常呈缓慢进展,常发展为慢性肾功能衰竭。关于HBV-GN治疗的临床报道很多,多为无对照或小样本的回顾性研究,尚无统一的治疗原则可循。抗病毒治疗对HBV-GN有一定疗效,而激素和免疫抑制剂的使用尚存争议。抗病毒药[干扰素或核苷类]＋免疫抑制剂[激素和(或)其他免疫抑制剂]＋中药(辨证施治)的治疗模式,可能是较好的选择。     

不同基因型HBV对药物反应性和S基因突变位点研究

目的分析HBV不同基因型对药物反应性及S基因变异情况。 方法收集遵义医学院附属医院于2016年3月至2017年7月就诊的186例HBV DNA阳性乙型肝炎患者的血清样本,根据是否用药分为治疗组130例和对照组56例,治疗组根据用药不同分为干扰素组、核苷（酸）类似物组、保肝药组和中成药组,分别提取HBV DNA后扩增S基因并测序,结合临床资料分析疗效与基因型相关性。 结果对照组共51例患者扩增出S基因[91.1%（51/56）,其中B基因型30例,C基因型21例],治疗组共有104例患者样本扩增出S基因[80.0%（104/130）,其中B基因型62例,C基因型42例],均以B、C基因型为主。两种基因型对核苷（酸）类似物的反应性（肝功能改变、HBVDNA拷贝数）与未治疗组差异有统计学意义（P < 0.01）。B基因型HBV S基因经核苷（酸）类似物作用后,第597位碱基鸟嘌呤G变为腺嘌呤A即183位苯丙氨酸（Phe/F）突变为缬氨酸（Val/V）,使翻译终止。保肝药和干扰素引起131位鸟嘌呤G突变为腺嘌呤A,进而甘氨酸（Gly/G）变为谷氨酸（Glu/E）,且9和213位氨基酸突变率为100%。C基因型HBV则发生26位胞嘧啶C突变为胸腺嘧啶T,即脯氨酸（P）变为亮氨酸（L）及53位点丝氨酸（Ser/S）突变为亮氨酸L。保肝药物作用主要引起68位点异亮氨酸（Ile/I）突变为苏氨酸（Thr/T）和49位点P变L。干扰素和中成药均可引起225位酪氨酸-异亮氨酸（YI）变为异亮氨酸-组氨酸（IH）和9位氨基酸P变L。 结论不同HBV基因型对药物反应不同,B、C基因型HBV对药物反应可产生相同突变位点。     

乙型肝炎病毒相关性肾炎的相关因素分析

目的 研究乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）的相关因素。 方法 采用回顾性病例对照研究。用Logistic回归对86例HBV-GN患者及135例非HBV-GN慢性HBV感染者进行比较。 结果 单因素分析结果显示,HBV-GN与男性（OR 2.79,95％CI 1.48～5.25,P = 0.001）、HBeAg阳性（OR 2.60,95％CI 1.49～4.53,P = 0.001）、HBV复制（OR 3.63,95％CI 1.80～7.33,P < 0.01）、肝硬化（OR 4.58,95％CI 1.41～14.91,P = 0.011)及谷丙转氨酶（ALT）升高（OR 2.53,95％CI 1.42～4.51,P = 0.002)相关。多因素分析结果显示,HBV-GN与男性（OR 2.21,95%CI 1.12～4.33,P = 0.022）、HBV复制（OR 2.77,95%CI 1.28～5.97,P = 0.01）、肝硬化（OR 4.55,95%CI 1.29～16.10,P = 0.019）及ALT升高（OR 1.96,95%CI 1.04～3.69,P = 0.037）相关。HBV-GN中,与IgA肾病型（HBV-IgAN）比较,单因素分析结果显示,经典型HBV-GN（膜性肾病或膜增生性肾炎型）与男性（OR 5.24,95％CI 1.64～16.81,P = 0.005）、HBV复制（OR 8.02,95％CI 2.15～29.84,P = 0.002）及ALT升高（OR 3.10,95％CI 1.00～9.67,P = 0.051）相关;多因素分析结果显示,仅与男性（OR 6.51,95%CI 1.76～24.11,P = 0.005）及HBV复制（OR 7.22,95%CI 1.68～30.97,P = 0.008）相关。结论 男性、HBV复制、肝硬化及ALT升高都可能是HBV-GN的易患因素。与HBV-IgAN比较,经典型HBV-GN与病毒复制及男性更相关,两者可能有不同的病理机制。     

The effect of hepatitis B vaccination on the incidence of childhood HBV-associated nephritis

The aim of the present study was to investigate the effect of a vaccination program for hepatitis B virus (HBV) on the incidence of HBV-associated glomerulonephritis (HBV-GN). In total, 727 renal biopsies were carried out at our hospital from November 1979 through March 2002. Two groups were established. Group A included those biopsied from November 1979 through December 1991 (prior to the HBV vaccination program) and group B from January 1992 through March 2002. Group B was divided into five subgroups (B₁ to B₅), with an interval of 2 years between each subgroup. Patients were divided into those with or without a history of HBV vaccination. Of the 727 renal biopsies, 64 fulfilled the criteria of HBV-GN, There were 28 cases of the 211 cases in group A and 36 cases of the 516 cases in group B (X ²=7.397,P<0.01). The incidence in group A and group B₁ through B₅ was 13.27% (28/211), 13.04% (9/69), 7.32 (6/82), 6.25% (4/64), 4.88% (4/82), and 5.94% (13/219), respectively (X ²=9.627, P<0.01). Only 8 of the 231 vaccinated children had HBV-GN, while there were 48 HBV-GN cases of the 381 non-vaccinated children (X ²=14.44, P<0.001). There were only 6 cases of membranous nephropathy (MN) in the vaccinated group, while 40 cases of MN occurred in the non-vaccinated group (X ²=12.92, P<0.01). There were 8 children that developed HBV-GN with abnormal serum HBV markers despite HBV vaccination. Two mothers of these 8 children had evidence of HBV infection. The incidence of HBV-GN in children has been decreasing each year since the implementation of the nationwide HBV vaccination program in Shanghai, China. Furthermore, since childhood MN is associated with HBV, vaccination can also reduce the incidence of childhood MN.     

乙型肝炎病毒相关性肾炎的诊治——附20例报告

目的总结乙型肝炎病毒相关性肾炎（HBV-GN）患者的临床及病理特点,以提高HBV-GN的诊治水平。方法经肾活检确诊为HBV-GN的患者20例,回顾性分析患者临床表现、实验室检查（尿常规、24h尿蛋白定量、转氨酶、血清清蛋白、HBV-DNA等）、肾组织光镜改变及免疫荧光（IgG、IgA、IgM、C3、C1q、FRA、HBsAg、HBcAg、HBeAg）染色结果,并分析其临床及病理特点。结果本组20例,其中肾病综合征10例,肾炎综合征9例,无症状镜下血尿1例。病理分型以非典型膜性肾病最多见（MN）,共16例（占78％）,系膜增生性肾小球肾炎（MsPGN）2例（占10％）,系膜毛细血管性肾炎（MPGN）2例（占10％）。7例患者HBV-DNA阴性。给予抗病毒联合激素治疗后,大多数患者肾功能稳定。结论目前HBV-GN的确诊仍依赖肾活检,在乙型肝炎高发区应常规进行肾活检组织乙型肝炎病毒标志物检测。     

拉米夫定耐药慢性乙型肝炎患者的HBV逆转酶区突变模式

目的研究慢性乙型肝炎患者在拉米夫定（LAM）治疗过程中出现耐药后,HBV逆转录酶区基因的突变模式及临床特征。方法采用巢式PCR方法对2007年4月至2010年12月于沈阳市第六人民医院肝病门诊或住院诊治的共260例慢性乙型肝炎LAM耐药患者的HBV聚合酶基因逆转录酶区进行扩增,对PCR产物进行直接测序,回顾性分析LAM耐药时HBV聚合酶基因的不同突变模式及患者的临床特征。结果260例患者诊断为LAM耐药,215例患者检测到LAM相关的HBV聚合酶基因突变。患者血清HBVDNA为（5．41±1．29）log10拷贝／ml。98．1％（211／215）患者存在YMDD基序突变。其中3种主要突变类型分别为：单位点rtM204I突变占40．0％（86／215）;rtL180M＋rtM204V占37．2％（80／215）;rtL180M＋rtM204I占13．0％（28／215）。与rtM2041相比,rtM204V多以联合rtL180M突变的形式存在（P〈0．05）。LAM耐药时,单位点突变与联合突变类型患者的血清HBVDNA、ALT、年龄、HBeAgFH性与阴性,肝硬化与慢性乙型肝炎差异均无统计学意义（P〉0．05）。测出基因突变患者与伴生化学突破患者HBVDNA载量较高（P〈0．05）。结论YMDD基序突变是LAM耐药后HBV聚合酶基因突变的主要模式,LAM耐药后患者临床病情轻重可能与HBV聚合酶基因突变类型无关。     

乙肝免疫球蛋白预防乙肝相关肝癌患者术后病毒再激活的效果研究

目的 前瞻性评估乙肝免疫球蛋白（HBIg）预防乙肝相关肝癌患者术后HBV再激活的效果。方法 纳入2014 年6 月至10 月在复旦大学附属中山医院诊断为原发性肝癌且血清乙肝表面抗原（HBsAg）阳性的患者51 例,按照治疗方法不同分为2 组,其中治疗组38 例,为血清HBV-DNA阳性患者,术前予以HBIg治疗;对照组13例,为血清HBV-DNA阴性患者。分析比较两组患者术后病毒激活率和HBIg有效率。结果 HBIg治疗组术后病毒激活率明显低于对照组（7.9% vs 53.8%,P=0.001）。Logistic回归分析表明,未予HBIg治疗是术后病毒激活的独立危险因素（OR 64.167,95%CI 9.472～434.696,P＜0.001）。治疗组中合并谷丙转氨酶（ALT）异常的患者术后病毒激活率高于ALT正常者,但无统计学差异（15.4% vs 4.0%,P=0.55）。治疗组中HBIg总体有效率为34.2%,其中合并ALT异常者有效率高于ALT正常者（61.5% vs 20.0%,P=0.011）。另外,长期使用核苷类似物（NAs）的患者术后病毒激活率与未使用者无统计学差异（P＞0.05）。结论 HBIg可有效预防乙肝相关肝癌患者术后HBV再激活,且在伴有ALT水平异常的患者中治疗效果更好。     

In situ hybridization of hepatitis B DNA in hepatitis B-associated glomerulonephritis

Renal tissues from 43 of 49 children with hepatitis B virus-associated glomerulonephritis (HBV-GN) were examined for HBV DNA by in situ hybridization (ISH) assay within the last 10 years. HBV DNA was identified in 41 of the 43 cases (95.3%). HBV DNA was distributed generally in the nucleus and cytoplasm of epithelial cells and mesangial cells of glomeruli, and epithelial cells of renal tubules. HBV DNA also existed simultaneously in renal interstitial tissues in some of these cases. The positive results from HBV DNA ISH correlated well with HBV antigen assays. The analyses implied that the more extensive the existence of HBV DNA in the nephron unit and interstitial tissue, the more severe the clinical manifestation. The duration of proteinuria in cases with HBV DNA in renal tubules was much longer than in those with no HBV DNA in renal tubules. The persistence of the HBV genome or genes in the kidney could lead to the expression of viral antigens in renal tissues and might cause cellular pathological alteration. This would support utilization of antiviral therapy, such as cytokines, in the treatment of HBV-GN. Received December 10, 1996; received in revised form March 7, 1997; accepted July 30, 1997     

PreS/S基因变异乙型肝炎病毒隐匿感染及其对严重肝功能损伤的影响

目的分析隐匿性乙型肝炎病毒感染（OBI）患者的HBV preS/S基因突变,探讨其对严重肝功能损伤进展的影响。 方法收集于广州市番禺区市桥医院体检、门诊及住院的HBsAg阴性患者共689例,对其血清样本进行荧光定量PCR扩增,共检出76例OBI患者作为研究组,另外选取HBsAg阳性患者87例作为对照组。对两组患者血清样本进行preS/S区基因测序,统计HBcAb、HBeAb、HBeAg、HBcAb/HBsAb阳性检出率,比较两组患者HBV DNA载量和preS/S区各基因突变频率。 结果研究组76例OBI患者标本中HBcAb、HBeAb、HBeAg、HBcAb/HBsAb阳性者分别为14例（18.42%）、9例（11.84%）、27例（35.53%）和26例（34.21%）;preS/S区检出基因型B型患者11例（14.5%）,C型患者65例（85.5%）。对照组标本S区检出B型患者19例（21.8%）,C型患者68例（78.2%）,两组患者均未检出D型HBV,基因型差异无统计学意义（χ² = 1.794、P = 0.180）。研究组患者HBV DNA载量为76～1 989 IU/ml（中位数为186.6 IU/ml）,显著低于对照组[573.7（108～5 689）IU/ml],差异有统计学意义（Z = 25.775、P < 0.001）。研究组OBI伴严重肝损伤（ALT ≥ 120 U/L）患者HBV DNA载量为76～1 989 IU/ml（中位数为193 IU/ml）,显著高于该组中无严重肝功能损伤者[178.6（77～1 325）IU/ml],差异有统计学意义（Z = 14.638、P < 0.001）,但显著低于对照组伴严重肝功能功能损伤患者[623.7（217～5 689）IU/ml],差异有统计学意义（Z = 21.396、P < 0.001）。研究组患者preS/S区G185R、T118R/K/A/M、L175S、I126s及preS缺失突变频率均显著高于对照组（P均< 0.05）;研究组OBI伴严重肝功能损伤患者中I126S突变频率稍低于该组中无严重肝功能损伤患者,但差异无统计学意义（χ² = 0.508、P = 0.476）;G185R、T118R/K/A/M、L175S及preS缺失则显著高于该组中无严重肝功能损伤患者（P均< 0.05）。研究组OBI伴严重肝功能损伤患者的I126s稍高于对照组伴严重肝功能损伤者,但差异无统计学意义（χ² = 3.287、P = 0.070）;而G185R、T118R/K/A/M、L175S及preS缺失突变频率则显著高于对照组中伴严重肝功能损伤患者（P均< 0.05）。 结论OBI患者中以HBeAg、HBcAb/HBsAb阳性检出者居多,突变基因型与HBsAg阳性基本一致。但OBI患者与HBsAg阳性患者HBV DNA载量以及基因突变存在较大差异,G185R、T118R/K/A/M、L175S及preS缺失突变可能是OBI患者发生严重肝功能损伤的重要检测指标。     

肝细胞癌与乙型肝炎病毒基因变异关系研究进展

乙型肝炎病毒(HBV)是肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)的主要病因,研究发现HBV基因变异与HCC的发生过程关系密切.本文从病因学方面对乙型肝炎病毒致肝癌的主要机制作一综述.HBV基因有4个开放读码区(S、C、P、X区),主要通过点突变、插入、截短变异等方式与HCC发生相关.     

恩替卡韦联合介入治疗乙型肝炎相关原发性肝癌的临床研究

目的：探讨恩替卡韦联合介入方法治疗乙型肝炎相关原发性肝癌（HBVR-HCC）的临床疗效。 方法：选择2007年2月—2011年2月85例确诊为HBVR-HCC、没有手术治疗适应证的患者,其中44例采用恩替卡韦联合肝动脉段性化疗栓塞（TACE）治疗（观察组）,41例单纯采用TACE治疗（对照组）,分析两组治疗前和治疗后4、12、24、48周HBV-DNA水平、肝功能、AFP水平和Child-Pugh评分,并比较两组的临床疗效、不良反应以及生存状况。 结果：随治疗时间延长,观察组HBV-DNA水平逐渐降低,而对照组逐渐升高,两组差异在治疗后各时间点均有统计学意义（均P<0.05）;两组谷丙转氨酶（ALT）与AFP水平、逐渐降低,但观察组在治疗24周后的降低程度明显优于对照组（均P<0.05）;两组Child-Pugh评分逐渐升高,但观察组在治疗24周后的升高程度低于对照组（P<0.05）。观察组HCC的治疗有效率明显高于对照组,并发症和不良反应均明显低于对照组（均P<0.05）。两组的1年生存率的差异无统计学意义（P>0.05）,但观察组2年生存率和中位生存期优于对照组（均P<0.05）。 结论：TACE对HBV活动存在激发作用,抗病毒联合TACE治疗HBVR-HCC可有效控制HBV,改善患者的肝功能,提高临床疗效,且不增加毒副作用。     

乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎39例临床与病理分析

目的探讨活动性及非活动性乙型肝炎病毒相关性肾小球肾炎（HBV-GN）的临床和病理特点。方法收集本院2004年1月至2010年7月经肾活检确诊的39例HBV-GN患者的临床和病理资料,比较HBV感染活动组与非活动组的临床及病理特点。结果（1）活动组循环补体4（CA）低于非活动组（P〈0．05）,肾组织C1q检出率高于非活动组（P〈0．05）,IgG、IgM、C3、Clq、HBV核心抗原（HBcAg）平均荧光沉积程度高于非活动组。（2）非活动组肾功能异常的发生率较活动组有升高趋势,且。肾脏病变程度较重（P〈O．05）。结论HBV感染活动组肾脏病理改变相对较轻,其发生可能与补体的参与及免疫球蛋白沉积增加有关。非活动组病理改变较重,且肾功能异常发生率较高。     

血清 HBV DNA 定量与 HBV 相关性肾炎患者临床病理特征及预后的相关性

目的：探讨HBV相关性肾炎（ HBV-GN）患者血清HBV DNA复制水平与临床病理特征及预后的相关性。方法选取2009年1月至2012年10月在青岛大学附属医院接受治疗的HBV-GN患者102例。采用荧光定量聚合酶链反应法测定所有患者血清HBV DNA载量,并依此将患者分为HBV DNA低度复制组（ HBV DNA＜103拷贝／mL）、HBV DNA中度复制组（103拷贝／mL≤HBV DNA≤105拷贝／mL）和HBV DNA高度复制组（ HBV DNA﹥105拷贝／mL）。所有患者行肾脏穿刺活检,明确病理类型,并进行肾脏组织中HBV相关抗原（ HBsAg、HBcAg及HBeAg）的免疫荧光定量检测。所有患者均接受拉米夫定（100 mg／d）联合阿德福韦酯（10 mg／d）治疗,随访观察18个月,并对各组患者治疗前后的肾功能和生化免疫学指标进行比较。采用One-way ANOVA单因素方差分析比较不同HBV DNA复制水平的患者肾功能、生化免疫学指标、肾脏组织中HBV相关抗原沉积的差异,并采用Spearman相关分析法分析血清HBV DNA水平与肾脏病理分期的相关性。结果102例患者中, HBV DNA低度复制组20例,HBV DNA中度复制组51例,HBV DNA高度复制组31例。随着血清HBV DNA复制水平的增高,患者24 h尿蛋白定量、胆固醇及三酰甘油呈现不同程度的增加（ F＝34.64,40.10和31.72,P＜0.01）,血浆白蛋白降低（F＝24.04,P ＜0.01）;肾脏组织中 HBV 抗原（HBsAg、HBcAg及HBeAg）免疫复合物的沉积增加（F＝41.49,15.64和10.41,P＜0.01）。对78例膜性肾病（MN）患者分析发现,随着血清HBV DNA复制的增加,HBV-MN患者病理分期加重（r＝0.38, P＜0.01）。抗病毒治疗后,各组24 h尿蛋白排泄量较治疗前均显著下降（ t＝7.86,19.28和16.74, P＜0.01）;补体C3较治疗前上升,但与治疗前比较差异无统计学意义（t＝1.05,1.04和1.94,P＞0.05）;血肌酐较治疗前无明显变化（ t＝0.14,0.52和0.57,P＞0.05）。治?     

拉米夫定耐药乙型肝炎患者HBV多聚酶区基因突变的检测

目的:探讨拉米夫定(LAM)耐药乙型肝炎患者的乙肝病毒(HBV)多聚酶区基因突变特点。方法:收集94例接受LAM治疗且耐药的慢性乙型肝炎患者和50例非耐药的患者的血清,采用PCR产物直接测序法检测HBV多聚酶区序列耐药变异。结果:94例诊断为耐药的患者中,80例患者检测到LAM相关的HBV多聚酶区基因突变,其中单位点rtM204I突变占30.0%(24/80),rtLl80M+rtM204V为25.0%(20/80),rtLl80M+rtM204I为22.5%(18/80),rtVl73L+rtV180M+rtM204V为8.8%(7/80),而50例非耐药的患者中只有2例HBV多聚酶区基因突变。结论:LAM耐药相关的HBV聚合酶基因突变类型复杂多样,需要对多个相关位点进行检测,以便尽早发现耐药毒株,调整治疗方案。     

阿德福韦酯耐药慢性乙型肝炎患者HBsAg变异分析

目的探讨阿德福韦酯耐药慢性乙型肝炎患者相关S抗原变异、疫苗逃逸相关变异以及部分已知特异性T细胞表位变异情况。 方法收集2007年12月至2011年9月于首都医科大学附属北京地坛医院收治的阿德福韦酯治疗失败的慢性乙型肝炎患者70例,并随机选择ADV治疗非耐药患者70例作为对照。采用PCR产物直接测序法获得患者HBV反转录酶区与S抗原序列。应用PCR产物直接测序法与焦磷酸测序法明确阿德福韦酯耐药情况。比较阿德福韦酯耐药患者与无阿德福韦酯耐药患者耐药相关S抗原变异、疫苗逃逸相关变异以及HBV特异性T细胞表位变异情况。 结果ADV耐药组与对照组患者人口学等指标差异无统计学意义。本组患者中42例rtA181T耐药变异关联的HBsAg变异均为sW172^*。在rtA181T/ sW172^*变异患者体内,该变异株在病毒准种中所占平均比率为（42.6 ± 22.1）%（12.2%~100%）。与非ADV耐药组患者相比,ADV耐药组患者发生HBsAg疫苗逃逸变异（χ² = 12.8736、P = 0.0003）以及T细胞抗原表位变异（χ² = 4.8344、P = 0.0279）几率显著升高。 结论我国ADV耐药患者rtA181T变异关联的HBsAg变异主要为sW172^*变异,HBsAg抗原疫苗逃逸变异以及T细胞抗原表位变异与ADV耐药相互影响,相关机制尚待进一步研究。     

慢性HBV感染者TNFα-308位点多态性与HBV C基因区突变的关系

目的 研究慢性乙型肝炎病毒（HBV）感染者肿瘤坏死因子α（TNFα）-308位点的基因多态性与HBV C基因区突变的关系.方法 对95例慢性HBV感染者进行研究,采用聚合酶链反应.限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）技术分析患者TNFα-308位点的多态性.对PCR产物直接测序,检测HBV C基因区nt1762/1764、nt1896、nt1899、nt1862、aa60、as87及aa97位点是否存在突变.采用Fisher＇s精确概率法比较TNFα-308位点不同基因型患者HBV C基因区常见突变的检出率.结果 TNFα-308位点共发现3种多态性,分别为G/G型63例（63/95,66.3%）,G/A型28例（28/95,29.5%）,A/A型4例（4/95,4.2%）.TNFα-308位点G/G、G/A、A/A基因型患者HBV C基因区aa87位点及as97位点突变型检出率均分别为39.3%（24/61）、11.5%（3/26）和50.0%（2/4）,差异有统计学意义（F=7.658,P〈0.05）;而nt1762/1764、nt1896、nt1899、nt1862以及aa60位点突变型检出率比较差异无统计学意义（F值分别为0.669、1.542、1.123、2.420和0.966,P值均〉0.05）.结论 慢性HBV感染者TNFα-308位点G/A基因型相对于G/G基因型不易发生HBV抗原性变异,有利于HBV的清除.     

耐阿德福韦酯乙型肝炎病毒多聚酶区基因突变模式与病毒B、C基因型相关性分析

目的分析耐阿德福韦酯（ADV）慢性乙型肝炎（CHB）患者中HBV多聚酶区基因突变模式及基因型的关系。方法选取2010年2月-2012年5月宁波市第二医院住院及门诊114例ADV耐药的CHB患者,采用实时荧光定量PCR方法对患者血清HBV多聚酶区进行扩增,对PCR产物进行直接测序比对。正态分布的计量资料以x±s表示,非正态分布数据用M（P25-P25）表示,经过数据转换方差齐的采用方差分析和LSD-t检验。结果114例CHB患者的基因突变模式为8种,以rtA181V／T／S（57．89％）、rtN236T（14．91％）和rtA181V／T／s＋N236T（9．65％）突变为主,其中单独突变102例（89．47％）,联合突变12例（10．53％）。114例患者B基因和C基因分别为21例（18．42％）和93例（81．58％）,B基因以rtN236T突变模式为主,占47．62％（10／21）;C基因以rtA181V／T／s突变模式为主,占65．59％（61／93）;HBVB基因和C基因rtA181V／T／S和rtN236T突变模式比较差异均有统计学意义（χ2=12．269和18．658,P〈0．01）。结论耐ADV的CHB患者血清HBV多聚酶区基因突变以rtA181V／T／S、rtN236T和rtA181V／T／S＋N236T为主,且不同基因突变模式与基因型有关。     

68例伴有肾组织乙肝病毒抗原沉积的肾炎患者临床和病理分析

目的：探讨血清乙肝病毒（HBV）标志物与肾组织HBV抗原沉积、肾病理之间的关系，了解乙肝病毒相关性肾炎（HBV—GN）的临床和病理特点。方法：收集成人肾组织中检测到HBsAg和／或HBcAg沉积的肾炎患者68例（以下称沉积阳性组）。随机抽取同期肾穿合并有慢性乙型肝炎但肾组织中不伴HBsAg和／或HBcAg沉积的肾炎患者24例作为对照组（以下称沉积阴性组）。两组均采用间接免疫荧光法检测肾活检组织冰冻切片中HBsAg和HBcAg，荧光定量PCR法检测血清HBV—DNA水平。结果：（1）两组患者在血压、血尿和蛋白尿程度以及肾功能水平均无统计学差异；（2）沉积阳性组肾病理以IgA肾病（IgAN，占51．5％）和不典型膜性肾病（MN，占38．2％）为主；沉积阴性组则以系膜增生性肾炎（MsPGN，占50％）为主；（3）68例患者中13例血清HBV标志物阴性或仅有HBsAb阳性，血HBV—DNA病毒载量〈100拷贝／ml的患者肾组织中检测到HBsAg和俄HBcAg沉积，且免疫荧光显示免疫球蛋白和补体沉积均在3种以上，满堂亮者7例（53．8％）：光镜显示不典型MN9例（69．2％），IgAN3例，MPGN1例。结论：对于成年人依据临床难作出HBV—GN诊断。成人HBV—GN病理表现具有多样性，以IgAN和不典型MN为主，其次为MPGN和MsPGN，FSGS少见；肾组织HBV抗原沉积现象可以出现在血清HBV标志物阴性或仅HBsAb阳性的患者，提示应重视肾组织HBV抗原检测，尽可能降低HBV—GN的漏诊率，尤其是血清HBV标志物阴性的患者。