高温高湿环境对自发性高血压大鼠胸主动脉血管反应性的影响

目的探讨高温高湿环境对自发性高血压大鼠(SHR)胸主动脉血管反应性的影响,为防控炎热环境下心血管病的发病提供科学依据。方法将7周龄雄性WKY大鼠和SHR各16只随机分为4组,分别为正常血压对照组(WKY对照组)、正常血压热应激组(WKY实验组)、高血压对照组(SHR对照组)、高血压热应激组(SHR实验组),每组8只。对照组饲养室温为24℃,相对湿度为50%;实验组饲养室温为32℃,相对湿度为65%。高温高湿应激时间为8 h/d,持续7 d。实验前后分别测定大鼠体重、血压,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定大鼠血清内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量变化,采用组织器官浴槽测定胸主动脉血管环对去甲肾上腺素(NE)的反应性,采用HE染色观察胸主动脉血管组织形态学变化。结果高温高湿应激后,SHR实验组大鼠收缩压和舒张压均高于WKY实验组,WKY实验组和SHR实验组大鼠胸主动脉血管反应性均高于相应对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。与WKY对照组比较,WKY实验组和SHR对照组大鼠血清eNOS含量降低,差异有统计学意义(P0.05);与SHR对照组比较,SHR实验组大鼠血清eNOS含量略有下降,但差异无统计学意义(P0.05)。形态学观察结果显示,WKY实验组和SHR实验组大鼠的血管内膜细胞均有不同程度损伤。结论高温高湿环境可增加SHR胸主动脉血管对NE诱发的收缩反应,其机制可能与血管内皮细胞损伤等有关。     

运动对慢性心理应激大鼠海马CA3区神经元细胞凋亡的影响

目的 观察运动对慢性心理应激大鼠海马CA3区神经元细胞凋亡的调节作用,探讨慢性心理应激致海马损伤的机制.方法 建立慢性心理应激模型,结合运动训练后,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL)技术观察海马神经元细胞凋亡;利用免疫组织化学技术检测海马凋亡调控因子Bel-2、Bax的表达.结果 与对照组相比,应激组大鼠海马CA3区凋亡细胞数明显增加,差异有统计学意义(P＜0.01),其余各组的差异无统计学意义(P＜0.05).与应激组相比,30min运动组、60min运动组、应激+30min运动组以及应激+60min运动组神经元凋亡明显减少,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,应激组Bcl-2表达明显降低,Bax表达明显升高,Bcl-2/Bax的比值明显降低;30min运动组、60min运动组Bel-2表达明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05),Bax表达明显降低,Bcl-2/Bax的比值明显升高.与应激组相比,应激+30min运动组和应激+60min运动组Bcl-2表达明显升高,Bax表达明显降低,Bcl-2/Bax的比值明显升高.同时,慢性心理应激和运动训练对大鼠海马CA3区Bcl-2、Bax表达及Bcl-2/Bax比值的影响存在交互作用.结论 慢性心理应激导致大鼠海马CA3区神经元细胞凋亡增加,适量运动可抑制慢性心理应激引起的细胞凋亡,对海马有保护作用.     

亚砷酸钠对人正常肝细胞凋亡及Bax和Bcl-2 mRNA和蛋白表达的影响

目的探讨亚砷酸钠对人正常肝(L-02)细胞凋亡及Bax、Bcl-2 m RNA和蛋白表达的影响。方法将L-02肝细胞分别暴露于含0(对照)、50、100、150μmol/L亚砷酸钠的培养基中暴露24 h。采用MTT法检测L-02肝细胞的存活率,采用流式细胞术检测L-02肝细胞凋亡率,采用RT-PCR的方法检测Bax、Bcl-2 m RNA相对表达情况,采用Westernblotting方法检测L-02肝细胞中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况。结果与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞的存活率均较低,凋亡率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,L-02细胞的存活率呈下降趋势,而凋亡率上升趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组L-02细胞中Bcl-2、Bax m RNA和蛋白的表达水平均较高,100μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值也较高,而150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2 m RNA/Bax m RNA值及50、150μmol/L亚砷酸钠染毒组Bcl-2蛋白/Bax蛋白值均较低,差异均有统计学意义(P0.05)。结论亚砷酸钠可抑制L-02肝细胞的生长,诱导细胞凋亡的发生;其机制可能与Bcl-2家族的激活有关。     

组织醛固酮对自发性高血压大鼠心脏靶器官的损害和伊普利酮的保护作用

目的观察自发性高血压大鼠(Spontaneously hypertensive rats,SHR)中醛固酮和心室重构与心肌细胞凋亡的关系以及选择性盐皮质激素受体拮抗剂--依普利酮(Eplerenone,Epl)对心室重构和心肌细胞凋亡的抑制作用。方法 20只8周龄雄性SHR随机分为2组,SHR-Epl组(Epl50mg/Kg)和SHR-C组(高血压对照组),10只雄性Wistar Kyoto大鼠(WKY)作为正常血压对照组。用放射免疫方法检测血浆和心肌组织醛固酮浓度;通过检测天狼星红染色组织切片的胶原蛋白沉积分数来评价心肌纤维化;应用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测心肌细胞凋亡;应用RT-PCR和Western-Blotting法检测Bcl-2和Bax mRNA和蛋白表达。结果 SHR-Epl组和SHR-C组较WKY组收缩压升高(P0.01),但此两组间无差别。SHR-Epl组、SHR-C组和WKY组的心重/体重分别是(3.48±0.56),(4.04±0.27)和(2.78±0.12)mg/g;心肌细胞直径是(15.15±0.14),(17.24±0.36)和(14.31±0.20)μm;胶原蛋白沉积分数是(3.81±0.30),(4.39±0.23)和(3.48±0.23)%;凋亡指数是(0.36±0.21),(1.95±0.17)和(0.21±0.05)%,SHR-C组均高于WKY组(P0.01)和SHR-Epl组(P005),且SHR-Epl组高于WKY组(P0.05)。SHR-Epl组的Bcl-2/bax mRNA和蛋白表达比值高于SHR-C组(P0.05)。结论 SHR心肌组织可以分泌醛固酮,且在心室重构和心肌细胞凋亡过程中起到重要的促进作用,Epl对SHR心室重构和心肌细胞凋亡有一定抑制作用。     

神经生长因子对高胆红素血症新生大鼠脑组织Bcl-2和Bax表达的影响

目的探讨神经生长因子干预对高胆红素血症新生大鼠脑组织Bcl-2和Bax表达的影响。方法选择7日龄SD新生大鼠90只,随机分为3组:对照组30例,高胆红素血症模型组30例,神经生长因子干预组30例,各组根据处死时间不同又分为6 h、12 h、24 h、48 h和72 h 5个亚组,每个亚组6只。各组在各时间点取脑组织,用苏木素-伊红染色法观察各组脑组织病理改变,脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法测定脑组织细胞凋亡率,免疫组织化学法测定Bcl-2和Bax表达。结果 1与对照组相比,模型组海马区神经细胞凋亡增加,Bcl-2表达轻度升高,Bax表达明显升高,差异有统计学意义(P0.05);2与模型组比较,NGF干预后,Bcl-2表达明显升高(P0.05),Bax蛋白表达明显降低(P0.05),海马区神经细胞凋亡减少(P0.05),但Bax表达和凋亡率仍高于对照组(P0.05)。结论 1Bcl-2和Bax可能参与了新生大鼠高胆红素血症神经细胞凋亡的发生;2NGF可能通过上调Bcl-2表达,下调Bax表达,抑制神经细胞凋亡,从而发挥其脑保护作用。     

SHR主动脉结构重构的microRNA-195和BCL2、Bax作用机制

目的:分析自发性高血压大鼠主动脉结构重构的microRNA-195和BCL-2、Bax作用机制。方法:选取SPF/VAF级16只雄性SHR大鼠及16只Wistar大鼠,随机分16只SHR大鼠为两组,即实验组和对照组,每组8只;分16只Wistar大鼠为两组,即实验组和对照组,每组8只。实验组SHR大鼠、Wistar大鼠均灌服10mg/kg/d贝那普利,4周为1疗程,共干预2个疗程。结果:干预前SHR实验组、SHR对照组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著高于Wistar实验组、Wistar对照组(P0.05),干预后SHR实验组、SHR对照组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著高于Wistar实验组、Wistar对照组(P0.05),而SHR实验组大鼠的尾动脉收缩压、舒张压均显著低于SHR对照组(P0.05)。Wistar组大鼠具有均一的主动脉内膜,其与平滑肌细胞均没有增生,中膜层弹力纤维、血管管壁均没有增厚,具有有序的排列;SHR对照组大鼠具有不均匀增厚的主动脉内膜、紊乱的结构,血管中膜平滑肌细胞、弹力纤维、血管壁分别增生肥厚、增厚、增厚。SHR实验组、Wistar实验组、Wistar对照组大鼠的主动脉心态结构之间的差异均不显著。干预后SHR实验组大鼠的主动脉microRNA-195表达显著高于SHR对照组(P0.05),Wistar实验组大鼠的主动脉microRNA-195表达显著高于Wistar对照组(P0.05);SHR实验组大鼠的microRNA-195显著高于Wistar实验组(P0.05)。SHR实验组大鼠的主动脉BCL2 mRNA表达显著低于SHR对照组(P0.05);Wistar实验组大鼠的主动脉BCL2 mRNA显著低于Wistar对照组(P0.05)。SHR实验组大鼠的主动脉Bax mRNA表达显著高于SHR对照组、Wistar实验组、Wistar对照组(P0.05),SHR对照组大鼠的主动脉Bax mRNA表达显著高于Wistar对照组(P0.05)。干预后SHR实验组、SHR对照组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达均显著高于Wistar实验组(P0.05),SHR实验组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达显著低于SHR对照组(P0.05),Wistar实验组大鼠的主动脉BCL2蛋白表达显著低于Wistar对照组(P0.05)。结论:microRNA-195可能通过对BCL2/Bax表达进行调节对SHR大鼠的主动脉结构性重构进行抑制,贝那普利干预可能能够促进microRNA-195表达。     

生脉注射液对大鼠脑缺血再灌注损伤的影响

目的 研究生脉注射液对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的影响.方法 雄性SD大鼠80只,体重250 ～ 300 g,随机分为5组(n=16):Ⅰ组(假手术对照组)、Ⅱ组(脑缺血再灌注组)、Ⅲ组(生脉预处理组)、Ⅳ组(生脉后处理组)和Ⅴ组(生脉对照组).Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组大鼠采用线栓法进行脑缺血2h.Ⅲ组大鼠线栓成功前60 min给予腹腔注射生脉15 mL/kg,Ⅳ组大鼠线栓成功后10 min给予腹腔注射生脉15 mL/kg.再灌注24 h时进行神经功能障碍评分,随后取脑组织,测定脑梗死灶体积、细胞凋亡率、Bcl-2及Bax表达,并且计算Bcl-2与Bax的比值(Bc卜2/Bax).结果Ⅰ组和Ⅴ组相比,神经功能障碍评分、脑梗死灶体积、细胞凋亡率、Bcl-2及Bax表达、Bcl-2与Bax比值差异无统计学意义(P＞0.05).与Ⅰ组和Ⅴ组比较,Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组神经功能缺陷评分、细胞凋亡率、Bcl-2及Bax表达均升高,Bcl-2/Bax降低,脑梗死灶体积增大,差异有统计学意义(P ＜0.01).与Ⅱ组比较,Ⅲ组和Ⅳ组神经功能障碍评分降低,Ⅲ组和Ⅳ组细胞凋亡率和Bax表达降低,脑梗死灶体积缩小,Bcl-2表达和Bcl-2/Bax升高,差异有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).与Ⅳ组比较,Ⅲ组脑梗死体积缩小,细胞凋亡率和Bax表达降低,Bcl-2表达和Bcl-2/Bax升高,差异有统计学意义(P ＜0.05或P＜0.01).结论 生脉注射液预处理和后处理可减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤,其机制与上调Bcl-2表达、下调Bax表达从而降低细胞凋亡的发生有关;且生脉注射液预处理较后处理效果更佳.     

中波紫外线诱导小鼠表皮细胞Bax和Bcl-2的表达

[目的]探讨中波紫外线(UVB)对正常小鼠表皮细胞凋亡及凋亡相关基因Bax和Bcl-2的调控。[方法]将正常ICR小鼠随机分为对照组(假照射组)、500J/m2、1000J/m2、1500J/m2、2000J/m2紫外线照射后2h组(每组10只小鼠)。1500J/m2紫外线照射后4h组、8h组、12h组、24h组、48h组、72h组(每组10只小鼠)。采用链霉菌亲生物素蛋白-过氧化物酶标免疫组织化学法(streptavidin-peroxidase,SP)染色检测凋亡相关基因Bax和Bcl-2的蛋白表达。[结果]小鼠皮肤用不同剂量紫外线照射2h后Bax的表达,随紫外线剂量增大而变大,Bcl-2表达减小,呈剂量依赖性。用1500J/m2紫外线照射小鼠后12hBax表达达到高峰,Bcl-2表达减弱;24h后Bax表达开始减弱,而Bcl-2则开始表达,72h恢复正常,Bax和Bcl-2的表达与紫外线照射后时间有关。[结论]中波紫外线照射小鼠皮肤后,Bax表达上调,Bcl-2表达下调,促进小鼠紫外线损伤的表皮细胞凋亡。     

烹调油烟对大鼠卵巢细胞损伤及其机制研究

目的探讨亚慢性接触烹调油烟(COF)对大鼠卵巢的损伤作用及诱导卵巢细胞凋亡相关机制。方法将50只健康60日龄清洁级Wistar雌性大鼠按体重随机分为5组,分别为对照组和0.5、1、2、4 h/d COF暴露组,每组10只;采用吸入式暴露[油烟浓度为(32.21±5.11)mg/m3],连续暴露56 d。测定大鼠卵巢各级卵泡构成的情况及卵巢组织半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(caspase)-3,-8,-9及白细胞分化抗原95分子(Fas),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)m RNA表达水平。结果与对照组相比,0.5、1 h/d COF暴露组大鼠的原始/初级卵泡构成比下降,次级卵泡构成比上升;2、4 h/d COF暴露组的成熟卵泡构成比减少;各COF暴露组的闭锁卵泡构成比上升;仅1 h/d COF暴露组的黄体构成比升高;0.5、2、4 h/d COF暴露组大鼠卵巢组织中caspase-3 m RNA的表达水平和各剂量COF暴露组大鼠卵巢组织中caspase-9、Bax m RNA的表达水平升高,而2、4 h/d COF暴露组大鼠卵巢组织中Bcl-2 m RNA的表达水平下降,差异有统计学意义(P0.05,P0.01);而各剂量COF暴露组大鼠卵巢组织中Fas和caspase-8 m RNA的表达水平均无明显改变。结论亚慢性接触COF可导致卵泡正常生长发育与退化受损、线粒体及内质网损伤,并可能通过线粒体途径诱导细胞凋亡。     

三氧化二砷暴露原代培养大鼠海马神经元凋亡及Bax和Bcl-2表达的初步观察

目的探讨砷诱导原代培养大鼠海马神经元凋亡及Bax和Bcl-2的表达情况。方法离体培养新生24 h内SD乳鼠海马神经元,以不同浓度三氧化二砷(0、10、50、100μmol/L)染毒24 h,分析神经元凋亡率,以蛋白印迹法检测海马神经元Bcl-2和Bax蛋白表达。结果染砷组处理24 h后同对照组比较,海马神经元凋亡率升高,差异具有统计学意义(P0.01),凋亡率随染砷浓度的增加而增加,具有明显的剂量-反应关系。Western blot分析显示随着染砷剂量的增加,Bcl-2/Bax的比值逐渐减小。结论三氧化二砷对大鼠海马神经元有直接毒性作用,并随染砷剂量增加凋亡加重,其机制是可能通过Bcl-2与Bax途径诱导凋亡。     

六黄合剂对胰岛素抵抗大鼠血管内皮PI3-K/Akt信号通路影响

目的了解六黄合剂对胰岛素抵抗大鼠血管内皮保护的作用机制。方法健康SD大鼠,按体重随机分为空白组、模型组、六黄合剂组和罗格列酮组,每组10只。应用高脂饲料联合肌注地塞米松的方法诱导大鼠胰岛素抵抗模型,分别给予罗格列酮和六黄合剂干预,7周后应用RT-PCR法测定大鼠胸主动脉PI3-Km RNA、Aktm RNA和e NOS m RNA的表达水平。结果与模型组比较,六黄合剂组胸主动脉Aktm RNA表达水平(0.20±0.05)明显升高(P0.05),PI3-Km RNA和e NOS m RNA的表达水平也升高,分别为(1.07±0.31)和(0.87±0.27),差异无统计学意义。结论六黄合剂通过上调PI3-K/Akt信号通路来发挥对胰岛素抵抗大鼠血管内皮的保护作用。     

早发型和晚发型子痫前期自噬与凋亡水平差异及相互关系研究

目的探讨早发型子痫前期(early-onset preeclampsia, EOPE)和晚发型子痫前期(late-onset preeclampsia, LOPE)胎盘组织中自噬和凋亡水平的差异,利用人绒毛膜滋养层细胞株HTR 8/SVneo缺氧模型探讨自噬与凋亡的关系,为解释子痫前期(preeclampsia, PE)的发病机制提供新的思路。方法选取2018年1～6月上海交通大学医学院附属国际和平妇幼保健院产科剖宫产分娩孕妇26例的临床资料。按照PE发生程度分为EOPE组10例,LOPE组6例,正常孕妇组10例。通过透射电镜观察EOPE组、LOPE组和正常孕妇组胎盘组织滋养层细胞中的自噬溶酶体;采用实时荧光定量多聚核苷酸链式反应和免疫印迹方法检测EOPE组、LOPE组和正常孕妇组胎盘组织中自噬相关基因(LC 3和Beclin-1)、抗凋亡基因Bcl-2和促凋亡基因Bax mRNA和蛋白水平的表达;利用HTR 8/SVneo缺氧模型,检测LC 3、Beclin-1、Bcl-2和Bax mRNA水平的表达。结果与正常孕妇组胎盘组织相比,EOPE组自噬溶酶体含量降低,LC 3、Beclin-1和Bcl-2 mRNA和蛋白表达水平降低,Bax表达升高,差异均有统计学意义(P0.05)。LOPE组自噬溶酶体含量增加并且出现凋亡细胞,LC 3、Beclin-1和Bax表达均升高,Bcl-2表达降低,差异均有统计学意义(P0.05)。缺氧模型中,与正常HTR 8/SVneo细胞相比,缺氧12 h组LC 3和Beclin-1 mRNA表达水平均升高,Bcl-2和Bax mRNA表达水平均降低,差异有统计学意义(P0.05),抑制自噬活性后,Bax mRNA表达水平显著升高,差异有统计学意义(P0.05);24 h和48 h组LC 3、Beclin-1、Bcl-2和Bax的mRNA表达均降低,差异有统计学意义(P0.05);72 h组LC 3、Beclin-1和Bax表达均升高,Bcl-2表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论 EOPE组胎盘滋养层细胞中自噬活性受损,凋亡水平增加;而LOPE组中自噬和凋亡水平均增加;短期缺氧激活滋养层细胞自噬,凋亡降低,抑制自噬凋亡增加;长期缺氧引发过度自噬和凋亡。     

利拉鲁肽对大鼠心肌再灌注损伤的作用及其机制

目的建立大鼠心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)模型,探讨利拉鲁肽对心肌损伤的保护作用和机制。方法可逆性冠脉左前降支结扎造成MIRI模型,给予大鼠心脏缺血30 min再灌注90 min。30只雄性SD大鼠随机分为3组,分别为假手术组、MIRI模型组和利拉鲁肽干预组(70μg/kg)。干预组每天1次,连续7 d。彩色多普勒超声仪测定心脏功能,Millar导管法测定血流动力学指标,腹主动脉插管取血,离心制备血清,自动生化分析仪测血清天冬氨酸氨基转换酶(AST)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)及乳酸脱氢酶(LDH)活力;酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定血清炎性因子含量白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF-α);实时荧光定量PCR检测各组心肌组织细胞凋亡相关基因Bax,Bcl-2和Caspase3,9 m RNA的表达。结果与模型组相比,利拉鲁肽可明显加快大鼠心率(HR),提升动脉收缩压(SBP)、舒张压(DBP)和左心室收缩压(LVSP)(P0.05),使左心室舒张末压(LVEDP)有所降低(P0.05);相比模型组,利拉鲁肽干预组心肌酶活力均显著降低(P0.05),且可使模型组大鼠血清炎性因子含量降低,利拉鲁肽干预组大鼠心肌Bax、Caspase3 m RNA表达水平显著降低,Bcl-2 m RNA表达水平显著升高。结论利拉鲁肽可通过减少炎性因子和细胞凋亡相关基因,抑制心肌细胞的损伤和凋亡作用,从而对大鼠MIRI有一定的保护作用。     

邻苯二甲酸二丁酯对大鼠卵巢颗粒细胞中细胞凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响

目的研究邻苯二甲酸二丁酯(dibutyl phthalate,DBP)对大鼠卵巢颗粒细胞中细胞凋亡因子Bcl-2、Bax表达的影响。方法体外培养25 d雌性SD大鼠卵巢颗粒细胞,分别加入DBP使终浓度分别(0、5、20、80μmol/L),培养24 h。采用放射免疫方法测定雌二醇(estradiol,E2)和孕酮(progestone,P)的水平;采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)和免疫印迹试验(Western blot)检测卵巢颗粒细胞中Bcl-2、Bax mRNA和蛋白的表达。结果 DBP染毒后颗粒细胞分泌的E2及P水平下降,各剂量DBP均可降低颗粒细胞中Bcl-2 mRNA和蛋白的表达(P0.05),且表达量与DBP剂量呈反比,同时,DBP可以增加颗粒细胞中Bax mRNA和蛋白的表达(P0.05),且表达量与DBP剂量呈正比。结论 DBP可导致大鼠卵巢颗粒细胞凋亡,且Bcl-2/Bax比例失调可能是导致其凋亡的机制。     

集落刺激因子干预对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织的保护作用

目的探讨集落刺激因子(rhG-CSF)干预对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织的保护机制。方法建立缺氧缺血性脑损伤新生大鼠模型,随机分为3组(144只):对照组大鼠只分离左侧颈总动脉而不做结扎,亦不做缺氧处理;缺氧缺血组注射等量的生理盐水;rhG-CSF组术后每日颈部皮下注射rhG-CSF 50μkg,每组又分为6 h,12 h,24 h,48 h,72 h,7 d 6个时间点。在各个时间点分别处死动物,采用免疫组织化学和免疫印迹法检测P53,Bcl-2,Bax的表达。结果对照组:P53,Bax只有极微量表达,Bcl-2有微量表达。缺氧缺血组:P53和Bax在6 h即见明显升高,24 h达到高峰。Bcl-2在6h微量升高,于24 h达高峰。rhG-CSF组:P53和Bax在6 h即见明显下降,24 h达到谷底,与缺氧缺血组比较具有显著差异。Bcl-2在6 h升高,48 h达到峰值,与缺氧缺血组比较具有极显著差异。结论rhG-CSF在脑缺血缺氧发生时对P53以及Bcl-2/Bax的比值进行调控,对受损伤的神经细胞具有一定的保护作用。     

急性胆道感染SD大鼠肝细胞凋亡和相关Bcl-2/Bax蛋白表达的分析

目的探究急性胆道感染对SD大鼠肝细胞细胞凋亡及其Bcl-2/Bax蛋白阳性表达的影响。方法将110只SD大鼠进行为期1周的喂养后随机分为5组,每组22只,随机选取一组为对照组,注入生理盐水,其余四组均为实验组,实验组SD大鼠胆总管注入大肠埃希菌建立急性胆道感染模型。并分别于6 h、12 h、24 h及48 h后处死一组SD大鼠,按照其感染时长分为实验组-6 h、实验组-12 h、实验组-24 h和实验组-48 h,对照组大鼠于6 h后处死,观察大鼠肝组织的病理变化,使用免疫组织化学法对Bcl-2、Bax阳性表达率进行计算,对大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)变化进行分析。结果随着感染时间的增加,大鼠肝组织细胞出现明显的变形和坏死,且坏死面积和细胞数量逐渐增加;对照组细胞凋亡数量较少,实验组随着感染时间增加,AI指数逐渐增加(P<0.05);实验组随着感染时间增加,Bcl-2阳性表达率逐渐降低(P<0.05),但实验组-6 h Bcl-2阳性表达率与对照组比较差异无统计学意义(t=1.717,P=0.093);实验组Bax阳性表达率随感染时间增加逐渐升高(P<0.05),48 h呈现下降趋势;与对照组比较,模型建立后实验组大鼠各时段ALT、AST和TNF-α均显著升高(P<0.05),随着感染时间推移ALT、AST的活性表达持续升高,AST在感染组12 h时与实验组-6 h比较差异不显著(t=0.744,P=0.461),TNF-α于感染48 h后有所下降。结论急性胆道感染过程中伴随明显的细胞凋亡现象,在持续感染的整个过程中都有表现,这与Bcl-2和Bax蛋白的阳性表达之间存在明显关系。     

缬沙坦和螺内酯对高血压大鼠血管生长因子和Ⅰ型胶原的影响

目的　观察血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )AT1受体拮抗剂缬沙坦和盐皮质激素受体拮抗剂螺内酯对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉生长因子和Ⅰ型胶原的影响。方法　将 18只雄性SHR随机分为三组 :SHR阳性对照组、缬沙坦治疗组、螺内酯治疗组 ,每组 6只 ;两治疗组分别用缬沙坦 3 0mg·kg-1·d-1、螺内酯 2 0mg·kg-1·d-1溶于饮水灌胃 ,1次 /d ,连续治疗 13周 ;两对照组给正常饮水。鼠尾法测大鼠尾动脉收缩压。用RT -PCR方法检测大鼠主动脉TGFβ1、HGF、Ⅰ型胶原mRNA水平。结果　治疗 13周后缬沙坦组和螺内酯组TGFβ1、Ⅰ型胶原mRNA水平组明显低于SHR对照组 ( P <0 0 1) ,但较WKY组有所升高 ( P <0 0 1)。SHR对照组的HGFmRNA水平低于WKY组 (P <0 0 1) ,缬沙坦组和螺内酯组的HGFmRNA水平高于SHR对照组 (P <0 0 1,P <0 0 5 ) ,低于WKY组 (P <0 0 1)。结论　AngⅡAT1受体拮抗剂缬沙坦和盐皮质激素受体拮抗剂螺内酯均能抑制SHR的血管纤维化 ,在药物干预的过程中同时伴HGFmRNA水平升高。HGF具有抗血管重塑的作用     

微囊藻毒素-LR对人支气管上皮细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响

目的研究微囊藻毒素-LR(microcystins-LR,MC-LR)对人支气管上皮细胞(16HBE)凋亡及凋亡相关蛋白表达的影响。方法将16HBE细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、1、10、20、30、40μg/ml的MC-LR溶液24h后,采用MTT法检测细胞活性。将16HBE细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、2.5、5、10μg/ml的MC-LR溶液培养24、48 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡率,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白细胞色素C(Cyt-c)、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)、前凋亡蛋白(Bax)的相对表达量。结果与对照组相比,各浓度MC-LR染毒组16HBE细胞的存活率较低,凋亡率较高,差异均有统计学意义(P0.05);随着MC-LR染毒浓度的升高,16HBE细胞的存活率呈逐渐下降的趋势,凋亡率呈上升趋势;随着MC-LR染毒时间的延长,16HBE细胞的凋亡率均呈上升趋势。当暴露时间一定时,与对照组相比,各浓度MC-LR染毒组16HBE细胞Bax和Cyt-c蛋白的表达水平均升高,Bcl-2蛋白的表达水平均下降(除外2.5μg/ml MC-LR染毒24 h组),差异有统计学意义(P0.05);且随着MC-LR染毒浓度的升高和染毒时间的延长,16HBE细胞Bax和Cyt-c蛋白的表达水平均呈上升趋势,Bcl-2蛋白的表达水平均呈下降趋势。结论 MC-LR能诱导16HBE细胞发生凋亡,并引起Cyt-c和Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低。     

miR-221在急性心肌梗死大鼠中表达及其作用

目的探讨miR-221在急性心肌梗死(AMI)大鼠中的表达及其作用。方法在45只SD清洁级雄性大鼠中随机抽取35只通过冠状动脉左前降支结扎大鼠建立AMI模型,将其中建模成功的30只大鼠随机分为AMI组、对照组及抑制组,每组各10只;另抽取未建模的10只大鼠设立假手术组,采用冠状动脉左前降支穿线不结扎。其中对照组用携带绿色荧光蛋白(GFP)的慢病毒空载体miR-221阴性对照以4×10~7病毒数量进行心肌组织局部注射转染,抑制组用携带miR-221 inhibitor慢病毒以4×10~7病毒数量进行心肌组织局部注射转染,AMI组和假手术组每天给予等量生理盐水,隔日1次连续2周;记录大鼠心脏功能。采用原位末端凋亡法(TUNEL)检测心肌凋亡指数(AI),RT-PCR法检测miR-221表达,Western blot法检测Bax、Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达。结果与假手术组大鼠miR-221表达量(0.18±0.02)比较,AMI组(1.16±0.12)和对照组(1.18±0.12)大鼠的miR-221表达量均升高(均P0.01),抑制组大鼠miR-221表达量(0.30±0.03)均低于AMI组和对照组大鼠的miR-221表达量(均P0.01);与假手术组大鼠Bax(0.13±0.01)、Bcl-2(0.53±0.05)、PI3K(0.45±0.04)和p-AKT(0.87±0.09)蛋白表达量比较,AMI组和对照组大鼠的Bax蛋白表达量均上调(均P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达量均下调(均P0.01);抑制组大鼠较AMI组和对照组大鼠Bax表达量均下调(P0.01),Bcl-2、PI3K和p-AKT蛋白表达量均上调(P0.01)。结论 miR-221在AMI大鼠心肌组织中高表达,下调miR-221表达可通过激活PI3K/AKT信号通路调控下游蛋白Bax及Bcl-2的表达抑制AMI大鼠心肌细胞凋亡。     

罗格列酮对2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及其基因表达的影响

目的　观察 2型糖尿病大鼠心肌细胞凋亡率、凋亡调控基因Bax、Bcl-2的表达变化及罗格列酮的干预作用。方法　8周龄SD大鼠高热量饮食一月后 ,腹腔注射小剂量链脲佐菌素 (STZ 3 0mg/kg) ,成模后分别于 12、2 4周宰杀动物 ,采用光镜、原位末端标记法、流式细胞术检测心肌细胞凋亡及心肌Bax、Bcl -2表达水平。结果　糖尿病大鼠心肌凋亡细胞数明显增多 ,Bax蛋白表达显著上调 ,Bax/Bcl-2比值增加 (P均 <0 0 1) ,Bcl -2蛋白表达有所下降 ,但无统计学意义。罗格列酮干预组凋亡率降低 (P <0 0 1) ,升高的Bax蛋白表达下调 ,降低的Bcl -2蛋白表达上调 ,但与糖尿病未治疗组均无统计学差异 (P >0 0 5 )。结论　心肌细胞凋亡在糖尿病大鼠心肌病变进程中起一定作用 ,罗格列酮可抑制心肌细胞凋亡 ,但与Bax、Bcl -2的调控关系不大。