外周血循环肿瘤细胞联合血清肿瘤标志物检测在非小细胞肺癌患者中的临床意义

目的 探讨外周血循环肿瘤细胞(CTCs)联合血清肿瘤标志物检测在非小细胞肺癌(NSCLC)中的临床意义。方法 选取2020年1月至2022年1月我院收治的NSCLC患者102例作为研究组,同期健康体检者87例作为对照组。比较研究组与对照组、不同临床分期患者外周血CTCs、血清肿瘤标志物的表达情况,分析影响预后的因素及诊断价值。结果 研究组及Ⅲ~Ⅳ期患者CTCs阳性表达癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19血清片段21-1(CYFRA21-1)水平均高于对照组及Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05);年龄、临床分期、CTCs、CEA、NSE、CYFRA21-1为患者预后的影响因素(P<0.05);外周血CTCs联合血清肿瘤标志物检测灵敏度、特异度、AUC最高(P<0.05)。结论 外周血CTCs联合血清肿瘤标志物检测可有效诊断NSCLC,可为临床病情诊断及预后评估提供参考。     

循环肿瘤细胞检测在非小细胞肺癌患者中的临床意义

选取2013年7月~2015年2月间于我院就诊的非小细胞肺癌患者78例,支气管肺炎患者56例以及42例健康志愿者分别归为肺癌组、肺炎组和健康组。采集各组人士的外周血,采用磁珠富集及免疫染色的方法检测外周血中的CTCs,比较CTCs的阳性检出率与非小细胞肺癌及其肿瘤分期的关系。结果肺癌组患者外周血CTCs阳性检出率明显高于其他两组(P<0.05)。非小细胞肺癌患者临床分期越晚,CTCs检出率越高,IV期患者的检出率达到88.89%,显著高于其他分期(P<0.05)。CTCs阳性检出率在非小细胞肺癌患者中较高,且与患者的临床分期有关。CTCs检测能够用于评估非小细胞肺癌患者的病情、判断预后,值得临床上进一步推广。     

肺癌患者外周血循环肿瘤细胞检测的临床意义

目的探究肺癌患者外周血循环肿瘤细胞检测的临床意义。方法选取2016年1月～2017年1月我院收治的肺癌患者60例作为研究组,选取同期健康体检志愿者60例作为对照组,测定其外周血循环肿瘤细胞。结果对照组中未检测到CTCs,研究组中检出CTCs48例,阳性检出率为80.00%,差异具有统计学意义(P0.05);肺癌患者CTCs表达水平与吸烟情况、远端转移以及TNM分期显著相关(P0.05),与患者年龄、性别、病理分期无关(P0.05);治疗后,有37例CTCs阳性患者,其PFS为4～9(6.17±2.42个)个月,23例CTCs阴性患者,其PFS为11～16(13.68±3.12)个月,两者比较,差异具有统计学意义(P0.05)。结论 CTCs可作为肺癌诊断指标,且可评估远端转移情况,亦可用作预后预测指标,CTCs阳性可提示肺癌预后不良。     

循环肿瘤细胞在中晚期非小细胞肺癌患者联合治疗中的疗效评价

目的分析循环肿瘤细胞(CTCs)在中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者化疗联合分子靶向治疗过程中的疗效评价能力。方法采用回顾性研究方法,选取2014年8月至2018年2月河北省涿州市医院收治的采用吉西他滨加顺铂(GP)化疗、联合吉非替尼靶向治疗的中晚期NSCLC患者共33例,共观察4个疗程。分别于治疗前,以及治疗2、4个疗程后按照实体肿瘤疗效评价标准(RECIST)检测肿瘤直径及肿瘤标志物变化;并通过免疫磁珠法富集、Envision法检测外周血CTCs的变化,分析CTCs标准与RECIST标准的异同。结果联合治疗前,33例中晚期NSCLC患者均检测出CTCs,检测阳性率为100%,而基线CTCs数量在不同年龄、性别、肿瘤类型和临床分期和吸烟史患者间差异无统计学意义(P>0.05);而肿瘤直径越大,CTCs数量越多(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,第2疗程后CTCs变化与治疗效果具有相关性(r=0.832,P=0.000)。按照RECIST标准分为有效组(n=19)和无效组(n=14),有效组治疗第2疗程和第4疗程后CTCs计数分别为8.0(3.0,15.0)个/5 ml及5.0(3.0,10.0)个/5 ml与治疗前12.0(7.0,18.0)个/5ml相比,差异均具有统计学意义(Z=-3.427、-3.876,P<0.05);无效组治疗第2疗程和第4疗程后CTCs计数分别为16.5(12.0,20.0)个/5 ml,18.5(14.0,22.0)个/5 ml与联合治疗前14.5(10.0,18.0)个/5 ml相比,差异均具有统计学(Z=-3.126、-2.897,P<0.05)。采用Fisher’s确切概率法评价两种疗效判定方法,两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论中晚期NSCLC联合治疗过程中,CTCs测定可以实现早期、有效的疗效评价,是RECIST标准的有益补充。     

非小细胞肺癌患者外周血循环内皮干细胞的检测及其临床意义

目的探讨外周血循环内皮祖细胞（endothelial progenitors cells,EPCs）与非小细胞肺癌患者的关系及临床意义。方法选择非小细胞肺癌患者45例和对照组15例,用抗CD133和KDR的单克隆抗体标记外周血细胞,应用流式细胞术检测其外周血中循环内皮祖细胞。应用Real-time RT-PCR方法检测患者外周血中CD133和KDR的mRNA表达水平。密度梯度离心法从人外周血分离出单个核细胞,将其接种在人纤维粘连蛋白包被培养板,在加有EGM-2-MV-SingleQuots的培养液中培养,在荧光显微镜下进行鉴定。其中U EA-1和D iI-A c-LDL染色双阳性细胞为正在分化的内皮祖细胞。结果肿瘤患者外周血中EPCs含量高于正常对照组（P〈0.01）,外周血中CD34和KDR的表达水平明显高于正常对照组。结论非小细胞肺癌患者外周血EPCs明显增高,为今后将EPCs作为非小细胞肺癌患者辅助诊断和治疗效果检测的标志物奠定基础。     

流式细胞术检测非小细胞肺癌外周血循环内皮细胞方法初探

目的探索流式细胞术单种CD分子（CD146）标记法和三种CD分子（CD45CD31CD146）标记法对非小细胞肺癌外周血循环内皮细胞（circulating endothelial cells,CECs）检测效果的影响。方法采用流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法检测60例非小细胞肺癌患者及20例健康人外周血CECs。结果流式细胞术单种CD146和三种CD分子标记法对非小细胞肺癌患者和健康人外周血循环内皮细胞检测成功,两种方法显示肺癌患者外周血CECs均高于健康对照,差异有统计学意义（P〈0.05）。两种方法测定CECs的结果呈正相关,有统计学意义（r=0.834,P〈0.01）。精密度试验显示三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。结论单种CD146和三种CD分子标记非小细胞肺癌患者和健康人外周血细胞均可经流式细胞术用于测定CECs,三种CD分子标记循环内皮细胞法优于单种CD146标记法。     

外周血叶酸受体阳性循环肿瘤细胞检测在非小细胞肺癌筛查中的应用价值

目的观察非小细胞肺癌患者外周血叶酸受体阳性循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)水平变化,探讨外周血叶酸受体阳性CTCs在非小细胞肺癌筛查中的应用价值。方法非小细胞肺癌患者136例为肺癌组,肺部良性病变患者10例为良性病变组,健康志愿者54例为对照组。3组均采用以叶酸受体为靶点的免疫磁珠阴性富集+实时荧光定量PCR法检测外周血叶酸受体阳性CTCs水平;采用化学发光免疫分析法检测血清癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)、糖链抗原(carbohydrate antigen,CA)125、CA724、细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19fragment,CYFRA21-1)、神经元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)水平。比较3组CTCs水平;比较不同临床特征非小细胞肺癌患者CTCs水平;绘制ROC曲线,评价CTCs及血清CEA、CA125、CA724、CYFRA21-1、NSE 5项指标联合诊断非小细胞肺癌的价值。结果肺癌组CTCs水平[11.21(8.58,15.30)FU/3mL]高于良性病变组[7.55(5.23,10.25)FU/3mL]和对照组[4.95(3.55,7.62)FU/3mL](P<0.05),良性病变组高于对照组(P<0.05)。TNM分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期非小细胞肺癌患者CTCs水平[11.00(8.58,13.30)、13.25(10.48,16.88)、14.77(11.47,16.55)、17.89(17.07,19.22)FU/3mL]两两比较差异均有统计学意义(H=16.443,P<0.05);不同年龄、性别、肿瘤最大径、T分期、分化等级、病理类型非小细胞肺癌患者CTCs水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,CTCs以8.70FU/3mL为最佳截断值,诊断非小细胞肺癌的AUC为0.953(95%CI:0.926~0.979,P<0.05),灵敏度为79.40%,特异度为98.10%,诊断效能优于CEA、CA125、CA724、CYFRA21-1、NSE联合检测。结论非小细胞肺癌患者外周血叶酸受体阳性CTCs水平升高,且增高程度与TNM分期有关;外周血叶酸受体阳性CTCs可用于非小细胞肺癌的早期筛查。     

外周血循环肿瘤细胞检测在慢性阻塞性肺疾病患者肺癌筛查及预后判断中的价值

目的 探讨外周血循环肿瘤细胞(CTCs)检测在对慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者进行肺癌筛查及预后判断中的作用.方法 选择2015年6月至2017年9月该院收治的55例COPD合并肺癌患者纳入合并组,选择同期收治的60例单纯COPD患者纳入COPD组.所有患者均接受过外周血CTCs检测,比较两组患者、不同特征COPD合...     

CyclinD1与Survivin表达联合检测在判断非小细胞肺癌预后中的价值

目的：探讨cyclin D1和survivin联合表达在判断非小细胞肺癌（NSCLC）预后方面的价值。方法：应用免疫组化法检测73例NSCLC组织中cyclin D1和survivin的表达情况，运用单因素（Log-rank）和多因素（COX比例风险模型）生存分析比较两者以及临床各因素与患者预后之间的关系。结果：（1）cyclin D1和survivin在NSCLC组织中表达的阳性率分别为60．3％和64．4％；（2）Log-rank分析显示分化程度、矿TNM分期、cyclinD1的表达状况、survivin的表达状况与患者的预后相关（P均〈0．05）；（3）COX比例风险模型分析显示矿TNM分期、cyclinD1的表达状况、survivin的表达状况是影响患者预后的独立指标（P均〈0．05）；结论：cyclinD1表达和survivin表达是影响NSCLC患者预后的独立指标，两者的联合检测具有更大的价值。     

MVP方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效评价

于 1997年 5月～ 2 0 0 1年 6月 ,我们对已确诊的Ⅲ～Ⅳ期非小细胞肺癌 48例病人 ,采用ＭＶＰ方案化疗 ,观察近期疗效报道如下。1　资料与方法1 1　临床资料　 48例经病理学和细胞学确诊的晚期非小细胞肺癌患者 ,男 2 9例 ,女 19例 ,年龄 3 8～ 72岁 ,中位年龄 5 6岁。其中腺癌 2 5例 ,鳞癌 2 0例 ,未分型癌 3例。初治者 3 3例 ,复治者 15例。有肺内转移者 18例 ,合并胸水者 6例 ,淋巴结转移者 2 2例 ,肝转移者 3例 ,骨转移者 3例。所有病人化疗前均常规检查血常规、尿常规、肝肾功能、心电图、腹部Ｂ超、胸片或胸部ＣＴ。1 2　用药方法　静…     

循环肿瘤DNA检测在非小细胞肺癌早期预警及监测管理中的研究进展

非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)约占肺癌的85%,发病率和病死率位居全球前列,由于其起病与进展的隐匿性,被发现时患者已丧失最佳的治疗时机。国内外课题组致力于NSCLC早期检测技术的研发及精准化治疗方法学的探寻,以期延长患者的无进展生存期和总存活时间。液体活检即通过血液、尿液或唾液等进行疾病特异性生物学标志物检测,具有微创性、高敏感性、可重复性等优势。该手段有助于癌症基因图谱的全面反映,极大克服了病灶组织学活检在时空上的异质性,对耐药靶点的发现、新药疗效预测及临床用药方案的调整意义深远。本文就液体活检中的环肿瘤DNA(circulating tumor DNA,ctDNA)检测在NSCLC早期诊断及监测管理的研究进展进行综述,以促进该技术临床应用价值的开拓。     

循环肿瘤细胞与肿瘤标志物在肺癌诊断中的价值比较

目的探讨循环肿瘤细胞(CTCs)检测在肺癌中的诊断价值。方法选取35例肺癌患者为肺癌组,以同期入院的非结核肺良性疾病患者22例及健康体检者26例为对照组,分别检测两组患者外周血CTCs及传统血清肿瘤标志物的表达水平,并使用灵敏度、特异度及ROC曲线对CTCs在肺癌中的诊断价值进行评价。结果肺癌组CTCs的检出率为77.1%,显著高于对照组CTCs检出率(10.4%),差异具有统计学意义(P<0.05);CTCs诊断肺癌的灵敏度、特异度、ROC曲线下面积分别为77.1%、89.6%、0.865,均高于传统血清肿瘤标志物NSE(42.9%、77.1%、0.591),CA125(34.3%、87.5%、0.706),CA153(11.4%、89.5%、0.530),CYFRA21-1(62.9%、64.6%、0.674),SCCA(22.9%、66.7%、0.336);而CEA的特异度(93.8%)虽高于CTCs,但其灵敏度(45.7%)及ROC曲线下面积(0.793)均低于CTCs。结论CTCs检测可用于肺癌的诊断,且与传统血清肿瘤标志物相比具有更高的诊断价值。     

Pembrolizumab for the treatment of non-small cell lung cancer

ABSTRACT

Introduction: Immune checkpoint inhibitors targeting programmed death protein 1 (PD-1) receptor and its ligand, PD-L1, have recently led to significant and durable improvements in the clinical outcomes of some types of cancers including lung cancer.

Areas covered: Pembrolizumab was approved by the US FDA for the treatment of advanced or metastatic NSCLC whose disease has progressed after other treatments and with tumors that express PD-L1. In the phase I KEYNOTE-001 trial, the overall response rate (ORR) was 19.4%, the median progression-free survival (PFS) and overall survival (OS) were 3.7 months and 12.0 months for 495 unselected NSCLC patients. Strong PD-L1 expression (≥ 50%) was associated with higher ORR, longer PFS, and longer OS. The phase II/III randomized KEYNOTE-010 trial demonstrated that pembrolizumab improved OS versus docetaxel in patients with previously treated NSCLC.

Expert opinion: Pembrolizumab, demonstrated durable response and prolonged OS especially in NSCLC patients with high expression of PD-1, thereby suggests a new treatment paradigm. However, many issues remain to be explored, including the identification of other robust biomarkers that can accurately predict the immune-responsiveness of tumors. Along with the identification of predictive biomarkers, further understanding of the tumor microenvironment is necessary to improve treatment outcomes through combinations of immunotherapy or combined with other targeted therapies.     

非小细胞肺癌放疗前后血清肿瘤标记物的改变及其临床意义

目的观察非小细胞肺癌（NSCLC）放疗前后血清CEA、CYFRA21-1、NSE的变化,探讨血清肿瘤标记物的改变能否用于评价放疗疗效。方法选取58例接受放射治疗的非小细胞肺癌病例（其中22例为局部晚期患者行胸部原发灶放疗,12例行骨转移放疗,24例行脑转移放疗）,所选病例放疗前肿瘤标记物均高于正常参考值,分别记录放疗前与放疗后血清CEA、NSE、CYFRA21-1的数值,并用Wilcoxon秩检验进行统计分析,以p〈0.05为有统计学意义。结果 22例胸部放疗患者放疗后血清CEA、NSE、CYFRA21-1水平较放疗前降低（P值分别为0.046,0.003,0.002）,12例骨转移患者放疗后血清CEA、NSE、CYFRA21-1水平较放疗前降低（P值分别为0.05,0.015,0.017）,24例肺癌脑转移患者放疗前后血清CEA、NSE、CYFRA21-1水平无统计学差异（P〉0.05）。结论血清CEA、CYFRA21-1、NSE水平可以用于非小细胞肺癌胸部放疗及骨转移放疗后的疗效评价。     

循环肿瘤细胞的磁分离法建立及在肺癌EGFR-TKI治疗中的应用

目的探索磁分离循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)联合竞争性等位基因特异性Taq ManPCR(Cast PCR)检测表皮生长因子受体(EGFR)基因突变的可行性。方法收集12例晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者血液样本各7.5 m L,两步法磁分离CTCs,免疫荧光染色检测上皮细胞黏附分子(Ep CAM)和细胞角蛋白(Cytokeratin)后,流式细胞术检测CTCs数量及纯度;Cast PCR检测CTCs及循环DNA中EGFR基因del EGFR19、T790M和L858R突变;用EGFR基因突变检测试剂盒(ADx-ARMS法)检测癌组织的上述位点突变。结果高表达与不表达Ep CAM的CTCs分别在6例和12例NSCLC患者中被检测出;del EGFR19、T790M和L858R突变例数分别在2例、8例和5例NSCLC患者的CTCs中被检测出,其总检出率为83.3%(10/12);2例患者的循环DNA中检出L858R突变;ADx-ARMS法检测12例NSCLC患者癌组织中上述3种突变分别是2例、5例和3例,总检出率为75.0%(9/12)。CTCs与癌组织的突变具有一致性(Kappa=0.75,P=0.007),循环DNA与癌组织的突变一致性无统计意义(Kappa=0.06,P=0.546)。结论磁分离CTCs联合Cast PCR能有效检测EGFR基因突变,值得在NSCLC患者的EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI)治疗中推广应用。     

CIMAvax-EGF,a therapeutic non-small cell lung cancer vaccine

Introduction: Lung cancer represents the most common cause of cancer death worldwide. While the prognosis remains poor, immunotherapy is giving a positive impact on survival. Cancer vaccines represent a form of active immunotherapy that historically has given modest results in terms of efficacy.

The overexpression of the EGFR by tumor cells was reported in more than half of cases of lung cancer, representing a mechanism of cancerogenesis. CIMAvax-EGF, a therapeutic vaccine for non-small cell lung cancer (NSCLC) developed in Cuba, consists of a human recombinant EGF able to induce antibodies against the autologous EGF, resulting in serum EGF withdrawal and lower EGF-EGFR interaction.

Area covered: We critically reviewed the existing literature about CIMAvax-EGF, from the Pilot studies to the efficacy controlled studies. We also overviewed the ongoing trials.

Expert opinion: CIMAvax-EGF demonstrated to be safe and immunogenic. In a phase III randomized study CIMAvax-EGF, used as a switch maintenance treatment after platinum-based chemotherapy, did not significantly improve survival. Current data are not sufficient to recommend CIMAvax-EGF as a treatment option for advanced stage NSCLC. Further studies, conducted in a context of worldwide standardized clinical practice, are needed to better define if a subpopulation of patients can benefit from the vaccination.     

液滴式数字PCR检测晚期非小细胞肺癌血液EGFR突变的应用价值

目的采用液滴式数字PCR(ddPCR)法检测晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者外周血循环肿瘤DNA(ctDNA)EGFR基因突变的情况,探讨试剂盒的性能、检测结果的可靠性和准确性以及ddPCR法在外周血ctDNA中的应用价值。方法使用标准突变比例的模拟cfDNA样本ddPCR法对试剂检测限、准确性、特异性、精密度、抗干扰能力等指标进行分析及评价;使用ddPCR法检测262例NSCLC患者外周血ctDNA,随机选取30例样本同时进行Super-ARMS法检测,并从方法学标准化和检测结果准确性两方面进行统计学分析。结果检测试剂在检测限以上的准确性、特异性均为100%,定量精密度(突变比例对数的绝对值变异系数CV)5%,关键环节质量控制各主要参数的相关性和线性关系均符合要求;Super-ARMS和ddPCR法同步检测30例NSCLC患者外周血ctDNA的结果具有较好的一致性(Kappa=0.783,P=0.000)。结论 ddPCR法灵敏度高,可绝对定量,是血液检测的有效的方法,但其在检测过程中存在较多对检测结果产生影响的环节,故而检测方法标准化至关重要。     

Classifying circulating tumor cells to monitor cancer progression

Introduction: The term ‘liquid biopsy’ refers to molecular analysis of a tumor’s genetic features based on circulating genetic material in the peripheral blood derived from circulating tumor cells (CTCs), circulating tumor DNA (ctDNA) and circulating miRNAs, and has emerged as a minimally invasive tool in early cancer diagnosis and disease monitoring. CTCs are believed to originate from the primary tumor and obtain genetic heterogeneity during evolution.

Areas covered: The presence of CTCs has been associated with poor clinical outcome in patients with metastatic breast cancer, lung cancer, colorectal cancer and prostate cancer. In addition, the detection of CTCs in patients with early breast cancer has been shown to represent an independent prognostic factor associated with an unfavorable clinical outcome. Moreover, the longitudinal evaluation of CTCs in patients with early breast cancer may reveal the presence of chemo- and hormone-therapy resistant CTCs which are associated with an increased risk for disease relapse and disease-related death.

Expert commentary: The molecular characterization of CTCs may provide an important tool for the monitoring and the evaluation of treatment efficacy in patients with different tumor types such as breast, prostate, colon, and non-small cell lung cancer.