慢性砷染毒对大鼠附睾上皮细胞凋亡的影响

目的探讨慢性砷染毒对大鼠附睾上皮细胞凋亡的影响。方法将40只健康清洁雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(蒸馏水)组和2.4、12.0、60.0 mg/L亚砷酸钠染毒组,每组10只。采用自由饮用方式进行连续染毒6个月。采用TUNEL细胞凋亡染色法测定大鼠附睾上皮凋亡细胞的凋亡情况,采用Western blot法测定附睾组织内caspase-3、caspase-9蛋白的表达水平,并测定精子顶体完整率和精子畸形率。结果与对照组比较,各浓度砷染毒组大鼠附睾管的细胞凋亡率较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着砷染毒浓度的升高,大鼠附睾管的细胞凋亡程度加重。与对照组比较,各浓度砷染毒组大鼠附睾内caspase-3、caspase-9蛋白表达水平均较高,差异有统计学意义(P0.05);且随着砷染毒浓度的升高,大鼠附睾内caspase-3、caspase-9蛋白的表达水平呈上升趋势。与对照组比较,12.0、60.0 mg/L砷染毒组大鼠精子顶体完整率均较低,而精子畸形率均较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着砷染毒浓度的升高,大鼠精子顶体完整率呈下降趋势,而精子畸形率呈上升趋势。结论慢性砷染毒通过激活caspase-3或caspase-9等途径实现大鼠附睾组织的损伤及凋亡。     

姜黄素对砷致大鼠睾丸生精细胞凋亡的拮抗作用

目的研究姜黄素对砷致大鼠睾丸生殖细胞凋亡的拮抗作用。方法将50只健康清洁级Wistar雄性大鼠随机分为5组,分别为对照(双蒸水)组和亚砷酸钠(100 mg/L)染毒组及低、中、高剂量姜黄素(100 mg/L亚砷酸钠+25、50、100mg/kg姜黄素)干预组,每组10只。亚砷酸钠采用自由饮用方式进行染毒;姜黄素采用经口灌胃方式染毒,每周3次,连续8周。测量生精小管平均直径;测定大鼠血清睾酮浓度及睾丸生精细胞凋亡指数。结果与对照组比较,亚砷酸钠染毒组大鼠血清睾酮的水平降低,生精小管直径缩小,而睾丸生精细胞凋亡指数升高,差异有统计学意义(P0.01)。与亚砷酸钠染毒组比较,中、高剂量姜黄素干预组大鼠血清睾酮的水平升高,生精小管直径增大,而睾丸生精细胞凋亡指数下降,差异均有统计学意义(P0.05)。且随着姜黄素染毒剂量的升高,大鼠血清睾酮水平和生精小管直径均呈上升趋势,而睾丸生精细胞凋亡指数呈下降趋势。结论姜黄素对砷致大鼠睾丸生殖细胞凋亡具有拮抗作用。     

砷对大鼠生精细胞半胱氨酸天冬氨酸酶-3表达及血清中黄体生成素浓度的影响

目的研究亚慢性砷中毒对大鼠睾丸生精细胞半胱氨酸天冬氨酸酶-3(caspase-3)表达及血清黄体生成素(LH)的影响。方法将40只健康成年清洁级SD雄性大鼠随机分为4组,分别为对照组(蒸馏水)组和0.4、2、10 mg/kg亚砷酸钠染毒组,每组10只,采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒14周。测定大鼠血清LH浓度及生精细胞caspase-3阳性率。结果与对照组比较,各剂量亚砷酸钠染毒组大鼠生精细胞caspase-3阳性率均较高,2、10 mg/kg亚砷酸钠染毒组大鼠血清LH浓度均较低,差异有统计学意义(P0.01,P0.05);且随着亚砷酸钠暴露剂量的升高,大鼠生精细胞caspase-3阳性率呈上升趋势,血清LH浓度呈下降趋势。结论砷暴露导致的生精细胞caspase-3表达增加可能是其雄性生殖毒性效应的机制之一。     

砷和氟对大鼠睾丸组织caspase-3和caspase-9表达的影响

目的研究慢性砷染毒、氟染毒及联合染毒大鼠睾丸组织中caspase-3、caspase-9表达的变化。方法将40只健康清洁级雄性SD大鼠随机分为4组,分别为对照(普通饲料)组、砷染毒(高砷饲料,含砷量为10.000 mg/kg)组、氟染毒(高氟饲料,含氟量为16.844 mg/kg)组和砷氟联合染毒(高砷高氟饲料,含砷量为10.000 mg/kg,含氟量为16.844 mg/kg)组,每组10只。采用自由进食饲料方式连续染毒12周。采用TUNEL染色法测定生精小管细胞的凋亡率;采用免疫组化法测定睾丸间质细胞caspase-3、caspase-9的阳性表达水平。结果与对照组比较,各染毒组大鼠生精小管生精细胞的凋亡率均较高,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组比较,各染毒组大鼠间质细胞caspase-3、caspase-9的阳性表达水平均较高,差异有统计学意义(P0.05)。且砷氟联合染毒组大鼠间质细胞caspase-3、caspase-9的阳性表达水平高于氟染毒组高砷染毒组,差异均有统计学意义(P0.05)。结论砷及氟联合染毒所致大鼠睾丸组织的损伤及凋亡可能通过激活caspase-3或caspase-9等途径实现。     

妊娠期至性成熟期砷暴露对仔代小鼠海马组织中蛋白激酶A和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白mRNA表达的影响

目的通过研究妊娠期至性成熟期亚砷酸钠暴露对子代小鼠海马组织中蛋白激酶A(protein kinase A,PKA)和环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(c AMP response element-binding protein,CREB)mRNA水平的影响,探讨砷暴露引起仔鼠学习记忆能力损伤的可能机制。方法将24只SPF级妊娠昆明小鼠随机分为对照(蒸馏水)组和15、30、60 mg/L亚砷酸钠染毒组,每组6只;从妊娠第1天至断乳前[出生后(postnatal day,PND)20 d],采用自由饮水方式进行染毒。仔鼠自断乳后至PND40继续染毒。采用水迷宫实验检测PND40仔鼠的学习记忆能力,分别于PND10、PND20、PND40,采用实时荧光定量RT-PCR(Real-time RT-PCR)法检测海马组织中PKA和CREB mRNA的表达水平。结果与对照组相比,训练第4天时60 mg/L亚砷酸钠染毒组仔鼠及训练第5天时各浓度亚砷酸钠染毒组仔鼠寻找平台的潜伏期均延长,仅60 mg/L亚砷酸钠染毒组仔鼠的停留时间缩短,差异有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,仔鼠寻找平台的潜伏期均呈延长趋势,停留时间呈缩短趋势。与对照组相比,各浓度亚砷酸钠染毒组PND20仔鼠及60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND40仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而各浓度亚砷酸钠染毒组PND10仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平无明显改变。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,PND20及PND40仔鼠海马组织中PKA mRNA的表达水平均呈逐渐下降趋势。与对照组相比,60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND20仔鼠及30、60 mg/L亚砷酸钠染毒组PND40仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平均较低,差异有统计学意义(P0.05);而各浓度亚砷酸钠染毒组PND10仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平无明显改变。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,PND20仔鼠海马组织中CREB mRNA的表达水平呈逐渐下降趋势。结论妊娠期至性成熟期砷暴露可使仔鼠海马组织中PKA和CREB mRNA的表达水平降低,进而影响仔鼠的学习和记忆能力。     

亚砷酸钠致大鼠肝功能损伤和肝纤维化形成及其机制探讨

目的探讨亚砷酸钠致大鼠肝功能损伤和肝纤维化形成及其机制。方法将32只成年清洁级SD大鼠随机分为对照(普通饲料)组和低、中、高剂量亚砷酸钠(饲料中砷含量分别为25、50、100 mg/kg)染毒组,每组8只,雌雄各半。采用喂饲法进行染毒,连续染毒3个月。检测大鼠肝砷含量及血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)的活力和透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)的含量以及纤维化面积。结果与对照组比较,各剂量亚砷酸钠染毒组大鼠的肝砷含量均升高,肝脏增生纤维组织面积均增大,差异有统计学意义(P0.05);与对照组比较,各剂量亚砷酸钠染毒组大鼠血清HA的含量和高剂量亚砷酸钠染毒组大鼠血清LN含量及高剂量亚砷酸钠染毒组雌性大鼠血清PCⅢ的含量以及中、高剂量亚砷酸钠染毒组雄性大鼠血清PCⅢ、Ⅳ-C的含量均升高,差异有统计学意义(P0.05);与对照组比较,各剂量亚砷酸钠染毒组大鼠血清ALT、AST的活力均升高,除雌性大鼠中、低剂量组外,差异有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,大鼠的肝砷含量、肝脏增生纤维组织面积及血清ALT、AST的活力和HA、LN、PCⅢ、Ⅳ-C的含量均呈上升趋势。结论亚砷酸钠饲料染毒可导致大鼠肝功能的损伤,进而发生肝纤维化。     

低剂量亚慢性砷染毒对家兔肝脏的损伤

为探讨低剂量亚慢性砷染毒家兔肝脏的损伤情况,将12只成年雄性普通级家兔按体重随机分为4组,分别为对照(自来水)组及低(10μg/L)、中(50μg/L)、高浓度(250 μg/L)亚砷酸钠染毒组,每组3只.采用自由饮水方法进行染毒,连续染毒12周.测定肝组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活力以及脏组织和胆汁中的砷水平,并观察肝脏的病理组织变化.结果显示,与对照组比较,中、高浓度亚砷酸钠染毒组家兔肝组织中SOD活力较低,MDA含量较高,差异均有统计学意义(P＜0.05)；且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,家兔肝组织中MDA水平呈上升趋势,SOD活力呈下降趋势.随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,家兔肝组织和胆汁中的砷水平均呈上升趋势.表明砷在肝脏中蓄积,且经由胆汁排泄；但仅高浓度亚砷酸钠染毒组家兔胆汁中的砷浓度高于对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).提示50 μg/L及以上浓度亚砷酸钠染毒可对家兔的肝脏造成脂质过氧化损伤.     

砷对原代培养海马神经元凋亡及突触素和生长相关蛋白GAP-43表达的影响

目的观察砷对原代培养海马神经元的细胞活性、凋亡及突触素(SYN)和生长相关蛋白GAP-43表达的影响。方法将原代培养的新生SD大鼠海马神经元分别暴露于含0.00、0.05、0.10、0.20、0.40μg/ml亚砷酸钠的培养基中培养24 h。检测神经元形态变化、细胞凋亡及SYN和GAP-43蛋白的表达水平。结果与对照组比较,0.10、0.20、0.40μg/ml亚砷酸钠染毒组大鼠海马神经元中神经网络丰富型神经元的构成比降低,海马神经元的凋亡率较高,SYN蛋白表达水平降低,各浓度亚砷酸钠染毒组大鼠海马神经元中GAP-43蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(P0.05,P0.01)。且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,大鼠海马神经元的凋亡率呈上升趋势,SYN和GAP-43蛋白表达水平呈下降趋势。结论砷可诱导原代培养海马神经元凋亡,通过降低SYN和GAP-43蛋白表达而损伤其突触可塑性。     

饮水途径慢性砷染毒大鼠坐骨神经髓鞘结构和功能的变化

目的探讨慢性砷染毒对大鼠坐骨神经髓鞘结构和功能的影响。方法将60只健康4周龄SPF级雄性SD大鼠随机分为3组,分别为对照(蒸馏水)组和2.5、10 mg/kg亚砷酸钠染毒组,每组20只。采用自由饮水方式进行染毒,连续6个月。测定大鼠坐骨神经的电生理指标以及N-乙酰神经氨酸的含量和β-半乳糖苷酶的活力。采用Western Blot法检测大鼠坐骨神经中髓鞘碱性蛋白(myelin basic protein,MBP)的表达水平。结果与对照组比较,10 mg/kg亚砷酸钠染毒组大鼠坐骨神经干动作电位幅度和传导速度均下降,而2.5 mg/kg亚砷酸钠染毒组大鼠坐骨神经干动作电位持续时间延长,差异均有统计学意义(P0.05);各剂量亚砷酸钠染毒组大鼠坐骨神经干动作电位潜伏期和峰值期均无明显改变。且随着染毒剂量的升高,大鼠神经干动作电位的幅度和传导速度均呈下降趋势,而潜伏期呈上升的趋势,持续时间和峰值期均呈先升高后下降的趋势。与对照组相比,10 mg/kg亚砷酸钠染毒组大鼠坐骨神经中β-半乳糖苷酶的活力和MBP蛋白的表达水平均增加,而N-乙酰神经氨酸的含量降低,差异均有统计学意义(P0.05)。且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,大鼠坐骨神经中β-半乳糖苷酶活力和MBP蛋白的表达水平均呈上升趋势,而N-乙酰神经氨酸的含量呈下降趋势。结论砷暴露可降低神经节苷脂的含量,增加MBP蛋白的表达,从而诱发周围神经毒性,这可能是砷中毒致周围神经病变的机制之一。     

氧化苦参碱对砷致大鼠脑组织氧化损伤的影响

目的探讨氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)对砷暴露大鼠脑组织氧化损伤的影响。方法将64只健康成年清洁级雄性Wistar大鼠按体重随机分为4组,分别为正常对照(去离子水)组、亚砷酸钠染毒(5.0 mg/kg)组和低(25 mg/kg)、高剂量(50 mg/kg)氧化苦参碱干预组,每组16只。亚砷酸钠染毒组和各剂量氧化苦参碱干预组采用经口灌胃的方式进行染毒,每天1次,每周6 d,连续染毒16周。适应性喂养1 d后,各剂量氧化苦参碱干预组采用经口灌胃方式进行染毒,每天1次,每周6 d,连续染毒8周;亚砷酸钠染毒组灌胃去离子水。分别于亚砷酸钠和氧化苦参碱染毒结束后,每组选择8只大鼠,检测脑组织总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)水平、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活力和砷、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果在亚砷酸钠染毒及OMT干预结束后,亚砷酸钠染毒组和各剂量OMT干预组大鼠的脑砷含量均高于正常对照组,差异有统计学意义(P0.05);亚砷酸钠染毒组和各剂量OMT干预组大鼠的脑砷含量间比较,差异均无统计学意义(P0.05)。在亚砷酸钠染毒及OMT干预结束后,与正常对照组比较,亚砷酸钠染毒组和各剂量OMT干预组大鼠脑组织T-SOD水平、GSH-Px活力均较低,而MDA含量均较高,差异有统计学意义(P0.05)。在OMT干预结束后,与亚砷酸钠染毒组比较,各剂量OMT干预组大鼠脑组织T-SOD水平、GSH-Px活力均较高,而MDA含量均较低,差异有统计学意义(P0.05);且随着OMT染毒剂量的升高,亚砷酸钠染毒大鼠脑组织T-SOD水平、GSH-Px活力均呈上升趋势,而MDA含量呈下降趋势。结论 OMT能有效地拮抗砷致大鼠脑组织的氧化损伤作用。     

急性砷暴露对小鼠脾脏核转录因子NF-E2相关因子2信号通路的影响

目的探讨急性砷暴露小鼠脾脏核转录因子NF-E2相关因子2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)及其下游血红素单加氧酶-1(HO-1)和谷胱甘肽-S-转移酶(GST)蛋白的表达。方法将48只健康8周龄清洁级昆明雌性小鼠按体重随机分为4组,分别为对照(生理盐水)组和5、10、20 mg/kg亚砷酸钠染毒组,每组12只。给予小鼠一次性灌胃亚砷酸钠24 h后,测定脾组织丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力以及Nrf2、HO-1和GST蛋白的表达水平。结果与对照组相比,各剂量亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中MDA含量均增加,差异有统计学意义(P0.05);20 mg/kg亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中SOD活力和10、20 mg/kg亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中GSH-Px活力均减少,差异有统计学意义(P0.05)。且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,小鼠脾组织中SOD和GSH-Px活力均呈下降趋势,而MDA含量呈上升趋势。与对照组相比,各剂量亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中HO-1和GSTO1/2蛋白的表达水平及10、20 mg/kg亚砷酸钠染毒组小鼠脾组织中Nrf2蛋白的表达水平均增加,差异有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,小鼠脾组织中Nrf2、HO-1和GSTO1/2蛋白的表达水平均呈上升趋势。结论急性砷暴露在导致小鼠脾脏发生氧化损伤的同时,能够活化Nrf2信号通路,诱导下游抗氧化相关酶类蛋白表达,这可能是砷暴露刺激机体产生的一种防御应答反应。     

三种典型纳米颗粒物对雄性大鼠的生殖毒性

目的探讨二氧化硅纳米颗粒(Si O_2NPs)、二氧化钛纳米颗粒(Ti O_2NPs)、四氧化三铁纳米颗粒(Fe_3O_4NPs)对雄性大鼠的生殖毒性效应。方法将80只健康SPF级雄性SD大鼠随机分为10组,分别为对照(生理盐水)组和1.5、4.5、13.5mg/kg Si O_2NPs、Ti O_2NPs、Fe_3O_4NPs染毒组,每组8只。采用非暴露气管插管滴注法进行染毒,染毒容积为1.0 ml/kg,隔日染毒1次,连续染毒4周。检测大鼠睾丸组织中乳酸脱氢酶同工酶-C4(LDH-C4)、琥珀酸脱氢酶(SDH)活力和睾酮(T)含量以及附睾精子数量、精子存活率、精子畸形率。结果与对照组相比,4.5、13.5 mg/kg Si O_2NPs、Ti O_2NPs和Fe_3O_4NPs染毒组大鼠的精子数量和精子存活率均降低,而精子畸形率均升高,差异有统计学意义(P0.05);且随着Si O_2NPs、Ti O_2NPs和Fe_3O_4NPs染毒浓度的升高,大鼠精子数量和精子存活率均呈下降趋势,精子畸形率均呈上升趋势。与相同浓度的Si O_2NPs染毒组比较,13.5 mg/kg Ti O_2NPs染毒组大鼠的精子数量、精子存活率降低,而精子畸形率升高,差异均有统计学意义(P0.05);另外,13.5 mg/kg Ti O_2NPs染毒组大鼠的精子畸形率高于相同浓度的Fe_3O_4NPs染毒组,差异有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,13.5 mg/kg Si O_2NPs、Ti O_2NPs、Fe_3O_4NPs染毒组大鼠睾丸LDH-C4、SDH的活力及4.5、13.5 mg/kg Si O_2NPs、Ti O_2NPs、Fe_3O_4NPs染毒组大鼠睾丸的T含量均降低,差异有统计学意义(P0.05);且随着Si O_2NPs、Ti O_2NPs和Fe_3O_4NPs染毒浓度的升高,大鼠睾丸LDH-C4、SDH活力和T含量均呈下降趋势。与相同浓度的Si O_2NPs染毒组比较,13.5 mg/kg Ti O_2NPs染毒组大鼠睾丸的LDH-C4活力和T含量均降低,差异有统计学意义(P0.05);13.5 mg/kg Ti O_2NPs染毒组大鼠睾丸T含量低于相同浓度的Fe_3O_4NPs染毒组,差异有统计学意义(P0.05)。结论Si O_2NPs、Ti O_2NPs、Fe_3O_4NPs均可通过影响生殖系统关键酶和性激素水平引起大鼠的生殖毒性效应,且三种纳米颗粒物对大鼠的生殖毒性效应存在差异,以Ti O_2NPs最强。     

稀土氟化钕对雄性大鼠睾丸毒性的影响

目的探讨稀土氟化钕(Nd F3)对雄性大鼠睾丸的影响。方法将48只SPF级健康成年雄性SD大鼠随机分为对照组和低、中、高剂量Nd F3染毒组,每组12只,采用非暴露式气管注入法建立大鼠损伤模型。3个染毒组分别灌注不同剂量的Nd F3溶液,染毒剂量分别为70、210、280 mg/kg,对照组予以相应体积的生理盐水,初次染毒间隔15 d后再次染毒,于第42天称重后处死。检测大鼠血清睾酮含量及附睾精子数量、精子存活率、精子畸形率。采用电感耦合等离子体质谱法测定大鼠睾丸组织Nd F3水平,在普通光镜下观察大鼠组织病理学改变,采用TUNEL法进行睾丸细胞凋亡检测,用透射电子显微镜进行睾丸组织超微结构检测。结果与对照组比较,各染毒组大鼠睾丸内Nd F3含量均增加,差异有统计学意义(P0.05);与对照组相比,低、高剂量组大鼠血清睾酮含量升高,中剂量组睾酮含量下降,且高剂量组睾酮含量低于低剂量组、高于中剂量组,差异均有统计学意义(P0.05)。与对照组相比,中、高剂量组大鼠精子数量、精子存活率降低,精子畸形率、睾丸细胞凋亡指数升高,差异有统计学意义(P0.05)。结论低剂量Nd F3颗粒物可促进大鼠睾丸发育,但中剂量Nd F3可损伤睾丸组织,进而可能影响雄性大鼠生殖功能。     

90 d饮水砷暴露对雄性大鼠生殖系统的毒性作用

目的研究90 d饮水砷暴露对大鼠生殖系统的毒性作用。方法将48只SPF Wistar雄性大鼠随机分为4组,分别为对照组(蒸馏水)、低(50μg/L)、中(150μg/L)、高(450μg/L)剂量组,每组12只,采用自由饮水方式进行染毒,连续染毒90 d后,处死各组大鼠,解剖取材,称量大鼠睾丸和附睾重量,计算脏器系数;取睾丸,HE染色后光学显微镜下观察大鼠睾丸的组织学变化;采用免疫组织化学染色的方法检测大鼠睾丸组织TGF-β_1的表达。结果与对照组比较,各剂量组大鼠睾丸和附睾脏器系数差异无统计学意义;组织学结果显示,与对照组相比,高剂量染毒组对大鼠睾丸产生一定程度的损伤作用;免疫组化结果显示,各剂量组睾丸组织中TGF-β_1蛋白阳性表达均高于对照组,并且随砷暴露剂量升高,睾丸组织中TGF-β_1蛋白阳性表达增多。结论长期慢性饮水砷染毒引起睾丸组织中TGF-β_1表达增多及雄性大鼠睾丸组织一定程度的损伤。     

氯氰菊酯对大鼠睾丸组织的毒性作用

为探讨氯氰菊酯(cypermethrin,CYP)对大鼠睾丸组织的毒性作用,将60只健康雄性大鼠随机分为5组,即对照(玉米油)组和7.5、15、30、60 mg/kg CYP染毒组,每组12只。采用灌胃方式进行染毒,染毒容量为5 ml/kg,每天1次,连续染毒15 d。测定睾丸中精子生成量和一氧化氮(NO)含量及一氧化氮合酶(NOS)、总抗氧化能力(T-AOC)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)活力。结果显示,与对照组比较,30、60 mg/kg氯氰菊酯染毒组大鼠睾丸精子组织匀浆中精子计数、每日生精量和T-AOC活力均显著下降,NO含量和NOS、Caspase-3活力显著升高,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);且随着氯氰菊酯染毒剂量的升高,大鼠睾丸精子组织匀浆中精子计数及每日生精量和T-AOC活力均呈逐渐下降的趋势,NO含量和NOS、Caspase-3活力均呈逐渐上升的趋势。提示在本实验染毒时间和剂量范围内,氯氰菊酯可通过增加NOS活力,生成过多的NO,损伤抗氧化系统,激活凋亡的关键执行分子Caspase-3,降低睾丸组织的生精能力。这可能是CYP致雄性大鼠生殖毒性作用机制之一。     

亚慢性十溴联苯醚对成年大鼠睾丸组织一氧化氮和一氧化氮合酶及标志酶的影响

目的观察十溴联苯醚(BDE-209)对成年大鼠睾丸组织一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)及标志酶的影响。方法将40只健康成年SPF级雄性SD大鼠随机分为溶剂对照(花生油)组和250、500、1 000 mg/kg BDE-209染毒组,每组10只。采用灌胃方式进行染毒,每天1次,连续染毒60 d。观察并计算大鼠精子的数量、活动度和畸形率;测定睾丸组织NO的含量和NOS、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)、山梨醇脱氢酶(SDH)的活力。结果与溶剂对照组比较,各剂量BDE-209染毒组大鼠精子数量和精子活动度以及500、1 000 mg/kg BDE-209染毒组大鼠睾丸组织γ-GT活力下降,而精子畸形率及NO含量和NOS活力升高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着BDE-209染毒剂量的升高,大鼠精子数量和精子活动度及γ-GT呈逐渐下降的趋势,而精子畸形率及NO含量和NOS呈逐渐上升的趋势。结论亚慢性BDE-209染毒雄性成年大鼠精子质量和数量的降低可能与睾丸组织NOS活力、NO含量升高以γ-GT活力下降有关。     

微囊藻毒素-LR急性呼吸道暴露对小鼠生殖细胞凋亡的影响及其作用机制

目的探讨微囊藻毒素(MC-LR)急性呼吸道暴露对小鼠生殖细胞凋亡的影响及其作用机制。方法将30只健康8周龄SPF级ICR雄性小鼠按体重随机分为3组,分别为对照组和10、25μg/kg MC-LR组,每组10只。采取暴露式气管滴注法进行急性暴露36 h。检测小鼠睾丸组织凋亡情况以及睾丸组织内质网应激相关蛋白和凋亡相关蛋白的表达。结果与对照组相比,各剂量MC-LR组小鼠睾丸组织阳性小管发生率和每管凋亡细胞数均较高,差异有统计学意义(P0.01);且随着MC-LR浓度的升高,阳性小管发生率和每管凋亡细胞数均呈上升趋势(P0.01)。与对照组相比,各剂量MC-LR组小鼠睾丸组织中caspase-3、caspase-12、CHOP蛋白及25μg/kg MC-LR组小鼠睾丸组织中GRP78蛋白的表达水平均升高,差异有统计学意义(P0.05);而各剂量MC-LR组小鼠睾丸组织中caspase-9、IER1、PERK蛋白的表达水平均无明显改变。随着MC-LR染毒剂量的升高,小鼠睾丸组织中caspase-3、caspase-12、CHOP蛋白的表达水平均呈上升趋势。结论呼吸道急性暴露MC-LR可能通过内质网应激途径诱导小鼠睾丸生殖细胞凋亡,从而介导小鼠睾丸损伤。     

饮水砷暴露大鼠血清炎症因子及肺泡灌洗液中自噬相关蛋白NBR1与P62的表达

目的观察亚砷酸钠对大鼠血清炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和肺泡灌洗液中自噬相关蛋白NBR1、P62的影响。方法将32只健康SPF级雄性SD大鼠按体重随机分为4组,分别为对照(超纯水)组和10、100、1 000μg/L亚砷酸钠染毒组,每组8只。采用自由饮用方式染毒,连续染毒28 d。测定大鼠血清中IL-6、IL-8、IL-1β、TNF-α的浓度和肺泡灌洗液中NBR1和P62的水平。结果与对照组比较,各浓度亚砷酸钠染毒组大鼠血清中IL-1β、IL-6的水平和10、100μg/L亚砷酸钠染毒组大鼠血清中IL-8水平及10μg/L亚砷酸钠染毒组大鼠血清中TNF-α水平较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,大鼠血清中IL-6、IL-8和TNF-α的浓度均呈先升高后下降趋势。与对照组比较,100、1 000μg/L亚砷酸钠染毒组大鼠肺泡灌洗液中NBR1的水平和10、100μg/L亚砷酸钠染毒组大鼠肺泡灌洗液中P62的水平较高,差异均有统计学意义(P0.05);且随着亚砷酸钠染毒浓度的升高,大鼠肺泡灌洗液中NBR1、P62的浓度均呈先升高后下降趋势。亚砷酸钠染毒大鼠血清IL-6与肺泡灌洗液中P62呈正相关(r=0.399,P0.05),血清TNF-α与肺泡灌洗液中NBR1呈正相关(r=0.452,P0.05)。结论炎症因子和细胞自噬参与亚砷酸钠致大鼠肺损伤,大鼠肺部损伤可能与细胞自噬受到抑制和炎症因子增多有关。     

吸烟对雄性大鼠睾丸组织结构及细胞凋亡的影响

目的通过测定吸烟雄鼠睾丸组织结构及细胞凋亡情况,探讨吸烟对雄性生殖系统的损伤机制。方法将清洁级SD雄性大鼠160只随机分为染毒2、4、6、8、12周的低、中、高剂量染毒组及对照组,每组10只。采用呼吸道静式染毒,每日染毒1次,染毒周期为2、4、6、8、12周。采用HE染色及末端转移酶标记技术(TUNEL法)测定大鼠睾丸组织病理学改变及细胞凋亡情况,用ELISA法检测大鼠血浆抑制素B的表达水平。结果吸烟组大鼠睾丸脏器系数从第8周起逐渐减小,与2周各剂量染毒组相比,差异有统计学意义(P0.05)。吸烟组大鼠随着染毒时间的延长和剂量的增加,睾丸组织病理学改变逐渐明显,染毒12周后大鼠睾丸组织支持细胞呈现空泡化,管腔内观察不到游离精子。吸烟组大鼠睾丸细胞凋亡指数随染毒时间及剂量的增加而升高,染毒4周高剂量组、6周中及高剂量组、8周及12周各剂量组睾丸细胞凋亡指数均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。随着染毒时间及剂量的增加,大鼠血浆抑制素B水平逐渐降低,染毒第8周起低于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论香烟烟雾中的有害成分可致大鼠睾丸组织结构损伤及睾丸细胞凋亡率增加,并抑制血浆抑制素B分泌。     

亚慢性砷暴露对大鼠海马组织BDNF表达的影响

目的探讨亚慢性饮水型砷暴露对大鼠海马组织BDNF表达的影响。方法将40只SD大鼠按体重随机分为4组,分别为对照组(蒸馏水)和2.4、12、60 mg/L亚砷酸钠溶液染毒组,每组10只,雌雄各半,采用自由饮水的方式连续染毒100 d。检测脑砷含量、海马组织BDNF mRNA及蛋白表达。结果各染砷组大鼠脑砷含量均高于对照组(P0.05),且脑砷含量随着染毒剂量的增加呈上升趋势;各染砷组大鼠海马组织BDNF mRNA及其蛋白表达均低于对照组(P0.05)。结论亚慢性砷暴露可引起大鼠海马组织BDNF mRNA及其蛋白表达的降低。