五味子乙素对人卵巢癌Skov3细胞株的增殖、凋亡及Wnt／β-catenin信号通路的影响

目的 探讨五味子乙素（Sch B）对人卵巢癌Skov3细胞株的增殖、凋亡及Wnt／β-catenin信号通路的影响。方法 采用0、1.0、10.0、20.0、50.0μmol／L Sch B处理Skov3细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测各浓度处理24、48、72和96h的增殖抑制率,Annexin-FITC／PI双染法检测不同浓度处理48h后的细胞凋亡情况,流式细胞仪检测各浓度处理48h后的细胞周期分布情况,Western blotting检测各浓度处理48h后细胞核Wnt／β-catenin信号通路中β-连接素（β-catenin）及下游靶分子C-myc、细胞周期素D1（Cyclin D1）的蛋白水平,同时于各浓度处理48h后检测细胞质和细胞核的糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）活性。结果 Sch B可呈剂量和时间依赖方式增加细胞增殖抑制率（P＜0.05）,作用48h后可呈剂量依赖方式升高早、晚期凋亡率及细胞质／胞核GSK-3β活性（P＜0.05）;除1.0μmol／L外,其余浓度作用48h的G0／G1期细胞比例均高于0μmol／L,S期、G2／M期细胞比例及β-catenin、C-myc和Cyclin D1蛋白水平均低于0μmol／L（P＜0.05）,且10.0、20.0、50.0μmol／L Sch B间的差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 Sch B可以抑制Skov3细胞株的增殖并促进其凋亡和细胞周期阻滞,以及抑制Wnt／β-catenin通路的激活。     

苯丁酸钠对人肝癌HepG2.2.15细胞凋亡及乙型肝炎病毒指标的影响

目的 探讨苯丁酸钠（SPB）对人肝癌HepG2.2.15细胞凋亡及乙型肝炎病毒指标HBsAg、HBeAg表达和HBV-DNA含量的影响。方法 采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）测定不同浓度（1.0、2.0、4.0、8.0μmol/L）SPB处理24、48h的HepG2.2.15细胞的增殖情况;采用流式细胞术分析（2.0、4. 0μmol/L）SPB处理24、48h的HepG2.2.15细胞的凋亡率和细胞周期;采用化学发光法检测8.0μmol／L SPB处理72h的HepG2.2.15细胞的上清液中HBsAg和HBeAg含量,RT-PCR法检测该上清液中HBV-DNA水平。结果SPB能够以时间和剂量依赖方式升高HepG2.2.15细胞的增殖抑制率（P＜0.05）,其作用24、48h HepG2.2.15细胞的早期和晚期凋亡率、G0/G1细胞比例均高于对照组,S期细胞比例低于对照组（P＜0.05）;同一浓度下,SPB处理48h HepG2.2.15细胞凋亡率均高于24h（P＜0.05）。8.0μmol/L SPB处理72h,HepG2.2.15细胞的上清液中HBsAg、HBeAg含量及HBV-DNA水平分别为40.22±1.57、69.46±1.75和9.34±0.54,均高于对照组的18.33±0.58、34.92±1.26和5.52±0.45,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论SPB对人肝癌HepG2.2.15细胞有诱导分化和促进凋亡的作用,并能刺激乙型肝炎病毒的复制,因此在乙型肝炎病毒指标阳性的肝癌患者中临床上应慎用,必要时与抗乙型肝炎病毒药物联合应用。     

PI3K／Akt／mTOR在表阿霉素抑制Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用

目的 探讨PI3K／Akt／mTOR信号通路在表阿霉素抑制人T细胞淋巴瘤细胞株Jurkat细胞增殖和诱导凋亡中的作用。方法 用0、1.25、2.5、5、10μmol／L表阿霉素和0、0.25、0.5、1、2μmol／L PI3K／mTOR双重抑制剂（NVP-BEZ235）对Jurkat细胞作用48h后,CCK-8试剂盒检测Jurkat细胞株增殖抑制情况;采用AnnexinⅤ／PE双染法流式细胞术检测上述药物作用Jurkat细胞48h的凋亡率以及5μmol／L表阿霉素和2μmol／L NVP BEZ235单独及联合作用Jurkat细胞0、12、24、36、48h的凋亡率;Western blotting法检测5、10μmol/L的表阿霉素作用Jurkat细胞0、6、12、24、48h,以及5μmol/L表阿霉素与2μmol/L NVP BEZ235单独及联合作用Jurkat细胞24、48h的PI3K／Akt／mTOR信号通路中Akt、mTOR、p70s6k等表达变化。结果 表阿霉素能够抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡,且凋亡作用呈浓度依赖性,5μmol／L表阿霉素作用Jurkat细胞48h的凋亡率为57.72％。在表阿霉素诱导Jurkat细胞凋亡过程中伴随Akt、mTOR、p70s6k的表达变化, NVP-BEZ235能够降低Jurkat细胞Akt、p70s6k的磷酸化水平,显著提高表阿霉素诱导Jurkat细胞凋亡的作用,5μmol／L表阿霉素和2μmol／L NVP-BEZ235联合作用Jurkat细胞48h的凋亡率达78.31％,明显高于5μmol／L表阿霉素的57.72％。结论 表阿霉素抑制Jurkat细胞增殖和诱导凋亡与PI3K／Akt／mTOR信号通路有关,当该通路抑制剂与表阿霉素联用时,Jurkat细胞对于表阿霉素敏感性有一定程度的提高。     

苦参碱对人类肝癌细胞HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响

 目的　探讨苦参碱（MT）对人类肝癌细胞株HepG2增殖、细胞周期及凋亡的影响。方法　用不同质量浓度的MT（0.0125、0.025、0.05、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6 g／L）对培养的HepG2细胞作用不同时间（24、48、72 h）,用四氮噻唑蓝（MTT） 比色法检测MT对细胞增殖的影响;流式细胞术（FCM）检测MT对HepG2细胞周期及凋亡的影响。结果　质量浓度≥0.1 g／L的MT有抑制HepG2细胞增殖的作用,且作用随药物质量浓度的增加及时间的延长而加强（P＜0.01）。FCM检测分析显示,0.8 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G1期[（75.3±6.5）%对（64.1±6.3）%]（P＜0.05）,1.6 g／L MT作用48 h能将HepG2细胞阻滞在G2期[（29.1±9.1）%对（11.6±2.1）%]（P＜0.01）。0.4、0.8、1.6 g／L MT作用12、24、48 h对HepG2细胞都有诱导凋亡作用,且作用随药物质量浓度的增加及作用时间的延长而加强（P＜0.01）。结论　MT能够抑制HepG2细胞的增殖、诱导其凋亡并影响其细胞周期,呈时间和剂量依赖性。MT抗肝癌的机制可能与影响肝癌细胞周期、抑制细胞增殖及诱导凋亡有关。     

醉茄素A对非小细胞肺癌A549细胞增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响

目的 探讨醉茄素A（WFA） 对非小细胞肺癌（NSCLC）A549细胞增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响。方法 采用0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol／L WFA 处理A549细胞,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测上述浓度处理24、48、72和96h的细胞增殖抑制率,Hoechst染色和磷酯酰丝氨酸结合蛋白 异硫氢酸荧光素／碘化丙啶双染法（Annexin V-FITC／PI）检测各浓度组48h的细胞凋亡情况,流式细胞仪检测各浓度组48h的细胞周期分布情况,免疫印迹检测各浓度组48h凋亡相关基因（Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3）和PI3K／Akt信号通路重要蛋白Akt及其磷酸化形式p-Akt的蛋白水平。结果 WFA 可抑制细胞增殖,并呈剂量和时间依赖性（P＜0.05）;0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol／L WFA作用48h后A549细胞的凋亡指数分别为2.75±0.64、4.61±1.36、9.75±2.78、12.92±3.42和18.68±4.31,组间差异有统计学意义（P＜0.05）。除2.5μmol／L外,其余浓度组的早、晚期凋亡率、凋亡促进基因（Bax和Cleaved caspase-3）水平及G0／G1期细胞比例均高于0μmol／L,凋亡抑制基因Bcl-2水平及S期和G2／M期细胞比例均低于0μmol／L（P＜0.05）; 2.5、5.0、10.0、20.0μmol／L的组间差异有统计学意义（P＜0.05）。随着浓度升高,p-Akt／Akt值呈降低趋势,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 WFA能够抑制A549细胞的增殖及凋亡,可能通过抑制PI3K／Akt通路激活实现。     

去甲斑蝥素对白血病细胞系K562的增殖、凋亡、细胞周期及NF-κB活性的影响

目的 探讨去甲斑蝥素（NCTD）对白血病细胞系K562的增殖、凋亡、细胞周期及核因子（NF）-κB活性的影响。方法 采用CCK-8试剂盒检测不同浓度NCTD（0、10、25、50、100 μmol／L）处理K562细胞24、48、72、96 h后的增殖抑制率,采用流式细胞术检测不同浓度NCTD处理24、48 h后的细胞凋亡率和处理48 h后的细胞周期,采用原位细胞凋亡检测试剂盒（Tunnel）检测不同浓度NCTD处理24、48 h后的细胞凋亡指数,采用Western blotting检测不同浓度NCTD处理48 h后的NF-κB p65及IκB α水平以评价NF-κB活性的变化。结果 在10～100 μmol／L范围内,NCTD可呈时间和浓度依赖的方式升高K562细胞的增殖抑制率,各浓度间的差异有统计学意义（P＜0.05）;与0 μmol／L相比,其余各浓度处理24、48 h后的凋亡率和凋亡指数均升高,处理48 h后的G0／G1期细胞比例升高,S、G2／M期细胞比例均降低,NF-κB p65水平降低,IκB-α水平升高,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 NCTD对白血病细胞系K562有细胞毒性,可抑制该细胞的增殖、诱导其凋亡及细胞周期阻滞并下调NF-κB表达。     

BRD4抑制剂对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡和侵袭的影响

目的 探讨溴结构域蛋白4（BRD4）抑制剂GSK525762A对鼻咽癌CNE-2细胞增殖、凋亡及侵袭的影响。方法 0、0.1、1、10、100 μmol／L GSK525762A 处理鼻咽癌CNE-2细胞 24、48、72和96 h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测细胞增殖抑制率变化,同时采用流式细胞术Annexin V-FITC／PI双染法检测不同浓度GSK525762A处理48、96 h后的CNE-2细胞凋亡情况,Transwell法检测不同浓度GSK525762A处理48、96 h后的CNE-2细胞侵袭能力,实时定量PCR检测不同浓度GSK525762A 处理48、96 h后凋亡相关基因的表达情况。结果 GSK525762A对CNE-2细胞增殖有抑制作用,增殖抑制率呈时间和浓度依赖性,差异有统计学意义（P＜0.05）;GSK525762A处理后的细胞早期、晚期及总凋亡率升高,均高于0 μmol／L,凋亡率随浓度升高而增加;穿膜细胞数均少于0 μmol／L,且随浓度升高而降低,以上差异均有统计学意义（P＜0.05）;与0 μmol／L比较,其余各浓度的Bcl-2 mRNA水平降低,Bax mRNA、Bak mRNA水平均升高,且各浓度间差异均有统计学意义（P＜0.05）;GSK525762A各浓度处理96 h的凋亡率、穿膜细胞数及凋亡相关基因mRNA均优于48 h（P＜0.05）。结论 BRD4抑制剂GSK525762A对鼻咽癌CNE-2细胞增殖有毒性作用,可诱导CNE-2细胞凋亡,恢复凋亡相关基因的表达,并降低细胞的侵袭能力。     

BML-210对脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂BML-210 对脑胶质瘤U251细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法 采用0、5、10、20 μmol／L BML-210 处理U251细胞,活细胞计数试剂盒（CCK-8）法检测不同浓度BML-210处理24、48、72和96 h的增殖抑制率,磷酯酰丝氨酸结合蛋白-异硫氢酸荧光素／碘化丙啶双染法（Annexin-FITC／PI）双染法检测不同浓度BML-210处理后的细胞凋亡率,流式细胞仪检测不同浓度BML-210处理48 h后的细胞周期分布情况,免疫印迹检测不同浓度BML-210处理48 h后凋亡相关基因（Bcl-2、Bax和Cleaved caspase-3）蛋白表达。结果 BML-210 可呈剂量和时间依赖的方式抑制U251细胞的增殖（P＜0.05）;除5 μmol／L组的晚期凋亡率外,BML-210处理组的早、晚期凋亡率均高于对照组（P＜0.05）,且BML-210处理组作用48 h后的凋亡率均高于24 h,组间差异均有统计学意义（P＜0.05）;与对照组比较,BML-210作用48 h后U251细胞的Bcl-2水平及S、G2／M期细胞比例降低,Bax和Cleaved caspase-3水平及G0／G1期细胞比例升高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 BML-210 可抑制脑胶质瘤U251细胞的增殖并诱导其凋亡和细胞周期阻滞,对脑胶质瘤的辅助治疗有一定价值。     

吉非替尼对A549细胞增殖及细胞周期、凋亡的作用

目的：观察吉非替尼对人非小细胞肺癌A549的生长增殖、细胞周期及细胞凋亡的影响。方法：用5—40μmol／L浓度范围内的吉非替尼和A549细胞共培养24、48、72h,采用四甲基偶氮唑蓝（MTr）法检测吉非替尼对细胞增殖的影响;用流式细胞仪检测其对细胞凋亡及细胞周期分布的影响;利用抗Capspase-3的ELISA（酶联免疫吸附）法检测是否发生细胞凋亡。结果：在5—40μmol／L浓度范围内,吉非替尼对A549细胞的增殖有明显的抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,以40μmol／L作用72h时的抑制率最高。流式细胞仪检测显示10μmol／L-401μmol／L的吉非替尼作用可使细胞发生G0／G,期阻滞,但即使作用48h也未发现凋亡细胞。ELISA法显示48h内,吉非替尼组与正常细胞组的Capspase-3浓度无统计学差异,但作用72h时出现凋亡。结论：吉非替尼在5—40μmol／L浓度下作用时间小于48h时,其对A549细胞的增殖抑制可能是通过阻滞A549细胞于G0／G1期而非引起细胞凋亡实现的,但作用时间达到72h时,其可以诱导A549发生细胞凋亡。     

DNA甲基转移酶抑制剂对结肠癌细胞增殖、凋亡及细胞周期影响的体外研究

目的 探讨DNA甲基转移酶抑制剂SGI-1027对结肠癌LoVo细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响。方法 取对数生长期LoVo细胞,实验组加入终浓度分别为0.1、1、5、10 μmol／L SGI-1027的培养液,对照组用含10％胎牛血清的RPMI 1640 培养基同步培养。MTT法检测SGI-1027作用于LoVo细胞24、48、72 h的增殖抑制率;倒置相差显微镜观察细胞形态学变化;SGI-1027处理后每个浓度收集细胞1×106个,采用膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）／碘化丙啶（PI）双染或PI单染流式细胞术分别检测SGI-1027处理后的细胞凋亡率和细胞周期时相分布情况;Western blotting检测SGI-1027对PI3K／Akt通路的影响。 结果 倒置相差显微镜观察显示,随SGI-1027浓度和作用时间的增加,LoVo细胞的凋亡形态学改变更为显著。除0.1 μmol／L SGI-1027处理24 h后的LoVo细胞增殖抑制率与对照组无差异外,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,SGI-1027对LoVo细胞的增殖抑制作用不断增强。与对照组比较,SGI-1027（0.1～10 μmol／L）处理LoVo细胞24、48 h的凋亡率均升高,且各浓度间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。与对照组比较,1～10 μmol／L SGI-1027处理后G0／G1期细胞比例及PTEN水平均高于对照组,S期和G2／M期细胞比例及Akt水平均低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 SGI-1027可抑制LoVo细胞的增殖并诱导细胞凋亡及G0／G1期阻滞,可能与其抑制PI3K／Akt通路激活有关,且SGI-1027作用的时间和浓度均对LoVo 细胞恶性行为有影响。     

Carfilzomib联合CPT-11对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及NF-κB的影响

目的 探讨Carfilzomib（CFZ）联合伊立替康（CPT-11）对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及核因子（NF）-κB水平的影响。方法 采用噻唑蓝比色法检测不同浓度CFZ（0、0.1、1、10、50、100nmol／L）或CPT-11（0、2.5、5、10、50、100μmol／L）及100nmol／L CFZ联合100μmol／L CPT-11处理SGC-7901细胞24、48、72、96h的增殖抑制率,采用流式细胞仪Annexin V／PI双染流式细胞术检测CFZ联合CPT-11处理48h的凋亡率和细胞周期,流式细胞术检测细胞内活化caspase 3的表达,采用Western blotting检测CFZ联合CPT-11处理48h的NF-κB、IκB-α水平及PI3K／Akt信号通路的活化情况。结果 CFZ联合CPT-11或两者单用可呈时间和剂量依赖的方式升高SGC-7901细胞增殖抑制率,且CFZ联合CPT-11的增殖抑制率高于CFZ或CPT-11单用,差异有统计学意义（P＜0.05）;与CFZ或CPT-11单用相比,CFZ联合CPT-11处理48h的凋亡率、caspase-3活化率、S期细胞比例及IκB-α水平均升高, G2／M期细胞比例、NF-κB p65及p-Akt 水平均降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 CFZ和CPT-11对胃癌SGC-7901细胞均有细胞毒性,如抑制增殖、诱导凋亡、下调NF-κB及抑制PI3K／Akt信号通路活化,CFZ联合CPT-11对胃癌细胞具有协同增效的作用。     

柚皮苷对人卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡及迁移的影响

目的 探讨柚皮苷对卵巢癌细胞SKOV3增殖、凋亡及迁移的影响。方法 采用1、5、10、20 μmol／L柚皮苷处理对数生长期的SKOV3细胞,并设不加柚皮苷处理的SKOV3细胞为对照组。采用MTT法检测不同浓度柚皮苷处理48 h及20 μmol／L柚皮苷处理12、24、36、48 h的增殖情况。收集不同浓度柚皮苷处理48 h的SKOV3细胞,Annexin V FITC／PI双染或PI单染流式细胞术分别检测细胞凋亡和细胞周期,Transwell法检测细胞穿膜数以评价迁移能力,Western blotting检测p Akt和PTEN的表达水平。结果 MTT检测发现,经1、5、10、20 μmol／L柚皮苷处理48 h,SKOV3细胞的增殖率降低,除1 μmol／L外,5～20 μmol／L柚皮苷处理SKOV3细胞的增殖率低于对照组（P＜0.05）;10、20 μmol／L处理48 h的增殖率分别为（6195±687）％和（50.58±6.09）％,差异无统计学意义（P＞0.05）;20 μmol／L柚皮苷处理12、24、36、48 h的增殖率依次为（83.93±5.54）％、（73.10±3.58）％、（61.95±5.01）％和（53.00±7.67）％,均低于对照组（P＜005）。与对照组相比,1～20 μmol／L柚皮苷处理48 h的G0／G1期细胞比例和凋亡率升高,S期细胞比例降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。1、5、10、20 μmol／L柚皮苷处理48 h的细胞穿膜数依次为（61.83±6.77）个、（47.17±5.35）个、（32.17±5.95）个和（20.83±3.06）个,p Akt相对水平为0.545±0.050、0373±0035、0280±0054和0173±0034,PTEN相对水平为0.357±0.054、0.468±0.085、0.602±0.063和0.728±0.103,均优于对照组（P＜0.05）。结论 柚皮苷能显著抑制卵巢癌细胞SKOV3的增殖并促进其凋亡,降低侵袭能力,该过程可能与其抑制PTEN／Akt信号通路激活有关,为临床治疗卵巢癌提供可能线索。     

Melittin对非小细胞肺癌增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响

目的 探讨Melittin对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖、凋亡及PI3K／Akt信号通路的影响。方法 分别采用0、10、20、50、100 μmol／L Melittin处理NSCLC细胞株A549、SPC-A1及人肺上皮细胞株16HBE 24、48、72和96 h后,采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测各细胞株的增殖抑制率变化,同时采用流式细胞术Annexin-FITC／PI双染法及PI单染法检测不同浓度Melittin 处理24、48 h后的A549细胞凋亡及细胞周期情况,Western blotting检测不同浓度Melittin处理48 h后的A549细胞中PI3K／Akt信号通路相关蛋白（Akt和PTEN）及凋亡促进基因（caspase-9）的表达情况。结果 在10～100 μmol／L范围内,Melittin可呈剂量和时间依赖的方式提高A549、SPC-A1细胞的增殖抑制率,差异均有统计学意义（P＜0.05）,但对16HBE无细胞毒性作用（P＞0.05）;与0 μmol／L比较,除10 μmol／L Melittin处理24 h后的晚期凋亡率和G2／M期细胞比例无统计学差异（P＞0.05）,10～100 μmol／L的早、晚期凋亡率、G0／G1期细胞比例及PTEN和caspase-9蛋白水平均升高,S期、G2／M期细胞比例及Akt水平均降低,以上差异有统计学意义（P＜0.05）,且10～100 μmol／L范围内各浓度间的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 Melittin可对NSCLC细胞有毒性作用,但对正常肺上皮细胞无影响,且可诱导A549细胞凋亡及细胞周期阻滞并抑制PI3K／Akt信号通路的激活。     

槲皮素对结肠癌细胞SW480增殖、细胞周期和cyclin B1蛋白表达的影响

背景与目的:探讨槲皮素对人结肠癌细胞SW480增殖、凋亡、细胞周期及CyclinB1蛋白表达的影响,并探讨其抗肿瘤机制.材料与方法:以10、20、40、60、80、160 μmol/L的槲皮素处理SW480细胞,采用MTT比色法、流式细胞技术、Western blot方法分析槲皮素对细胞增殖、凋亡、细胞周期及cyclin B1蛋白表达的影响.结果:与对照组相比,20μmol/L槲皮素可促进SW480细胞增殖(P＜0.05),但40、80、160μmol/L的槲皮素可明显抑制SW480细胞的增殖(P＜0.01),抑制作用呈剂量和时间依赖性.20、40、60、80μmol/L的槲皮素作用SW480细胞48 h,G0/G1期和S期细胞减少,G2/M期细胞显著增多(P＜0.01).80μmol/L的槲皮素作用48 h后细胞凋亡率(13.32±4.62)%,较对照组(2.68±1.04)%显著升高(P＜0.01);40、60、80μmol/L的槲皮素作用SW480细胞48 h后,cyclin B1蛋白表达降低(P＜0.05).结论:槲皮素对结肠癌细胞SW480的增殖有一定的调节作用,低浓度可促进其增殖,而高浓度则可抑制其增殖,其抑制作用机制可能与影响细胞周期分布、诱导细胞调亡、调节cyclin B1蛋白表达有关.     

脂氧合酶抑制剂NDGA对胰腺癌细胞PCNA-1增殖和凋亡的影响

目的：探讨脂氧合酶抑制剂NDGA对人胰腺癌细胞株PCNA-1生长抑制、诱导凋亡及其对bcl-2、bax表达的影响。方法：采用MTT法检测NDGA对胰腺癌细胞株PCNA-1增殖活性的影响,流式细胞术检测NDGA处理的胰腺癌细胞株PCNA-1的细胞周期及凋亡相关蛋白bcl-2、bax的表达。结果：NDGA抑制胰腺癌细胞株PCNA-1的增殖活性,呈剂量依赖效应关系;细胞经100μmol／L的NDGA处理后G0／G1期细胞减少（P〈0．05）、S期细胞增多（P〈0．05）,G2／M期细胞无明显变化;细胞经100μmol／L的NDGA处理48h后bcl-2蛋白与对照组相比表达下调（P〈0．01）、bax蛋白与对照组相比表达上调（P〈0．01）。结论：NDGA对胰腺癌细胞株PCNA-1有抑制增殖、诱导其凋亡作用,诱导细胞凋亡的机制可能与细胞凋亡相关基因bcl-2表达下调、bax表达上调有关。     

鸦胆子油对人肝癌细胞增殖的抑制作用及机制

目的:探讨鸦胆子油对人肝癌HepG2和Huh7细胞的增殖抑制作用及机制。方法:采用MTT法分析不同浓度鸦胆子油的增殖抑制作用,并用流式细胞仪进行细胞周期和细胞凋亡分析。结果:鸦胆子油能够使HepG2细胞和Huh7细胞的存活率降低,HepG2细胞24h和48h的IC50值分别为59.41μl/L和45.35μl/L,Huh7细胞24h和48h的IC50值为273.43μl/L和103.52μl/L。细胞周期实验中细胞G0/G1期比例升高。细胞凋亡实验中HepG2和Huh7细胞早期凋亡和晚期凋亡的比例均有增加,但晚期凋亡的细胞比例增加更大,分别为(61.47±7.74)%和(69.34±6.42)%。 结论:鸦胆子油能够抑制HepG2细胞和Huh7细胞的增殖,且通过阻滞细胞周期于G0/G1期诱导细胞凋亡。     

洛铂对人肝癌细胞HepG2增殖及凋亡作用的实验研究

目的 探讨洛铂（LBP）对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡的影响及其可能机制。方法取对数生长期HepG2细胞,分别采用不同浓度LBP（0、2.5、5、10、20 μmol／L）处理48 h。普通光镜观察细胞形态学改变;MTS法检测细胞增殖,并计算半数抑制浓度（IC50）;Annexin Ⅴ-FITC／PI双染法及Hoechst 33258染色检测细胞凋亡;Western blotting检测Bax、Bak、Bcl-2、Bid、Bcl-XL、Survivin及PARP-1蛋白表达。结果 随着LBP浓度的升高HepG2细胞密度减少,离巢死亡细胞数目增多;光镜下可见典型核固缩、碎裂的凋亡细胞。LBP能显著抑制HepG2细胞增殖,且呈浓度和时间依赖性（P＜0.05）;2.5、5、10、20 μmol／L的LBP作用HepG2细胞48 h后的增殖率分别为（92.11±1.79）％、（65.87±1.78）％、（51.57±0.81）％及（33.11±1.47）％; LBP作用HepG2细胞48 h的IC50为13.28 μmol／L。2.5、5、10、20 μmol／L LBP作用48 h HepG2细胞的凋亡率分别为（11.64±0.85）％、（20.99±2.21）％、（33.02±2.30）％和（40.77±1.58）％,与LBP 0 μmol／L 的（3.29±0.43）％比较,差异有统计学意义（P＜0.05）。2.5、5、10、20 μmol／L LBP能够下调HepG2细胞中的Bcl-2、Mcl-1蛋白表达,上调Bax、Bid、PARP-1蛋白表达, 对Bcl-XL、Bak及Survivin蛋白表达无影响。结论 LBP能够诱导HepG2细胞凋亡、抑制细胞增殖,其可能机制与上调Bax、Bid和PARP-1蛋白以及下调Bcl-2、Mcl-1蛋白表达有关。     

Stellettin B对非小细胞肺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的 探讨Stellettin B 对非小细胞肺癌细胞增殖和凋亡的影响及可能的作用机制。方法采用四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测不同浓度（01、1、10、100μmol／L）Stellettin B处理A549细胞和NCI-H1299细胞24、48、72和92h的增殖抑制率;采用Hoechst染色检测处理A549细胞24、48h后的凋亡指数;流式细胞术Annexin-FITC／PI双染法和PI染色法分别检测处理A549细胞48h后的凋亡率和细胞周期分布情况;采用Western blotting检测处理48h后A549细胞周期相关蛋白（Cyclin A、CDK2及p21CIP1）的表达水平。结果 不同浓度Stellettin B可显著增强对A549细胞的增殖抑制作用,且呈剂量和时间依赖性（P＜0.05）。不同浓度Stellettin B处理24、48h后,A549细胞的凋亡指数、凋亡率均升高且呈剂量依赖性（P＜0.05）。随着Stellettin B浓度的增加,G0／G1期细胞比例及p21CIP1蛋白的表达水平逐渐升高,S和G2／M期细胞比例及Cyclin A和CDK2蛋白的表达水平逐渐降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论 Stellettin B 可抑制A549细胞增殖并诱导细胞凋亡及细胞周期阻滞,可能与其对细胞周期相关蛋白表达的调控有关。     

巴弗洛霉素A1对舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖及自噬的抑制作用

目的 探讨巴弗洛霉素A1（Baf-A1）对人舌鳞状细胞癌Tca8113细胞增殖、凋亡及自噬的影响。方法 采用终浓度为0.1、0.5 μmol／L的Baf-A1处理Tca8113细胞,并设不加药的对照组。MTT比色法测定对照组及不同浓度Baf-A1处理0、24、48、72 h细胞的增殖情况,流式细胞仪检测0.5 μmol／L Baf-A1处理72 h的细胞周期,Western blotting、细胞免疫荧光检测自噬标记蛋白LC3B的表达,电子透射显微镜观察细胞自噬体形成情况。结果 Baf-A1呈剂量依赖性抑制Tca8113细胞增殖,05 μmol/L Baf-A1处理72 h时细胞增殖抑制作用最明显。流式细胞仪检测显示,与对照组比较,Baf-A1组sub-G1期、G1期细胞增多（P＜0.05）,S期和G2/M期细胞减少（P＜0.05）。Baf-A1组LC3B-II蛋白的相对表达量为1.83±0.23,高于对照组的0.79±0.18（P＜0.01）;细胞免疫荧光检测显示,对照组中可见少量LC3B表达,而Baf-A1组72 h后可见大量LC3B点状聚集物;电镜观察显示,与对照组比较,0.5 μmol／L Baf-A1处理后可见大量自噬体形成,自噬溶酶体形成增加。结论 Baf-A1对舌鳞癌Tca8113细胞有增殖抑制作用,可能与其阻滞细胞周期和抑制细胞自噬有关。     

吡格列酮对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡的影响及分子机制研究

目的 探讨吡格列酮对人胰腺癌细胞株PANC-1增殖、凋亡的影响及其分子机制。方法 体外培养人胰腺癌细胞株PANC-1,分别以吡格列酮（0 μmol/L、10 μmol/L、20 μmol/L、50 μmol/L）和吉西他滨（50 μmol/L）作用0 h、12 h、24 h、48 h、72 h后,采用CCK-8检测各时间点的细胞增殖情况,流式细胞仪检测72 h细胞周期及凋亡情况,4,6-联脒-2-苯基吲哚（DAPI）染色检测48 h细胞凋亡形态学变化,Western blot检测48 h细胞凋亡相关蛋白及MAPK/ERK信号通路相关蛋白的表达。结果 与0 μmol/L吡格列酮相比,吉西他滨及各剂量吡格列酮组细胞作用24 h、48 h、72 h的OD值均降低（P＜0.05）;48 h 的G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率、Bax及caspase-3、p-ERK蛋白表达均升高（P＜0.05）,而S期细胞比例、Bcl-2蛋白表达降低（P＜0.05）,且细胞逐渐收缩,细胞核逐渐碎裂。与50 μmol/L吉西他滨组相比,10 μmol/L吡格列酮组细胞作用24 h、48 h、72 h的OD值均升高（P＜0.05）,而50 μmol/L吡格列酮组均降低（P＜0.05）;10 μmol/L吡格列酮组细胞作用48 h 的G0/G1期细胞比例、细胞凋亡率、Bax及caspase-3、p-ERK蛋白表达均降低（P＜0.05）,而50 μmol/L吡格列酮组均升高（P＜0.05）;10 μmol/L吡格列酮组细胞48 h 的S期细胞比例、Bcl-2蛋白表达均升高（P＜0.05）,而50 μmol/L吡格列酮组均降低（P＜0.05）。结论 吡格列酮能抑制人胰腺癌细胞株PANC-1增殖,诱导其凋亡,可能通过上调MAPK/ERK通路实现。