癌基因CTTN表达Cortactin蛋白及其变异体磷酸化状态下与细胞蛋白Dynamin相互作用分析

目的:探讨Cortactin的氨基端序列在磷酸化介导的蛋白相互作用中的功能。方法:设计表达标签为GST的氨基端缺失的Cortactin突变体,纯化突变体蛋白,以及全长Cortactin蛋白,同时纯化His标签的细胞发动蛋白Dynamin,采用Src磷酸化Cortactin蛋白,并采用pull-down分析观察与Dynamin的相互作用。结果:成功表达和纯化Cortactin的1-80氨基酸(CortΔ80)缺失、1-349缺失的Cortactin突变体(CortΔ349),以及全长Cortactin(Cort WT)和Dynamin。Pull-down分析结果表明:与磷酸化的野生型Cortactin蛋白比较,氨基端缺失的Cortactin蛋白在磷酸化后与Dynamin的结合作用减弱。结论:实验提示Cortactin分子的氨基端是Arp2/3与actin结合的重要结构域其参与肌动蛋白聚合的过程,对于磷酸化信号的正常传导是不可或缺的部分。     

Max作用蛋白1-0缺失突变体的构建、表达及细胞内定位的研究

目的:构建Max作用蛋白1-0(Max interacting protein1-0,Mxi1-0)缺失突变体的真核表达载体并观察这些突变体在细胞内的定位情况,为研究Mxi1-0细胞内定位与其功能的关系奠定基础。方法:以野生型Mxi1-0真核表达质粒为模板,聚合酶链式反应扩增出5种类型Mxi1-0缺失突变体的基因片段,克隆至增强绿色荧光蛋白真核表达载体,经酶切和测序鉴定后,利用脂质体将重组质粒转染小鼠胚胎成纤维细胞株(NIH3T3)。Western blot检测融合蛋白的表达,荧光显微镜下观察融合蛋白细胞内定位情况。结果:各种Mxi1-0缺失突变体经测序鉴定正确后,在NIH3T3中得到表达。免疫荧光结果表明,脯氨酸富集结构域(PRD)突变体在细胞质和细胞核中均有分布,与Sin3结合域高度同源结构域(tSID)突变体主要分布于细胞质,在细胞核中有少量分布;PRD-tSID突变体及△PRD突变体分布于细胞质,而△PRD-tSID突变体主要分布于细胞核。结论:成功构建了5种人Mxi1-0缺失突变体的真核表达载体,并初步观察这些突变体在细胞内的定位情况,为探寻Mxi1-0在细胞内定位机制及功能奠定了基础。     

抗结核药物筛选模型荧光素酶报告系统的建立

目的:以ESX -1分泌系统为靶点,建立能够寻找既能抑制该系统发挥功能、降低结核菌毒力和细胞内生存力,又不抑制分枝杆菌生长、减少耐药性产生可能性的抗结核药物.方法:通过PCR的方法扩增得到Luciferase(LUC)、CFP-10及其突变体△CFP-10,应用搭桥的方法将二者融合,电击转化入海分枝杆菌,测定海分枝杆菌上清中LUC活性.结果:表达LUC-CFP-10融合蛋白重组海分枝杆菌上清中荧光素酶的活性是表达末端缺失7个氨基酸的LUC-△CFP-10融合蛋白的10倍左右.结论:可以通过检测LUC-CFP-10蛋白的分泌,即通过测定海分枝杆菌上清中荧光素酶活性来反映ESX -1分泌系统的活性,而该分析方法可以发展成为寻找ESX -1抑制剂的高通量筛选方法.     

带3蛋白C末端132个氨基酸残基与血型糖蛋白A相互作用位点的研究

目的：利用酵母双杂交系统探寻带3蛋白与血型糖蛋白A(GPA)的相互作用位点。方法：采用PCR方法，从pFAST-Bac-AE1-C-end杆状病毒表达载体中扩增出AE1—C—end截断突变体(Arg832-Arg879)，将突变体的cDNA片段插入酵母双杂交系统GAL4AD端表达载体中，观察其在选择性培养基上的表达情况。用醋酸锂法将构建好的重组质粒与BD端表达质粒共同转化酵母菌AHl09，经酵母双杂交营养缺陷培养和β—半乳糖苷酶检测证实带3蛋白C—末端与GPA之间的作用位点。结果：成功构建了AE1-C-末端截断突变体酵母双杂交的AD端表达质粒，证实带3蛋白C-末端截断突变体与GPA不止有一个相互作用位点。结论：带3蛋白与GPA的作用位点不仅在带3蛋白的酸性C端域，还涉及其最后两次跨膜域。     

重组日本七鳃鳗毒素蛋白rLj-RGD3及其4种突变体抗血小板聚集活性的比较

目的：初步探讨rLj-RGD3分子中3个RGD模体对野生型rLj-RGD3抗血小板聚集活性的作用。方法全序列人工合成并重组表达、纯化4种rLj-RGD3缺失突变体蛋白。制备富血小板血浆( PRP),与不同浓度各重组突变体蛋白共温浴,采用Born氏比浊法测定ADP诱导的血小板聚集率,并计算血小板聚集抑制百分率,以评价野生型rLj-RGD3及其4种突变体蛋白的抗血小板聚集活性。结果成功重组表达纯化4种可溶性rLj-RGD3缺失突变体蛋白, rLj-RGD3抗血小板聚集活性最高, rLj-RGD3-0不具有抗血小板聚集功能, rLj-RGD3-1、rLj-RGD3-2及rLj-RGD3-3活性相当。结论3个RGD模体在rLj-RGD3抗血小板聚集功能中均十分重要,并不分伯仲,而rLj-RGD3因分子中含有3个RGD模体而活性最强。     

用重组PCR技术缺失突变人单核细胞趋化蛋白-1基因

目的：用重组PCR技术对人单核细胞趋化蛋白-1(hμMCP-1)基因cDNA进行缺失突变，构建其突变体-7NDcDNA。方法：根据hμMCP-1基因缺失突变前后的两段基因分别设计两对含有酶切位点的引物，以pBluescdpt-hμMCP-1为模板，进行重组PCR反应，将PCR产物与T载体连接进行TA克隆，酶切鉴定并测序确定其长度为342bp，继之将目的基因克隆入pcDNA3．1真核表达载体。结果：成功构建hμMCP-1cDNA突变体-7ND的真核细胞表达载体，测序结果表明，该突变体N端第2至8位氨基酸缺失。结论：重组PCR技术是十分有效、可靠的基因缺失突变方法。     

Gene synthesis,cloning,prokaryotic expression and analysis of chikungunya virus E2 glycoprotein

目的 通过对全长基孔肯雅病毒包膜蛋白E2(CHIKV-E2,1~404 aa)及其跨膜疏水区(351~378 aa)缺失突变体E2(1~350 aa)进行原核表达,分析跨膜疏水区对E2蛋白在大肠杆菌中表达的影响.方法 利用ExPasy预测软件对E2蛋白跨膜疏水区进行预测分析,根据GenBank数据库中CHIKV-E2氨基酸序列获得其对应的基因序列.结合重叠延伸PCR(OE-PCR) 原理设计用于全基因合成的核酸引物对CHIKV-E2全长基因(404 aa)进行体外合成,构建全长E2蛋白及其缺失突变体原核表达质粒,将序列正确的两种重组质粒分别转至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测重组质粒的表达情况.结果 OE-PCR法成功合成了大小为1 212 bp的编码CHIKV-E2(1~404 aa)蛋白的全长基因,构建了全长E2蛋白及其缺失突变体重组表达质粒 pET21b-E2(1~404)和pET21b-E2(1~350),经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE结果显示缺失突变体pET21b-E2(1~350)融合蛋白表达量较pET21b-E2(1~404)有明显提高.结论 E2蛋白跨膜疏水区(351~378 aa)对该蛋白的原核表达具有重要影响,缺失该疏水区的突变体在大肠杆菌中表达量比全长E2蛋白表达量明显提高.     

HA20-lys10在大肠埃希菌中的融合表达纯化和凝胶阻滞试验

目的表达和纯化流感病毒血凝素HA2氨基末端20个氨基酸与10个赖氨酸的融合蛋白HA20-lys10,并观察其与质粒结合的能力.方法用PCR方法构建流感病毒血凝素HA2氨基末端20个氨基酸与10个赖氨酸的融合基因HA20-lys10,并克隆于pET32a(+)原核表达载体.将重组表达质粒pET-HA-K转化大肠埃希菌BL21(DE3),当A(Abs)600nm达到0.6时,加入终浓度为1 mmol/L IPIG诱导目的蛋白的表达.表达产物用亲和层析一步法进行纯化,然后用凝胶阻滞试验观察重组蛋白结合质粒的能力.结果IPTG诱导后可获得相对分子质量约为27 000的目的蛋白,表达蛋白以可溶形式存在,占菌体蛋白20%以上.表达菌超声后,表达产物经亲和层析一步纯化后可获得纯度达85%以上目的蛋白.凝胶阻滞试验发现,纯化的重组蛋白在一定条件下可以与质粒结合,使质粒的迁移率明显改变.结论融合蛋白HA20-lys10有望用于受体介导基因转移,以提高基因转移的效率.     

类泛素蛋白FAT10共价结合底物蛋白质的活性分析

 目的 探讨类泛素蛋白FAT10的C末端双甘氨酸基团及双泛素结构域结合修饰底物蛋白质的活性。方法 分别将野生型全长FAT10,C末端双甘氨酸的缺失突变体FAT10ΔGG,分别包含N端、C端泛素结构域的截断突变体FAT10 N和FAT10 C构建到真核表达载体中,转染HEK293T细胞,并使用26S蛋白酶体抑制剂MG132处理细胞。利用Western blot方法检测野生型FAT10及其突变体结合底物蛋白质的活性。结果 与野生型FAT10的蛋白质底物结合能力相比,FAT10ΔGG、FAT10 N、FAT10 C与底物蛋白质结合能力均显著下降。蛋白酶体抑制剂MG132能够促进FAT10及其突变体的底物结合活性。结论 FAT10的C末端双甘氨酸基团及双泛素结构域都是FAT10与底物共价结合所需的活性基团,被FAT10标记后的底物蛋白质通过26S蛋白酶体途径降解。     

基于网络药理学的墨旱莲-女贞子药对“异病同治”糖尿病肾病与糖尿病视网膜病变的机制研究

[目的]通过网络药理学的方法,研究墨旱莲-女贞子药对"异病同治"糖尿病肾病(DN)与糖尿病视网膜病变(DR)的药理作用机制,验证国医大师吕仁和教授治疗DN与DR的临床经验。[方法]利用TCMSP、TCMID和Uniprot数据库,搜集并获取墨旱莲、女贞子的化学成分及其作用靶点。利用NCBI-gene、Genecards和OMIM数据库搜集DN和DR的疾病相关靶点。通过String数据库、Cytoscape3.7.2软件、TBtools软件构建药物靶点蛋白相互作用网络,获取交集靶点。利用BioGPS数据库和Cytoscape3.7.2软件构建作用靶点-组织分布网络图,运用GO数据库和Cytoscape3.7.2软件的ClueGO插件对交集靶点进行GO和KEGG富集分析。[结果]墨旱莲-女贞子药对主要含有14个活性成分和124个潜在作用靶点,DN相关靶点2 614个,DR相关靶点2 587个,其中药对同时作用于DN和DR的共同靶点有63个。有11个作用靶点在胰岛、视网膜和肾脏高表达,KEGG富集分析得到共同靶点主要富集在糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、TNF信号通路和IL-17信号通路等115条通路上,涉及对含氧化合物的反应、细胞对化学刺激的反应、对脂质的反应和细胞群增殖的调节等1 686个生物过程。[结论]墨旱莲-女贞子药对可能通过调节多个靶点、多条通路和多个生物反应过程,达到对DN与DR的"异病同治"作用,为吕仁和教授的临床经验用药提供了网络药理学验证,也为今后进一步研究墨旱莲-女贞子药对的药理作用机制提供了依据。     

CELL SURFACE CHARGES ANDINVASION OF DURUG RESISTANTSUBLINES OF EHRLICHASCITES TUMOR CELLS

Ehrlich ascites tumor I:EAT) cells devcloped into drug resistant sublines (DR) after treatment with antitumor agents (Viublastine VBL, ac- tinomycin D - AD, and 5-flurouracil- 5-Fu) for several months, but became sensitive again (RS) vrhen the drugs were stopped for 4 months or more. The cell electrophoretic niobilities of the three DR sublines were significantly different frora that of the drug sensitive line (DS). The cell surface cha,rgc densities of RS of {VBL and 5-Fu wcre also different fron:t those of the res- pective DR sublines. flowever, the charge dens- ity ot the RS of AD remained the same as that, of its DR subline. This phenomenon had pre- vlously been see7a iri the subline of EAT treated with sarcolysine (Ku and Liu, 1965). In a later stage of the development of DR of VBL, trunor cells invaded into adipose tissue along the uterus ot tumor bcaring mice. Invasion persisted for 40-50 generafions when tumor ceUs were already resistant to VBL, but vanished gradually.     

阿尔茨海默病患者海马CA1区p75NTR的表达与其神经病理学改变的关系

目的：观察阿尔茨海默病（AD）患者海马CA1区p75^NTR的表达与其神经病理学改变的关系。方法：免疫细胞化学双标法。结果：AD患者海马CA1区p75^NTR免疫阳性神经性元与正常对照组比较无显著差异，但着色强度明显增加；AD海马CA1区Alz-50阳性神经元较多，并可见大量p75^NTR和Alz-50双标神经元，而正常对照组阳性神经元罕见，老年斑中散在分布p75^NTR免疫阳性反应产物。结论：p75^NTR参与AD神经病理的形成。     

坐骨神经损伤后脊神经节A细胞和B细胞的不同凋亡反应：p75神经营养因子受体的作用

研究背景： 采用公平的体视学方法,我们已发现：神经损伤后,脊神经节B细胞优先丢失;而且,脊神经节细胞Caspase-3的活化和脊神经节B细胞的丢失都与p75神经营养因子受体（p75NTR) 有关。 方法：为明确神经损伤后 p75NTR 参与的脊神经节细胞的凋亡通路,我们使用了 p75NTR 基因剔除鼠和其野生鼠。采用免疫组化的方法,我们观察了单侧坐骨神经损伤后的第二天和第七天,前凋亡蛋白,包括：JNK、c-jun和p38在脊神经节细胞的表达。另外,采用免疫组化和western blot的方法,我们同时观察了生存信使,ERK, 在脊神经节细胞的表达。 结果： 磷酸化的JNK和p38主要由B细胞表达,而A细胞和B细胞均表达磷酸化 的c-jun。磷酸化的ERK见于B细胞和卫星细胞。神经损伤后,磷酸化的JNK和c-jun阳性细胞数显著增多,而磷酸化p-38和ERK的表达没有明显变化。而且,神经损伤后第二天,野生鼠的磷酸化JNK阳性细胞百分率是p75NTR 基因剔除鼠的2.2倍（p=0.001)。 结论：神经损伤后, p75NTR 依赖的JNK－caspase－3途径参与脊神经节B细胞的丢失,JNK不是c-jun的唯一激活者。     

树突状细胞感染Her2/neu膜外及跨膜区蛋白基因重组腺病毒后的免疫功能变化

目的 观察体外树突状细胞（DC）感染编码Her2／neu基因膜外第一受体区（Her2-ECDs）、全长膜外区（Her2-ECD）和膜外跨膜区（Her2-TM）蛋白3种重组腺病毒（rAdrier2-ECDs、rAdrier2-ECD和rAdHer2-TM）后的免疫功能变化。方法 重组腺病毒感染未成熟DC后，Western blot法检测目的蛋白在DC中的表达。ELISA法检测DC感染3个重组腺病毒后的白介素-12（IL-12）分泌水平及与淋巴细胞共孵育后上清中干扰素-γ（IFN-γ）的含量。采用混合白细胞反应检测DC感染前后刺激同种异体淋巴细胞的增殖能力。MTT法检测细胞毒T淋巴细胞（CTL）活性。结果 Her2-ECDs、ECD、TM蛋白在DC中获得表达。转染DC培养第5天，上清中IL-12含量比未转染DC含量高（P〈0．05），但3种重组病毒之间无明显差异（P〉0．05）。DC刺激淋巴细胞增殖后培养上清中IFN-γ的含量显示随着时间的延长逐步增高，但病毒感染DC明显高于非感染DC。DC明显介导淋巴细胞增殖反应，除rAdHer2-TM感染DC外，另两种转染和非转染DC之间无差异（P〉0．05）。在DC诱导的CTL反应中，病毒感染DC诱导的杀伤率明显高于SK-OV-3修饰和非修饰DC，而SK-OV-3修饰又高于非修饰DC杀伤率（P〈0．05）。在病毒感染DC中．以rAdrier2-TM转染DC激发的CTL活性为最强。对高表达Her2／neu蛋白的乳腺癌细胞株的杀伤率明显高于对Her2／neu表达阴性的杀伤率（P〈0．05）。结论 编码Her2／neu膜外及跨膜区蛋白重组腺病毒转染DC后，明显增强DC的抗肿瘤免疫功能．诱导出Her2／neu特异性的CTL活性。     

Her2/neu膜外及跨膜区蛋白基因重组腺病毒的构建和鉴定

目的 构建编码Her2/neu膜外第一受体区、全长膜外区、膜外及跨膜区3个蛋白的重组腺病毒真核表达载体,为信号传导和免疫研究建立实验材料.方法 RT-PCR扩增出3个目的片段的cDNA,克隆进pAdTrack-CMV穿梭质粒,在BJ5183细菌内同源重组形成腺病毒质粒,脂质体法转染293细胞后,荧光显微镜观察病毒噬斑形成和绿色荧光蛋白表达,Western blot检测目的蛋白的表达.结果 PCR扩增出了预定大小的目的基因cDNA片段,测序结果和GenBank完全相符.病毒质粒转染293细胞后形成了病毒噬斑,绿色荧光蛋白和目的蛋白均获得表达.目的蛋白的表达量随着病毒感染复数的升高而增加.结论 成功地构建了在真核细胞中表达Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的腺病毒载体,为Her2/neu膜外及跨膜区蛋白的功能研究提供了材料基础.     

Different apoptotic reactions of dorsal root ganglion A- and B-cells after sciatic nerve axotomy: effect of p75 neurotrophin receptor

Background By unbiased stereological methods, we have observed preferential dorsal root ganglion （DRG） B-cell loss in rodents after nerve injury, and caspase-3 activation and cell loss were related to the present of p75 receptor （p75^NTR）. We hypothesized that DRG B-cells express higher levels of pro-apoptotic proteins as compared to A-cells and the expressions of pro-apoptotic proteins can be reduced by depletion of p75^NTR. This study aimed to identify the p75NTR involved apoptotic pathway in DRG neurons after nerve injury. Methods The p75NTR knockout mice （p75-/-） and wildtype Balb/C mice （p75＋/＋） were used in this study. The expressions of pro-apoptotic proteins, c-Jun-N-terminal kinase （JNK）, c-jun and p38 in DRG were evaluated with immunohistochemistry 2 and 7 days following unilateral sciatic nerve transection. In addition, extra-cellular related kinase （ERK）, a transducer of survival signals, was also tested with immunohistochemistry and Western blotting methods in these animal models. Results Phosphorylated JNK （P-JNK） and phosphorylated p38 （P-p38） were mainly located in small B-cells, whereas phosphorylated c-jun （P-c-jun） was located in both A- and B-cells. Phosphorylated ERK （P-ERK） was located in both B-cells and satellite cells. Axotomy dramatically increased the expressions of P-JNK and P-c-jun （paired t-test）, with no influence on the expressions of P-p38 and P-ERK. Furthermore, the increase of P-JNK in p75＋/＋ mice 2 days after nerve axotomy was approximately 2.2-folds of that in p75-/- mice （P=-0.001, unpaired t-test）. Conclusion p75NTR-dependent JNK-caspase-3 pathway is involved in DRG B-cell loss after nerve injury and JNK is not the unique upstream of c-jun activation.     

Ⅰ型糖尿病HLA－DRB1等位基因分析

应用ＰＣＲ／ＳＳＰ基因分型方法鉴定ＨＬＡ－ＤＲＢ１与北京地区胰岛素依赖型糖尿病的关系。证明ＩＤＤＭ的ＤＲ９频率较对照人群明显升高（３０．３％ｖｓ１７．９２％，ｘ２＝６．９７，Ｐ＜０．０１）；而ＤＲ３在ＩＤＤＭ中虽有升高，但无统计学意义（７．０％ｖｓ２．３６％　ｘ２＝３．１９，Ｐ＞０．０５）；糖尿病患者ＤＲ２频率明显降低（７．４％ｖｓ１９．８％，ｘ２＝９．６７，Ｐ＜０．０１）。上述结果表明ＤＲ９、ＤＲ３与ＩＤＤＭ易感呈正相关，而ＤＲ２与ＩＤＤＭ抗性相关。     

磁共振弥散张量成像的阿尔茨海默病脑白质特征

目的基于弥散张量成像（diffusion tensor imaging,DTI）脑白质特征探寻阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）的特异性影像标志物。方法 选用公开数据集ADNI中43例AD、187例轻度认知障碍（mild cognitive impairment,MCI）和145例正常对照（normal control,NC）的T1加权的结构磁共振图像（magnetic resonance imaging,MRI）和DTI数据,基于解剖图谱的分析法计算不同脑区的各向异性分数（fractional anisotropy,FA）、平均扩散率（mean diffusivity,MD）、轴向扩散率（axial diffusivity,DA）和径向扩散率（radial diffusivity,DR）,采用单因素方差分析评价全脑及脑区的弥散特征值,寻找特异性脑区,并与MMSE和CDR-SB评分进行Pearson关联。结果AD组特异性脑区均出现FA值下降,而MD、DA、DR值升高。特异性脑区有FA值7个,MD值14个,DA值11个,DR值18个。双侧扣带（海马）的MD值、右...     

重组人p75NTR169-Fc抗酶裂嵌合体在大肠杆菌中的表达、纯化及活性鉴定

目的制备重组人p75NTR169-Fc融合蛋白,其是一种潜在的抗凋亡和止痛的候选药物。方法 (1)应用PCR法,以本组保存的pUC12-NGFR和人肝cDNA为模板,扩增出p75NTR(1～169氨基酸),IgG Fc(216～433氨基酸)基因顺序,再按照重叠PCR的原则和方法,将两组扩增产物混合变性、复性后再扩增,得到"p75NTR(1～169)-IgG Fc(216～433)"融合基因,缩写为p75NTR169-Fc。(2)应用DNA重组技术将p75NTR169-Fc融合DNA片段经NcoⅠ、EcoRⅠ酶切插入到pET28a(+)原核表达载体中,获得pET28a-p75NTR169-Fc重组质粒。(3)利用pET28a(+)/BL21(DE3)原核表达系统诱导表达目的蛋白,经protein A亲和层析纯化,得到纯度约96%的p75NTR169-Fc重组蛋白质。(4)用MTT方法,以PC12细胞检验不同剂量重组蛋白抗β-淀粉样肽(Aβ25～35)细胞毒的作用。结果 (1)成功构建了pET28a-p75NTR169-Fc/BL21(DE3)表达系统,其高效表达可溶性重组蛋白。实验表明:该重组蛋白p75NTR169-Fc稳定性好,不再被蛋白酶降解,为单一条带。亲和层析纯化后,分子质量均一。(2)p75NTR169-Fc与p75NTR竞争结合Aβ(25～35),拮抗Aβ(25～35)对PC12的细胞毒作用。结论重组人抗酶裂嵌合体蛋白p75NTR169-Fc具有生物学活性,在临床治疗阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)上具有应用前景,系针对神经退行性疾病的新的候选药物。     

耐辐射球菌基因组DNA酶切条件的优化

目的研究耐辐射奇球菌Deinococcus radiodurans R1基因组DNA酶切的优化条件,从而获得构建基因文库所需的DNA片段,旨在构建DR菌基因组DNA表达文库,进一步筛选文库中与其有相互作用的蛋白。方法培养耐辐射奇球菌,提取基因组DNA,用Sau3AI酶切DR菌基因组DNA,分别从酶浓度、酶切时间等选择酶切产生的DNA片段集中在0.5-5.0 kb的最佳条件,最后通过琼脂糖凝胶电泳进行检测。结果Sau3AI酶切DR菌基因组DNA的最佳酶浓度为0.125 u/10μL,最佳作用时间为3 h,此条件下DR菌基因组DNA片段主要集中于0.5-5.0 kb。结论优化了DR菌基因组DNA的酶切条件,为进一步构建DR菌基因组DNA表达文库,筛选与高抗辐射相关基因产物的互作蛋白奠定了基础。