骨折愈合的现代研究与局部基因治疗

本文综述了近年来有关骨折愈合研究的部分文献。作者认为 ,生长因子在骨折愈合中起着重要的作用。应用生长因子或其基因疗法有望成为一种骨折治疗的重要方法 ,特别是应用能诱导未分化间质细胞定向分化为成骨细胞的骨形态发生蛋白的基因治疗 ,具有应用价值     

牛骨形态发生蛋白复合纤维蛋白促进骨质疏松性椎体骨折愈合的实验研究

目的探讨以纤维蛋白为牛骨形态发生蛋白(bBMP)载体促进大鼠骨质疏松性椎体骨折愈合的机制。方法选择雌性SPF级8月龄SD大鼠81只,随机选取54只经去除卵巢建立骨质疏松模型,27只行伪手术。3月后以腰5椎体手术开窗刮除术区内松质骨的方法建立骨折模型,去除卵巢建立的骨质疏松模型随机分为两组:A组为骨质疏松椎体骨折bBMP治疗组,B组为骨质疏松椎体骨折空白组。每组各27只,C组为伪手术组。于术后1,2,4,6,8,12周观察影像学、组织学与力学性能。结果(1)影像学观察:术后两组X线片示腰5椎体有一骨折缺损透光区。A,C组在术后6周时透光区与周围骨质无明显差别,而B组仍清晰可见,于8周时无明显差别。(2)组织学观察:三组软骨细胞在骨质愈合1周时出现,形成软骨岛,但B组软骨细胞每高倍镜下数量明显少于A,C组,另外,软骨细胞改建成成熟骨细胞,骨小梁形成数量,胶原纤维排列较A,C组有明显差异。(3)力学性能测定:在骨质愈合6~12周,腰5椎体的最大载荷、弹性模量、最大应力明显高于同期B组,差异显著(P<0.05),而A,C组之间无统计学意义(P>0.05)。结论bBMP复合纤维蛋白明显促进骨质疏松性椎体骨折愈合,证明在骨质疏松性松质骨骨折修复过程中bBMP以纤维蛋白为载体作用显著,骨折愈合质量明显增高。     

股骨干骨折交锁髓内钉内固定移位骨块对骨折愈合的影响

目的探讨对伴有移位骨块的股骨干骨折患者运用交锁髓内钉闭合复位内固定后,移位骨块的大小和移位距离对骨折愈合的影响。方法回顾性分析唐山市第二医院2010年5月-2015年5月应用交锁髓内钉闭合复位内固定治疗的174例股骨干骨折患者,其中男性93例,女性81例;年龄22~65岁,平均40.2岁。根据患者术后移位骨折块的面积大小和移位距离不同分为4组:A组(游离骨折块面积≤15cm2,移位距离≤10mm)60例,B组(游离骨折块面积≤15cm2,移位距离10~20mm)27例,C组(游离骨折块面积:15~30cm2,移位距离≤10mm)62例,D组(游离骨折块面积:15~30cm2,移位距离10~20mm)25例。对4组患者的平均骨折愈合时间、骨折一期愈合率和总愈合率及术后临床疗效进行对比分析。结果4组患者各项指标比较均有统计学意义,其中A组患者骨折愈合情况最好,骨折愈合率为98.33%,D组愈合情况最差,骨折愈合率为56%,B、C组介于A组和D组之间且C组患者愈合情况优于B组。A、B、C、D组临床疗效优良率分别为96.67%、77.78%、83.87%、48.00%。结论移位骨块的面积或移位距离增大均会对骨折愈合产生不利的影响,当骨块移位距离10mm、面积15cm2时骨折愈合率及术后临床疗效明显降低,因此临床上治疗此类患者时应当给予足够重视,必要时给予临床干预,以防术后骨折延迟愈合或不愈合情况的发生。     

骨折愈合的一些新概念

现已知，骨折和组织损伤时局部可释放化学趋化因子、血管形成因子和生长因子等活性物质。血肿中有大量单核细胞、淋巴细胞和巨噬细胞，它们向损伤部位游走并产生某些生长因子。许多间叶细胞也有类似作用，如类胚胎细胞（ｅｍｂｒｙｏｎａｌ－ｌｉｋｅｃｅｌ）、原始细胞（...     

骨折端注射“促骨愈合素”对骨愈合影响的实验研究与临床应用

家兔34只,双侧尺骨中段人工锯断,造成2mm骨缺损。左侧(药物侧)于术中当时及术后每隔3天注射“促骨愈合素”0.5ml,15天停药,右侧(对照侧)不注药。术后1～8周X线片及组织学检查结果表明,注药侧骨痂、骨小梁、钙盐等的出现及数量均明显优于对照侧。经两家医院协作治疗13例新鲜骨折和15例骨不连病人,结果满意。证实骨折端注射“促骨愈合素”能促进新鲜骨折愈合,缩短疗程,对骨不连可获完全治愈。     

山莨菪碱对大鼠骨折愈合影响的实验研究

探讨山莨菪碱对大鼠骨折愈合影响的机制。认为山莨菪碱能提高大鼠局部血流灌注,减轻渗出、加速吸收、机化、促进骨痂形成而缩短骨折愈合时间。     

积极开展加速骨折愈合的研究

积极开展加速骨折愈合的研究董天华据统计，约５％～１０％的骨折可因各种原因发生骨折迟缓愈合和不愈合［１］．其中有与局部解剖原因所致血供不良或固定不牢有关，有因严重创伤直接造成骨与软组织过度破坏与缺损所致，但亦有不少是治疗中未能遵循骨折治疗基本原则，包括...     

脱钙骨基质移植治疗高原地区骨折,骨延迟愈合

脱钙骨基质移植治疗高原地区骨折、骨延迟愈合雷明全李恩平魏喜全林贵德王民刚杜全印自Ｕｎｉｓｔ（１９６５）证实脱钙骨基质（ｄｅｍｉｎｅｒａｌｉｇｅｄｂｏｎｅｍａ－ｔｒｉｘ，ＤＢＭ）的诱导成骨作用以来，国内外［１～５］已广泛应用于临床，但未见高原地区报道．...     

骨折端微钻孔对兔骨折愈合过程影响的实验研究

目的 研究骨折断端微钻孔对骨折愈合的影响。方法 应用40只家兔造成双侧桡骨实验性骨折,采用微型骨钻在骨折端钻5－8个微孔,术后2、3、4、6周进行组织学、X线片和同位素扫描对比观察。结果 实验组骨折愈合速率快于对照组（P＜0．05）。结论 骨折端微钻孔能加速骨折愈合。     

Computed tomography and plain radiography in experimental fracture healing

We evaluated the relative contribution of plain radiographs and computed tomography to the assessment of fracture healing under experimental circumstances. In 15 sheep, we performed midshaft femoral osteotomies and internal fixation of the resultant segmental fractures. Radiographs were obtained preoperatively and immediately postoperatively. Animals were sacrificed at 3 weeks, 6 weeks, 12 weeks, 24 weeks, and 36 weeks after surgery, and the femoral specimens radiographed. After removal of the internal fixation devices, computed tomographic scans of the specimens were performed.By 3 weeks, callus was visible, but at 6 weeks, a trabecular pattern in the callus was seen on plain films but not on computed tomography. There was progressive organization of the callus on both studies. At 24 weeks, computed tomography demonstrated fracture lines not seen due to overlying callus on plain films and also more accurately showed incomplete union. By 36 weeks, healing was essentially complete according to both modalities, although there still were small gaps in the callus detectable on computed tomography but not on plain films.Computed tomography may be of value in the evaluation of fractures of long bones in those cases in which clinical examination and plain radiographs fail to give adequate information as to the status of healing.     

不同方法固定后松质骨骨折愈合的超微结构观察

目的 观察不同方法固定后的松质骨骨折愈合的超微结构变化。方法 采用成年新西兰兔３０只,在兔股骨髁间做完全截骨后,分别采用屈膝位长腿石膏固定,皮质骨和松质骨螺丝钉内固定术后３ｄ,１,２,３,６周截取标本进行透射电镜观察。结果 不同方法固定除对松质骨骨折愈合过程中的成纤维细胞出现时间载明显影响外,对成纤维细胞和成软骨细胞变笥以及成骨细胞功能有着十分明显的影响。     

骨折断端血管性血友病因子表达在骨折愈合中的生物学意义

目的 探讨骨折断端血管性血友病因子(von willebrand factor,vWF)表达在骨折愈合中的生物学意义.方法 雄性SD大鼠28只,建立股骨骨折模型.分别于造模后2,3,5,7,10,14,21 d取骨折断端组织,每个时间点4只大鼠,计算机图像分析观察大鼠骨折断端vWF表达,成骨细胞、软骨细胞与vWF表达分布间的关系,结合体外培养的大鼠成骨细胞的vWF表达结果,分析骨折断端vWF表达在骨折愈合中的生物学意义.结果 各时间点大鼠骨折断端新生的骨小梁及软组织血管内vWF均呈阳性表达且分布不均,骨折断端软骨细胞周围基质中vWF阳性表达.培养的大鼠成骨细胞胞浆内外vWF表达阴性.结论 骨折愈合过程中可能存在vWF-血小板激活途径,调控骨折局部成骨细胞、软骨细胞的分化与增殖,为骨折的愈合创造良好的微环境.     

Primary hyperparathyroidism presenting as delayed fracture union

We describe a case of delayed union in a tibial fracture secondary to primary hyperparathyroidism. A closed intra-articular proximal tibia fracture was stabilized with a hybrid external fixator. At 5 months clinical and radiological evaluation failed to demonstrate evidence of fracture healing. Fixation was stable and inflammatory markers ruled out infection. Further questioning revealed symptoms of anorexia, nausea and constipation. Plasma biochemistry showed an elevated corrected calcium and parathyroid hormone concentration. Further investigation included a sestamibi scan which confirmed a diagnosis of hyperparathyroidism secondary to a parathyroid adenoma. Six weeks following partial parathyroidectomy the fracture site was pain free, non-tender and the fracture had united radiologically. In cases of delayed-union, once an infective cause has been excluded with a mechanically stable fracture, other causes of delayed union like primary hyperparathyroidism should be ruled out.     

定量CT评价骨折愈合的有效性

目的 探讨定量CT(quantitative computed tomography,QCT)评价骨折愈合的有效性和准确性.方法 将24只健康新西兰兔随机数字表法分为A组(骨折愈合组,右胫骨中段横形骨折,用克氏针内固定)和B组(不愈合组,右胫骨中段横断骨折,制作5 mm骨缺损后以骨蜡封填断端和髓腔),分别于第2,4,8,12周各处理3只兔:先摄两侧胫骨X线片,拔出克氏针及定量CT检测,之后处死动物,将骨折段切取行组织学分析.以X线片和组织学表现为骨折愈合及不愈合的金标准,以受试者工作特征曲线(ROC)分析定量CT检测参数的评价效能,并以健侧胫骨相应节段为对照,观察定量CT参数结果的变化趋势.结果 A组X线片和组织学证实骨折在第2,4周骨折线清晰,为纤维骨痂填充,8～12周骨折线模糊至消失,骨皮质恢复完整连续性.B组X线片和组织学在第2、4周骨折线清晰,骨化不活跃,8～12周骨折线仍存在,骨细胞和骨小梁稀少.将定量CT检测结果进行ROC分析显示,材料学参数骨痂骨密度(BMD)、骨痂骨矿含量(BMC)的曲线下面积(准确度)为0.781和0.750,结构学参数横截面积(CSA)和截面惯性矩(CSMI)的曲线下面积(准确度)为0.781和0.469(P<0.05),材料学参数和结构学参数乘积引伸所得的横截面积力学强度指数(BSICSA)、截面惯性矩力学强度指数(BSICSMI)的曲线下面积(准确度)分别为0.913和0.813(P<0.05),BMD、CSA、BSICSA三者曲线下面积(准确度)分别为0.905,0.921,0.905(P<0.05).结论 定量技术测量骨折局部形态具有区分和反映骨折愈合与骨折不愈合模型及过程的潜能,所筛选出具有准确度的参数有BMD、CSA和BSICSA,这些参数具有准确、特异的优越性.     

骨折固定对长骨微循环及骨折愈合的影响

在骨折愈合过程中,稳定的力学环境和骨折端适当的血液供应起着决定性的作用,其中骨外固定对骨的血循环,特别是对骨折端的血循环干扰最小,传统的“坚强固定”观念已逐渐被既要求牢稳固定,又要求尽可能保护血循环的“生物学固定”观念所取代,因此,长骨的微循环改变在骨折愈合过程中起着重要的作用。本文对正常长骨的微循环和不同固定方式对微循环及骨折愈合的影响作一综述。     

重组人BMP-2聚乳酸缓释纳米微球对体外培养兔成骨细胞增殖和矿化的影响

目的 观察重组人骨形态发生蛋白-2聚乳酸纳米微球缓释系统(rhBMP-2-PLA-Ns)对体外培养的兔成骨细胞的生物学效应. 方法 体外培养兔成骨细胞并鉴定,将rhBMP-2-PLA-Ns和第3代成骨细胞一起培养,免疫荧光法检测成骨细胞核中增殖细胞核抗原(PCNA)的表达,茜素红染色方法观察矿化结节的形成,Western blot检测rhBMP-2-PLA-Ns对成骨细胞自分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用,并与单纯rhBMP-2组和空白组进行比较. 结果 培养5 d后,各组PCNA阳性细胞差异无统计学意义.培养10 d后,rhBMP-2-PLA-Ns组阳性细胞数明显高于单纯rhBMP-2组和空白组,表明rhBMP-PLA-Ns能够明显促进PCNA在成骨细胞核中的表达.与其他两组比较,rhBMP-2-PLA-Ns能显著促进矿化结节的形成(P<0.05);对Western blot检测结果进行半定量分析显示:三组成骨细胞均有VEGF的自分泌,加入rhBMP-2-PLA-Ns成骨细胞自分泌VEGF的量超过单纯rhBMP-2组以及空白对照组(P<0.05).结论 rhBMP-PLA-Ns有较好的生物学活性,能促进成骨细胞的增殖、矿化和VEGF自分泌的增加,具有一定的临床应用价值,为加快骨创伤的愈合提供了新的思路.     

天鹅记忆接骨器对骨折愈合中骨生物电的影响

目的　探讨天鹅记忆接骨器 (SMC)对实验性骨折愈合中骨生物电的变化及其与骨折愈合的关系。　方法　 33只新西兰大白兔双侧肱骨干截骨后 ,随机选取一侧用SMC固定 ,对侧用四孔加压接骨板 (DCP)固定 ,在骨折前、骨折后、内固定术后即刻、1,2 ,4 ,8,12周 ,应用改良的Friedenberg技术 ,连续测量 8只兔骨折端生物电的变化。在术后 1,2 ,4 ,8,12周各处死大白兔 5只 ,骨折部取材 ,制作HE切片。　结果　SMC组骨折端术后始终保持恒定负性生物电位 ,而DCP组术后 2周 ,骨折端负性生物电位即开始回升 ,术后 4周即恢复至伤前水平 ,与SMC组相比差异有显著性意义 (P <0 .0 5 )。组织学观察显示 ,DCP组骨愈合以软骨内化骨为主 ,而SMC组软骨内化骨则不明显 ,骨折端直接由板层骨替代连接。　结论　SMC对骨折端产生持续动态的压应力 ,使骨折部形成相对恒定负性生物电 ,有助于骨折愈合。     

骨折愈合过程中血管内皮生长因子及其受体的表达

目的 探讨血管内皮生长因子（VEGF）在骨折愈合中的表达规律及其受体在骨折端血管内皮细胞内的表达类型。方法 采用新西兰大耳白兔35只,随机为术后8、24、72h,1、3、5、8周7个时相组每组5只,制作左侧桡骨中段骨折模型,按分组于相应时相点取骨折端标本固定,脱钱处理后行冰冻切片,利用原位杂交、免疫组织化学方法分别检测VEGF及其受体在骨折端的表达情况。结果 在伤后8h-8周的骨折端血管内皮细胞内检测到VEGF的flt1受体表达,1-3周为表达的高峰期;骨折后3d-3周检测到flk1受体的强阳性表达。结论 VEGF及其flt1受体表达贯穿于骨折愈合的始终,flk1受体在伤后一定时间呈强阳性表达。由于VEGF通过与其受体的特异性结合而发挥作用,因此可以确定VEGF在骨折后的血管重建过程中起重要作用,并且可能在骨折愈合过程中也发挥作用。