杜仲生品及盐炙品HPLC指纹图谱比较研究

目的:比较研究杜仲盐炙前后HPLC指纹图谱的变化规律。方法:采用HPLC法研究杜仲盐炙前后的指纹图谱。色谱柱为SP-120-5-ODS-AP(150mm×4.60mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水线性梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1,检测波长为230nm,进样量为5μL,柱温为25℃。结果:杜仲生品指纹图谱中标出共有指纹峰15个,杜仲盐炙品则标示出16个共有峰。结论:杜仲经盐炙后HPLC指纹图谱指纹峰数有所增加,且大部分峰面积亦有增加趋势,可以认为杜仲盐炙后化学成分发生了一定的质变和量变。     

益智仁盐炙前后缩泉丸指纹图谱的比较

目的比较益智仁Alpinia oxyphylla Miq.盐炙前后缩泉丸的指纹图谱。方法 HPLC法建立缩泉丸指纹图谱,确定色谱峰归属及其变化来源。结果益智仁盐炙前后,缩泉丸指纹图谱中有32个共有峰,其中25个来自于益智仁,5个来自于乌药,2个来自于山药。同时,1号峰发生显著变化,来自于益智仁,其含有量在盐炙后明显增加。结论益智仁盐炙后可使缩泉丸温肾缩尿作用明显增强,可能与该药材中成分含有量变化有关。     

基于化学模式识别的益智仁盐炙前后高效液相色谱指纹图谱研究

目的 建立益智仁盐炙前后的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱，结合化学模式识别法比较益智仁盐炙前后的化学成分差异。方法 采用HPLC法建立益智仁生品及盐炙品的指纹图谱，应用主成分分析（PCA）和正交偏最小二乘法判别分析（OPLS-DA）对益智仁生品及盐炙品化学成分进行比较。结果 益智仁生品及盐炙品HPLC指纹图谱分别确定了30和32个共有峰，指认了其中8个色谱峰，分别是X2峰（5-羟甲基糠醛）、1号峰（原儿茶酸）、2号峰（原儿茶醛）、4号峰（表儿茶素）、21号峰（白杨素）、22号峰（山奈素）、25号峰（杨芽黄素）和26号峰（圆柚酮）。PCA及OPLS-DA结果显示，益智仁生品和盐炙品各聚为一类。VIP分析共筛选出12个成分是益智仁盐炙前后的差异标志物，分别是X1、26（圆柚酮）、16、3、X2(5-羟甲基糠醛)、25（杨芽黄素）、15、12、8、10、17、20号峰。结论 HPLC指纹图谱结合化学模式识别的方法准确可靠，可用于盐炙前后益智仁质量差异分析。     

益智仁及其盐炙品的超高效液相指纹图谱研究

目的建立益智仁及其盐炙品饮片的超高效液相(UPLC)通用指纹图谱。方法采用ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm);以乙腈-水溶液为流动相梯度洗脱;体积流量0.2 mL/min,检测波长241 nm;进样量2μL。结果建立了益智仁及其盐炙品的UPLC特征指纹图谱共有模式,以圆柚酮为内比参照物,标定了16个共有峰。10批益智仁样品相似度均在0.97以上,18批盐炙品中有15批样品相似度在0.90以上,4批海南益智仁和6批海南盐益智仁样品相似度在0.96以上。结论此方法迅速、简便,可用于益智仁与盐益智仁的质量评价。     

盐炙益智仁石油醚部位缩尿作用谱效关系分析

目的:通过盐炙益智仁石油醚部位的指纹图谱特征峰所代表的化学成分及其对豚鼠膀胱逼尿肌抑制作用贡献的大小,阐明盐炙益智仁的药效物质基础。方法:采用HPLC建立盐炙益智仁石油醚部位的指纹图谱,Diamonsil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相水(A)-乙腈(B)梯度洗脱(0~10 min,5%~25%B;10~60 min,25%~65%B;60~75 min,65%~100%B),柱温35℃,检测波长254 nm,进样量10μL,流速1 m L·min~(-1)。考察盐炙益智仁石油醚部位对豚鼠离体膀胱逼尿肌活动的影响,分析盐炙益智仁缩尿药效的物质基础,利用灰色关联分析法建立谱效关系。结果:建立了盐炙益智仁石油醚部位的指纹图谱,相似度均0.9;盐炙益智仁缩尿的药效是多种成分共同作用的结果,各特征峰所代表的化学成分缩尿药效贡献的大小顺序(按特征共有峰编号)为20号9号11号17号16号13号15号24号18号23号14号32号34号22号25号19号31号27号21号29号28号30号。结论:构建的盐炙益智仁石油醚部位HPLC指纹图谱重复性好、稳定性高、方法简单,石油醚部位指纹图谱与其缩尿药效之间有较明显的对应关系,为盐炙益智仁的缩尿药效评价提供参考。     

益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸的缩尿部位指纹图谱比较

目的:通过比较益智仁盐炙前后组成缩泉丸缩尿部位的指纹图谱,从物质基础上揭示益智仁盐炙后增强缩泉丸缩尿药效的原因。方法:采用HPLC,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长230 nm。记录10批益智仁盐炙前后分别组成缩泉丸的石油醚部位HPLC图谱,建立相应指纹图谱,标定特征共有峰并比较其平均相对峰面积和平均相对保留时间。结果:益智仁盐炙后组成缩泉丸时,有11个共有峰平均相对面积明显增加,包括对缩尿药效贡献较大的1号,4号(teuhetenone A),5号(7-表-香科酮),7号色谱峰,增加率分别为123.08%,90.91%,53.33%,43.75%。结论:对缩尿作用贡献较大的4个成分含量的明显增加极有可能与缩泉丸缩尿作用的增强紧密相关,此外其他7个成分含量也有明显增加。     

对续断炮制前后HPLC-ELSD指纹图谱比较研究

目的建立续断的HPLC-ELSD指纹图谱分析方法,探讨炮制后续断内在成分的变化。方法对川续断生品、盐炙品及酒炙品进行HPLC-ELSD指纹图谱分析,选用Eclipse XDB(4.6mm×150 mm,5μm)C18色谱柱;以乙腈-水溶液为流动相进行梯度洗脱;体积流量为1.0 m L/min;柱温为30℃。蒸发光散射检测器检测参数:漂移管温度为108℃,N2气体流速为2.9 L/min。结果与续断生品相比,盐炙品及酒炙品均无9号特征峰,其它的特征峰相对含量均发生变化。结论所建立色谱指纹图谱可较反映续断的化学成分及其炮制前后的差异,为续断的炮制机理研究奠定基础。     

复方二神丸中两味药物炮制前后的高效液相指纹图谱比较研究

目的建立复方二神丸HPLC指纹图谱,并对该复方的两味组成药物补骨脂和肉豆蔻分别经过盐炙及煨炙后的复方二神丸HPLC指纹图谱进行比较研究,探讨经过炮制后的药物组成的复方二神丸在化学成分上的变化。方法采用HPLC色谱法;色谱柱Diamonsil C18柱色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈-水梯度洗脱;检测波长254 nm;柱温30℃;流速1.0 ml/min。以指纹图谱软件计算相似度,对共有特征峰进行图谱比较。结果补骨脂、肉豆蔻生品同炮制品组方的二神丸HPLC指纹图谱中都标记出32个共有峰,未发现有成分的新增和消失,有4种成分在经过炮制药物的组方中含量明显降低,9种成分含量明显增高。结论该方法简便、快捷、重复性好,利用HPLC指纹图谱分析方法,可较全面的反映补骨脂、肉豆蔻炮制前后组方二神丸化学成分的差异。     

川牛膝酒炙和盐炙前后HPLC化学指纹图谱及其主要药效成分量变化研究

目的揭示川牛膝药材经酒炙和盐炙前后的化学成分变化规律,为修订和完善川牛膝质量标准提供参考。方法采用Agilent Zorbax Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,0.1%磷酸水溶液-乙腈为流动相梯度洗脱,检测波长266 nm,体积流量0.5 m L/min,建立HPLC指纹图谱,记录各色谱峰的保留时间和峰面积数据。采用对照品指认主要色谱峰物质,采用向量夹角法计算指纹图谱相似系数,采用主成分分析和聚类分析方法进行模式识别。结果从24批次样品中一共提取出25个主要色谱峰,指认了其中的葛根素、杯苋甾酮、大豆苷元3个色谱峰。主成分分析、聚类分析以及相似度结果显示,酒炙和盐炙对川牛膝化学成分的整体组成与其量水平具有显著影响。葛根素、杯苋甾酮、大豆苷元3个已知的药效成分在经酒炙后其量均未得到显著提升,经盐炙后仅有葛根素的量得到一定程度地提升。结论现行药效指标成分对于川牛膝酒炙品和盐炙品的质控作用较弱,有关川牛膝炮制品的质控指标成分还需进一步筛选。实验所建立的HPLC化学指纹图谱及其分析方法可以用于川牛膝生品、酒炙品、盐炙品之间的鉴定及其质量控制。     

盐炙关黄柏指纹图谱研究

目的 建立盐炙关黄柏饮片的指纹图谱.方法 采用反相高效液相色谱法,运用Diamonsil C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-0.1%磷酸水溶液(含0.2%三乙胺)梯度洗脱;流速0.8 mL/min;检测波长230 nm.结果 所得色谱图各色谱峰分离较好,达到指纹图谱的要求.结论 所建立的HPLC指纹图谱有很好的精密度、重复性和稳定性,能够用于盐炙关黄柏饮片的质量控制.     

益智药材质量标准概述

益智为药食同源药材,应用广泛,其质量的优劣直接影响药效。益智药材质量标准的建立能够促进益智饮片市场规范化,保障用药的安全。目前,不同国家或地区益智标准存在差异。对益智的国内外质量标准、炮制规范、商品规格等现状进行综述,旨在为益智质量标准的提升和规范研究提供参考。     

益智的本草考证

通过查阅历代本草、医籍、方书并结合近现代文献资料,对益智的名称、基原、产地变迁、品质评价、采收加工与炮制方法进行梳理与考证。经考证,益智古时为龙眼的别名,且常与草豆蔻、高良姜、白豆蔻等相混杂,唐代以后的益智基原均为姜科山姜属植物益智,至《中华人民共和国药典》 1963年版才准确记载益智来源为Alpinia oxyphylla Miq.的干燥成熟果实。益智产地记载由岭南、交趾、昆仑等地区逐渐细化,如今主要产于广东、广西、海南等,福建、云南等地有少量栽培,以海南为其道地产区。益智一般于夏、秋果实由绿变红时采收,以身干、粒大、饱满、油性足、香气浓者为佳。经炒制及盐制后可减少益智辛燥之气,增强其温肾缩尿的功效。     

益智炮制的初步研究

通过对不同药用部位的益智生品（益智、益智仁、益智壳）、炮制品（盐炙益智、盐炙益智仁、益智壳）中挥发油含量，物理常数（比重、折光率）。浸出物含量的测定，以及薄层层析比较其挥发油中各组分的变化，表明，不同药用部位的益智生品、炮制品的挥发油含量、比重、折光率、浸出物含量有所不同，挥发油组分基本无变化。益智仁可考虑带壳应用。     

枳壳炮制前后指纹图谱及主要黄酮类成分含量的变化

目的:建立枳壳及其不同炮制品的HPLC指纹图谱,并对其所含的4种黄酮类成分进行定量分析。方法:采用HPLC,Inertsil ODS-3 C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%磷酸水溶液梯度洗脱,检测波长283 nm,流速1.0 m L·min^-1,建立生枳壳、麸炒枳壳和制枳壳的HPLC指纹图谱,通过相似度评价、聚类分析对枳壳炮制前后指纹图谱进行分析,并对芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷进行含量测定。结果:建立了枳壳及其炮制品的指纹图谱,以柚皮苷为参照峰,生枳壳标定了8个共有峰,麸炒枳壳标定了15个共有峰,制枳壳标定了11个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均>0.95。芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷在炮制前的质量分数分别为0.574 7%,5.986 3%,0.302 2%,3.574 7%;经炮制后,上述4种成分在麸炒枳壳中的质量分数分别为0.948 4%,5.103 4%,0.549 3%,3.533 7%,在制枳壳中的质量分数分别为0.605 3%,4.762 3%,0.404 7%,3.264 9%。结论:枳壳的HPLC指纹图谱在炮制前后发生了显著变化。4种黄酮类成分含量在炮制前后均发生了一定程度的变化,样品中芸香柚皮苷、橙皮苷含量排序为麸炒枳壳>制枳壳>生枳壳,样品中柚皮苷、新橙皮苷含量排序则为生枳壳>麸炒枳壳>制枳壳。     

基于OPLS-DA结合熵权TOPSIS的不同产地益智仁综合质量评价

目的 对不同产地益智仁进行综合质量评价。方法 采用超高效液相色谱法建立15批不同产地益智仁的指纹图谱,确定共有峰,并进行相似度评价;以挥发油、水溶性浸出物、醇溶性浸出物、总灰分、酸不溶性灰分、二氧化硫残留量及指纹图谱为指标,采用正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）和熵权逼近理想解排序法（TOPSIS）对益智仁的整体质量进行综合评价。结果 益智仁指纹图谱共标定了15个共有峰,指认了峰1、峰13分别为原儿茶酸、圆柚酮;OPLS-DA结果显示,峰4、峰11、峰13、峰14的峰面积及二氧化硫残留量是影响各产地益智仁质量差异的主要因素;熵权TOPSIS分析结果显示,海南省琼中县、屯昌县、万宁市,广东省阳春市、高州市益智仁质量评价贴近度（C_i）依次为0.520、0.378、0.577、0.206、0.207。结论 海南产益智仁质量整体优于广东产,且以海南省万宁市质量最优。OPLS-DA结合熵权TOPSIS构建的多指标综合评价模型,可排除主观因素的干扰,提高分析结果的科学性与准确性,可用于益智仁的整体质量评价。     

基于电子鼻技术区分益智仁的不同炮制品

目的:利用电子鼻技术建立气味指纹图谱以区别益智仁不同炮制品。方法:采用电子鼻技术对益智仁生品、清水炒制品、盐炙品进行检测,获得电子鼻在传感器的响应值,利用主成分分析、判别因子分析及统计质量控制分析等化学计量学对响应值进行数据处理。结果:经化学计量学分析,益智仁生品及其炮制品能明显区分开。益智仁生品与炮制品的气味差异较大,清水炒制和盐炙益智仁气味差异较小。结论:电子鼻技术可用于益智仁炮制品的区分,推测益智仁气味的变化主要由加热炮制引起。     

基于正常小鼠排便作用的益智仁燥性效应表征研究

目的: 观察益智仁对正常小鼠排便作用的影响及作用机制,从而对益智仁的燥性效应进行表征。 方法: 将SPF小鼠分为正常动物组、益智仁20,10,5 g·kg^-1剂量组及益智仁20 g·kg^-1与增液汤20 g·kg^-1联用组,各组动物每天灌胃给药1次,连续28 d,在第7,14,21,28 d观察对动物排便作用的影响,并从肠道水分、结肠肌电方面阐明益智仁燥性对肠道影响的机制。 结果: 在连续6 h观察中,益智仁低剂量组在28 d的首次排黑粪时间为142.7 min,干粪粒数为10.1粒,干粪重量为176.6 mg;中剂量组在21 d的首次排黑粪时间为145.4 min,干粪粒数为10.2粒,干粪重量为177.0 mg;高剂量组在21 d的首次排黑粪时间为160.3 min,干粪粒数为9.7粒,干粪重量为170.5 mg,说明益智仁能呈剂量依赖和时间依赖使得正常动物逐渐出现便秘症状。在28 d时,益智仁低、中、高剂量组的大肠肠腔水分含量分别是66.23%,64.42%,61.53%,均能显著减少大肠肠腔水分含量。在28 d时,益智仁低、中、高剂量组的结肠肌电频率分别是43.40,45.63,48.26次/min,结肠肌电振幅分别是66.23,64.42,61.53 mV,能显著增快结肠肌电频率及降低结肠肌电振幅。增液汤对于益智仁引起的上述便秘作用有显著的拮抗作用。 结论: 益智仁燥性效应表征能引起正常小鼠的便秘作用,且与促进肠道水分重吸收和减弱肠道传输能力有关。     

益智仁盐炙对水负荷多尿模型大鼠缩尿作用的研究

目的:通过比较盐炙益智仁对水负荷多尿模型大鼠的缩尿作用,进一步验证益智仁盐炙人肾传统炮制理论的正确性.方法:SD大鼠按尿量、体重均匀分成正常组、模型组、缩泉丸组、益智仁石油醚部位生品(低、中、高剂量)组、盐炙品(低、中、高剂量)9组,缩泉丸组剂量为1.5 g·kg-1,益智仁石油醚部位生品和盐炙品低、中、高剂量分别为含生药4.5,9,18g·kg-1.各组按10 mL·kg-1体积灌胃给药1周后,用1％盐水造成大鼠水负荷多尿模型.采用代谢笼法测定大鼠尿量、首次排尿时间,并计算6h排泄率;放免法测定大鼠血清精氨酸加压素(AVP)含量.结果:与模型组相比,益智仁生、炙品(除生品低剂量组外)能显著降低0～1h段大鼠尿量(P＜0.01),延长大鼠首次排尿时间(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品低、中、高剂量组P ＜0.01),显著降低大鼠6h排泄率(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品高剂量组P＜0.01).与模型组相比,各组AVP含量均升高,其中生品高剂量、盐炙品中、高剂量组有极显著性差异(P＜0.01).结论:益智仁石油醚部位具有缩尿作用,盐炙能增强其作用.