qPCR快速检测痰标本中MRSA的临床应用

目的探讨实时荧光定量PCR(qPCR)法快速检测痰液标本中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的临床应用。方法痰标本经裂解获取DNA,应用qPCR法检测mecA和Sa442基因,同时对痰标本进行常规培养鉴定。结果以痰培养鉴定结果为金标准,在887份合格痰标本中,PCR检测MRSA的灵敏度为95.7%,特异度为91.2%,阳性预测值为37.8%,阴性预测值为99.7%。结论 qPCR法可用于快速检测痰标本MRSA,排除MRSA的定植和感染。     

全血γ-干扰素释放试验与ELISA检测结核分枝杆菌抗体在痰菌阴性肺结核辅助诊断中的比较应用

目的:探讨γ-干扰素释放试验(interferon-gamma release assays, IGRA)与酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay, ELISA)在痰菌阴性肺结核诊断中的应用价值。方法 :收集93例痰菌阴性肺结核患者和40例健康体检者的肝素钠抗凝全血,采用IGRA试剂盒检测其血浆γ-干扰素含量,其血清标本应用ELISA试剂盒检测结核分枝杆菌抗体(Tuberculosis antibody, TBAb),并将2种结果进行比较分析。将痰菌阴性肺结核患者分为老年组和中青年组进行比较,分析IGRA检测在不同年龄段间是否有差异。结果:IGRA诊断痰菌阴性肺结核,灵敏度为84.94%,特异度为90.00%,阳性预测值为95.18%,阴性预测值为72.00%;TBAb诊断痰菌阴性肺结核灵敏度为52.69%,特异度为85.00%,阳性预测值为67.20%,阴性预测值为40.96%。2种方法相比较,差异有统计学意义。不同年龄患者间,IGRA检测结果差异无统计学意义。结论:与ELISA相比,IGRA对诊断痰菌阴性肺结核有更高的灵敏度、特异度和阳性预测能力。     

聚合酶链反应诊断细菌和真菌性中枢神经系统感染的临床价值

目的探讨聚合酶链反应(PCR)在细菌和真菌性中枢神经系统感染快速诊断中的临床价值。方法收集137例中枢神经系统感染患者留存的脑脊液进行DNA提取,采用细菌和真菌通用引物扩增病原体DNA并进行序列测定,对比同期脑脊液培养方法与PCR方法的检测结果。结果 137份脑脊液标本中PCR检测到细菌50株,真菌6株,脑脊液培养检测到细菌38株,真菌5株;PCR检测法灵敏度为40.9%,特异度为100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为38.2%,诊断效率为56.7%;传统培养法则分别为31.4%、100%、100%、34.7%、44.4%。PCR的灵敏度、阴性预测值和诊断效率均明显优于传统培养方法,特异度和阳性预测值与培养法相当,两方法鉴定菌种的符合率为97.7%。结论通用引物PCR扩增法具有快速、特异、灵敏、准确等特点,对细菌和真菌性中枢神经系统感染的病原学快速诊断具有重要的应用价值。     

HIV阴性免疫力低下患者痰液中耶氏肺孢子的实时荧光定量PCR检测

目的探讨实时荧光定量PCR对HIV阴性免疫力低下合并肺孢子肺炎(PCP)患者的诊断价值。方法选取71例临床存在肺部感染并不能排除PCP的HIV阴性免疫力低下患者的痰液标本,分别运用ITS-巢式PCR法和ITS-实时荧光定量PCR法检测标本中耶氏肺孢子。结果 71例患者中,18名临床诊断为PCP。巢式PCR检测阳性结果 25例,假阳性率为36.00%,灵敏度、特异度、阳性预测值分别为88.89%、83.01%和64.00%。若阈值为103copies/mL,实时荧光定量PCR的特异度和阳性预测值均显著高于巢式PCR。PCP患者中,实时定量PCR检测出耶氏肺孢子的基因载量显著高于非PCP患者。结论在HIV阴性免疫力低下患者中,RT-PCR较巢式PCR能更准确、快速地诊断PCP,并可区分耶氏肺孢子定植与感染。     

基因芯片技术在检测痰涂阳肺结核患者结核分枝杆菌耐药性的应用效果

目的探讨基因芯片技术在结核病耐多药快速检测中的应用效果。方法收集重庆市五个区县1 030例涂阳肺结核患者的痰标本,同时进行罗氏培养和基因芯片检测异烟肼、利福平耐药性,培养后的菌株用比例法药敏试验检测异烟肼、利福平的耐药性。以比例法药敏试验为判断标准,对基因芯片的检测效果进行分析。结果对同时有两种耐药性检测结果的958例患者进行了统计学分析,基因芯片对异烟肼检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P0.05),符合率94.1%,灵敏度80.2%,特异度95.9%,阳性预测值71.8%,阴性预测值97.4%,Kappa值为0.724。基因芯片对利福平检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P0.05),符合率96.3%,灵敏度86.4%,特异度97.5%,阳性预测值80.9%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.815。此外,基因芯片对异烟肼和利福平耐药结核病检测结果和比例法药敏试验比较差异无统计学意义(P0.05),符合率96.9%,灵敏度78.3%,特异度98.3%,阳性预测值78.3%,阴性预测值98.3%,Kappa值为0.766。结论基因芯片技术可用于耐多药结核病早期快速筛查和诊断,以弥补传统药敏试验的不足,但该方法对检测环境要求较高,需对操作人员严格培训。     

液基细胞学联合人乳头瘤病毒DNA检测诊断宫颈癌及癌前病变的临床研究

目的探究液基细胞学(TCT)联合人乳头瘤病毒(HPV)DNA检测诊断宫颈癌及癌前病变的临床诊断价值。方法选择2012年5月至2014年5月收治的500例宫颈疾病患者,进行液TCT检测、HPV-DNA检测,并进行病理活检进行对照,分析TCT与HPV-DNA联合联合检测方法的临床使用价值。结果 500例患者经病理活检发现,慢性炎症208例,轻度宫颈上皮内瘤112例,中度宫颈上皮内瘤63例,重度宫颈上皮内瘤53例,鳞状细胞癌(SCC)42例;TCT检测分析可知,阳性患者275例,阴性患者225例,其灵敏度为73.0%,特异度64.6%,阳性预测值69.1%,阴性预测值69.5%,准确度69.0%;HPV-DNA检测分析可知,阳性患者254例,阴性患者246例,其灵敏度为71.5%,特异度71.7%,阳性预测值73.2%,阴性预测值69.9%,准确度71.6%;联合检测的阳性患者244例,阴性患者356例,其灵敏度为91.5%,特异度97.5%,阳性预测值97.5%,阴性预测值91.4%,准确度94.4%,5项评价指标均高于TCT和HPV-DNA方法,差异有统计学意义(P0.05)。结论 TCT、HPV-DNA检测均能够诊断宫颈癌及癌前病变,但是TCT与HPV-DNA联合检测具有更高的灵敏度、特异度以及准确度,值得在临时床上使用。     

检测艰难梭菌感染的五种方法比较

目的 比较分析用于美国医院临床微生物实验室的5种艰难梭菌感染检测方法 ,从中选择1种适于早期诊断艰难梭菌感染的灵敏、特异、简单、快速及经济的实验方案.方法 对174份临床送检的腹泻患者粪便标本同时用TGC、Premier Toxin A&B EIA(A/B-EIA)、C.Diff Quick Chek Complete(D-EIA)、BD GeneOhm Cdiff assay(BD-PCR)和实验室发展的PCR(LD-PCR)方法 进行艰难梭菌的检测.以金标准TGC法作为参比标准,评价各种检测方法 的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值.结果 TGC法检测174份腹泻患者大便标本,艰难梭菌感染的阳性率为13.8%(24/174).与TGC法比较,4种检测方法 的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为:A/B-EIA 62.5%、99.3%、93.8%、94.3%;D-EIA 66.7%、98.7%、88.9%、94.9%;BD-PCR 83.3%、98.7%、90.9%、97.4%;LD-PCR 79.2%、93.3%、65.5%、96.6%.所有标本中,至少1种方法 检测为阳性的标本共计34份,其中15份标本5种方法 检测结果 均为阳性.D-EIA法检测结果 中,18份标本GDH及毒素A/B均为阳性,23份仅GDH阳性,133份GDH及毒素A/B均为阴性.18份D-EIA检测阳性标本全部与BD-PCR检测结果 一致,16份与TGC法检测结果 一致.24份TGC阳性标本中,有22份包括在41份GDH抗原呈阳性的标本中.D-EIA检测为假阴性的8份标本中,4份BD-PCR检测为阳性.根据本实验结果 ,D-EIA与BD-PCR相结合的二步法检测方案灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为83.3%、98.7%、90.9%、97.4%.结论 从技术角度评价,以BD-PCR法为最优.结合D-EIA与BD-PCR的二步法检测方案,是对临床送检标本进行艰难梭菌感染检测的灵敏、特异、简便、快速、经济的检测方案.     

全血γ-干扰素释放试验与ELISA检测结核分枝杆菌抗体在痰菌阴性肺结核辅助诊断中的比较应用

目的：探讨γ-干扰素释放试验（interferon-gamma release assays, IGRA）与酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbent assay, ELISA）在痰菌阴性肺结核诊断中的应用价值。方法：收集93例痰菌阴性肺结核患者和40例健康体检者的肝素钠抗凝全血,采用IGRA试剂盒检测其血浆γ-干扰素含量,其血清标本应用ELISA试剂盒检测结核分枝杆菌抗体（Tuberculosis antibody, TBAb）,并将2种结果进行比较分析。将痰菌阴性肺结核患者分为老年组和中青年组进行比较,分析IGRA检测在不同年龄段间是否有差异。结果：IGRA诊断痰菌阴性肺结核,灵敏度为84.94%,特异度为90.00%,阳性预测值为95.18%,阴性预测值为72.00%;TBAb诊断痰菌阴性肺结核灵敏度为52.69%,特异度为85.00%,阳性预测值为67.20%,阴性预测值为40.96%。2种方法相比较,差异有统计学意义。不同年龄患者间,IGRA检测结果差异无统计学意义。结论：与ELISA相比,IGRA对诊断痰菌阴性肺结核有更高的灵敏度、特异度和阳性预测能力。     

COBIO XS尿有形成分分析仪在筛查尿路感染中的应用

目的评价COBIO XS尿有形成分分析仪在诊断尿路感染中的应用价值。方法收集南京医科大学附属南京医院住院患者清洁中段尿349份,每份标本在进行细菌的分离培养后使用COBIO XS尿有形成分分析仪检测尿液白细胞数和细菌数。以细菌培养结果为金标准,并以阴性杆菌大于或等于10×105 CFU/mL、阳性球菌及真菌大于或等于10×104 CFU/mL为阳性诊断标准,利用SPSS18.0统计软件绘制受试者工作特征(ROC)曲线,从而计算出白细胞和细菌数在尿路感染诊断中的最佳临床判断(cut off)值,得出其特异度、灵敏度、阴性预测值和假阴性率。以Kappa检验分析其与细菌培养结果的一致性。结果尿培养结果阳性的标本70例(20.65%),细菌数和白细胞数分别以136个/微升和13.5个/微升的cut off值判断,特异度分别为94.1%和66.9%,灵敏度均为88.6%,阴性预测值分别为96.93%和95.74%,假阴性率均为2.36%,Kappa值为0.92。结论 COBIO XS尿有形成分分析仪用于初筛尿路感染与尿液标本的细菌培养有较强的一致性,是一种简单、快速、可靠的筛查尿路感染的实验,其细菌计数可以作为尿路感染诊断检测的良好指标。     

应用葡萄球菌A蛋白快速检测金黄色葡萄球菌的诊断价值

目的评价应用葡萄球菌A蛋白(SPA)快速检测金葡菌的临床诊断价值。方法 200株鉴定明确的菌株(金葡菌和非金葡菌各100株)采用SPA法检测,统计检测方法的灵敏度和特异度;118份ICU患者的痰标本,采用双盲法分别对其进行传统痰培养鉴定和SPA镜下快速检测,计算该诊断试验的评价指标,并对痰培养和SPA方法的相关性进行分析。结果 SPA检测的灵敏度和特异度均为100%;双盲法痰标本SPA检测敏感度为100%,特异度97.7%,SPA检测和痰培养的结果呈高度相关性(P>0.05)。结论 SPA检测法可早期诊断金葡菌感染,是一项快速的、灵敏度和特异度较高的诊断试验。     

TB-RNA、TB-DNA联合检测在痰菌阴性肺结核诊断中的应用价值

目的探讨痰结核菌脱氧核糖核酸(TB-DNA)PCR法和痰结核菌核糖核酸(TB-RNA)恒温扩增法联合检测在痰菌阴性肺结核诊断中的应用价值。方法选取初治痰菌阴性肺结核患者210例分别进行TB-DNA、TB-RNA的单一检测和联合检测,对比其灵敏度、特异度及约登指数等差异。结果 TB-DNA检测灵敏度为81.9%,特异度为79.4%,约登指数为0.613,ROC曲线下面积(AUC)为0.826;TB-RNA检测灵敏度为86.2%,特异度为83.3%,约登指数为0.695,AUC为0.849;联合检测的灵敏度为70.6%,特异度为96.6%,约登指数为0.745,AUC为0.936。结论联合检测灵敏度高,特异性强,同时可判定活动性结核,为痰菌阴性肺结核的早期诊断提供重要的临床依据。     

基因芯片检测结核分枝杆菌耐药基因效能分析

目的评价基因芯片检测结核分枝杆菌(MTB)耐药性的效能。方法选取140例MTB阳性的痰标本进行基因芯片检测和传统药敏试验检测,分析基因芯片法对异烟肼(INH)、利福平(RFP)耐药性检测的灵敏度、特异度、准确度。对两种结果不符合的标本进行耐药基因测序检验。结果 INH耐药基因检测的灵敏度89.5%,特异度96.1%;RFP耐药基因检测的灵敏度86.4%,特异度97.9%。痰和菌株进行基因芯片检测的结果一致率为97.1%,用痰标本进行基因芯片耐药基因检测报告时间为(3.6±1.5)d,传统药敏报告时间为(65.1±4.9)d。结论利用痰标本进行的基因芯片检测可作为一种高效的MTB耐药筛查方法。     

三种方法检测潜伏妊娠梅毒的临床评价

目的评价梅毒血清学试验检测潜伏妊娠梅毒的临床价值。方法对1236例围产保健的孕妇血清,用甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）检测梅毒反应素,酶联免疫吸附试验（ELISA）、金免疫层析试验（GICA）和梅毒螺旋体颗粒凝集试验（TPPA）检测梅毒螺体抗体,聚合酶反应（PCR）检测梅毒螺旋体DNA。TPPA试验和PCR试验同时阳性判断为潜伏妊娠梅毒。结果 TRUST试验对潜伏妊娠梅毒的诊断灵敏度、诊断特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比分别为75.0%、97.5%、23.1%、99.7%、30.0和0.3,ELISA试验对潜伏妊娠梅毒的诊断灵敏度、诊断特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比分别为91.7%、98.8%、42.3%、99.9%、76.4和0.1,GICA试验对潜伏妊娠梅毒的诊断灵敏度、诊断特异度、阳性预测值、阴性预测值、阳性似然比和阴性似然比分别为83.3%、98.9%、43.5%、99.8%、75.7和0.2。结论临床筛查潜伏妊娠梅毒最好选择ELISA试验,同时联合TRUST、GICA检测梅毒可以提高阳性检测率,为临床预防和阻断梅毒母婴垂直传播提供更可靠的理论依据。     

阴道分泌物真菌感染5种检测方法比较

目的比较分析用于检出阴道分泌物中真菌的5种检测方法,从中选择出诊断真菌感染性阴道炎的灵敏度、特异度较好,同时快速、经济、简单的实验方案。方法选取2016年5-8月在该院妇科进行阴道分泌物检测的患者共442例,对442例标本同时进行真菌培养法、盐水KOH悬浮法、革兰染色、瑞氏染色、全自动六联5种方法检测,其中真菌培养为金标准,来评价其他4种方法的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值、准确性。结果真菌培养法检测442例阴道分泌物标本,真菌感染的阳性率为34.8%(154/442)。与真菌培养法比较,4种检测方法的特异度、灵敏度、阴性预测值、阳性预测值、准确性分别为盐水KOH悬浮法97.9%、64.9%、83.9%、94.3%、86.4%;革兰染色96.5%、83.1%、91.4%、92.7%、91.8%;全自动六联检测84.7%、46.8%、74.8%、62.0%、71.5%;瑞氏染色96.9%、78.6%、89.4%、93.1%、90.5%。结论革兰染色灵敏度、特异度、准确度在4种检测方法中最高,是对临床送检阴道分泌物标本进行真菌检测的特异、灵敏、快速、经济、简单的检测方案,临床工作中如采用其他方法检测阴道分泌物中真菌,可同时结合革兰染色法以提高其准确度。     

电化学发光免疫分析法检测梅毒特异性抗体的临床应用及假阳性分析

目的 评价电化学发光免疫分析法(ECLIA)在筛查梅毒特异性抗体中的临床应用价值,并分析假阳性产生的原因。方法 选取2020年9月至2021年8月在该院就诊的门诊及住院78 374例患者标本,均采用ECLIA筛查梅毒特异性抗体,阳性标本和临界标本采用梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)进行确证,计算ECLIA检测的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值,并对假阳性结果进行分析。结果 ECLIA筛查梅毒特异性抗体的灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为100.00%、99.94%、97.65%、100.00%;当发光比值>20.00时,ECLIA与TPPA的阳性符合率为100.00%。结论 ELCIA适合大规模的梅毒特异性抗体筛查试验,可为临床诊断梅毒提供重要血清学诊断依据。     

PCR-膜芯片检测痰结核杆菌耐药基因突变的应用研究

目的探讨PCR-膜芯片技术直接应用于痰标本中结核杆菌耐药基因突变检测的可行性。方法采集82例痰标本（结核患者64例,非结核患者18例）,TB膜芯片检测标本中的结核杆菌IS6110基因,阳性者利用12对特异性引物进行多重PCR,扩增产物与含有59个探针的耐药-TB膜芯片反向点杂交检测结核杆菌耐药基因突变,测序验证并与药敏试验比对。结果 TB膜芯片检测痰标本中的结核杆菌IS6110基因,特异度为100%（18/18）,灵敏度为81.3%（52/64）,阳性预测值为100%（52/52）,阴性预测值为60%（18/30）;在52例结核杆菌IS6110基因阳性的痰标本中,耐药-TB膜芯片检出INH基因突变的1例,RFP基因突变的1例,INH和RFP基因同时突变的2例,INH、RFP和SM基因同时突变的1例,其中4例结果与药敏及DNA测序结果基本符合,1例突变位点与测序一致,但细菌培养阴性。结论应用PCR-膜芯片技术可提高痰样中结核杆菌基因的检出率;耐药-TB膜芯片检测结果对临床耐药结核病的快速诊断具有重要的参考价值。     

念珠菌乳胶免疫层析法的性能评价

目的评价念珠菌乳胶免疫层析法检测试剂盒(以下简称念试剂)检测阴道分泌物中念珠菌的性能和种属特异性。方法采用涂片/革兰染色法和念试剂检测354例怀疑为念珠菌阴道炎妇女阴道分泌物和9种属22种阴道常见感染微生物,并与涂片/革兰染色法半定量比较,评价念试剂的临床标本检测性能及种属特异性。结果与涂片/革兰染色法相比,念试剂的灵敏度为93.81%,特异度为99.10%,准确性97.31%,阳性预期值为98.14%,阴性预期值为96.90%;与涂片/革兰染色法半定量相比,该念试剂检测阴道分泌物中的念珠菌在标本中念珠菌浓度较低时仍然具有较高的特异度、可接受的灵敏性;在种属特异度评价,6种念珠菌阳性,其他16种阴道常见感染微生物均为阴性。结论念试剂检测阴道分泌物中念珠菌具有较高的临床和种属特异度、灵敏度、阳性预测值和阴性预测值。     

超声结合弹性成像在鉴别非哺乳期乳腺良恶性病变的价值分析

目的对比超声结合弹性成像与常规超声、超声弹性成像评分(UE)的诊断差异,寻找更灵敏的鉴别非哺乳期乳腺良恶性病变的检测方法。方法选择接受治疗的264例非哺乳期患者(312个乳腺病灶,恶性97个,良性215个)进行常规超声和UE检测,检测结果与组织病理学检测结果比较,对比三种方法的准确度、灵敏度以及特异度。结果超声诊断检测结果良性病灶166个,检测正确149个,恶性病灶146个,检测正确80个,准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为73.39%、82.47%、69.30%、54.79%、89.76%;超声弹性成像评分结果为≤3分(良性)189个,检测正确176个,≥4分(恶性)123个,检测正确83个,准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为83.01%、83.51%、81.86%、65.85%、93.12%;超声结合弹性成像结果为良性病灶207个,检测正确197个,恶性病灶105个,检测正确90个,准确度、灵敏度、特异度、阳性预测值和阴性预测值分别为93.35%、92.78%、91.63%、85.71%、95.17%。三组准确度、特异度比较差异有统计学意义(P0.05),常规超声与弹性成像的灵敏度、阳性预测值和阴性预测值比较差异未见统计学意义(P0.05),而与超声合并弹性成像组比较差异有统计学意义(P0.05)。结论超声结合弹性成像在诊断非哺乳期乳腺良恶性病变时,灵敏度高,特异度好,具有重要临床检测价值,值得推广。     

尿液标本GeneXpert结核分枝杆菌/利福平检测诊断结核病的应用价值

目的 探讨尿液标本GeneXpert结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis, MTB）/利福平（rifampin, RIF）检测系统在结核病诊断中的临床应用价值。方法 回顾性选择2018年1月1日—2023年6月1日四川大学华西医院收治临床高度疑似结核病患者。分析尿液标本GeneXpert MTB/RIF的诊断效能指标（灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值），并评估其在结核病诊断中的临床价值。进一步运用相关性分析探究患者尿液标本GeneXpert MTB/RIF阳性水平等级与实验室检查指标相关性。结果 共纳入400例患者。其中，临床结核病组163例，临床非结核病组237例。在临床结核病组中，泌尿系结核病112例，非泌尿系结核病51例。尿液标本GeneXpert MTB/RIF在结核病诊断中的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为55.2%、97.5%、93.8%、76.0%；在泌尿系统结核病中的灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值分别为65.2%、92.0%、76.0%、87.2%，其诊断灵敏度进一步提高。相关性分析表明，尿液标本GeneXpert...     

Xpert MTB/RIF技术在基层定点医院肺结核病诊断中的应用价值

目的探讨Xpert MTB/RIF技术在基层定点医院肺结核病诊断中的应用价值。方法选取本院感染科门诊2014年7月至2015年9月疑似肺结核患者的痰标本185份,分别进行固体培养法、Xpert MTB/RIF检测技术和药敏试验,比较Xpert MTB/RIF检测和传统检测痰液标本中结核分枝杆菌培养及利福平耐药性的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值和Kappa值。结果痰结核分枝杆菌培养阳性96份,阳性率为51.9%;以固体培养法作为金标准,Xpert MTB/RIF检测的敏感度94.8%,特异度为87.6%,阳性预测值为89.2%,阴性预测值为94.0%,Kappa值为0.826;以比例法药敏试验作为金标准,Xpert MTB/RIF检测的敏感度为86.7%,特异度为94.9%,阳性预测值为76.5%,阴性预测值为97.4%,Kappa值为0.774。结论 Xpert MTB/RIF检测快速,操作简便,硬件设施要求低,能够有效检测结核分枝杆菌及利福平耐药性,可在基层结核实验室大力推广。