BSO逆转人肺腺癌细胞株多药耐药性的实验研究

目的研究谷胱甘肽(GSH)合成酶抑制剂——BSO对人肺腺癌多药耐药细胞株A549DDP细胞内GSH含量影响;探讨BSO逆转多药耐药(MDR)作用机制及逆转效果。方法GSH还原酶循环法测定BSO对细胞内GSH含量的影响。MTT比色法测定经BSO预处理后顺氯氨铂(DDP)、阿霉素(ADM)对细胞50%抑制浓度(IC50)的影响。流式细胞仪检测BSO对MDR细胞内柔红霉素(DNR)荧光强度的影响。结果耐药细胞A549DDP细胞内GSH含量较人肺腺癌A549细胞内GSH含量明显增高。BSO在一定浓度范围内(50～200μmol·L-1)对A549细胞和耐药细胞A549DDP无明显细胞毒性作用(抑制率均小于10%)。BSO呈剂量依赖性非线性抑制细胞内GSH的合成,其对MDR细胞内GSH合成影响较为显著,而对A549细胞内GSH合成影响较小。BSO在一定浓度范围内能降低DDP、ADM对A549DDP细胞的IC50,而对A549细胞的IC50无明显影响。A549DDP细胞内DNR荧光强度较A549细胞显著降低,能不同程度提高A549DDP细胞内柔红霉素荧光强度,均较未处理组显著提高;与未经BSO处理的A549细胞比较,细胞内荧光强度轻度增高,但统计学上无显著性差异。结论BSO能有效逆转A549DDP细胞的MDR,其机制与降低MDR细胞内GSH含量有关。     

红芪多糖-1对人肺腺癌A549细胞氧化应激的影响

目的评价红芪多糖-1(HPS-1)对人肺癌A549细胞氧自由基(ROS)、谷胱甘肽(GST)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、总抗氧化能力(T-AOC)、硫氧还蛋白还原酶(Trx R)以及脂肪酸过氧化代谢产物丙二醛(MDA)表达的影响。方法人肺腺癌A549细胞经低、中、高(50 mg/L、100 mg/L、200 mg/L)不同剂量HPS-1处理不同时间后,MTT法检测细胞细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况,化学荧光法检测细胞内ROS,比色法检测细胞上清液中GSH、T-SOD、T-AOC、Trx R、MDA水平。结果不同剂量HPS-1均具有抑制人肺腺癌A549细胞增殖的作用,且具有时间、剂量依赖性(P0.05)。不同剂量HPS-1具有诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的作用,且具有时间、剂量依赖性(P0.05)。HPS-1可促进人肺腺癌A549细胞ROS、MDA的上调(P0.05),随着作用时间的延长,上调作用降低;可促进GSH、T-SOD、T-AOC、Trx R的下调(P0.05),随着HPS-1干预时间的延长,下调作用降低。结论 HPS-1具有抑制人肺腺癌A549细胞增殖、诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的作用。机制可能与其调控人肺腺癌A549细胞氧化/抗氧化能力比例的作用有关。     

异钩藤碱脂质体逆转人肺腺癌细胞A549／DDP对顺铂耐药的研究

目的研究异钩藤碱脂质体(Isorhynchophylline Liposomes,IR-L)在体外对人肺腺癌细胞系A549/DDP对顺铂(DDP)的逆转作用。方法采用MTT法检测药物细胞毒性作用及耐药细胞逆转倍数,电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)法测定细胞内顺铂浓度。结果IR-L无细胞毒浓度组(2.0μg/mL)使A549/DDP细胞对DDP的IC50由16.81 mg/L降至3.36 mg/L;低细胞毒浓度组(7.0μg/mL)的IC50降至2.34 mg/L;两组均明显提高DDP在A549/DDP细胞内的浓度,从0.92μg/L分别提高到4.62μg/L和6.89μg/L。结论IR能部分逆转A549/DDP细胞的MDR,其作用机制可能与增加细胞内药物浓度有关。     

奥美拉唑增强多柔比星对肺腺癌A549细胞毒性作用的实验研究

目的 探讨囊泡型质子泵(V- ATPase)非特异性抑制剂奥美拉唑(OME)增强多柔比星(ADM)对人肺腺癌细胞株A549的毒性作用及其可能机制.方法 OME(终浓度为0、2.0、4.0、8.0、16.0μg/mL)处理A549细胞48 h后,锥虫蓝法测定OME对A549的细胞毒性.OME预处理0、24 h后,MTT法测定ADM对A549细胞的半数抑制浓度(IC50).以非细胞毒性的OME 4 μg/mL预处理,流式细胞术测定不同时间A549细胞内ADM的浓度.RT-PCR法测()ME预处理后A549细胞内多药耐药基因(MDR1)转录量.结果 不同浓度OME预处理的A549细胞锥虫蓝染色均未见蓝染细胞.与对照组比较,OME预处理后,ADM对A549细胞的IC50值明显下降(P＜0.05);A549细胞摄入ADM量增加,排出量下降;A549细胞内MDR1基因转录明显下降.结论 OME对A549细胞无毒性作用,但能增强ADM对A549细胞的毒性,其可能机制为OME抑制MDR1基因的转录.     

金纳米颗粒对人肺腺癌细胞株A549的毒性效应

目的:探讨直径4 nm的金颗粒对人肺腺癌细胞株A549的毒性以及浓度-效应关系?方法:在A549细胞培养液中,分别加入柠檬酸钠溶液(对照组)以及浓度分别为12.5?25.0和50.0 ?滋g/ml的直径4 nm的金颗粒溶液孵育48 h?采用透射电子显微镜(TEM)鉴定金纳米颗粒并观察其在细胞内的分布情况;采用细胞增殖和毒性试剂盒检测细胞活力;采用流式细胞术检测A549的细胞周期和凋亡?结果:TEM显示金纳米颗粒大小及形态均一,主要分布于A549细胞的微小囊泡?胞浆?溶酶体以及细胞核周围?与对照组相比,4 nm金颗粒能显著降低细胞活力(P < 0.05),且具有浓度-效应关系?流式细胞检测结果显示,较高浓度(25及50 ?滋g/ml) 4 nm金颗粒处理后,A549细胞凋亡比例显著增加(P < 0.05),但细胞周期未见显著性差异?结论:直径4 nm的金颗粒能显著降低A549的细胞活力,促进A549凋亡,且具有浓度-效应关系,为肺癌的治疗提供了一种新思路?     

GSH在COPD大鼠肺内合成机制和作用的研究

目的探讨还原型谷胱甘肽(GSH)在慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺内合成的分子机制及其作用。方法健康雄性Wistar大鼠14只,随机分COPD模型组和对照组,每组7只。采用每日熏香烟和两次气管内滴入200μg脂多糖法制作COPD大鼠模型,检测肺内GSH和活性氧(ROS)浓度、总抗氧化力水平(T-AOC)和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)活性;对相关指标作相关分析。结果COPD组大鼠肺内GSH(35.86±6.01)mg/mg.prot和ROS(30.45±5.23)U/mg.prot增高,T-AOC(0.69±0.10)U/mg.prot降低,γ-GCS活性(2.06±0.15)U增高,与对照组分别为(16.50±2.43)mg/mg.prot、(9.84±2.16)U/mg.prot、(1.59±0.57)U/mg.prot和(1.12±0.09)U相比差异具有显著性(P均<0.05);GSH、ROS、γ-GCS活性与PEF、FVE0.3、PaO2呈直线负相关,与PaCO2呈直线正相关;T-AOC与PEF,FVE0.3呈直线正相关(P均<0.05)。结论COPD大鼠肺内存在氧化/抗氧化失衡,其局部抗氧化作用是通过激活γ-GCS活性,增加GSH合成来发挥局部抗氧化作用,其气道阻力增加可能与肺内局部氧化/抗氧化失衡有关。     

依他尼酸联合顺铂化疗促肺癌A549细胞凋亡的作用及机制研究

目的 探讨依他尼酸(ethacrynic acid,EA)杀伤肺癌A549细胞球的作用及机制研究.方法 无血清培养基中培养A549细胞球,应用Western blot检测CD133、SOX2、EpCAM和ABCG2的蛋白表达水平.应用l、2、5、10、20 mg/mL的浓度顺铂(cisplatin,DDP)分别处理A549及细胞球48 h,用MTT检测48 h内细胞的存活率.应用比色法检测10、50、100、200 μmol/L EA对A549细胞球中谷胱甘肽S-转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的抑制作用.应用流式细胞术、Western blot、Real-time-PCR、相差显微镜观察检测200 μmol/L EA处理A549细胞球前后ROS水平、细胞成球能力、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白以及β-catenin启动子活性的变化情况.应用β-catenin腺病毒感染A549细胞球后,再用200 μmol/L EA的处理A549细胞球,利用Real-time PCR和Western blot检测β-catenin S、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的变化,并用MTT检测A549细胞球增殖的抑制作用.结果 成功培养出悬浮的A549细胞球,其高表达肿瘤干细胞标志物CD133、SOX2、EpCAM以及耐药相关蛋白ABCG2,并可耐受不同浓度DDP的杀伤作用.200 μmol/L EA处理A549细胞球后ROS水平明显升高,而GST活性、β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的表达、β-catenin的启动子活性、A549细胞球的成球能力显著下降,并且200 μmol/L EA联合5 mg/mL DDP可增强对抑制A549细胞球增殖的作用和增加细胞凋亡的水平(P＜0.05).过表达β-catenin后,200 μmol/L EA对β-catenin、Sox2和ABCG2 mRNA和蛋白的抑制作用较空载体组显著减弱.此外,过表达β-catenin可显著缓解200 μmol/L EA联合5 mg/mLDDP对A549细胞球的增殖抑制作用.结论 EA通过抑制GST活性和β-catenin水平,发挥抑制A549细胞球增殖和干性,促进其凋亡的作用.EA可望成为治疗肺癌及肺癌干细胞的药物.     

苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶表达的影响

目的观察苦参碱诱导肺腺癌A549细胞凋亡及对人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因表达的影响。方法以终质量浓度为0.1、0.2、0.4、0.6 mg/mL的苦参碱作用肺腺癌A549细胞48 h后,通过台盼蓝拒染法计数细胞的生长抑制率;以终质量浓度为0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48、72、96 h后,经透射电镜和DNA Ladder实验了解到细胞凋亡的发生,PCR-TRAP法检测端粒酶活性,实时RT-PCR检测hTERT的mRNA表达水平。结果各种质量浓度的苦参碱作用A549细胞48 h后,均显著抑制细胞的增殖且呈浓度依赖性;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞不同时间后,经透射电镜形态学检测和DNA Ladder实验,均显示A549细胞发生了凋亡改变;0.2 mg/mL的苦参碱作用A549细胞48 h后,端粒酶活性明显受抑,hTERT mRNA表达显著降低。结论苦参碱能抑制肺腺癌A549细胞的生长并诱导其凋亡,其机制可能与下调hTERT基因表达,抑制端粒酶活性,破坏端粒稳定性有关。     

白藜芦醇诱导肺腺癌A549细胞凋亡的作用机制

目的探讨白藜芦醇(Res)对肺腺癌A549细胞凋亡的作用及其机制。方法常规培养肺腺癌A549细胞(购于中国科学院细胞生物学研究所)至对数生长期,加入不同浓度的Res(终浓度分别为3、10、30、60、100、200、300 mg/L),以Res 0 mg/L为对照组,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的Res对A549细胞的吸光度值,计算细胞的生长抑制率;采用Annexin-Ⅴ/PI双染法检测Res对肺腺癌A549细胞凋亡的影响;采用逆转录酶-聚合酶联反应(RT-PCR)检测端粒酶mRNA和β-actin mRNA的相对活性。结果 MTT检测显示Res呈剂量依赖性抑制A549细胞增殖。与对照组比较,不同浓度(10、30、100 mg/L) Res可抑制A549细胞增殖; Annexin-Ⅴ/PI检测结果显示,与对照组比较,随着Res剂量(10、30、100 mg/L)的增加,A549细胞的凋亡数升高,差异有统计学意义(P <0. 05);与对照组比较,不同剂量Res(10、30、100 mg/L)诱导端粒酶mRNA相对含量明显下降,差异有统计学意义(P <0. 05)。结论 Res可诱导肺腺癌A549细胞凋亡,其机制可能与抑制端粒酶活性有关。     

复方苦参注射液对人肺腺癌A549细胞株增殖、乙酰肝素酶表达及侵袭能力的影响

目的:通过体外研究探讨复方苦参注射液对人肺腺癌A549细胞株增殖、乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)表达的影响及机制。方法:WST-1法检测不同浓度复方苦参注射液对A549的增殖抑制作用;S-P法测定各组干预48 h后细胞内Hpa的表达;Matrigel体外侵袭试验检测各组细胞侵袭能力。结果:(1)0.1~0.5 mg/ml浓度的复方苦参注射液作用人肺腺癌A549细胞达48 h开始对细胞增殖有抑制作用,且呈浓度、时间依赖性;相同浓度时干预48 h对细胞的增殖抑制作用优于72 h。(2)复方苦参注射液作用肺腺癌A549细胞48 h后,药物在0.1~0.5 mg/ml浓度区间内对A549细胞核内Hpa表达有抑制作用。(3)复方苦参注射液作用肺腺癌A549细胞48 h后,0.2~0.5 mg/ml浓度区间内对A549细胞侵袭基底膜均有抑制作用。结论:本研究结果显示复方苦参注射液能通过抑制肺腺癌A549细胞表达Hpa、抑制A549细胞侵袭基底膜而发挥抗肺腺癌作用。     

In vitro evaluation of cytotoxicity and oxidative stress induced by multiwalled carbon nanotubes in murine RAW 264.7 macrophages and human A549 lung cells

Objective To investigate in vitro cytotoxicity and oxidative stress response induced by multiwalled carbon nanotubes (MWCNTs).Methods Cultured macrophages (murine RAW264.7 cells) and alveolar epithelium cells type II (human A549 lung cells) were exposed to the blank control,DNA salt control,and the MWCNTs suspensions at 2.5,10,25,and 100 μg/mL for 24 h.Each treatment was evaluated by cell viability,cytotoxicity and oxidative stress.Results Overall,both cell lines had similar patterns in response to the cyto...     

白藜芦醇对人肺细胞株放射损伤的保护作用及其机制研究

目的探讨白藜芦醇对X射线照射后人支气管上皮细胞HBE和人胚肺成纤维细胞MRC5损伤的保护作用及可能机制。方法培养HBE和MRC5细胞,分为4个组:对照组(Vehicle)、白藜芦醇组(resveratrol,Res)、X射线照射组(RT+Vehicle)、白藜芦醇和X射线联合组(RT+Res)。Res(终浓度5μmol/L)为X射线前2h给药,X射线(20Gy,8.33Gy/min,照射144s)照射后,分别对各组细胞的形态、超微结构、生长活力、DNA损伤、凋亡情况进行观察;同时检测胞内的活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)含量、总超氧化物歧化酶(SOD)活性、总谷胱甘肽(GSH)含量。结果 X射线能对HBE和MRC5细胞造成明显的损伤。白藜芦醇能有效地减轻X射线对细胞形态和超微结构的破坏,缓解X射线对细胞活力的影响和DNA的损伤,降低X射线照射后细胞的凋亡、降低细胞ROS的水平和MDA的含量,增加细胞总GSH的含量和总SOD的活性。结论白藜芦醇对HBE和MRC5细胞的放射损伤具有保护作用,其机制与减轻氧化应激损伤有关。     

根皮素抑制LPS诱导的BV2小胶质细胞氧化应激反应

目的 探讨根皮素(phloretin, PHL)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤的抑制作用及可能的分子机制。方法 利用LPS建立BV2小胶质细胞的氧化应激损伤模型,对该模型予以不同浓度的PHL 预处理。利用MTS方法检测细胞活力。ELISA法检测氧化应激相关产物一氧化氮(nitric oxide,NO)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性。双荧光素酶活性检验方法检测抗氧化响应元件荧光素酶报告基因质粒(antioxidant reaction element luciferase reporter plasmid,ARE-LUC)报告基因转录活性。Western blotting法检测磷酸化核因子-E2相关因子2(nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2)和血红蛋白加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)蛋白表达。结果 与对照组相比,LPS处理后的BV2小胶质细胞活力显著降低,氧化应激产物NO和MDA水平明显升高,GSH含量和SOD活性明显下降,但Nrf2磷酸化水平、ARE-LUC报告基因转录活性和HO-1蛋白表达略有增高。与模型组比较,高剂量PHL(20 μmol/L)预处理明显改善了LPS导致的BV2小胶质细胞活力下降,降低NO和MDA的含量,增高GSH的含量和SOD的活性,且进一步增加了Nrf2的磷酸化水平,上调ARE-LUC的转录活性和HO-1蛋白的表达。结论 PHL可以显著抑制LPS导致的BV2小胶质细胞的氧化应激损伤,Nrf2/ARE通路可能是根皮素发挥抑制BV2小胶质细胞氧化应激损伤作用的途径之一。     

纳米二氧化硅颗粒对血管内皮细胞的毒性及其氧化损伤作用

目的：探讨纳米二氧化硅（SiO2）颗粒的血管内皮细胞毒性,阐明其作用机制。方法：选用粒径约60 nm的纳米SiO2颗粒,以体外培养的人脐静脉内皮细胞（HUVECs）为模型,分为对照组和纳米SiO2颗粒暴露组（浓度分别为12.5、25.0、50.0和100.0 mg•L^-1）,采用MTT法测定细胞活力;乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测细胞膜的完整性;流式细胞术（FCM）检测细胞内活性氧（ROS）水平;实时荧光定量PCR法检测细胞内核因子E2相关因子2（Nrf2）、血红素加氧酶1（HO-1）、超氧化物歧化酶2（SOD2）和γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶催化亚单位（GCLC）　mRNA表达水平。结果：MTT检测,与对照组比较,纳米SiO2颗粒暴露组细胞活力降低,呈现明显的剂量依赖效应;当作用时间为12 h时,仅100.0 mg•L^-1纳米SiO2颗粒暴露组细胞活力显著降低（P<0.05）;当作用时间延长至24 h,25.0～100.0 mg•L^-1纳米SiO2颗粒暴露组细胞活力明显降低（P<0.05）;同一浓度作用下,随着作用时间的延长,细胞活力也呈现下降趋势,呈时间效应关系。LDH和FCM检测,与对照组比较,除12.5 mg•L^-1组外,其余纳米SiO2颗粒暴露组细胞培养液中LDH活力和细胞内ROS水平均明显升高（P<0.05）,且随着暴露剂量的增加而逐渐升高。实时荧光定量PCR法检测,与对照组比较,100.0 mg•L-1纳米SiO2颗粒暴露组,细胞内Nrf2、HO-1、SOD2和GCLC mRNA表达水平均显著升高（P<0.05）。结论：纳米SiO2颗粒具有降低细胞活力、破坏细胞膜完整性、诱导ROS生成和转录调控氧化还原因子等血管内皮细胞毒性,氧化损伤是纳米SiO2颗粒发挥血管内皮细胞毒性的作用机制之一。     

顺势疗法药物山金车30C通过上调核苷酸切除修复基因的表达减少紫外线照射后大肠杆菌的DNA损伤

目的：检测高度稀释的顺势疗法药物山金车30C是否能够调节暴露于紫外线照射下的大肠杆菌的核苷酸切除修复基因的表达。方法：大肠杆菌在标准培养基中培养至对数阶段,然后接受亚致死剂量的紫外线照射（25和50J／m。分别照射22．5和45s）。接受不同剂量紫外线照射的大肠杆菌分别与山金车30C及安慰剂30C共同培养,90min后检测其DNA损伤情况及氧化应激状态。采用多种方法及指标如彗星实验、梯度凝胶电泳、细胞内活性氧生成及测量其他生物活性指标如过氧化物歧化酶、过氧化氢酶及谷胱甘肽衡量DNA损伤情况及细胞氧化应激状态。逆转录聚合酶链反应检测大肠杆菌细胞紫外线损伤修复基因uvrA、B、c（核苷酸切除修复基因）mRNA的表达情况。结果：接受照射后的大肠杆菌出现了DNA损伤及氧化应激反应,表现为细胞内活性氧生成增加及过氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽活性降低。与安慰剂组相比,山金车30C降低了大肠杆菌的DNA损伤及氧化应激反应,表现为细胞内活性氧生成减少及过氧化物歧化酶、过氧化氢酶和谷胱甘肽活性增强。与对照组相比,山金车30C上调了大肠杆菌细胞紫外线损伤修复基因的表达。结论：山金车30C能够通过上调紫外线损伤修复基因的表达修复紫外线引起的大肠杆菌细胞的DNA损伤,并通过减少细胞内活性氧的生成及调节抗氧化酶活性降低细胞的氧化应激反应。     

Exendin-4对高糖诱导的心肌细胞氧化应激的影响

目的:探讨Exendin-4对高糖诱导的心肌细胞氧化应激的影响。方法:通过酶消化法获取乳鼠心肌细胞,在体外高糖暴露条件下,采用不同浓度的Exendin-4处理,MTT法检测细胞的活性,同时运用生化试剂盒测定上清液中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、还原型谷胱甘肽(GSH)的水平。结果:与对照组相比,高糖环境下的心肌细胞活性明显减低(P<0.05),MDA含量明显增加(P<0.05),SOD及GSH含量明显减少(P<0.05),而给予Exendin-4预处理后,能逆转上述指标的变化,在浓度为1nmol/L和10nmol/L时具有统计学意义(P<0.05)。结论:高浓度葡萄糖通过氧化应激作用诱导心肌细胞损伤,Exendin-4通过抗氧化作用对心肌细胞起到较好的保护性作用。     

右美托咪定对大鼠离体肺缺血再灌注所致线粒体损伤的影响

目的：探究右美托咪定（dexmedetomidine,Dex）对大鼠离体肺缺血再灌注所致线粒体损伤的影响。方法：将SD大鼠随机分成4组（n=6）：对照组（C组）、缺血再灌注组（IR组）、1 nmol/L Dex组（D1组）、10 nmol/L Dex组（D10组）,制备大鼠离体肺缺血再灌注模型。记录平衡末（T0）、再灌注即刻（T1）、再灌注30 min（T2）和再灌注60 min（T3）时的潮气量（tidal volume,VT）、肺顺应性（compliance,Cdyn）、气道阻力（airway resistance,Raw）和肺静脉氧分压（oxygen partial,PaO2）;测定肺湿/干重比;HE染色观察组织病理学改变;测定灌流末流出液乳酸脱氢酶（LDH）活性和肺组织中活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、三磷酸腺苷（ATP）含量以及超氧化物歧化酶（SOD）活性。分离肺组织线粒体,检测线粒体肿胀程度和线粒体膜电位（MMP）。结果：与C组相比,IR组、D1组、D10组肺功能不同程度降低,LDH活性升高,ROS、MDA增加,SOD活性下降,ATP生成减少,线粒体肿胀程度升高,MMP下降（P < 0.05）;与IR组相比,D1组、D10组肺功能改善,病理显示肺损伤明显减轻,LDH释放减少,ROS、MDA含量减少,SOD活性升高,ATP生成增加,线粒体肿胀程度减轻,MMP上升（P < 0.05）;与D1组相比,D10组改善肺功能作用更明显,Raw下降,LDH活性降低,SOD活性升高,线粒体肿胀程度减轻（P < 0.05）。结论：右美托咪定减轻了离体肺缺血再灌注损伤,其机制可能与减轻线粒体损伤,减少氧化应激反应有关。     

Ⅰ型与Ⅱ型子宫内膜癌细胞抗氧化能力的比较

 目的 比较Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞对氧化应激的抵抗并探讨其机制。  方法  ① H₂O₂处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞,噻唑蓝（MTT）法检测两型细胞的增殖水平;② 120μmol H₂O₂和800μmol H₂O₂分别处理Ⅰ型和Ⅱ型子宫内膜癌细胞,流式细胞仪检测细胞内活性氧（ROS）水平,酶标仪检测细胞内还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）水平,分光光度计检测细胞内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性 结果 在不进行处理的情况下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞较Ⅱ型子宫内膜癌细胞ROS水平及CAT活性较低,GSH水平、GSH/GSSG比值及SOD和GPx活性较高（P＜0.01）。在氧化应激条件下,Ⅰ型子宫内膜癌细胞GSH水平及GSH/GSSG比值下降,SOD和CAT活性降低（P＜0.01）;Ⅱ型子宫内膜癌细胞GSH、GSSG水平明显升高,GSH/GSSG比值略有升高,SOD、CAT和GPx活性升高（P＜0.01）。  结论  Ⅱ型子宫内膜癌细胞与Ⅰ型子宫内膜癌细胞相比较,其本身ROS水平较高,细胞内抗氧化系统及抗氧化酶系统对氧化刺激可进行有效应答,细胞不易受到氧化损伤。     

银杏叶提取物对小鼠心肌细胞氧化应激损伤的影响

目的 探讨银杏叶提取物(ginkgo biloba extract, EGb)对缺氧/复氧所致心肌细胞氧化应激损伤的保护作用.方法 将原代大鼠心肌细胞分为空白对照组(Con组)、高剂量EGb对照组(C160组)、缺氧/复氧组(H/R组)、低剂量EGb组(EGb40组)、中剂量EGb组(EGb80组)、高剂量EGb组(EGb160组).采用四唑盐(MTT)法检测各组细胞活力,采用酶联免疫吸附法检测各组细胞的MDA含量、SOD活力、GSH与GSSG含量,并计算GSH/GSSG比值以及GSH/GSSG氧化还原电势(Eh(GSH/GSSG)).结果 与Con组相比,H/R组的MDA含量、Eh(GSH/GSSG)升高(P<0.01),细胞活力、GSH/GSSG值及SOD活力降低(P<0.01).EGb40、EGb80和EGb160组的MDA含量、Eh(GSH/GSSG)较H/R组降低(P<0.01),细胞活力、GSH/GSSG值及SOD活力升高(P<0.01),且呈浓度依赖性(P<0.01).结论 EGb具有明显的抗氧化应激能力,EGb预处理可明显衰减H/R心肌细胞所受的氧化损伤.     

新型番荔枝酰胺衍生物FLZ对去血清培养损伤星形胶质细胞的保护作用

目的 评价番荔枝酰胺衍生物FLZ对去血清培养损伤星形胶质细胞的作用,并探讨其可能的作用机制.方法 在去血清培养的星形胶质细胞模型上,以3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测细胞存活率,Hochest 33342染色观察细胞核形态变化,荧光比色法检测细胞内活性氧簇(ROS)生成.酶联免疫...